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[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 陈昌福  史维舟  李静  樊明兴  
从患细菌性烂鳃病的翘嘴鳜分离的柱状嗜纤维菌制作的酚灭活菌苗,接种翘嘴鳜3周后,受免鱼体血清中凝集抗体效价上升到1:256~2048;血液中白细胞的吞噬活性显著地高于对照鱼(P<0.05);毒力攻击结果表明免疫保护力达到100%。
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 陈昌福  楠田理一  
从柱状嗜纤维菌提取菌体脂多糖(LPS)作为免疫原,分别注射接种翘嘴鳜、斑鳜和大眼鳜后,检测了供试鱼血清中凝集抗体效价和血液中白细胞吞噬活性以及采用直接荧光抗体法测定了受免鳜血液中各种淋巴细胞数量的变化。结果表明,接种LPS后,3种受免鳜血清中凝集抗体效价均在第3周达到峰值,血液中吞噬细胞的吞噬活性和T、B淋巴细胞样细胞的比率均在第2周最高。但是,3种受免鳜对LPS的免疫应答水平则显示出种间差异,以翘嘴鳜最高,斑鳜其次,大眼鳜最低。
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 陈昌福  罗宇良  曾妍雄  魏富兵  
从 3种不同血清型的柱状嗜纤维菌中提取菌体脂多糖 (LPS) ,测定了其中蛋白质含量及其成分的变化 ,并分别作为免疫原接种翘嘴鳜 ,对LPS的免疫原性进行了比较。结果表明 ,不同血清型的柱状嗜纤维菌菌体LPS中蛋白质含量没有明显差别 (t测验 ,P >0 .0 5 ) ,而其中蛋白质成分则有明显的血清型特异性。不同血清型的菌体LPS对翘嘴鳜的免疫原性没有明显差别 (t测验 ,P >0 .0 5 )
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 陈昌福  
采用不同方法提取的柱状嗜纤维菌脂多糖(LPS)作为抗原,对鲤注射免疫后,通过测定受免鲤血清中凝集抗体效价、沉降抗体、白细胞吞噬活性和进行强毒攻击的方法,比较了不同方法提取LPS的免疫原性,结果表明,Boivin法和Phenol-water法较EDTA法提取LPS的免疫原性强,而Biovin法和Phenol-water法提取LPS的免疫原性则没有明显差别。
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 陈昌福  曾妍雄  楠田理一  
从培养不同时间后的柱状嗜纤维菌中提取菌体脂多糖 (LPS) ,测定了其中蛋白质含量及成分的变化 ,并分别作为免疫原接种翘嘴鳜对其免疫原性进行了比较。结果表明 ,培养时间对菌体LPS中蛋白质含量没有明显影响 ,对其蛋白质成分则有一定影响 ,而菌体LPS中蛋白质成分与其免疫原性有关 ,从培养 36h的菌体中提取的菌体LPS的免疫原性最强
[期刊] 淡水渔业  [作者] 陈昌福  
采用从各种患病淡水鱼类上分离到的柱状嗜纤维菌(Cytophagacolumnaris)40个菌株,通过交叉凝集和琼脂内扩散反应,研究了C.columnaris的血清型。结果表明:根据不同菌株的热稳定性具有明显差别的现象,首次证明了从我国各地收集的Ccolumnaris菌存在3个不同的血清型。
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 陈昌福  曾妍雄  楠田理一  
用嗜水气单胞菌 (Aeromonashydrophila)制备的福尔马林灭活菌苗 (F AH)和胞外产物 (ECP)作为免疫原 ,接种翘嘴鳜 (SinipercachuatsiBasilewsky)后 ,通过测定供试鱼的体液及细胞免疫活性 ,探讨了A .hydrophila的ECP对翘嘴鳜免疫防御机制的影响。结果表明 ,与F AH免疫组相比 ,ECP能极显著地影响供试鱼的凝集抗体、补体等体液因子的活性 (t测验 ,P 0 .0 5 )。推测A .hydrophila的ECP对翘嘴鳜免疫防御机...
