【目的】在地塞米松(DEX)诱导骨骼肌卫星细胞氧化应激的体外条件下,筛选丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)信号系统中起关键作用的信号通路。【方法】将体外培养的肉仔鸡胸肌骨骼肌卫星细胞(SCs)分别进行处理:Ⅰ、对照组;Ⅱ、DEX;Ⅲ、p38MAPK抑制剂;Ⅳ、DEX+p38MAPK抑制剂;Ⅴ、JNK抑制剂;Ⅵ、DEX+JNK抑制剂;Ⅶ、ERK5抑制剂;Ⅷ、DEX+ERK5抑制剂;Ⅸ、ERK1/2抑制剂;Ⅹ、DEX+ERK1/2抑制剂。除处理Ⅰ和处理Ⅱ外,其它处理首先用抑制剂预处理30min,弃去培养基后,再按处理设置分别加入含DEX的培养基或者正常培养基继续处理24h。处理结束后,分别测定细胞培...

为研究镁对肉仔鸡红细胞体外氧化应激的敏感性和红细胞膜流动性的影响,本试验用96只1日龄的AA肉仔鸡随机分配为低镁日粮组(镁含量1.2 g/kg)和对照组(镁含量2.4 g/kg)。在体外氧化应激反应体系中,低镁组肉仔鸡红细胞丙二醛(MDA)的生成量高于对照组(P<0.01),低镁日粮显著提高红细胞膜的各向异性参数(P<0.05);低镁组肉仔鸡红细胞的谷胱甘肽(GSH)含量降低了17%,丙二醛(MDA)的含量升高了19%(P<0.05),红细胞膜的镁含量降低18%(P<0.05);低镁日粮组肉仔鸡红细胞膜胆固醇的含量(P<0.01)均显著提高。结果表明表明低镁日粮...

以原代分离培养仔猪睾丸支持细胞为模型,经含不同浓度(0、2.5、5、10、20、40、80、160μmol/L)乙酸棉酚或40μmol/L乙酸棉酚加800μmol/L的乙酰半胱氨酸(NAC)的培养基培养24 h后,检测细胞增殖率、细胞内活性氧(ROS)水平和丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性、培养基中乳酸脱氢酶(LDH)活性及细胞凋亡情况,研究棉酚对仔猪睾丸支持细胞的氧化应激及细胞凋亡的影响。结果显示:棉酚呈浓度依赖性抑制仔猪睾丸支持细胞增殖率,棉酚浓度大于等于10μmol/L时,细胞增殖率极显著降低;棉酚造成细胞内ROS水平显著升高、SOD活性显著降低、MDA含量升高及培养基中LDH活性升高;NAC显著抑制棉酚诱导的细胞内ROS水平升高、细胞增殖抑制及细胞凋亡。表明棉酚能诱导仔猪睾丸支持细胞凋亡,这可能与过量ROS生成而造成细胞氧化应激有关。

【目的】在氧化应激条件下,研究海带岩藻聚糖及其级分对肉鸡巨噬细胞免疫功能的影响,初步探讨海带岩藻聚糖及其级分的免疫调节功能与抗氧化作用的关系。【方法】以叔丁基过氧化氢(tBOOH)为活性氧诱导剂,加入肉鸡腹腔巨噬细胞培养液中,测定细胞培养液中抗氧化酶的变化,巨噬细胞分泌一氧化氮(NO)、诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)、以及细胞因子IL-1和TFN-α等免疫指标的变化。【结果】用tBOOH处理后的巨噬细胞,细胞存活率显著下降(P<0.05),乳酸脱氢酶(LDH)和丙二醛(MDA)显著升高(P<0.05),SOD和GSH-Px酶活性显著降低(P<0.05)。巨噬细胞的吞噬活性显著降低(P<0.0...

本试验旨在探讨饲粮中添加硒和碘,对蛋鸡淋巴细胞内的抗氧化酶活性和细胞DNA损伤的影响,以及是否影响淋巴细胞的抗氧化能力。288只33周龄的新罗曼蛋鸡,饲喂添加不同剂量硒(0、0.2 mg/kg)和碘(0、0.2mg/kg)的日粮24周,测定淋巴细胞中几种酶的情况。结果表明,日粮中碘添加量为0时,淋巴细胞谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活性比对照组低41%(P<0.01);日粮中硒添加量为0时,淋巴细胞内的GPx比对照组低28%、超氧化物歧化酶(SOD)活性比对照组低31%(P<0.01)、CAT活性比对照组高30%(P<0.05);硒碘互作对淋巴细胞SOD(P<0.01)和CAT(P<0.05)活...

