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[期刊] 中国农业科学
[作者]
张宗源 蒋咏梅 章文贤
【目的】组蛋白乙酰化修饰对真菌生长发育和次级代谢合成具有重要的调控作用。研究组蛋白乙酰化对静置培养的灵芝生长发育和主要代谢物合成的影响,为表观遗传手段提高灵芝多糖和灵芝酸生物合成提供理论依据。【方法】采用液体振荡-静置两阶段法培养灵芝。在静置培养阶段添加不同浓度(0、0.6、60、120和180μmol·L~(-1))辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA),采用常规方法测定或观察灵芝生物量、糖消耗、上层菌丝膜形成、菌丝体形态、灵芝孢子生成以及灵芝酸和灵芝多糖生物合成,利用蛋白免疫印迹技术测定灵芝组蛋白乙酰化水平;利用qRT-PCR技术对灵芝多糖(ugp、gls和pgm)、灵芝酸(hmgr、sqs、se和ls)生物合成关键基因以及灵芝全局调控因子相关基因(vet和LaeA)进行表达分析。【结果】SAHA处理使灵芝组蛋白H_4乙酰化水平提高,最高为对照组的1.6倍;抑制了灵芝菌丝体生长和色素产生,改变了菌丝体的形态。灵芝孢子的形成也受到抑制,且SAHA浓度越大,抑制程度越明显。SAHA处理显著增加了灵芝多糖的产量,最高增加50%;灵芝酸生物合成受到抑制,与对照相比降低13%—27%;qRT-PCR分析结果表明SAHA处理下灵芝多糖与灵芝酸合成关键酶基因表达均有不同程度上调,其中灵芝多糖合成关键酶基因提升1.5—3.5倍,灵芝酸合成关键酶基因提升1.8—12.1倍;灵芝全局性调控因子vet和LaeA的表达被抑制,仅为对照组的11.30%—62.4%。【结论】组蛋白乙酰化可通过灵芝全局调控因子调控灵芝生长发育进而影响灵芝酸生物合成,同时组蛋白乙酰化对灵芝多糖生物合也有影响。
[期刊] 华北农学报
[作者]
白丹 常迺滔 李大海 刘继霞 尤雪颜
通过热水提取法提取灵芝多糖,得到灵芝粗多糖,并以3种植物病原菌(胡萝卜欧氏菌、指状青霉、灰葡萄孢)和5种食品有害菌(蜡状芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、黑曲霉和黑根霉)为供试菌,采用纸片琼脂法来测定灵芝粗多糖对供试菌的抑菌强度。结果表明,灵芝粗多糖对植物病原菌中的胡萝卜欧氏菌有较强的抑制作用;对指状青霉菌有一定的抑制作用,但抑制作用较弱;对灰葡萄孢几乎没有抑制作用;对食品有害菌中的枯草芽孢杆和蜡状芽孢杆菌有很强的抑制作用;对大肠杆菌和黑曲霉抑制作用相对较弱;对黑根霉几乎没有抑制作用。总体来看,灵芝多糖对细菌的抑菌活性强于真菌。
关键词：
灵芝多糖 抑菌活性 抑制作用
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
朱静 师亮 任昂 刘锐 赵明文
灵芝是具有广泛应用价值的食药用真菌，灵芝三萜是灵芝的主要药用成分之一，也是衡量其经济价值的重要指标。虽然灵芝三萜的主要合成途径已清晰，但是其分子调控机制并不清晰。基于近年来基因组学、蛋白质组学等的发展和遗传研究手段的进步，本文综述了灵芝三萜合成途径中的功能基因、信号分子(如活性氧、一氧化氮、钙离子等)和环境因子(如高温、营养、化学物质等)对灵芝三萜生物合成的重要作用，表明灵芝三萜的生物合成是由多种因素共同调控的，为高品质灵芝栽培提供技术创新的理论依据和技术指导，对提高我国食药真菌产品在国际市场的竞争力具有重要意义。
关键词：
灵芝 灵芝三萜 信号分子 基因 环境因子
[期刊] 华北农学报
[作者]
吴旋 白东清 杨广 宁博 张雪涛 孙立卓
