- 年份
- 2024(6475)
- 2023(9284)
- 2022(7767)
- 2021(7137)
- 2020(6175)
- 2019(12803)
- 2018(12494)
- 2017(23148)
- 2016(12960)
- 2015(14136)
- 2014(14014)
- 2013(13486)
- 2012(12523)
- 2011(11128)
- 2010(11046)
- 2009(10213)
- 2008(9654)
- 2007(8564)
- 2006(7412)
- 2005(6464)
- 学科
- 济(49691)
- 经济(49634)
- 管理(32228)
- 业(30376)
- 企(22143)
- 企业(22143)
- 方法(21224)
- 数学(18930)
- 学(18876)
- 数学方法(18777)
- 农(14693)
- 中国(13514)
- 财(12484)
- 地方(10876)
- 农业(10139)
- 业经(9815)
- 制(9595)
- 贸(9443)
- 贸易(9438)
- 易(9148)
- 体(8017)
- 环境(7920)
- 银(7818)
- 融(7773)
- 金融(7765)
- 银行(7746)
- 理论(7661)
- 行(7387)
- 技术(7375)
- 务(6692)
- 机构
- 大学(184233)
- 学院(182966)
- 济(71530)
- 经济(70173)
- 研究(69354)
- 管理(63660)
- 理学(55558)
- 理学院(54797)
- 管理学(53582)
- 管理学院(53271)
- 中国(49391)
- 科学(48652)
- 农(48005)
- 农业(38881)
- 京(38754)
- 所(37939)
- 业大(37486)
- 研究所(35399)
- 财(31172)
- 中心(30472)
- 江(27879)
- 农业大学(25824)
- 院(25225)
- 财经(24978)
- 省(24700)
- 北京(23243)
- 范(23014)
- 经(22860)
- 经济学(22702)
- 师范(22485)
- 基金
- 项目(133169)
- 科学(101949)
- 基金(96231)
- 家(89660)
- 国家(88953)
- 研究(86145)
- 科学基金(72970)
- 社会(54619)
- 省(53800)
- 社会科(51623)
- 社会科学(51609)
- 基金项目(51138)
- 自然(50255)
- 自然科(49112)
- 自然科学(49089)
- 自然科学基金(48222)
- 划(45533)
- 教育(39323)
- 资助(38714)
- 编号(32081)
- 重点(31319)
- 计划(28953)
- 发(28676)
- 部(27898)
- 创(27738)
- 科技(26704)
- 科研(26620)
- 创新(26125)
- 成果(25089)
- 业(24876)
共检索到264520条记录
发布时间倒序
- 发布时间倒序
- 相关度优先
文献计量分析
- 结果分析(前20)
- 结果分析(前50)
- 结果分析(前100)
- 结果分析(前200)
- 结果分析(前500)
[期刊] 淡水渔业
[作者]
李波 郑树城 曾伟伟 王庆 李莹莹 尹纪元 王雅慧 吕月凤 石存斌 赵志英 姜志勇 王英英
罗非鱼湖病毒TiLV是一种新发RNA病毒，对罗非鱼养殖业造成巨大威胁。为明确罗非鱼(Oreochromis niloticus)多聚免疫球蛋白受体基因(OnpIgR)的序列和结构特征及其对TiLV增殖的影响，本研究首先对PCR扩增获得的OnpIgR完整的ORF,进行了结构域预测、三维结构预测以及遗传进化树分析，然后采用荧光定量PCR方法分析了罗非鱼感染TiLV后该基因在各组织的表达模式，最后构建了OnpIgR过表达质粒，初步研究了OnpIgR对TiLV增殖的影响。结果表明，PCR扩增获得了完整的OnpIgR ORF序列，长度为1 023 bp,该ORF序列具有一个信号肽，两个Ig样结构域，同源建模结果显示，pIgR蛋白整体呈扭曲的“L”型，主要由反平行β片层和无规卷曲组成；系统发育树显示OnpIgR与大口黑鲈(Micropterus salmoides)以及斜带石斑鱼(Epinephelu coioides)的pIgR聚为一支；感染TiLV后，罗非鱼皮肤、脾脏以及肾脏中pIgR均呈现先上升后下降的趋势；成功构建了pEGFP-OnpIgR并在TiB细胞中过表达OnpIgR后感染TiLV,发现TiLV的S8和S10节段mRNA相对表达量显著增多，TiLV拷贝数也显著增多，初步表明OnpIgR对TiLV的增殖具有促进作用。
[期刊] 中国水产科学
[作者]
丁冰洁 绳秀珍 唐小千 邢婧 战文斌
鱼类多聚免疫球蛋白受体(polymeric immunoglobulin receptor,pIgR)是黏膜免疫系统的关键因子,能够介导多聚免疫球蛋白向黏液中的转运和分泌。本研究利用同源克隆和cDNA末端快速扩增技术(rapid amplification ofcDNA ends,RACE),首次得到了大菱鲆(Scophthalmus maximus)pIgR完整的cDNA序列,全长1 584 bp,该序列包含一个1 005 bp的开放阅读框及5’和3’UTR,编码334个氨基酸。同源性比较发现,大菱鲆pIgR氨基酸序列与牙鲆(Paralichthys olivaceus)、斜带石斑鱼(Epi...