［目的］本文旨在研究Ｌ－肉碱对氧化应激状态下胖头鱥肌肉细胞系（ｆａｔｈｅａｄ ｍｉｎｎｏｗ ｍｕｓｃＬｅ ｃｅＬＬ Ｌｉｎｅ，ｆｈｍ）细胞活力、脂质过氧化及抗氧化功能的影响。［方法］以ｆｈｍ细胞为研究对象，以ｈ＿２ｏ＿２为氧化应激因子，采用四甲基偶氮唑盐（ｍｔｔ）法测定不同浓度Ｌ－肉碱（０．００１、０．０１、０．１、０．５、１．０和５．０ ｍｍｏＬ·Ｌ～（－１））预处理６ ｈ分别对０．２和０．６ ｍｍｏＬ·Ｌ～（－１）ｈ＿２ｏ＿２诱导的细胞氧化应激活力的影响，并采用生物化学方法检测Ｌ－肉碱预处理对氧化应激ｆｈｍ细胞中脂质过氧化程度及抗氧化酶的变化。［结果］０．２和０．６ ｍｍｏＬ·Ｌ～（－１）．．．

选取80只3月龄康乐黄鸡，随机均分为4组，每组5个重复，每个重复4只。对照组(CON组)和应激组(STR组)饲喂基础饲粮，酵母硒组(SY组)和酵母硒+应激组(SY＿STR组)饲喂在基础饲粮中添加0.5 mg/kg酵母硒的试验饲粮。预试期7 d，正试期21 d。试验第21天时，给STR组和SY＿STR组肉鸡腹腔注射15 mg/kg敌草快，CON组和SY组注射等量生理盐水，24 h后，每个重复选取1只鸡，采集盲肠内容物样品，用于肠道菌群分析，研究酵母硒对氧化应激肉鸡盲肠微生物多样性、菌群结构及物种丰度的影响。结果表明：盲肠菌群α多样性指数在各组间的差异均无统计学意义(P>0.05);β多样性分析显示，与CON组和SY＿STR组相比，STR组盲肠菌群结构分布相对零散，物种相似度较低；与CON组相比，STR组厚壁菌门与拟杆菌门相对丰度之比(F/B)、肠球菌属和埃希氏菌属–志贺氏菌属相对丰度显著(P<0.05)升高，毛螺旋菌属和嗜胆菌属相对丰度显著(P<0.05)降低；与STR组相比，SY＿STR组和SY组拟杆菌门相对丰度显著(P<0.05)降低；与STR组相比，SY＿STR组Muribaculaceae未明确属相对丰度显著(P<0.05)升高，肠球菌属相对丰度显著(P<0.05)降低；LEfSe分析显示，与CON组相比，STR组梭菌目vadinBB60群、Monoglobus、丹毒丝菌科显著富集，与STR组相比，SY＿STR组拟杆菌门、普雷沃氏菌科＿UCG–001、拟普雷沃氏菌属、帕拉普氏菌属显著富集。可见，氧化应激能引起肉鸡盲肠微生物多样性和菌群结构的改变，添加酵母硒能够缓解氧化应激对肉鸡肠道菌群结构造成的负面影响。

