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[期刊] 华北农学报  [作者] 王元红  白彩霞  杨侃侃  张雨晨  俞赵荣  王勇  蔡海莹  
为探究绿茶粉改善免疫应激小鼠肠道屏障功能的作用机制。选取72只三周龄SPF级C57BL/6雄鼠,对其适应性喂养3 d后随机分成Ⅰ组(阴性对照)、Ⅱ组(阳性对照)、Ⅲ组(添加抗生素)、Ⅳ组(添加1%绿茶粉+茶多酚)、Ⅴ组(添加2%绿茶粉+茶多酚)和Ⅵ组(添加3%绿茶粉+茶多酚),每组3个重复,每个重复4只。在小鼠45 d时,Ⅰ组腹腔注射生理盐水,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ和Ⅵ组按10μL/g的剂量腹腔注射大肠杆菌脂多糖。注射5 h后采集血液及组织器官。采用RT-PCR测定肠上皮紧密连接蛋白ZO-1、Occludin和Claudin蛋白相对表达量; ELISA法测定血清中IgA、IgG、IgM、肠道sIgA和血浆内毒素含量。结果表明,与Ⅱ组相比,添加茶多酚的绿茶粉能显著降低小鼠血浆内毒素的含量,促进血清中IgA、IgG、IgM和肠道sIgA分泌,同时增加肠上皮紧密连接蛋白ZO-1、Occludin和Claudin蛋白相对表达量。本研究表明,绿茶粉可以通过促进肠上皮紧密连接蛋白ZO-1、Occludin和Claudin蛋白相对表达量,修复肠道屏障,增强免疫应激小鼠的体液免疫,从而减轻肠道炎症,达到保护肠道的作用。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 隋启慧   郭丽丽   汪鹏   邓先乐   陈跃平   温超   周岩民  
[目的]本试验旨在研究高温储存豆粕对肉鸡生长、免疫功能和肠道屏障的影响。[方法]将216只1日龄健康雄性爱拔益加(AA)肉仔鸡随机分成3组,每组6个重复,每重复12只鸡,分别饲喂由新鲜豆粕、高温储存14 d和28 d豆粕(储存温度:35 ℃±0.2 ℃)配制的日粮。试验期21 d。试验结束后,每重复选取1只接近平均体重的肉鸡屠宰采样。[结果]与对照组相比,高温储存显著增加豆粕蛋白质羰基含量(P<0.05),显著降低巯基含量(P<0.05);与高温储存14 d组相比,高温储存28 d组豆粕羰基含量显著增加(P<0.05),巯基含量显著降低(P<0.05)。与对照组相比,饲喂高温储存豆粕配制的日粮显著降低了肉鸡平均体重和平均日增重(P<0.05),提高了料重比(P<0.05),但对平均日采食量无显著影响;高温储存28 d豆粕组肉鸡法氏囊的器官指数显著降低(P<0.05);高温储存豆粕组胸腺皮质变薄,皮质与髓质交界模糊,胸腺小体体积增大,数量增多;肝脏炎性细胞浸润部位增多、面积增大。高温储存豆粕组肉鸡空肠黏膜中分泌型免疫球蛋白A(sIgA)和免疫球蛋白M(IgM)含量显著降低(P<0.05),高温储存28 d豆粕组空肠黏膜免疫球蛋白G(IgG)含量显著降低(P<0.05),回肠黏膜中sIgA、IgG和IgM含量显著降低(P<0.05);高温储存豆粕组空肠黏膜中髓过氧化物酶(MPO)活性显著降低(P<0.05),高温储存28 d豆粕组回肠黏膜MPO活性显著降低(P<0.05);高温储存28 d豆粕组空肠黏膜中白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、白介素-10(IL-10)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量显著下降(P<0.05);高温储存豆粕组肉鸡血清中二胺氧化酶(DAO)活性显著升高(P<0.05),但肠道屏障完整性相关基因表达量无显著变化。[结论]35 ℃高温储存使豆粕蛋白质发生氧化,降低了肉鸡前期生长性能,影响肉鸡的免疫机能和肠道屏障完整性,其影响程度随豆粕蛋白质氧化程度增高而线性增加。