选取540尾黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco),连续投喂含不同水平灵芝多糖(300,600,900,1 200,1 500mg/kg)的配合饲料8周。而后采用Percoll密度梯度离心等技术,对黄颡鱼头肾巨噬细胞与外周血白细胞进行分离纯化,使用NBT还原法、Griesse试剂显色法与MTT法测定头肾巨噬细胞呼吸爆发活性与外周血白细胞的增殖能力,探讨灵芝多糖对黄颡鱼免疫细胞活性的影响。结果表明,灵芝多糖各水平组均能显著提高黄颡鱼头肾巨噬细胞的氧呼吸爆发活性和外周血白细胞的增殖能力(P
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
吉清妹 潘孝忠 符传良 谢良商
为研究灵芝富硒栽培中不同浓度亚硒酸钠（０，０．１，０．４，０．８，１．２ｇ·ｋｇ～（－１））对赤芝、紫芝、无柄紫芝、热带灵芝生长情况及富硒效应的影响程度，本试验分别采用平板培养基和木屑培养基对所选育的灵芝菌株进行培养试验，以菌丝体生长速度、子实体的生物量及子实体硒含量等为指标，研究不同浓度的亚硒酸钠对灵芝生长速度、子实体的生物量、子实体硒富集量的影响。结果表明：浓度为０．１～０．８ｇ·ｋｇ～（－１）亚硒酸钠对４种灵芝的生长速度、子实体的生物量有抑制作用，且随着浓度的增大而有所加强，在相同情况下，平板培养基上菌丝体的生长受到的抑制作用较在木屑培养基上强；木屑培养基中灵芝子实体生物量随着亚硒酸钠浓．．．
关键词：
灵芝 硒含量 富硒灵芝 生长速度
[期刊] 西南农业学报
[作者]
王赛贞 林占熺 林冬梅 林树钱 林志彬 李晶
灵芝是我国传统大型药用真菌之一,属无隔担子菌亚纲,无褶菌目,灵芝科,灵芝属,常见的有赤芝[Ganoderma lucidum(Curtis:Fr.)P.karst]、紫芝[Ganoderma sinense(Zhao,Xu et Zhang)][1]。从赤芝[Ganoderma lucidum(Curtis:Fr.)P.karst]多糖肽中分离纯化具有活性成分GL-PPS,对其进行结构分析。经分离纯化得GL-PPS,通过高效液相凝胶渗透色谱法(high-performance gel-permeation chromatography,HPGPC)、气相色谱、甲基化分析和Smith降解等方法研...
关键词：
赤芝 GL-PPS 结构
[期刊] 中国农业科学
[作者]
宁玉波 王红艳 乔康 刘秀梅 王开运
【目的】诱导抗病剂可以诱导寄主植株产生系统抗病性，具有持效性和广谱性的特点。论文以番茄植株为模式植物，番茄灰霉菌（Ｂｏｔｒｙｔｉｓ ｃｉｎｅｒｅａ）为目标菌，进行温室盆栽试验，以期明确灵芝多糖诱导剂对番茄灰霉病的诱导抗性。【方法】用一定质量浓度的灵芝多糖溶液（５０、１００、２００和４００ ｍｇ·Ｌ～（－１））喷雾处理盆栽番茄植株第１、２片真叶（正反面），每２ ｄ喷施１次，共诱导３次，最后一次诱导２ ｄ后全株喷雾接种供试菌孢子悬浮液（（１—２）×１０～６个孢子／ｍ Ｌ），对照组施用等量清水代替灵芝多糖溶液，与各处理平行喷雾接种番茄灰霉菌孢子悬浮液。在接种孢子悬浮液之前用注射器将番茄苗茎基部刺伤，．．．
关键词：
灵芝多糖 番茄 灰霉病 诱导抗性 防御酶
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
张丽霞 张雅君 张丽萍
【目的】从灵芝孢子粉中提取纯化多糖,研究灵芝多糖对小鼠细胞免疫功能的影响,为灵芝开发利用提供试验依据。【方法】利用水煮醇沉法从灵芝孢子粉中提取粗多糖,经反复冻融、Sevag法脱蛋白和Sepharose CL-6B柱层析,纯化得灵芝多糖(GLP)。通过HPLC鉴定GLP的纯度,G.C.分析其单糖组成。采用MTT法、中性红试验、Griess法、比色法和ELISA法,分别检测GLP对小鼠脾淋巴细胞增殖、腹腔巨噬细胞吞噬功能、NO产量和iNOS活性以及TNF-α产量的影响。【结果】GLP为白色粉末,分子质量为51ku,HPLC分析GLP为单一狭窄对称峰,其单糖组成为葡萄糖(Glc)和半乳糖(Gal),...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
