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[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
胡浪 郭青青 刘烨蓉 胡章立 王江新 雷安平
为研究缺氮胁迫对固氮蓝藻DNA甲基化的影响,本研究以固氮蓝藻鱼腥藻Anabaena sp. PCC 7120为试验材料,比较了正常藻丝、缺氮藻丝和异形胞的DNA甲基化修饰。DNA甲基化修饰与细胞分化、基因组印记等多种重要生物学过程有关。在高等植物和非固氮蓝藻中,缺氮胁迫可以改变DNA甲基化修饰模式。DNA甲基化修饰也存在于固氮蓝藻细胞中。然而,固氮蓝藻可以通过固定空气中的氮来缓解缺氮压力,缺氮胁迫是否能改变固氮蓝藻的DNA甲基化修饰模式尚不清楚。全基因组重亚硫酸盐测序可以在单碱基水平分析基因组范围内所有胞嘧啶的甲基化修饰模式。利用全基因组重亚硫酸盐测序对正常培养的藻丝、缺氮72h的藻丝和异形胞的胞嘧啶甲基化进行了测序,分别获得6.25,8.38,7.11Gb的干净数据。在正常培养的藻丝、缺氮72h的藻丝和异形胞中,甲基化胞嘧啶位点占所有胞嘧啶位点的比例分别为1.06%,1.05%和1.05%,甲基化胞嘧啶位点的平均甲基化水平分别为0.61%, 0.54%和0.54%。基于胞嘧啶甲基化修饰模式对这3个样品进行Pearson相关性分析,发现样品间的相关系数在0.976～0.983之间。这些结果说明正常培养的藻丝、缺氮72h的藻丝和异形胞的DNA甲基化修饰模式相似,缺氮胁迫不能引起固氮蓝藻DNA甲基化模式的改变。本结果为固氮蓝藻和非固氮蓝藻采用不同的表观修饰来应对缺氮胁迫提供了证据。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
陈因 方大惟
外源脯氨酸可在一定程度上削弱高温对蓝藻(Anabaena7120)固氮活性的抑制。弱光或加光合抑制剂时,脯氨酸的有益作用变小。供给蔗糖或在空气氧下则有某种程度的增大,氧下效用消失。氢和氧加合下有益作用不明显,CO_2,N_2或 CO_2与 N_2加合时,脯氨酸非但不促进,且加剧高温对固氮活性的抑制。
[期刊] 中国水产科学
[作者]
张鑫 李琪 于红 孔令锋
为探讨干露胁迫对海产贝类基因组DNA甲基化的影响,应用荧光标记甲基化敏感扩增多态性(fluorescencelabeled methylation sensitive amplified polymorphism,F-MSAP)技术,比较了不同干露条件下(0 d、0.5 d、1 d、3 d、5 d、7 d、9 d和11 d)长牡蛎(Crassostrea gigas)基因组DNA甲基化的变化。结果表明,对照组(干露处理0 d)闭壳肌与鳃组织的总体甲基化水平分别为29.76%和29.82%;干露处理0.5
[期刊] 中国农业科学
[作者]
黄韫宇 张海军 邢燕霞 齐艳 孙倩倩 周春蕾 赵冰 郭仰东
【目的】研究黄瓜种子萌发过程中DNA甲基化动态变化情况以及外源施加NaCl对种子萌发及种子DNA甲基化水平的影响,探索DNA甲基化在黄瓜种子萌发过程及NaCl胁迫反应中的作用。【方法】运用甲基化敏感扩增多态性(methylation se nsitive amplified polymorphism,MSAP)技术,分析0、150、200 mmol.L-1 NaCl处理下,黄瓜种子萌发过程(0、1、2、4、6、8 d)的DNA甲基化水平及动态变化情况。【结果】MSAP结果显示,黄瓜种子CCGG位点的甲基化水平约15.25%,以双链甲基化方式为主。种子中DNA甲基化水平在萌发1—2 d略有升高,...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
黄钰铃 陈明曦 刘德富 李靖
【目的】蓝藻水华暴发后消耗大量溶解氧,使水体透明度降低,某些藻类甚至产生有毒有害物质,影响其他水生生物的生长和繁殖,破坏水域生态系统的动态平衡,是水环境恶化的表征之一。探讨氮磷营养、水温和光照等环境条件对蓝藻水华生消的综合影响,可以为河湖蓝藻水华防治提供参考。【方法】构建物理模型,采用L9(34)正交试验,模拟研究氮磷营养、水温和光照等因素复合作用下,单一铜绿微囊藻水华生消的过程。【结果】在正交试验中,当磷营养为0.8 mg/L、氮营养为3.6 mg/L、水温为29~30℃、光照强度为3300~3400 lx时,水华暴发强烈,此时藻类比增长率为1.129;营养盐含量随藻类生长和水华暴发逐渐降低...