[期刊] 中国农业科学  [作者] 李彦军  牛骁麟  张千  王国秀  李发弟  李飞  李冲  庞鑫  贾莉  樊海苗  
【背景】代乳粉的合理利用对于提高羔羊健康和成活率具有重要意义,但代乳粉饲喂水平对羔羊免疫功能和肠道屏障功能的影响仍不清楚,羔羊免疫功能发育和肠道健康发育所需的最佳代乳粉饲喂水平仍无定论。【目的】从羔羊血液学指标动态变化规律、回肠和结肠组织形态、抗氧化指标、免疫指标以及肠道屏障功能相关基因表达量的角度分析代乳粉饲喂水平对羔羊免疫功能和肠道屏障功能的影响。【方法】选用16只初生重接近的初生湖羊公羔,随机分成两组,分别为对照组(CON,代乳粉每日饲喂量为羔羊体重的2%)和高饲喂水平组(H,代乳粉每日饲喂量为羔羊体重的4%)。所有羔羊从7日龄开始断母乳饲喂代乳粉,49日龄时屠宰。【结果】代乳粉饲喂水平对羔羊白细胞数、淋巴细胞数、中性粒细胞数、红细胞数和血红蛋白浓度影响不显著(P>0.05)。21—49d羔羊淋巴细胞数、红细胞数、血红蛋白浓度随日龄逐渐增加,49日龄时显著较高(P<0.05),而中性粒细胞淋巴细胞比49日龄时显著较低(P<0.05)。H组羔羊回肠绒毛高度显著高于CON组(P<0.05),回肠和结肠隐窝深度显著低于CON组(P<0.05)。回肠和结肠丙二醛(MDA)含量和免疫球蛋白A(IgA)含量显著低于CON组(P<0.05)。结肠Claudin4表达量显著低于CON组(P<0.05),回肠和结肠肿瘤坏死因子(TNF-α)表达量均显著低于CON组(P<0.05)。【结论】高代乳粉饲喂水平可以降低肠道组织氧化损伤,促进肠绒毛发育,降低肠道物理屏障损伤进而减少肠道免疫反应。生产中可以通过提高早期羔羊代乳粉饲喂水平促进羔羊肠道健康发育。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 万有娣  万艳  陈雅飞  朱梦洁  雷治海  苏娟  
[目的]研究流感感染小鼠使用抗生素后肠道微生物、代谢物及肠道紧密连接蛋白的变化。[方法]30只雄性BALB/c小鼠随机分为3组:对照组、感染组和抗生素组。感染组和抗生素组同时感染流感病毒,抗生素组感染1 d后饮水中添加组合抗生素,3组小鼠感染9 d后取样。16S rRNA基因测序进行微生物组学分析;气相色谱-飞行时间质谱(GC-TOF/MS)进行代谢组学分析;免疫组化法和免疫印迹法进行结肠紧密连接蛋白的分析。[结果]感染组微生物多样性指数、细菌丰度和代谢物主成分分析(PCA)与对照组无显著差异。与感染组相比,抗生素组微生物多样性指数(Chao1,Shannon,Simpson)均显著下降(P<0.01)。拟杆菌门和变形菌门显著增加(P<0.01),厚壁菌门显著减少(P<0.001)。抗生素组与对照组在PCA中完全分离,有机酸代谢与筛选差异出的微生物具有较强相关性。感染组和抗生素组紧密连接蛋白(Claudin-1,Occludin)的表达均显著减少(P<0.01),抗生素组Claudin-1的表达与感染组相比显著减少(P<0.001)。[结论]抗生素降低肠道微生物的多样性,增加致病菌的侵入,减少有益菌的繁殖,加剧流感诱导的肠道菌群失调,减少有机酸的产生,导致更严重的肠道屏障功能损伤。