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
王双艳 王磊 陈张帆 崔忠凯 周茜 陈松林
本研究根据半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)基因组数据库中预测的多聚免疫球蛋白受体(Polymeric immunoglobulin receptor, pIgR)序列,通过PCR和RACE技术获得了半滑舌鳎pIgR基因cDNA,全长为1419 bp,开放阅读框(ORF)为1020 bp,编码339个氨基酸,5′UTR区域为109 bp,3′UTR区域为290bp。保守结构域分析显示,半滑舌鳎pIgR蛋白包含1个信号肽,2个免疫球蛋白功能域(Ig-like domain, ILD)和1个跨膜结构域。经蛋白序列同源比对和系统进化树分析,发现半滑舌鳎pIgR与大菱鲆(Scophthalmus maximus)和牙鲆(Paralichthy solivaceus)的pIgR亲缘关系最近。实时荧光定量PCR分析显示,pIgR基因在健康半滑舌鳎的不同组织中均有表达,在鳃中表达较高,在肌肉中表达最低。经哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)病原感染刺激后,pIgR基因在半滑舌鳎的5个组织(肝脏、脾脏、肾脏、肠和鳃)中均呈先上升后下降的趋势,其中,在脾脏和鳃中48 h达到最高值,在肝脏、肾脏和肠中72 h达到峰值。与内脏组织不同的是,pIgR基因在皮肤中呈一直上升的趋势。上述结果表明,pIgR基因在半滑舌鳎抵御哈维氏弧菌的免疫应答中发挥重要作用。
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
吴斌
制备了"新吉富"罗非鱼血清免疫球蛋白IgM单克隆抗体(McAb)并进行了特性分析,以血清IgM McAb为基础,建立了IgM捕获ELISA检测方法.采用亲和层析法纯化健康"新吉富"罗非鱼IgM,纯化蛋白经SDS-PAGE检测,重链、轻链的相对分子质量分别为7578、2325 ku;以纯化的IgM为抗原制备IgM McAb,制备McAb杂交瘤细胞株系3株,分别命名为2H5、2D4、2B11,抗体亚型均为IgM,小鼠腹水效价分别为1.0×10(-5)、1.0×10(-4)、1.0×10(-5),对IgM敏感度
[期刊] 水产学报
[作者]
王凡 林天龙 潘厚军 吴淑勤 杨金先 李巧苹
This paper described the preparation and characterization of monoclonal antibodies(Mab) against mandarin fish(Siniperca chuatsi) immunoglobulin(Ig),using the Mabs as a tool for analyzing the structure of S.chuatsi Ig,and monitoring the humoral immunity level of S.chuatsi.The purified serum Ig of S.c...
