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[期刊] 水产学报
[作者]
邹定辉 高坤山
对羊栖菜离体生殖托低温超低温保存技术进行了探讨。首先对离体生殖托进行有关预处理(包括保护剂的选择、生殖托干出或浸没的状态以及温度降低的程序等),然后分别在超低温(-196℃)、冰冻(-18℃)和低温(5℃)的条件下进行保存。结果表明,生殖托在超低温和冰冻条件下保存均不理想,但是处于干出状态(避免失水)的生殖托在5℃下可以保存30d,其代谢活性、细胞相对活力以及配子释放能力均较好,是一种简单而有效的生殖托保存方法。并讨论了羊栖菜生殖托低温保存技术在人工苗种生产上的可能应用。
关键词：
羊栖菜 生殖托 保存
[期刊] 林业科学
[作者]
陈礼光 郑郁善 李庆荣 张祝金
对不同含水量肉桂离体胚进行超低温(LN2)保存,采用不同冷冻方式、解冻方式及防冻剂预处理,并测定超低温保存前后的脱氢酶、电导率、α-淀粉酶生理生化指标。结果表明:超低温保存的技术关键是减少保存材料在脱水过程中所受的伤害,以及采用适宜的冷冻和解冻方式和添加适宜的防冻剂。防冻剂预处理可以适当提高保存含水量,增加含水量范围。肉桂离体胚没有添加防冻剂时最适宜保存含水量为30%~40%(w∶w),采用快冻快解处理。防冻剂预处理后的保存效果比没有防冻剂预处理的更佳,采用缓冻快解或快冻缓解处理较为适宜。
关键词：
肉桂 超低温保存 离体胚 含水量 防冻剂
[期刊] 华北农学报
[作者]
陈霜莹 常永健 赵艳华 张浡 刘瑜 章德明
将苹果、梨、桃、李和樱桃等树种的39个品种的花粉干燥至含水量10%～20%,直接投入液氮中(-196℃),经过一段时间保存后,再以40℃水浴快速化冻1min,然后鉴定其生活力和萌发力.结果表明,花粉的生活力没有明显变化,其离体萌发率与新鲜花粉相近.新鲜花粉含水量在60%左右,不宜用于液氮保存.花粉含水量是影响保存效果的关键因子之一,只要花粉含水量适宜,可以多次反复冷冻—化冻,生活力不受影响.此项技术可用于果树花粉的长期保存.
关键词：
超低温保存种质 花粉 果树
[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
刘燕 周慧 方标
为了探讨超低温保存技术广泛应用于园林花卉种子保存的可能性 ,对 18个科 47种花卉种子进行了超低温保存研究 .除了 2种花卉种子进入液氮后炸裂外 ,其余 45种花卉种子保存后都有一定发芽率 ,有些花卉种子保存后种子发芽率还高于保存前 .结果表明 ,①超低温保存技术可以广泛应用于园林花卉的种子保存 ;②花卉种子在自然含水量状态即可存于液氮中 ;③从液氮中取出后 ,采用 35～ 40℃温水浴化冻有较高的发芽率 ;④超低温保存对一些花卉种子萌发表现出促进作用
关键词：
超低温保存 种子 园林花卉 种质保存
[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
张亚利 尚晓倩 刘燕
为满足种质资源保存和交换以及杂交育种工作的需求,花粉超低温保存研究日渐兴起并逐步深入,保存材料从农作物、果树逐渐扩展到药用植物、园林植物等各类植物花粉.花粉超低温保存研究最初主要集中在保存技术方面,随着研究工作的深入和完善,花粉超低温保存机理的研究也逐渐展开,超低温保存花粉效果的评价,也从花粉染色法、离体萌发法,逐渐发展到田间杂交育种的实际应用.该文对20世纪80年代以来成功进行了花粉超低温保存研究的植物材料进行了总结,重点介绍了花粉超低温保存技术程序,同时对保存效果的评价及超低温保存机理的研究进展进行了综述.