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
刘莲 周小玉 赵良杰 刘其根
基于千岛湖2009-2010年春夏硅藻不占优势,蓝藻和绿藻发生相互演替的现象,选取千岛湖两种优势蓝藻和两种优势绿藻进行室内生态实验来比较氮磷比对于蓝藻和绿藻生长的影响,得到的主要结果如下:室内条件下,以BG-11培养基为基础设置了5组氮磷比(原子比:N/P=76.77、N/P=307.06、N/P=153.53、N/P=15.35、N/P=3.84)的培养液,研究氮磷比变化对两种蓝藻(水华微囊藻Microcystis flos-aquae和蓝纤维藻Dactylococcopsis sp.)和两种绿藻(小球藻Chlorella sp.和四尾栅藻Scenedesmus quadricauda)的影...
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
吴彪 杨爱国 孙秀俊 刘志鸿 周丽青 宫一震
为探讨急性温度胁迫对虾夷扇贝（ＰａｔｉｎｏＰｅｃｔｅｎ ｙｅｓｓｏｅｎｓｉｓ）基因组Ｄｎａ甲基化水平的影响，本研究从表观遗传学角度，运用甲基化敏感扩增多态性（Ｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎ－ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ ａＭＰｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ ＰｏｌｙＭｏｒＰｈｉｓＭ，ＭｓａＰ）技术比较分析了升温海水（１７℃和２４℃）急性胁迫虾夷扇贝（原暂养于９℃的海水中）９ ｈ和２４ ｈ后基因组Ｄｎａ甲基化的变化情况。结果显示，９对引物在各组的总扩增位点数为３１４–３３７，总甲基化位点为７９–９４，所占比例为２３．４５％–２８．５１％；所有处理组基因组Ｄｎａ总甲基化率低于对照组，急性升温胁迫使虾夷扇贝基因组Ｄｎａ发生去甲．．．
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
何丽烂 区炳庆 温海祥 陈惠娟 喻敏
用耐氨固氮菌浸种处理黄瓜种子,研究了低温胁迫下黄瓜幼苗保护酶活性的变化。结果表明:5℃低温胁迫2 d,清水组黄瓜幼苗叶片相对电导度、MDA含量及CAT活性显著升高,SOD及POD活性、叶绿素含量显著降低,恢复1 d,这种差异更显著,活性变化不明显;经耐氨固氮菌浸种处理后,菌液组黄瓜叶片叶绿素含量及保护酶活性显著增强,5℃低温胁迫2 d,也表现出清水组的变化规律,但CAT活性显著降低,恢复1 d,菌液组黄瓜叶片相对电导度、MDA含量则显著低于清水组(P<0.05),叶绿素含量则显著高于清水组(P<0.05),POD和AsA-POD活性则降低。结果显示...