覃娟清 杜志坚 张富 秦莉雯 郭宇康 刘庆华
【目的】研究日粮中添加菌草灵芝多糖肽(JCGLPP)对闽西南黑兔生长性能、血液生化指标及免疫功能的影响,为JCGLPP在肉兔中的应用提供依据。【方法】选取(33±2) d、初始体质量(655.65±25.90)g、健康状况良好的断奶闽西南黑兔公兔100只,随机分为4组,对照组饲喂基础饲粮,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别饲喂在基础饲粮中添加50,100和150 mg/kg JCGLPP的日粮,56 d后统计腹泻率和死亡率,测算平均日采食量(ADFI)、平均日增重(ADG)以及料重比(F/G);屠宰后取背腰最长肌,测定pH值、滴水损失率和剪切力;采集血清,测定总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)质量浓度,尿素氮(UN)、丙二醛(MDA)浓度,超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性以及IgG、IgA、IgM和IL-6质量浓度;计算心脏、肝脏、肾脏、圆小囊、脾脏、胸腺和蚓突器官指数;测定十二指肠、空肠、回肠黏膜炎性因子IL-1α、IL-2和分泌型免疫球蛋白(sIgA)质量浓度及肠道淀粉酶、纤维素酶和胰蛋白酶活性。【结果】(1)各组间兔的终末体质量、平均日增重、平均采食量和料重比均无显著差异(P>0.05);对照组兔的腹泻率和死亡率最高,Ⅱ组兔的腹泻率显著低于对照(P<0.05)。(2)试验组兔肌肉的pH、滴水损失和剪切力均与对照无显著差异(P>0.05)。(3)Ⅱ组兔血液中的TP、ALB质量浓度及SOD、GSH-Px活性显著高于对照(P<0.05),而UN和MDA浓度显著低于对照(P<0.05)。(4)Ⅱ组兔血液中的IgG、IgA、IgM质量浓度均显著高于对照(P<0.05),而IL-6质量浓度各组差异不显著(P>0.05)。(5)各组兔免疫器官指数差异均不显著(P>0.05);试验组兔十二指肠、空肠、回肠IL-1α、IL-2和sIgA质量浓度大多显著高于对照(P<0.05),肠道淀粉酶活性均显著低于对照(P<0.05),Ⅰ组兔的肠道纤维素酶和胰蛋白酶活性、Ⅱ组兔的肠道胰蛋白酶活性显著高于对照(P<0.05)。【结论】JCGLPP对闽西南黑兔的促生长作用不明显,但能提高机体的抗氧化和免疫能力,降低腹泻率和死亡率,添加量以100 mg/kg为宜。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
熊晓辉 沈昌 沈爱光
利用豆粕为主要原料，接种筛选所获灵芝菌株进行发酵，获得成熟发酵液，其湿菌体含量为３２％，蛋白含量为４．０％，脂肪含量０．４１％，灵芝多糖含量０．３８％。经调配试验表明，该发酵液具有良好的加工性，可调配成色泽宜人，口感良好，营养保健功能较高的蛋白饮品。
关键词：
灵芝 深层发酵 大豆蛋白
[期刊] 华北农学报
[作者]
章文贤 蒋咏梅 贺望兴 郭文燕 黄晓菊 郑素云
通过电子克隆技术,获得14-3-3基因的cDNA序列全长,并采用生物信息学方法,借助电子计算机和相关的生物信息学软件,对该基因编码蛋白从基本理化性质、疏水性/亲水性、亚细胞定位、跨膜区结构、信号肽、高级结构及系统发育树分析等进行了预测和分析。该cDNA编码蛋白由257个氨基酸组成,相对分子质量为29.014 5 kDa,亲水性和疏水性比较平衡,定位于细胞质,不存在信号肽,无跨膜螺旋区,且二级结构由6.23%无规则卷曲,66.54%α-螺旋和27.24%延伸链组成。同源比对分析显示,该酶基因编码的氨基酸序列与污叉丝孔菌、双孢菇和木耳等蘑菇类高等真菌中的14-3-3基因所编码的氨基酸序列高度同源。...
