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[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
栾兆进 赵勇超 宋慧子 张家新
[目的]利用体外培养的绵羊附睾上皮细胞(EECs)探究谷胱甘肽过氧化物酶5(GPX5)的抗氧化功能。[方法]体外分离培养并鉴定绵羊EECs后备用。筛选合成3条GPX5的siRNA序列(siRNA-N.1、siRNA-N.2、siRNA-N.3),同时随机设计一段不与GPX5重合的扰码(scramble)序列(siRNA-NC),采用瞬时转染法转染EECs,以正常的EECs为对照(CK),于转染34 h后取样,从mRNA和蛋白水平检测GPX5的干扰效果。采用CCK-8法检测GPX5干扰组、siRNA-NC组和CK组EECs的增殖能力,采用DCFH-DA探针法检测其活性氧(ROS)水平,采用TBA法检测其丙二醛(MDA)水平,采用免疫荧光法检测其8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)水平。[结果]分离培养的细胞可与角蛋白18(CK18)特异性抗体反应,表明细胞为EECs,可用于后续试验。siRNA-N.3(即siRNA-GPX5)对EECs GPX5 mRNA和蛋白表达的干扰效果最优,可用于后续试验。随着过氧化氢(H_2O_2)处理浓度的增加,与CK组相比,siRNA-GPX5组EECs的增殖能力持续下降。与CK组相比,siRNA-GPX5组EECs中的ROS和MDA水平分别极显著(P<0.01)和显著(P<0.05)升高,8-OHdG水平明显上升。[结论]GPX5可以有效保护绵羊EECs,使其免受脂质过氧化损伤及DNA氧化损伤。
[期刊] 中国农业科学
[作者]
栗瑞兰 张通 范晓梅 欧阳效晴 张春强 曹俊伟 张家新
【目的】研究谷胱甘肽过氧化物酶－５（ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅ ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ ｔｙｐｅ－５，ｇｐｘ５）在成年绵羊附睾的表达特征以及ｇｐｘ５蛋白在附睾中的定位，为绵羊精子在附睾中抗氧化机制的研究提供理论依据。【方法】采取年龄相近的成年蒙古绵羊的附睾、睾丸和输精管。每一只公羊的附睾分别按照附睾头、附睾体和附睾尾进行分割。样品保存于－８０℃冰箱，采用实时荧光定量ｐＣｒ和Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔｔｉｎｇ的方法，对成年绵羊的附睾、睾丸和输精管的ｇｐｘ５表达量进行分析。将新鲜的组织样品各部分切取适合大小浸泡于４％多聚甲醛溶液中２４ｈ，按照石蜡切片的方法制作组织切片。用ｇｐｘ５特异性抗体孵育组织切片，利．．．
关键词：
绵羊 附睾 GPX5 基因表达 蛋白定位
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
乌亚罕 史振丹 乌丽雅苏 爱伦高娃 扎木嘎 乌云斯钦 恩和玛日特 哈斯高娃 娜仁花
【目的】研究谷胱甘肽过氧化酶5(GPx5)基因在绵羊附睾及附睾不同发育时期的表达特性。【方法】采用荧光定量PCR技术、免疫印迹技术及免疫荧光等方法,分别检测GPx5基因在绵羊附睾不同发育时期、不同部位上mRNA和蛋白的表达及分布情况。【结果】荧光定量PCR结果表明,青年羊附睾GPx5基因在头部的mRNA表达量显著高于体部和尾部(P<0.05);青年羊附睾头部GPx5基因mRNA表达量显著高于羔羊和老年羊附睾头部(P<0.05)。免疫印迹结果表明,羔羊附睾无GPx5蛋白表达;青年羊附睾各部位均有表达,而老年
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