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 陈昌福  李静  周文豪  赵桂珍  
从患细菌性败血症的翘嘴鳜分离嗜水气单胞菌BS-1菌株,制成福尔马林灭活疫苗(F-AH)、酚灭活疫苗(P-AH)和提取菌体脂多糖(LPS)作为免疫原。注射接种体重为35.5±5.6g的翘嘴鳜后,通过检测血清中的凝集抗体效价、血液和头肾中吞噬细胞的吞噬活性以及应用活菌攻毒等方法,比较了3种不同免疫原的免疫效果。结果表明,LPS的免疫效果最好,P-AH次之,F-AH较差。用活菌攻毒后,3种受免鱼体的免疫保护力分别为92.2%,84.7%和80.7%。
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 张玉蕾  赵丽娟  周伟东  艾桃山  林蠡  
从患病黄颡鱼上分离出1株柱状黄杆菌(Pf1),对其进行分类鉴定和药物敏感试验。用Pf1感染黄颡鱼和翘嘴鳜,发现Pf1对2种鱼均有致病性。Pf1可导致翘嘴鳜多个组织细胞坏死和炎症反应,严重损伤肝、体肾和鳃。被感染翘嘴鳜肝细胞肿胀、空泡化坏死;肾小管广泛坏死和大量炎症细胞浸润;鳃小片毛细血管充血,呼吸上皮细胞肿胀变性,鳃的呼吸功能衰退。鳃部病变导致感染鳜呼吸频率加快、游动缓慢,最后大量死亡。
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 陈昌福  
采用不同血清型的柱状嗜纤维菌(Cytophagacolumnaris)G4,CTS5,和M157等3个菌株,分别制备成福尔马林灭活菌苗(FKC)和热灭活菌苗(HKC),注射接种草鱼4周后,通过测定血清中凝集、交叉凝集抗体效价以及活菌攻毒试验,证明了3个菌株制备的菌苗的抗原性不存在差别。
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 陈昌福  王敏  罗宇良  
测定了17种抗生素对20株柱状嗜纤维菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。发现从湖北省各地患病鱼上分离的菌株对大多数供试药物都高度敏感,而从广东省中山的患病翘嘴鳜和斑鳢上分离的菌株则对四环素类、氨基甙类和大环类酯类的部分抗生素显示出高度耐药性。推测这是由于无序使用抗生素的结果。
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 陈昌福  史维舟  纪国良  赵桂珍  
将酚灭活的点状气单胞菌和柱状屈桡杆菌菌苗按不同比例制备成二联菌苗,注射接种草鱼后,通过检测受免草鱼血清中的凝集抗体效价和攻毒试验,初步证明了由这两种菌制备的酚灭活菌苗,可刺激草鱼产生良好的免疫反应,免疫保护力达到56.0%~73.0%。
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 陈昌福  李静  杨广  俞云聪  
用酚灭活的柱状嗜纤维菌(P-CC)疫苗,菌体脂多糖(LPS)以及将P-CC和LPS混合后作为抗原,分别浸泡翘嘴鳜使免疫,并检测了受免鱼体的免疫保护力。结果表明,经3种疫苗浸泡接种后的鱼体血清中凝集抗体效价与对照组鱼没有显著差别(P>0.05);而经活菌攻毒后的存活率,则是免疫组显著地高于对照组(P<0.05),以LPS免疫组的免疫保护力(71.9%)最强。
[期刊] 渔业科学进展  [作者] 朱鑫海  张紫瑞  周丽颖  汤环宇  敖士奇  周一凡  高晓建  姜群  张晓君  
嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)是严重危害翘嘴鳜(Siniperca chuatsi)养殖生产的主要病原之一,为揭示嗜水气单胞菌感染翘嘴鳜后宿主基因表达水平的变化,筛选免疫相关基因,解析翘嘴鳜应答病原细菌感染的分子机制,本研究以病原嗜水气单胞菌感染翘嘴鳜,于感染24 h后,采集感染组与对照组翘嘴鳜头肾组织,采用Illumina Hiseq 2000进行了RNA-Seq分析,原始数据拼接后组装共获得53,040个单基因(unigene)。基因差异表达分析结果显示,感染组和未感染组翘嘴鳜存在526个差异表达基因,包括254个上调基因和272个下调基因,其中免疫相关的显著上调的差异基因主要有炎症和免疫原性细胞因子白介素、补体系统、MHCⅠ型抗原提呈、溶菌酶、丝氨酸蛋白酶抑制因子、泛素蛋白连接酶等。GO富集分析发现,差异基因主要涉及免疫应答反应和炎症反应等,经KEGG富集分析显示,89个通路富集显著,免疫相关的代谢通路主要有内吞作用和吞噬体等。此外,实时荧光定量PCR验证结果表明,所选取7个差异表达免疫相关基因与RNA-seq结果具有相似的表达趋势。本研究为揭示翘嘴鳜对病原微生物感染的防御分子机制奠定了理论基础。
[期刊] 渔业科学进展  [作者] 朱鑫海  张紫瑞  周丽颖  汤环宇  敖士奇  周一凡  高晓建  姜群  张晓君  
嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)是严重危害翘嘴鳜(Siniperca chuatsi)养殖生产的主要病原之一,为揭示嗜水气单胞菌感染翘嘴鳜后宿主基因表达水平的变化,筛选免疫相关基因,解析翘嘴鳜应答病原细菌感染的分子机制,本研究以病原嗜水气单胞菌感染翘嘴鳜,于感染24 h后,采集感染组与对照组翘嘴鳜头肾组织,采用Illumina Hiseq 2000进行了RNA-Seq分析,原始数据拼接后组装共获得53,040个单基因(unigene)。基因差异表达分析结果显示,感染组和未感染组翘嘴鳜存在526个差异表达基因,包括254个上调基因和272个下调基因,其中免疫相关的显著上调的差异基因主要有炎症和免疫原性细胞因子白介素、补体系统、MHCⅠ型抗原提呈、溶菌酶、丝氨酸蛋白酶抑制因子、泛素蛋白连接酶等。GO富集分析发现,差异基因主要涉及免疫应答反应和炎症反应等,经KEGG富集分析显示,89个通路富集显著,免疫相关的代谢通路主要有内吞作用和吞噬体等。此外,实时荧光定量PCR验证结果表明,所选取7个差异表达免疫相关基因与RNA-seq结果具有相似的表达趋势。本研究为揭示翘嘴鳜对病原微生物感染的防御分子机制奠定了理论基础。
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