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 唐飞  艾于杰  张善明  曲凤凤  陈玉琼  倪德江  
以昆明小鼠为对象,研究不同剂量、不同年份湖北青砖茶对小鼠胃排空、小肠推动和肠道菌群作用。理化检测发现,2010年青砖茶氨基酸、茶黄素、茶红素、茶褐素、咖啡碱、有机酸含量显著高于2016年与2006年,儿茶素总量与可溶性糖含量显著低于2016年与2006年。连续给予小鼠青砖茶不同剂量提取物15d后,发现中剂量(1 667mg/kg)改善小鼠肠胃功能的效果最佳,为最有效剂量。高剂量(3 334 mg/kg)减缓胃排空,低剂量(834mg/kg)显著增加双歧杆菌数量,抑制肠球菌数量。另外,与正常组比较,3个年份
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)  [作者] 吕明其   陈颖清   吴晓晴   李健   廖吕燕   吴樟强   黄一帆   马玉芳  
【目的】旨在探究牛至香酚是否能有效改善脂多糖(LPS)免疫应激小鼠免疫功能的损伤。【方法】将80只小鼠随机分成空白对照组、模型组和牛至香酚低、中、高剂量组。牛至香酚低、中、高剂量组分别按25、50、100 mg·kg~(-1)的剂量灌胃牛至香酚,空白对照组和模型组按10 mL·kg~(-1)的剂量灌胃橄榄油,每日1次,连续14 d。第15天时,牛至香酚组和模型组小鼠腹腔注射8 mg·kg~(-1) LPS,空白对照组注射等量生理盐水,6 h后采集血液和肠道组织,检测小鼠血清细胞因子(IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-10)含量和肠道细胞因子(IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-10)、紧密连接蛋白(ZO-1、Occludin、Claudin-1)mRNA的表达水平。【结果】(1)与空白对照组相比,模型组小鼠血清TNF-α、IL-10、IL-1β含量上升(P>0.05),IL-6含量极显著上升(P<0.01);模型组回肠和结肠组织TNF-α、IL-6、IL-1βmRNA表达水平极显著上调(P<0.01),回肠和结肠组织ZO-1mRNA表达水平下调(P>0.05),结肠组织Occludin、Claudin-1mRNA表达水平极显著下调(P<0.01)。(2)与模型组相比,牛至香酚试验组小鼠血清IL-6含量极显著下降(P<0.01),IL-1β含量显著下降(P<0.05);牛至香酚高剂量组血清TNF-α含量极显著下降(P<0.01);牛至香酚中、高剂量组血清IL-10含量显著上升(P<0.05)。(3)同模型组相比,牛至香酚中、低剂量组回肠组织IL-1β、TNF-α、IL-6mRNA表达水平极显著下调(P<0.01);牛至香酚中、高剂量组回肠组织ZO-1、OccludinmRNA表达水平极显著上调(P<0.01);牛至香酚高剂量组结肠组织IL-10mRNA表达水平极显著上调(P<0.01),TNF-αmRNA表达水平极显著下调(P<0.01),Occludin、Claudin-1mRNA表达水平极显著上调(P<0.01)。【结论】牛至香酚通过改变小鼠血清细胞因子含量和肠道细胞因子、紧密连接蛋白mRNA的表达水平,调节LPS免疫应激小鼠的免疫功能。
[期刊] 水产学报  [作者] 刘欣平  董文静  黄汉  廖瑞生  陈拥军  谭北平  林仕梅  