关键词：
花粉 超低温保存 种质资源
[期刊] 林业科学
[作者]
郑郁善 陈礼光 李庆荣 林镇斌 吴擢溪
The quality character, the dehydrogenase activities and the α amylase activity of Castanea mollissima conserved materials, including the seeds and the excised embryos, were analyzed for purpose of the feasibility of long term storage associated with cryopreservation. The results showed that mo...
关键词：
板栗 含水量 超低温保存 种子活力
[期刊] 华北农学报
[作者]
吴永杰 赵艳华 周明德
苹果金冠品种的休眠茎尖经３种不同方法（玻璃化法、包埋－干燥法和两步降温法）超低温保存后，均获得成功，存活率达到了８３％。休眠茎尖由于经受了冬季的深冷驯化和具有较低的含水量，因而成为超低温保存的良好试材。经过玻璃化液（ＰＶＳ３：５０％甘油＋５０％蔗糖）预处理８０ｍｉｎ（２５℃条件下）后或经蔗糖溶液预培养并于无菌空气中干燥脱水至含水量３０％左右后，休眠茎尖可直接投入液氮进行超低温保存。保存后的休眠茎尖经离体培养后可直接再生植株。试验进一步验证了试材生理状态的选择是超低温保存成功的一个关键因素，这不仅可以简化超低温保存的程序，而且可以提高此方法的实用性，为早日建立植物种质的超低温保存库奠定了基础。
关键词：
苹果,休眠茎尖,超低温
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
熊兴耀 李炎林
超低温保存是目前木本植物长期保存的理想方法。综述国内外超低温保存技术在木本植物种质资源保存方面的应用现状和超低温条件下的低温伤害及细胞超微结构改变,阐述超低温保存技术的发展及各类超低温保存技术的优缺点和影响因素,指出广谱适用性问题、保存方法的可重复性问题和可操作性问题、投入产出问题是影响超低温保存技术推广应用的主要问题,认为扩大超低温保存木本植物资源的种类、根据植物种类和外植体类型发展相应的超低温保存技术、根据保存目的合理选取保存材料及其保存方法、优先发展经济优势物种的保存技术、增加财政投入以研发新型超低温保存技术是解决上述问题的重要途径。
关键词：
木本植物 种质资源 超低温保存 低温伤害
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
沈秋林 毕旸 陈礼光 蒋建立 黄宇
探讨了超低温保存过程中预培养的蔗糖含量、DMSO含量,冰冻和解冻方式、防冻剂的种类和含量等因子对三尖杉悬浮细胞保存效果的影响.结果表明:效果较好的防冻剂为DMSO、PEG;在含有4%蔗糖和6%DMSO的液体培养基上培养得到的悬浮细胞,加入15%PEG、9%DMSO和5%山梨醇的防冻剂,采用快冻和缓解处理的悬浮细胞活力最强.
关键词：
三尖杉 悬浮细胞 超低温保存
[期刊] 中国水产科学
[作者]
周磊 罗渡 卢薛 王鹏飞 胥鹏 曾雷 李桂峰
实验所用翘嘴鳜(♀,Siniperca chuatsi)2~3龄,体质量1 000~1 500 g;斑鳜(♂,Siniperca scherzeri Steindachner)1~2龄,体质量300~500 g。于繁殖季节选取成熟度好的亲鱼以促黄体素释放激素类似物(LHRH-A2)、绒毛膜促性腺激素(HCG)和马来酸地欧酮(DOM)进行催产。通过筛选D-15、D-17、Ringer液和M-Hank’s液4种稀释液和二甲基亚砜(DMSO)、甘油(Gly)、乙二醇(EG)、1,2-丙二醇(PG)和二甲基甲酰胺(DMF)5种抗冻剂,发现DMSO和D-17分别是优选的抗冻剂和稀释液。以D-17作为斑鳜...