关键词：
耐氨固氮菌 黄瓜 低温胁迫 保护酶
[期刊] 中国农业科学
[作者]
彭海 席婷 张静 吴先军
DNA甲基化是植物逆境响应的重要机制,调控了开花、产量、抗性等与物种稳定性或品种一致性密切相关的性状。这些性状相关位点的甲基化变异在群体内基本稳定一致、在世代间也具有一定的可遗传性,随机变异较少。病原菌胁迫下,抗性相关位点多出现低甲基化、全基因组多为高甲基化,这符合生物遗传与进化机制,规律性强,随机性小。这一现象在烟草、拟南芥等多种生物胁迫,以及冷、盐、重金属和多倍体等非生物胁迫研究中得到了直接或间接证据的支持。本文讨论了甲基化分析中误差的可能来源并提出了控制措施。
关键词：
植物 胁迫 MSAP 甲基化变异 随机性
[期刊] 华北农学报
[作者]
张旸 胡中影 李娜 丁兵 王江 解莉楠
ＤＮＡ甲基化在植物的生长发育中具有重要的调控作用，它是植物正常生长发育所必需的。采用甲基化敏感扩增多态性（ＭｅｔｈｙｌＡｔｉｏＮ ｓｅＮｓｉｔｉｖｅ ＡＭｐｌｉｆｉｃＡｔｉｏＮ ｐｏｌｙＭｏｒｐｈｉｓＭ，ＭｓＡｐ）技术，以羽衣甘蓝自交不亲和系９＃种子为研究对象，从表观遗传学的角度，对其生长发育过程以及高压静电场处理条件下基因组ＤＮＡ甲基化水平及模式变化情况进行研究，探讨自交不亲和系种子退化现象与表观遗传规律的相关性。结果表明，自交不亲和系９＃种子经高压静电场处理后，同时发生甲基化与去甲基化事件，以去甲基化为主。其中全甲基化水平略有升高，半甲基化水平下降明显，总甲基化水平下降；通过记录和计算种子．．．
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
鲁一薇 崔纪菡 郭帅 李顺国 校诺娅 刘寒双 刘猛 夏雪岩
为明确缺氮胁迫对谷子幼苗生长发育的影响,以‘冀谷45’为试验材料,采用苗期水培法,以全氮营养液培养(15mol/L N)为对照(CK),测定缺氮(0mol/L N,N_0)胁迫下幼苗生物量、根系性状、叶片光合色素含量等生理指标,并进行Pearson相关性分析。结果表明:1)缺氮胁迫下,幼苗已展开的真叶出现叶尖干枯症状;与CK相比,缺氮胁迫谷子幼苗的地上部鲜、干重和苗高均显著下降;但幼苗地下部鲜重、地下部干重、根冠比、总根长、根投影面积、根表面积和平均直径等根系性状指数均显著提高;缺氮胁迫下,谷子幼苗叶片的叶绿素a和b含量分别比CK减少32.3%和34.5%,说明缺氮显著抑制幼苗叶片叶绿素的合成。2)缺氮胁迫幼苗叶片的SOD、POD、CAT酶活性和可溶性蛋白质含量分别比CK降低24.9%、43.1%、33.9%和7.0%;MDA和可溶性总糖含量分别比CK提高46.2%和92.5%。3)相关性分析表明,缺氮胁迫下,可溶性总糖含量与幼苗地下部干、鲜重均呈正相关,POD活性与SOD活性呈极显著正相关(R~2=0.969),POD与CAT活性呈正相关(R~2=0.020),CAT与SOD活性呈正相关(R~2=0.425)。一方面,谷子幼苗在缺氮胁迫下地上部鲜重和干重分别比CK减少73.6%和34.6%,显著抑制幼苗叶片的生物量积累;幼苗叶片的叶绿素a、b含量和叶绿素总含量均显著下降,抑制叶片叶绿素的合成;谷子幼苗根系的总根长、根总投影面积、根表面积和根平均直径比CK均显著增加,缺氮胁迫促进了幼苗根系的伸长生长。另一方面,缺氮胁迫下谷子幼苗叶片MDA含量显著增加,活性氧累积,3种抗氧化酶活性均显著降低,膜脂过氧化,谷子幼苗生长受到显著抑制。
[期刊] 中国农业科学
[作者]
潘雅姣 傅彬英 王迪 朱苓华 黎志康
【目的】研究水稻抗旱导入系DK106和旱敏感轮回亲本IR64苗期和分蘖期干旱胁迫前后DNA甲基化的变化情况,并比较分析叶片和根部DNA甲基化变化特征,探讨DNA甲基化在水稻干旱胁迫反应中的作用。【方法】用甲基化敏感扩增多态性技术(methylation sensitive amplified polymorphism,MSAP)和高效液相层析(high performance liquid chromatography,HPLC)方法分析DNA甲基化变化情况;从聚丙烯酰胺凝胶回收甲基化多态性片段并克隆测序及序列比对。【结果】MSAP分析结果显示,水稻基因组中约有20%的CCGG位点发生了胞嘧啶...