乌亚罕 乌丽雅苏 史振丹 艾伦高娃 扎木嘎 乌云斯钦 哈斯高娃 恩和玛日特 娜仁花
为研究外源雄激素丙酸睾酮对绵羊附睾特异表达基因谷胱甘肽过氧化酶５（ＧＰｘ５）的影响，应用酶联免疫吸附（ＥＬＩＳＡ）法检测血清和附睾头部内睾酮（Ｔ）、二氢睾酮（ＤＨＴ）的含量，及附睾头部雄激素受体（ＡＲ）蛋白表达量；应用实时荧光定量ＰＣＲ（ＲＴ－ＰＣＲ）技术检测了附睾头部ＧＰｘ５－ｍＲＮＡ和ＡＲ－ｍＲＮＡ相对表达量；并结合免疫印迹（ＷＢ）法检测了附睾头部ＧＰｘ５蛋白相对表达量。结果表明：丙酸睾酮处理（ＴＰＴ）组与对照组相比绵羊血清ＤＨＴ含量，附睾头部Ｔ含量、ＤＨＴ含量均显著提高，分别是对照组的０．５、６．０、０．８倍；ＧＰｘ５－ｍＲＮＡ和ＡＲｍＲＮＡ相对表达量显著提高，分别是对照组的０．７５和０．．．
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
栾兆进 赵勇超 许娇霞 刘永斌 张家新
为探究雄激素受体(Androgen receptor, AR)及共调节因子对绵羊附睾上皮细胞(Epididymal epithelial cells, EECs)谷胱甘肽过氧化物酶5(Glutathione peroxidase 5,GPX5)的调节机制，本研究采用CCK-8检测睾酮对EECs增殖的影响；利用qRT-PCR、免疫荧光法和Western Blot法分别检测AR、GPX5、甾体激素受体共激活子1(Steroid receptor coactivator 1,SRC-1)、CREB结合蛋白(cAMP-response element-binding protein, CBP)、p300和核受体共抑制因子2(Nuclear receptor corepressor 2,NCOR2)的mRNA水平和蛋白表达情况，采用双荧光素酶报告基因测定干扰SRC-1或p300后EECs的荧光素酶活性。结果表明：1)与对照组相比，100 nmol/L睾酮组细胞中的GPX5 mRNA和蛋白表达量极显著升高(P0.05),但分别极显著(P<0.01)和显著(P<0.01)和显著(P0.05),而SRC-1和p300蛋白表达量极显著升高(P<0.01)和显著(P0.05),AR的转录活性显著降低(P
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
范晓梅 栗瑞兰 张通 边小娜 张家新
为研究GPx5在内蒙古绒山羊附睾中的表达模式,对初情期、体成熟期、老龄期3个生殖生理阶段绒山羊附睾及睾丸中的GPx5从mRNA和蛋白水平进行了检测。结果显示各生殖生理阶段绒山羊睾丸中均未见GPx5表达,附睾中均有GPx5表达。各生殖生理阶段附睾表达区域及表达量存在差异:初情期,GPx5 mRNA和蛋白主要表达于附睾头部;体成熟期,附睾各区域GPx5 mRNA和蛋白的表达量极显著高于其他阶段,附睾起始部和附睾头部为主要表达区;老龄期,GPx5 mRNA和蛋白主要表达于附睾头部,但较体成熟期明显减少。免疫组化
关键词：
绒山羊 附睾 精子 GPx5
[期刊] 中国农业科学
[作者]
张春香 秦小伟 郭丽娜 张国林 张建新 任有蛇
【目的】微量元素锌是动物正常繁殖所必需的元素,研究旨在了解日粮纳米锌对公羊精液品质、抗氧化酶和附睾Cu-Zn SOD蛋白表达的影响,分析公羊精液品质参数与精浆抗氧化酶活性的相关性。【方法】将16只9月龄健康状况良好体重相近的晋中绵羊公羊,随机分成4组,分别喂给基础日粮(对照组),基础日粮+50 mg·kg-1、100 mg·kg-1和150 mg·kg-1DM纳米锌。试验期90 d。在试验78 d和79 d连续两天采集精液,每次采集精液取出100μL评价精液品质参数,剩余精液离心分离精浆,测定精浆Cu-Zn SOD、GPxs活性及总抗氧化能力;试验结束时,用手术去势法采集附睾头、附睾体和附睾尾...