关键词：
斑鳜 精子 冷冻保存 杂交育种 种质资源
[期刊] 中南林业科技大学学报
[作者]
常维霞 姚小华 龙伟
为实现普通油茶花粉周年保存,对普通油茶3个无性系品种的花粉进行超低温保存研究。结果表明:花粉投放液氮前的含水量、预冻及解冻方式对超低温保存效果具有明显影响。3个品种花粉烘干(30℃)脱水2~5 h,花粉含水量达11.65%~15.70%时,超低温保存效果最佳;-26℃预冻(1 h)具有明显的预冻效果,液氮保存后花粉萌发率显著高于其他处理;超低温保存后的花粉采用38℃温水浴(3 min)快速解冻及-80℃(1 h)→-20℃(1 h)→4℃(1 h)逐级解冻,均能较好保持花粉活力。4℃低温干燥保存油茶花粉,能满足短期内(30 d)授粉的需要;超低温技术可以实现油茶花粉的周年保存,且保存一年的花粉较初始活力差异不显著。
关键词：
普通油茶 花粉 超低温保存
[期刊] 水产学报
[作者]
江世贵 苏天凤 喻达辉 陈竞春 周立新
对中华乌塘鳢精子激活的生理生态学进行了研究 ,探讨了中华乌塘鳢精子超低温保存方法。中华乌塘鳢精子激活的适宜盐度为 5～ 15 ;其精子的激活不仅与激活溶液盐度有关 ,而且与激活溶液的离子成份有关 ,激活溶液中K+ 的存在在一定程度上对精子的活动有抑制作用 ;中华乌塘鳢精子对pH的适应性强 ,在pH 5 .5～ 9.5范围内 ,激活率均在 70 %以上 ,尤以中性及弱酸性条件下的激活率最高 ,在pH 6 .0时精子活力最好。使用筛选出的精子保存液 ,以二甲亚砜 (DMSO)为抗冻保护剂 ,采用快速冷冻和解冻方法 ,成功地进行中华乌塘鳢精子超低温保存 ,解冻后的中华乌塘鳢精子激活率达 90 %以上...
关键词：
中华乌塘鳢 精子 激活 超低温保存
[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
李秉玲 王荷 刘燕
为解决杂交育种工作中的时空不遇,延长花粉寿命,本文对23个日本牡丹品种花粉进行了超低温保存研究。对新鲜花粉及超低温保存花粉离体萌发率测定结果表明:不同日本牡丹品种新鲜花粉生活力存在差异,23个品种中,‘大藤锦’花粉萌发率最高,达到60.89%,而‘岛大臣’最低,仅3.49%;室温条件下,日本牡丹品种花粉寿命仅15d左右,而超低温保存可以使日本牡丹品种花粉寿命至少延长至2年。经超低温保存2年,花粉仍然具有较高的萌发率,有的甚至超过保存前水平,因此超低温保存技术可用于日本牡丹品种花粉的长期保存。
关键词：
日本牡丹 花粉 萌发率 超低温保存
[期刊] 中国水产科学
[作者]
刘光霞 吴兴兵 何勇凤 邓智明 杨德国 王小明 杨少荣 刘欢
为建立圆口铜鱼(Coreius guichenoti)精子超低温冷冻保存方法,采用计算机辅助精子分析系统(CASA)评价了4种稀释液(D15、D20、L1、D1), 3种抗冻保护剂[二甲基甲酰胺(DMF)、二甲基亚砜(DMSO)、甲醇(METH)]在3种体积浓度(7.5%、10%、12.5%, V/V)下对圆口铜鱼精液的冷冻保存效果,并比较了150 mOsm/kg NaCl与超纯水作为激活剂对精子活力的影响。结果表明,D1组稀释液的精子活率(MOT)最高,为(74.64±13.17)%,与鲜精无显著差异(P>0.05);以10%甲醇作为抗冻保护剂的圆口铜鱼精子经超纯水激活后,测得MOT最高,达到(78.11±14.74)%,与鲜精无显著差异(P>0.05),精子运动速度达最大,平均曲线运动速度(VCL)、平均直线运动速度(VSL)、VAP(平均路径运动速度)分别达到(50.28±12.46)μm/s、(35.06±10.82)μm/s、(39.44±12.46)μm/s,精子快速运动时间和寿命分别为(8.67±1.15) s、(33.33±5.00) s,显著低于鲜精(P
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