关键词：
鳜 免疫球蛋白 单克隆抗体
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
李佳 陶小荣
植物NLR(nucleotide binding leucine-rich repeat)蛋白是一类具有核苷酸结合域并富含亮氨酸重复序列的胞内免疫受体，通过识别进入细胞内的病原生物效应蛋白，激活植物免疫反应。近年来，植物NLR免疫受体蛋白的三维结构解析与生物学功能研究取得了诸多进展，从分子水平上揭示了植物NLR受体对病原生物效应蛋白的识别机制、受体多聚体化以及免疫信号激活机制，同时也为植物NLR免疫受体的人工设计和改造提供了重要的结构基础。本文综述了近十年植物NLR免疫受体蛋白的结构生物学研究进展，并探讨了未来该领域亟待回答的科学问题和面临的挑战。
[期刊] 华北农学报
[作者]
朱新产 邵艳红 朱峰伟 杨丽金
为探究Ig G/Ig M蛋白的分子特征、理化特性及病理学相关致病机理,对鹅细小病毒感染雏鹅的免疫球蛋白Ig进行了分级分离、纯化及Ig G/Ig M蛋白质结构和功能等生化-分子生物学分析。以GPVYZ感染雏鹅,采用(NH4)2SO4分级分离鹅血清Ig,将Sephadex G-100凝胶柱在Utro-gel ACA22凝胶柱色谱工作站上串联,分步聚集纯化出鹅血清Ig M/G进行SDS-PAGE和生化分析。结果显示,初级沉淀鹅血清Ig,在非还原条件下,感染组(RD)缺失6个蛋白主带(128,114,69,59,55,48 k Da);而在还原条件下,RD组缺失7个蛋白主带(139,128,119,1...
[期刊] 华北农学报
[作者]
朱新产 邵艳红 朱峰伟 杨丽金
为探究Ｉｇ ｇ／Ｉｇ Ｍ蛋白的分子特征、理化特性及病理学相关致病机理，对鹅细小病毒感染雏鹅的免疫球蛋白Ｉｇ进行了分级分离、纯化及Ｉｇ ｇ／Ｉｇ Ｍ蛋白质结构和功能等生化－分子生物学分析。以ｇＰＶＹＺ感染雏鹅，采用（ＮＨ４）２ＳＯ４分级分离鹅血清Ｉｇ，将ＳｅＰＨａｄｅｘ ｇ－１００凝胶柱在ＵｔｒＯ－ｇｅｌ ａＣａ２２凝胶柱色谱工作站上串联，分步聚集纯化出鹅血清Ｉｇ Ｍ／ｇ进行ＳｄＳ－Ｐａｇｅ和生化分析。结果显示，初级沉淀鹅血清Ｉｇ，在非还原条件下，感染组（ｒｄ）缺失６个蛋白主带（１２８，１１４，６９，５９，５５，４８ ｋ ｄａ）；而在还原条件下，ｒｄ组缺失７个蛋白主带（１３９，１２８，１１９，１．．．
[期刊] 中国水产科学
[作者]
许娜娜 钱冬 赵海泉
分离纯化了花鲈(Lateolabrax japonicus)血清免疫球蛋白(Ig),并对其特性进行初步研究与分析。采用山羊-IgG(Goat-IgG)免疫花鲈并制备血清,分别采用硫酸铵分级沉淀法、A蛋白亲和层析法及Goat-IgG偶联亲和层析法提取花鲈Ig,对提取组份进行了蛋白浓度测定、间接ELISA效价测定、SDS-PAGE和Western-blotting分析。结果表明,采用硫酸铵分级沉淀法提取的花鲈Ig主要集中在硫酸铵饱和度为30%~50%的区间,其中45%饱和度硫酸铵富集的的抗体比活最高,ELISA效价为2×104/mg蛋白,比血清ELISA效价提高2.2倍;A蛋白柱亲和层析可得单一蛋...
关键词：
花鲈 免疫球蛋白 纯化 亲和层析
[期刊] 水产学报
[作者]
林天龙 陈强 俞伏松 杨金先 龚晖 林能锋 许斌福 伊光辉
采用饱和硫酸铵分步盐析法结合柱层析提取、纯化欧洲鳗血清免疫球蛋白 (Ig) ,实验证实欧洲鳗Ig主要分布在硫酸铵饱和度 30 % - 5 0 %的区间内 ;Sephacryl-S2 0 0进一步提纯的Ig主要存在于第一个蛋白峰 ;而Sepharose - 4B柱层析提纯的Ig则存在于第二个蛋白峰 ;DEAE - 5 2离子交换柱层析可进一步纯化Sepharose -4B柱层析的产物 ;ELISA和Western -blot分析证实上述提取物具有抗体的免疫学活性 ;SDS -PAGE分析纯化的Ig ,显示欧洲鳗Ig重链约为 6 8kD、轻链约为 2 6kD。
关键词：
欧洲鳗 免疫球蛋白 纯化
[期刊] 中国水产科学
[作者]
刘云 孙峰 姜国良
运用Sephacryl S-200凝胶层析和HiTrap rProtein ASepharose亲和层析2种方法对牙鲆(Paralichthys olivaceus)血清免疫球蛋白进行分离纯化,结果表明,牙鲆免疫球蛋白分布于33%~50%的硫酸铵饱和溶液中,其中45%的分离效果最好。凝胶层析和亲和层析样品均出现2个蛋白峰,用还原SDS-PAGE检测确定牙鲆免疫球蛋白存在于第2个蛋白峰中。牙鲆免疫球蛋白重链分子量约为75.4 kD,轻链分子量约为29.9 kD和28.2 kD,推测牙鲆血清免疫球蛋白的分子量为836 kD。制备了兔抗牙鲆免疫球蛋白多克隆抗体,免疫双扩散法检测多克隆抗体效价为1∶3...