[期刊] 淡水渔业
[作者]
吴燕燕 李来好 刁石强 李刘冬 杨贤庆 陈培基
针对鱼油在常温放置时极易氧化的问题 ,本文以罗非鱼内脏油为研究对象 ,采用SCHAAL烘箱法研究不同抗氧化剂对罗非鱼油的抗氧化效果。结果表明 :不同抗氧化剂的抗氧化性能为迷迭香 >TBHQ >茶多酚>VE。添加了迷迭香、TBHQ和茶多酚后 ,可使罗非鱼油在 2 0℃时贮存 ,时间从 16天分别延长至 6 7 2天、6 5 6天、6 4天。
关键词：
罗非鱼油 抗氧化剂 抗氧化性能
[期刊] 草业科学
[作者]
郑晓凯 王义翔 李双明 孙颖超 侯国庆 姚琨 张凡凡
本研究旨在明确杂交构树青贮对阿勒泰羊生长性能、血液生理、血清生化、血清与肠道组织免疫功能与抗氧化功能的影响。选择5月龄、体重（30.12±1.14）kg的健康阿勒泰公羊40只，随机分组，每组20只。对照组饲喂基础饲粮，试验组使用20%的构树青贮替换相同营养物质饲粮。预试期10d，正式期60d，测定生长性能、血液生理变化、血清生化变化、血清与肠道组织抗氧化指标和免疫球蛋白含量及细胞因子。结果表明：（1）试验组与对照组各生长性能指标无显著差异。（2）试验组血液中性粒细胞数目、淋巴细胞数目、嗜酸性粒细胞数目含量显著低于对照组（P＜0.05）。（3）试验组血清中的肌酐含量显著低于对照组（P＜0.05）。（4）试验组血清与肠道组织总抗氧化能力、超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性均极显著高于对照组（P＜0.01），丙二醛含量极显著低于对照组（P＜0.01）。（5）试验组血清与肠道组织免疫球蛋白A、免疫球蛋白M、免疫球蛋白G含量均极显著高于对照组（P＜0.01）。（6）试验组的肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-2、白细胞介素-6、白细胞介素-8极显著高于对照组（P＜0.01），白细胞介素-4极显著低于对照组（P＜0.01）。综上，饲粮中添加20%杂交构树青贮对阿勒泰羊生长性能、血液参数无负面影响，但能够提高机体免疫能力和抗氧化能力。
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
郭文亮 郭燕菲 吴玮琪 郭世伟 石璐璐 金晓 史彬林
为探讨冬季两种不同舍饲方式对羔羊生长性能、血液热休克蛋白、免疫和抗氧化功能的影响,将30只2月龄、体重相近((16.42±2.52)kg)的杜泊×蒙古杂交母羔羊随机分为2个处理组:一组为封闭式舍饲组(CHG),另外一组为开放式舍饲组(OHG)。试验期28d,每天记录舍内外温度、湿度、风速、氨气及二氧化碳含量和两组试验羊的采食量,并于第1和28天称重,计算平均日增重、平均日采食量和料重比;于第7、14、21和28天进行颈静脉采血,分离血清并收集白细胞,测定热休克蛋白、免疫因子和抗氧化指标及其相关基因的表达量。结果表明:1)与CHG羔羊相比,OHG羔羊的平均日增重显著下降(P<0.05),料重比显著上升(P<0.05);2)与CHG羔羊相比,OHG羔羊的血清胰岛素含量显著下降(P<0.05),热休克蛋白90(HSP90)含量显著上升(P<0.05),血液白细胞中热休克转录因子1和HSP90mRNA表达量显著提高(P<0.05);3)与CHG羔羊相比,OHG羔羊的血清白介素4(IL-4)含量显著下降(P<0.05),白介素1(IL-1β)含量极显著下降(P<0.01),血液白细胞中受体相互作用蛋白2、核转录因子κB(NF-κBp50)、NF-κBp65、IL-1β、IL-4和肿瘤坏死因子-αmRNA表达量显著下降(P<0.05);4)与CHG羔羊相比,OHG羔羊的血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性显著降低(P<0.05),总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性极显著降低(P<0.01),丙二醛(MDA)含量极显著上升(P<0.01),血液白细胞中核转录因子2(Nrf2)、过氧化氢酶、GSH-Px、SOD1和SOD2mRNA表达量显著提高(P<0.05)。综上,在冬季,开放式舍饲方式会降低羔羊的日增重,增加料重比,引起羔羊免疫水平降低和氧化应激,其机体通过提高HSP和Nrf2基因的转录水平,降低NF-κB基因的转录水平来维持机体内环境稳态,而封闭式舍内温度相对较高且稳定,羔羊机体应激程度较小,有利于其健康与生长。因此,比起冬季为羔羊舍增设运动场,更需要做好羔羊舍的保暖工作。
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
路晨玥 林焱 苏松坤
采用3个指标SOD、MDA和ROS评估蜂王浆对冈田酸(okadaic acid, OA)诱导的阿尔兹海默症(Alzheimer′s disease, AD)人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞模型的抗氧化作用.用OA损伤SH-SY5Y细胞后加入不同含量的蜂王浆培养24、48、72 h,观察OA损伤前后的细胞形态变化,用CCK法检测细胞活度,并检测SOD、MDA和ROS的含量.结果表明,一定的OA剂量和处理时间会使细胞形态发生明显变化,细胞活度明显下降,对3个抗氧化指标的检测结果表明,蜂王浆能显著提高阿尔兹海默症SH-SY5Y细胞模型的抗氧化水平,推测其对受损神经细胞具有保护作用,并可能对AD有一定积极效果.