选取80只3月龄康乐黄鸡，随机均分为4组，每组5个重复，每个重复4只。对照组(CON组)和应激组(STR组)饲喂基础饲粮，酵母硒组(SY组)和酵母硒+应激组(SY＿STR组)饲喂在基础饲粮中添加0.5 mg/kg酵母硒的试验饲粮。预试期7 d，正试期21 d。试验第21天时，给STR组和SY＿STR组肉鸡腹腔注射15 mg/kg敌草快，CON组和SY组注射等量生理盐水，24 h后，每个重复选取1只鸡，采集盲肠内容物样品，用于肠道菌群分析，研究酵母硒对氧化应激肉鸡盲肠微生物多样性、菌群结构及物种丰度的影响。结果表明：盲肠菌群α多样性指数在各组间的差异均无统计学意义(P>0.05);β多样性分析显示，与CON组和SY＿STR组相比，STR组盲肠菌群结构分布相对零散，物种相似度较低；与CON组相比，STR组厚壁菌门与拟杆菌门相对丰度之比(F/B)、肠球菌属和埃希氏菌属–志贺氏菌属相对丰度显著(P<0.05)升高，毛螺旋菌属和嗜胆菌属相对丰度显著(P<0.05)降低；与STR组相比，SY＿STR组和SY组拟杆菌门相对丰度显著(P<0.05)降低；与STR组相比，SY＿STR组Muribaculaceae未明确属相对丰度显著(P<0.05)升高，肠球菌属相对丰度显著(P<0.05)降低；LEfSe分析显示，与CON组相比，STR组梭菌目vadinBB60群、Monoglobus、丹毒丝菌科显著富集，与STR组相比，SY＿STR组拟杆菌门、普雷沃氏菌科＿UCG–001、拟普雷沃氏菌属、帕拉普氏菌属显著富集。可见，氧化应激能引起肉鸡盲肠微生物多样性和菌群结构的改变，添加酵母硒能够缓解氧化应激对肉鸡肠道菌群结构造成的负面影响。

为探究在体外培养过程中山羊睾丸支持细胞(GSCs)存在的氧化应激问题,采用2步酶消化法分离和纯化GSCs,通过形态学观察、MTT法、油红染色和流式细胞鉴定细胞活度和纯度,再用不同浓度的H2O2处理GSCs,研究GSCs的活性、丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性及其DNA指数(DI)的变化。结果表明:GSCs形态为多角形状;在培养至第5天时GSCs活性最强;油红O染色鉴定多数细胞胞质含有红色的脂滴;GATA4阳性细胞率达到88.27±3.29%;添加50μmol/L H2O2组细胞存活率与对照组相比差异不显著(P>0.05),其它各组均显著低于对照组(P0.05),而其他各组均与对照组有显著差异(P

【目的】探讨氧化应激在镉诱导大鼠肝细胞凋亡中的作用。【方法】采用两步灌流法获得大鼠肝细胞,经过24 h培养,用醋酸镉处理细胞,或者Z-VAD-fmk、NAC和镉共同处理细胞。应用MTT法检测细胞存活率,流式细胞仪检测细胞凋亡率、细胞内ROS水平和线粒体膜电位,分光光度法检测caspase-3活性、GSH和MDA含量。【结果】结果表明,肝细胞暴露于浓度为2.5、5、10μmol.L-1的镉后,细胞相对存活率显著下降(P<0.01),凋亡率显著或极显著升高(P<0.05或P<0.0...

马尾藻具有很高的食用和药用价值,分离提取马尾藻多糖(Sargassum polysaccharides,SP),对其理化性质进行分析;研究马尾藻多糖对氧化应激态鸡脾脏淋巴细胞内谷胱甘肽(GSH)和一氧化氮(NO)分泌水平及淋巴细胞体外增殖的影响。结果表明:马尾藻多糖提取率为152.8 g/L;马尾藻多糖浓度为100、200、400 mg/L时,能显著促进体外培养的鸡脾脏淋巴细胞增殖;H2O2浓度为50μmol/L时,能诱导体外培养的鸡脾脏淋巴细胞处于氧化应激状态。马尾藻多糖浓度为400 mg/L,与细胞共孵育4 h或12 h,能显著增加氧化应激态细胞内GSH含量;共孵育培养8 h,能显著降低氧...

【目的】研究高温和氧化应激对体外培养肉鸡骨骼肌线粒体功能的影响,初步探讨高温影响肉鸡肌肉品质的机制。【方法】从16只2周龄AA肉鸡的左右小腿后侧分离腓骨长肌,使用不锈钢支架维持肌肉束的正常长度,在95%O2、5%CO2混合气体饱和条件下,体外孵育2h。分别测定升高孵育温度或在培养介质中添加邻苯三酚后,肉鸡腓骨长肌线粒体活性氧(ROS)产量、钙泵(Ca2+-ATPase)活性和乳酸含量的变化。【结果】升高培养温度显著提高肉鸡骨骼肌线粒体H2O2的产生量(P<0.0001),并影响肌纤...