[期刊] 水产学报
[作者]
林天龙 陈强 龚晖 刘晓东 俞伏松 杨金先 董传甫
应用杂交瘤单克隆抗体技术制备了 13个分泌抗欧洲鳗免疫球蛋白的单克隆抗体细胞株 ,并对这些单克隆抗体的特性进行了分析。经抗体级份和亚级份测定 ,其中IgM有 3株 ,IgG1有 5株 ,IgG2a有 3株 ,IgG2b有 2株 ;所有的单克隆抗体与欧鳗免疫球蛋白均有ELISA反应特性 ,抗体滴度 10 4～ 10 7,有七株单抗具有WESTERNBLOT反应特性 ,能在变性条件下识别欧鳗免疫球蛋白的重链。进一步实验证实这些单抗能特异地识别欧洲鳗、日本鳗的免疫球蛋白 ,而与鲫、淡水白鲳、罗非鱼、胡子鲶、美洲斑点叉尾血清免疫球蛋白以及水产动物常见病原菌如气单胞菌、爱德华氏菌、弧菌、柱状屈桡杆菌、...
关键词：
欧洲鳗鲡 单克隆抗体 免疫球蛋白
[期刊] 水产学报
[作者]
杨桂文 安利国 温武军 王长法
以正常生活状态下的非免疫鲤为材料，采用盐析、高速离心、柱层析等方法，从鲤胆汁与血清中分离提取了免疫球蛋白，并对它们的理化性质和免疫原性进行了比较研究。结果表明：鲤胆汁中存在的免疫球蛋白的某些理化性质同血清中免疫球蛋白的相似，并且二者具有相同的免疫原性。由此推断，鲤胆汁中免疫球蛋白的来源可能与血清中免疫球蛋白具有一定的同源性。
关键词：
鲤,免疫球蛋白,血清,胆汁
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
杨晓宇 李娜 杨华 陈锦屏 张富新
研究了酸、碱、胃蛋白酶、胰蛋白酶对羊初乳中免疫球蛋白IgG稳定性的影响。结果表明,IgG在pH 值为5．0～10．0时十分稳定,在pH值低于5．0的条件下,随pH值降低,变性率急剧上升;正交试验结果表明,胃蛋白酶对IgG的影响因素为pH值>作用时间>酶液浓度;最佳条件为pH 4．0,作用时间1 h,胃蛋白酶的质量浓度为0．5 mg／mL;胰蛋白酶对IgG活性的影响相对较小。
关键词：
羊初乳 免疫球蛋白 稳定性
[期刊] 海洋水产研究
[作者]
邵蓬 战文斌 绳秀珍 邢婧
用患淋巴囊肿病牙鲆体表肿瘤纯化的淋巴囊肿病毒对健康牙鲆进行人工感染,应用抗牙鲆免疫球蛋白单克隆抗体通过间接酶联免疫法(ELISA)检测感染之后的牙鲆血清总抗体水平和抗LCDV特异性抗体水平的变化规律。结果表明,感染7d后,牙鲆血清中特异性抗体和总抗体水平都显著升高。抗LCDV特异性抗体水平在405nm处的OD值从对照的0.129上升至0.238;随着感染时间延长抗体水平持续升高(第14天0.247,第21天0.410),在第28天达到最高值0.436,然后开始缓慢降低(第35天0.385,第98天0.357);总抗体水平在405nm处的OD值从对照的0.135上升至0.250;随着感染时间延长...
文献操作()
导出元数据
文献计量分析
导出文件格式：WXtxt
删除