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
朱嘉诚 贺婵娟 贾晓会 顾娟 施定基 庄旻敏 冯思豫 贾睿 栾必荣 何培民
转基因蓝藻纯化是研究其生理、生化、分子生物学、营养学、药理学、毒理学等必不可少的环节,更是其作为生产原料的基础。传统纯化方法仅对不同物种间的分离进行了讨论,尚未涉及野生藻种和转基因突变株在实验和生产中相互污染情况下的鉴别和分离。本文的转基因藻纯化方法先后从种群、细胞、分子3个层面纯化分离了藻种。该方法使用平板划线的方法将杂藻杂菌与鱼腥藻分离,再使用核酸电泳、RT-qPCR、Western Blot将鱼腥藻野生种、转空载体突变株以及转目的基因突变株3个亚品系逐步分离。纯化分离后的藻株生长速率得到了提高,目的基因的表达效率增长,生产目的蛋白的产率自然增长。本研究对转基因藻在实验和生产中出现的一些问题提出了相应的解决方案,对转基因微藻的应用具有积极的作用。
[期刊] 华北农学报
[作者]
吴静 李春俭 江荣风 张福锁
以普通结瘤大豆Ｂｒａｇｇｃｖ．［Ｇｌｙｃｉｎｅｍａｘ（Ｌ．）Ｍｅｒｒ．］及其超结瘤突变体ｎｔｓ３８２为试验材料，用营养液培养方法研究了缺硼对大豆植株生长和根瘤固氮作用的影响。结果表明，在缺硼条件下，植株根系生长受到抑制，变粗变短，颜色加深；地上部生长点坏死，使植株长得矮小，干重降低；根系结瘤能力和根瘤固氮活性明显下降，说明硼不仅对维持植株的正常生长，同时对根瘤的形成及其固氮活性都起着重要作用。
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
袁艳敏 刘福利 梁洲瑞 汪文俊 孙修涛
利用鼠尾藻(Sargassun thumbergii)、菱形藻(Nitzschia)、石莼(Ulue pertusa)和绢丝藻(Callithamnion corymbosum)作为研究对象,通过白光、蓝光、红光照射,1%硝酸铵、1%柠檬酸、3%硫酸铵处理不同时间,淡水浸泡不同时间3种杂藻清除方法,系统研究光质、药物和淡水处理对鼠尾藻及杂藻光合生理的影响。结果显示,对于相对生长速率(RGR)、表观光合速率及表观光合速率与呼吸耗氧速率(R)的比,鼠尾藻幼孢子体在蓝光下均明显大于在白光和红光下,而菱形藻则在红光下较大,且鼠尾藻幼孢子体与菱形藻在蓝光下的P_n比明显大于其在白光和红光下的P_n比。结果显示,鼠尾藻幼孢子体若与菱形藻进行竞争,在蓝光下相对于在白光和红光下更有优势。硝酸铵、硫酸铵、柠檬酸药物处理对鼠尾藻幼孢子体的生理状态有一定的影响,且这种伤害具有不可逆性;对鼠尾藻嫩芽的伤害较小,且可恢复正常;对石莼的清除效果不明显,对绢丝藻有伤害。淡水处理对鼠尾藻幼孢子体有伤害,对鼠尾藻嫩芽伤害较小,对石莼影响不大,对绢丝藻有伤害。研究表明,在鼠尾藻幼苗早期培育过程中,可增大蓝光的照射或减少红光的照射,在一定程度上能促进鼠尾藻的生长且抑制菱形藻的生长;在鼠尾藻早期幼苗的杂藻清除中,应避免使用1%硝酸铵、1%柠檬酸和3%硫酸铵处理,会对鼠尾藻幼孢子体产生伤害;鼠尾藻育苗早期不宜使用淡水浸泡除去杂藻,鼠尾藻嫩芽每次淡水浸泡30 min,可清除杂藻,且对藻体无伤害。
关键词：
鼠尾藻 杂藻 光质 药物处理 淡水处理
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