为了评价淀粉结构对大口黑鲈肠道健康的影响,实验用10%的普通玉米淀粉(直/支链比例为3:7,CS)和高直链玉米淀粉(直/支链比例为7∶3,HACS)分别配制成CS和HACS两组等氮等脂的实验饲料,在室内循环系统中饲养初始体重为(8.53±0.06)g的大口黑鲈8周。结果显示,HACS组大口黑鲈特定生长率(SGR)和蛋白质效率(PER) 显著高于CS组。同CS组相比,HACS组肠道过氧化氢酶(CAT)和总超氧化物歧化酶(T-SOD)的活性显著升高,且抗氧化基因nrf2、cat的表达量显著上调。同时,HACS组促炎细胞因子(tnf-α、il-8)的相对表达量显著下调,而抗炎细胞因子(tgf-β)的相对表达量显著上调。此外,HACS组在门水平中显著提高放线菌门的丰度,在属水平中显著提高有益菌乳酸菌属的丰度,降低部分潜在有害菌(不动杆菌属、考克氏菌属)的丰度。进一步表型预测发现相较于普通玉米淀粉,饲喂高直链玉米淀粉能显著降低革兰氏阴性菌比例,增加革兰氏阳性菌比例,显著降低潜在致病菌丰度。研究表明,高直链淀粉能提高大口黑鲈抗氧化能力和免疫水平,改善肠道形态结构和肠道菌群。因此,高直链淀粉能改善大口黑鲈的肠道健康状况。
[期刊] 中国水产科学  [作者] 石勇  胡毅  刘艳莉  车常宝  钟蕾  
为探讨血根碱是否具有缓解黄鳝(Monopterus albus)由脂多糖(LPS)诱导后引起的免疫应激及炎症反应作用,本实验设置对照组(基础饲料)和实验组(基础饲料+750μg/kg血根碱),每组3个重复,养殖实验持续8周,结束后每个重复随机取30尾规格一致的黄鳝经腹腔注射大肠杆菌脂多糖(LPS),在注射前0 h和注射后3 h、6 h、12 h、24 h和48 h进行采样。结果显示,在0 h时,实验组肝脏中超氧化物歧化酶(SOD)活力显著高于对照组(P0.05);血清中葡萄糖(GLU)、皮质醇(COR)、IgM、C4、碱性磷酸酶(AKP)、谷草转氨酶(GOT)、谷丙转氨酶(GPT)和肝脏中SOD在腹腔注射LPS后均呈先上升后下降的趋势,并在3 h或6 h达到峰值,肝脏中丙二醛(MDA)的变化趋势与其相反;与对照组相比,实验组血清中AKP、IgM、C4的含量和肝脏中SOD活力在注射LPS后上升幅度更大,GLU和COR的含量上升幅度慢,并且GLU、COR、AKP、IgM、C4、GOT和GPT恢复至正常水平速度更快。肠道中炎症相关基因IL-1β、IL-10、IL-12β、IL-15、TGF-β1和TGF-β2表达量在腹腔注射LPS后呈先上升后下降的趋势,并在6 h或12 h达到峰值;与对照组相比,实验组下调了IL-1β和IL-12β基因表达量,上调了IL-10、IL-15、TGF-β1、TGF-β2和TGF-β3基因表达量。综上所述,在本研究条件下,腹腔注射LPS诱导黄鳝产生了免疫应激及炎症反应,在3~6 h时出现高峰,而饲料中添加750μg/kg血根碱能够有效改善黄鳝由LPS诱导产生的免疫应激及炎症反应。
[期刊] 水产学报  [作者] 吴佳瑄  廖瑞生  况文明  孙皓  陈拥军  谭北平  林仕梅  
为评价鸡肉粉替代鱼粉的可行性,用不同水平国产鸡肉粉等蛋白替代基础饲料中的鱼粉配制成5种等氮等脂的实验饲料(对照组、PBM 12.5、PBM 25、PBM 37.5及PBM 50),在室内循环系统饲喂初始体质量为(9.25± 0.13)g的大口黑鲈8周。结果显示,各处理组大口黑鲈的增重率(WGR)、特定生长率(SGR)和摄食率(FR)均无显著差异。同对照组相比,实验组肝脏超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性显著增加,而丙二醛(MDA)含量显著降低。