关键词：
蜂王浆 AD细胞模型 细胞活度 抗氧化
[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
邓心蕊 王振宇 刘冉 刘敬华 欧阳乐
用乙醇提取红皮云杉中的抗氧化物质,分离纯化,并对各组分进行体外抗氧化能力研究。首先用不同浓度的乙醇提取红皮云杉中的抗氧化物质,然后采用大孔树脂D101纯化。收集不同组分,并对干物质及多酚等物质含量较高部分做抗氧化能力的测定。通过对羟基自由基清除活性、DPPH自由基清除活性、总还原力和抗脂质过氧化能力的比较得出结论:PT40%-E的羟基自由基清除活性最好,清除率可达97.998%,IC50值为119.101μgmL;PT20%-D对DPPH·的清除活性最好,清除率及IC50分别为99.617%和9.009μgmL;PT80%-D总还原力最好,当质量浓度为300μgmL时吸光度值达2.209...
关键词：
红皮云杉 抗氧化物质 体外抗氧化
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
任大明 杜志强 李秀娜 程宇 石莉娜 王莹
应用保健功能的评价方法,通过对血清溶菌酶含量、胸腺指数与脾指数、腹腔巨嗜细胞吞噬功能的测定以及迟发型超敏反应,来定性分析猴头菌丝多糖的免疫调节作用;通过对血清SOD、CAT、MDA含量的测定,来分析猴头菌丝多糖的抗氧化功能。试验结果表明,猴头菌丝多糖能够明显提高小鼠腹腔巨嗜细胞的吞噬功能,高剂量多糖的吞噬率达到(70.4±1.3)%,与对照组相比,差异极显著;中剂量多糖的吞噬率达到(58.4±0.9)%,与对照组相比,差异显著。同时猴头菌丝多糖能够在一定程度上提高小鼠血清溶菌酶含量;能够明显促进迟发型超敏反应的发生,高剂量多糖引起的肿胀度达到(29.5±0.6)mg,与对照组相比,差异极显著;...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
于玲玲 朱晓萍 岳春旺 刘海英 贾志海
【目的】研究日粮中不同硒(Se)水平和不同来源多不饱和脂肪酸(PUFA)对绵羊血浆和红细胞膜脂肪酸组成及抗氧化的影响。【方法】选用3月龄三元杂交肉用羯羊(无角陶赛特×小尾寒羊×夏洛莱,平均体重为26.3±1.2kg)32只作为试验羊,采用2×2因子(两个Se水平和两个PUFA来源)设计,随机分为4组,分别饲喂基础日粮+5%亚麻油(LO)、LO+2mg·kg-1硒(LOSe)、基础日粮+5%葵花油(SO)和SO+2mg·kg-1硒(SOSe)。硒以亚硒酸钠的形式添加。试验结束后颈静脉采血,分离血浆及红细胞膜,测定脂肪酸组成及抗氧化特征。【结果】日粮加硒提高了绵羊血浆和红细胞膜的抗氧化能力、血浆t...
关键词：
绵羊 硒 多不饱和脂肪酸 抗氧化
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
德力格尔桑 韩杰 玛丽娜 乌兰塔娜
探索蒙古绵羊脾蛋白的最佳酶解条件,确定最具抗氧化活性的脾肽及其分子质量。将不同饱和度硫酸铵沉淀制得的脾蛋白分别经胰蛋白酶、木瓜蛋白酶及二者混合物(质量比1∶1,下称酶混合物)水解制得脾肽,经G-25柱层析分离后,电泳确定脾肽分子质量。分别在非脂质的DPPH.和.OH体系,及脂质的卵磷脂和猪油体系中对制得的脾肽进行体外抗氧化活性试验,结果表明:60℃,pH7.0,酶混合物添加量5.0%(质量分数),5.5 h为最佳酶解条件。饱和度为60%的硫酸铵沉淀制得的脾蛋白电泳条带最多,此脾蛋白经酶混合物水解后,柱层析分离得到F1、F2、F3、F44个峰区,其中F3(分子质量6 ku)的脾肽在非脂质体系中清...
关键词：
脾脏蛋白 酶水解 脾脏多肽 体外抗氧化
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