[期刊] 西南农业学报
[作者]
黄在兴 刘凌云 陈华 翁伯琦 林占熺 刘朋虎
【目的】研究菌草灵芝多糖肽(GL-PP)对肝癌细胞Huh7活性、迁移和细胞凋亡的影响,为GL-PP应用于肝癌治疗提供理论依据。【方法】用低(50μg/mL)、中(100μg/mL)、高(200μg/mL)3种不同浓度的GL-PP处理肝癌细胞Huh7,分别采用CCK8、Transwell方法、流式细胞仪分析不同浓度GL-PP对肝癌细胞Huh7活性、迁移和细胞凋亡的影响。【结果】培养基添加GL-PP后肝癌细胞Huh7活力降低,且GL-PP添加浓度越高活力降低越多,但是差异均不显著(P>0.05);GL-PP的浓度为100μg/mL时对肝癌细胞Huh7的迁移无明显影响,当浓度为200μg/mL时对肝癌细胞Huh7的迁移具有明显的抑制作用;低浓度(50μg/mL)和中浓度(100μg/mL)的GL-PP对肝癌细胞Huh7的凋亡无明显影响(P>0.05),高浓度(200μg/mL)的GL-PP能够明显(P<0.05)诱导肝癌细胞Huh7的凋亡。【结论】GL-PP对肝癌细胞Huh7细胞活性影响不显著,高浓度的GL-PP可抑制肝癌细胞Huh7的迁移,也可诱导其凋亡。
关键词：
灵芝 多糖肽 肝癌 细胞凋亡 Huh7
[期刊] 中国农业科学
[作者]
赵彦玲 任子利 宁淑芳 杨小淦 卢晟盛 卢克焕
【目的】探讨猪孤雌胚早期发育过程中组蛋白H4K5乙酰化水平与组蛋白去乙酰化酶(HDAC1)基因mRNA表达水平之间的关系。【方法】收集早期猪孤雌胚(2-细胞、4-细胞、桑椹胚和囊胚),运用细胞免疫组化和激光共聚焦显微镜,通过检测这些胚胎的相对荧光强度来评判其H4K5的乙酰化水平;运用实时定量PCR的方法检测猪早期孤雌胚发育过程中HDAC1基因mRNA表达的动态变化。【结果】从2-细胞到囊胚开始,其H4K5的乙酰化均在细胞核内表达,且各阶段表达量逐步提高,至囊胚期达最高(分别为1124.77±127.78、1305.81±184.23、1795.19±318.67及2149.63±529.47)...
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
谢晶 周童晖 孙连月 李晶 林占熺
使用CCK-8比色法研究菌草灵芝多糖肽(JCGLPP)对人结肠腺癌上皮细胞(Caco-2)存活率的影响；采用PCR检测JCGLPP作用不同时间后对Caco-2细胞中P-糖蛋白的编码基因MDR1和多药耐药相关蛋白-2的编码基因MRP2表达水平的影响.结果显示：0.1～500μg·mL~(-1) JCGLPP对Caco-2细胞无毒性；10μg·mL~(-1) JCGLPP作用1～48 h能抑制MDR1基因的表达，对MRP2基因的表达呈先抑后扬的趋势.表明JCGLPP可抑制MDR1基因的表达，对MRP2基因表达的影响与其作用时间有关.
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
林莹 韩玉辉 熊思嘉 李泽斌 张欣 顾婷婷
[目的]本研究对森林草莓中组蛋白去乙酰化酶基因(HDAC)进行鉴定和分析,并研究其在生长发育以及逆境胁迫响应过程中的表达变化,为深入研究森林草莓组蛋白去乙酰化调控机制奠定基础。[方法]运用生物信息学方法,对森林草莓中HDAC基因进行鉴定,并进行蛋白结构域、染色体定位、基因复制类型和其他进化分析。利用转录组数据分析森林草莓中HDAC基因在不同组织和发育阶段中的表达变化。运用实时荧光定量PCR对森林草莓中HDAC基因在低温、高温胁迫下的表达变化进行分析。[结果]森林草莓中包含12个HDAC基因,其中RPD3/
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