随鸡肉粉替代水平的增加,肝脏抗炎细胞因子基因(IL-10、TGF-β)相对表达量显著上调,而促炎细胞因子基因(IL-8、TNF-α)相对表达量显著下调,但肝脏的组织结构无显著临床症状变化。此外,随替代水平的增加,肠道抗氧化基因(SOD、CAT)和肠道紧密连接蛋白基因(Occludin、ZO-1 和Claudin-1)相对表达量也显著上调,而血清D-乳酸(D-lac)和脂多糖(LPS)含量显著降低。研究表明,鸡肉粉替代基础饲料(40%鱼粉)50%的鱼粉不会抑制大口黑鲈的生长,同时还会增强鱼体的抗氧化能力和免疫力,进而改善大口黑鲈的肝脏和肠道健康。因此,鸡肉粉可作为大口黑鲈饲料的优质蛋白源。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 刘平  李宗军  许爱清  
以肠出血性大肠杆菌O157:H7感染的小鼠为模型,研究造模后按茯砖茶水提物剂量1、10、20 g/(kg.d)(分别记为低、中、高剂量茶汁组)连续灌胃10 d后模型小鼠免疫功能的变化。结果表明,模型组和对照组的吞噬系数、血清溶血素水平和肠道黏膜上CD4+T、CD8+T淋巴细胞数均有显著性差异;中剂量茶汁组小鼠胸腺指数和高剂量茶汁组小鼠血清溶血素水平均极显著高于模型组小鼠(P<0.01),中剂量茶汁组小鼠血清溶血素水平和高剂量茶汁组小鼠胸腺指数以及中、高剂量茶汁组小鼠肠道黏膜上CD4+T、CD8+T淋巴细胞数均显著高于模型组小鼠(P<0.05);中、高剂量茶汁组小鼠的吞噬系数极显著高于模型组小鼠...
[期刊] 草业科学  [作者] 解玉怀  王丽雪  杨维仁  张桂国  张崇玉  刘艳花  张济福  
肠道免疫系统由肠道特异性免疫与粘膜免疫屏障共同组成,在抵抗病原体入侵,调控肠道通透性,维护肠道与机体健康方面发挥着重要作用。本文系统地对畜禽肠道特异性免疫系统与粘膜屏障进行了阐述,详细总结了植物提取物对肠道免疫关键蛋白的调控机制,以及对其他主要免疫相关因子的影响,并为植物提取物在改善肠道健康,调控肠道免疫方面的理论研究与应用提供了参考。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 胡威  郑路程  易金鑫  郑文亚  徐梦婷  刘犇  
采用苏木精–伊红(HE)染色、醋酸铀–枸橼酸铅染色和免疫组织化学染色,对模拟运输应激小鼠免疫器官(胸腺、淋巴结和脾脏)的结构和3种热休克蛋白(HSP27、HSP70和HSP90)的表达情况进行分析。结果表明:试验组小鼠的胸腺、淋巴结和脾脏结构均受到不同程度的损伤,胸腺髓质增大,皮质中血管充血,淋巴小结缩小,脾小结增大,中央动脉被破坏,细胞发生凋亡等;淋巴细胞核核膜呈锯齿状甚至碎裂,嗜酸性粒细胞胞核溶解消失,浆细胞破坏更为严重,线粒体肿胀,嵴断裂或消失等;HSP27在淋巴小结中的表达逐渐降低,在淋巴结髓质和脾脏中的表达有所增加,HSP70在淋巴结髓质中的表达逐渐降低,在淋巴小结和脾脏红髓中的表达升高,HSP90仅在淋巴结中有明显表达。综上可知,运输所引起的应激反应会对小鼠免疫器官的结构造成严重损伤,应激相关热休克蛋白HSP27、HSP70和HSP90的表达情况也会发生一定的变化,提示热休克蛋白与运输应激之间可能存在着某些调控关系。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 胡威  郑路程  易金鑫  郑文亚  徐梦婷  刘犇  