[目的]本试验使用硫氢化钠(NaHS,硫化氢供体)处理Caco-2细胞,研究硫化氢(H_2S)对肠上皮细胞炎症、氧化应激和线粒体硫化物代谢功能的影响,探究H_2S影响肠道健康的可能机制。[方法]试验分为4个组,分别为对照组、低(0.1 mmol·L~(-1))、中(1 mmol·L~(-1))、高(2 mmol·L~(-1))浓度的NaHS组,处理24 h后测定各组细胞活力、炎症细胞因子基因表达、硫化物代谢酶基因表达和氧化应激指标。[结果]与对照组相比,NaHS能够增强肠上皮细胞活力,2 mmol·L~(-1) NaHS显著上调肿瘤坏死因子α(TNF-α)的基因表达水平(P<0.05),显著降低超氧化物歧化酶(SOD)活性(P<0.05)。[结论]低浓度H_2S能增强细胞活力,提高线粒体硫化物代谢能力和氧化应激水平。高浓度H_2S能促进炎症反应,提高氧化应激水平,影响线粒体硫化物代谢能力,可能对肠道健康产生不利影响。

用过氧化氢(H2O2)建立体外奶牛乳腺上皮细胞的氧化应激损伤模型,研究不同质量浓度茶多酚对氧化应激所致奶牛乳腺上皮细胞损伤的影响。MTT法检测细胞存活率,比色法检测细胞培养液中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和乳酸脱氢酶(LDH)活性,流式细胞术检测细胞凋亡情况,分光光度法检测天冬氨酸特异的半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)的活性。结果显示:与H2O2损伤模型组相比,20～100μg.mL-1茶多酚处理组的奶牛乳腺上皮细胞存活率、SOD活性显著升高,而MDA含量、LDH与Caspase-3相对活性与细胞凋亡率均下降,其中以100μg.mL-1茶多酚处理组效果最显著,说明一定质...

【目的】探究咖啡酸苯乙酯（caffeic acid phenethyl ester,CAPE）通过AMPK/FOXO3a信号通路缓解氧化应激对猪精液的影响及其分子机制。【方法】选取8头成年（1—2岁）、健康状况良好长白种公猪进行鲜精采集，将质检合格的样品混池待用。试验设计如下：首先，在常温基础稀释液中分别添加0、0.02、0.04、0.06、0.08和0.10 g·L~(-1)浓度的CAPE，将精液样品与各个浓度组依次混合后放置室温平衡，随即转入17℃电子恒温冰箱进行常温保存。全自动精子分析仪（CASA）测定1—5 d精子运动学参数（总活率与渐进性活力），筛选出最佳适宜浓度为0.06 g·L~(-1)。其次，将0.06 g·L~(-1) CAPE与400μmol·L~(-1)的H_2O_2建立氧化胁迫模型，在第1、3、5天分别采用CASA测定精子总活率与渐进性活力，荧光探针技术评估质膜完整性与顶体完整性，抗氧化试剂盒检测过氧化氢酶（catalase,CAT）与超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活性，在第5天利用实时荧光定量PCR技术测定AMPK/FOXO3a信号通路下游靶向基因（AMPK、FOXO3a、SOD1、SOD2、CAT）及凋亡基因BAX的mRNA表达水平，蛋白免疫印记技术测定AMPK、p-AMPK蛋白表达。【结果】（1）浓度筛选试验中，0.06 g·L~(-1)的CAPE在保存第3天显著提高精子的总活率并维持至第5天（P<0.05），不仅如此，精子的渐进性活力在第1天显著高于其他处理组（P<0.05）。（2）氧化胁迫试验中，H_2O_2处理组的精子质膜完整性、顶体完整性、总活率、渐进性活力、SOD与CAT活性在保存的第5天均极限显著低于空白组与CAPE+H_2O_2混合组（P0.05）。与CAPE+H_2O_2混合组相比，H_2O_2处理组AMPK、FOXO3a、SOD1、SOD2、CAT的mRNA表达水平显著降低（P<0.05),BAX的表达水平显著升高（P0.05）。在蛋白表达水平中，CAPE+H_2O_2混合组与H_2O_2组相比，AMPK、p-AMPK与p-AMPK/AMPK比率显著提升（P