采用苏木精–伊红(HE)染色、醋酸铀–枸橼酸铅染色和免疫组织化学染色,对模拟运输应激小鼠免疫器官(胸腺、淋巴结和脾脏)的结构和3种热休克蛋白(HSP27、HSP70和HSP90)的表达情况进行分析。结果表明:试验组小鼠的胸腺、淋巴结和脾脏结构均受到不同程度的损伤,胸腺髓质增大,皮质中血管充血,淋巴小结缩小,脾小结增大,中央动脉被破坏,细胞发生凋亡等;淋巴细胞核核膜呈锯齿状甚至碎裂,嗜酸性粒细胞胞核溶解消失,浆细胞破坏更为严重,线粒体肿胀,嵴断裂或消失等;HSP27在淋巴小结中的表达逐渐降低,在淋巴结髓质和脾脏中的表达有所增加,HSP70在淋巴结髓质中的表达逐渐降低,在淋巴小结和脾脏红髓中的表达升高,HSP90仅在淋巴结中有明显表达。综上可知,运输所引起的应激反应会对小鼠免疫器官的结构造成严重损伤,应激相关热休克蛋白HSP27、HSP70和HSP90的表达情况也会发生一定的变化,提示热休克蛋白与运输应激之间可能存在着某些调控关系。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 左伟勇  陈伟华  邹思湘  
90只清洁级昆明系小鼠,随机分为5组,预饲基础日粮一周后,各组分别灌胃:生理盐水(对照组,CK)、伴大豆球蛋白液(Ⅰ)、伴大豆球蛋白胃蛋白酶水解液(Ⅱ)、伴大豆球蛋白胃蛋白酶水解液提纯B组分(Ⅲ)、伴大豆球蛋白盐酸水解液(Ⅳ),除对照组外,各处理组灌胃液体总含氮量相等,实验期21d。结果显示:与对照组相比,第3周Ⅱ组和Ⅲ组每只小鼠日均采食量较对照组显著下降,分别降低8.75%(P<0.05)和9.28%(P<0.05);Ⅲ组小鼠胸腺相对质量极显著下降,降低了10.40%(P<0.01),肠黏膜sIgA水平提高45.49%(P<0.01),大肠食糜中6磷酸果糖酮糖酶(F6PPK)活性极显著提高(...
[期刊] 水产学报  [作者] 黄嘉   冉旭东   刘欣平   胡伟   唐仁军   郑娟   陈拥军   何远法   林仕梅  
为探明胆汁酸与牛磺酸在大口黑鲈饲料中的互作效应,在基础饲料中分别添加0.03%胆汁酸(BA)、0.5%牛磺酸(Tau)和0.03%胆汁酸+0.5%的牛磺酸(BA+Tau),配制成4种等氮(粗蛋白46%)等脂(粗脂肪10%)的实验饲料,在室内循环系统饲养大口黑鲈(15.33±0.23 g) 8周。结果显示,饲料中单独或联合添加胆汁酸、牛磺酸均显著改善大口黑鲈生长性能,降低血糖(GLU)、血清中甘油三酯(TG)和胆固醇(TC)含量及谷丙转氨酶(ALT)与谷草转氨酶(AST)活性。同对照组相比,实验组肝脏抗氧化酶(SOD、CAT、GSH-Px)活性显著增加,而丙二醛(MDA)含量显著降低。同时调节肝脏糖代谢基因(gck、pklr、pygl、pck1)以及脂代谢基因(cpt1、 acaca)的mRNA表达水平,降低肝脂和肝糖原含量,明显改善肝脏的组织形态结构。此外,饲料中单独或组合添加胆汁酸、牛磺酸均显著提高肠道抗氧化酶(SOD、CAT、GSH-Px)活性;下调肠道促炎细胞因子(il-1β、il-8和tnf-α)的相对表达水平,而二者组合还上调抗炎细胞因子(il-10、tgf-β)的相对表达水平。同时提高肠道紧密连接蛋白基因zo-1的相对表达水平,二者配伍还显著提高基因claudin-1、occludin-1的相对表达水平。而胆汁酸组血清D-乳酸(D-lac)含量和二胺氧化酶(DAO)活性显著低于对照组。研究表明,饲料中胆汁酸、牛磺酸单独或组合添加均能提高肝肠抗氧化能力、调节糖脂代谢和增强免疫功能,改善肝脏和肠道健康,进而促进大口黑鲈生长,且二者还表现出协同效应。
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