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[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 陈勇  夏国良  王海滨  苏友强  傅国栋  
本实验应用组织切片法探讨了体内正常生理条件下昆明白小鼠卵巢内卵丘扩展与卵母细胞成熟的关系。初情期前小鼠注射孕马血清促性腺激素 (PMSG) ,4 8h后注射人绒毛膜促性腺激素 (HCG) ,于注射HCG后不同时间取出卵巢进行组织切片。注射 HCG后 1h,卵丘细胞开始扩展 ,此时卵母细胞核膜完整 ,即未发生生发泡破裂 (GVBD) ;注射 HCG后 3h,大部分 (>70 % )大有腔卵泡中卵母细胞发生 GVBD,此时卵丘处于 2级扩展状态。卵丘完全扩展发生在注射 HCG后 9h,而 PB1的排出是从 12 h开始的。结果表明 :在小鼠体内 ,卵丘开始扩展先于卵母细胞成熟 ,但卵母细胞成熟并不...
[期刊] 华北农学报  [作者] 谢辉辉   童彬彬   李巧丹   潘富强   张博超   廖洪艳   贾雨珂   崔剑坤   李运生   刘亚  
旨在探究Ezrin对小鼠卵母细胞成熟、受精及早期胚胎发育的影响,揭示其可能作用机制。分别向小鼠GV期卵母细胞和原核期胚胎注射Ezrin的siRNA(si-Ez)或阴性对照siRNA(si-NC),观察对小鼠卵母细胞成熟、受精和早期胚胎发育的影响,并分别通过扫描电镜和免疫荧光染色的方法观察GV期注射si-Ez对小鼠成熟卵母细胞表面微绒毛生长、纺锤体定位和皮质颗粒迁移的影响。结果显示,GV期敲低Ezrin可显著降低小鼠卵母细胞成熟率,极显著降低受精后早期胚胎的囊胚率,虽可降低成熟卵母细胞的受精率,但差异不显著;在原核期敲低Ezrin,可极显著降低小鼠囊胚细胞数,桑椹胚存活率和囊胚率虽有下降趋势,但与对照组无显著差异;扫描电镜观察发现,敲低小鼠GV期卵母细胞Ezrin后显著降低了MⅡ期卵母细胞表面微绒毛的长度和密度;免疫荧光结果显示,敲低小鼠GV期卵母细胞Ezrin影响了纺锤体和皮质颗粒的迁移。结果表明,Ezrin通过影响微绒毛形成、纺锤体定位和皮质颗粒的正常迁移阻滞了小鼠卵母细胞成熟,进而影响了受精和早期胚胎发育。
[期刊] 水产学报  [作者] 丁军  蒋一珪  
银鲫卵母细胞体外诱导成熟的初步观察丁军,蒋一gui(中国科学院水生生物研究所,武汉430072)关键词银鲫,卵母细胞,成熟,体外诱导THEPRELIMINARYOBSERVATIONONINDUCINGCRUCIANCARP,CARASSIUSAUR...
[期刊] 华北农学报  [作者] 黄承俊  郭林林  孙守强  林峰  刘海军  
为了提高牛卵母细胞体外成熟率,以机械裸卵(DOs)、卵丘-卵母细胞复合体(COCs)和添加的离散卵丘细胞的不同组合,对卵丘细胞在卵母细胞体外成熟过程中的影响进行了探索,并对不同卵丘细胞的作用途径和强度进行了分析。试验结果表明:添加离散卵丘细胞能够显著促进DOs的体外成熟(57.98±14.27 vs 35.53±14.00,P0.05);卵母细胞胞外卵丘细胞对与之共培养的DOs的体外成熟促进作用效果不明显(35.83±18.32 vs 35.53±14.00,P>0.05)。分析结果显示:卵...
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 陈勇  夏国良  苏友强  傅国栋  
本实验建立了昆明白小鼠卵丘-卵母细胞复合体(CEO)、自然课卵(NO)和探卵(DO)3种细胞模型,并观察其在体外培养时卵母细胞的成熟情况。3种细胞模型在M199培养液中自发成熟时,其卵母细胞生发泡破裂(GVBD)主要发生在培养后1~5h。培养至24h,CEO、DO和NO的GVBD发生率分别为97.3%,87.3%和81.2%,CEO和NO间GVBD%差异显著(P<0.05)。CEO中卵母细胞的第一极体(PB1)主要集中在8~14h排出(24h时,PBI%为86.6%),DO主要在10~16h排出PBI(24h时,71.7%),而NO在培养24h内很少有PB1排出(17.4%)。4mmol·L-...
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 王松波  夏国良  周波  穆欣艺  张美佳  
采用体外培养方法和放射免疫分析法(RIA)研究磷酸二酯酶5(PDE5)抑制剂Sildenafil(西地那非)对小鼠卵母细胞体外自发成熟的作用。结果显示:该抑制剂显著抑制(P<0.05)小鼠卵母细胞的自发成熟,且其抑制作用是可逆的。放射免疫分析实验表明,Sildenafil对卵丘细胞(CCs)和裸卵母细胞(DOs)内环鸟苷一磷酸(cGMP)水平没有显著的升高作用,却能够显著提高CCs和DOs内环腺苷一磷酸(cAMP)的水平。以上结果提示,cGMP和cAMP信号通路之间的互作可能参与了PDE5调控的小鼠卵母细胞自发成熟过程。
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 卜淑敏  周波  夏国良  
为探讨和比较磷酸二酯酶(PDE)3、4和5对小鼠卵母细胞体外自发成熟的影响,将小鼠卵丘卵母细胞复合体(COCs)和裸卵(DOs)分别培养在含有或不含有PDE 3、4和5特异性抑制剂的M-199培养液中。结果表明:PDE3的特异性抑制剂cilostamide和PDE5的特异性抑制剂zaprinast均能显著抑制小鼠COCs和DOs的自发成熟,且其抑制效应不随培养时间的延长而减弱,但却是可逆的;而PDE4的特异性抑制剂rolipram对小鼠COCs和DOs没有影响。上述结果提示,不同亚型的PDE在小鼠卵母细胞减数分裂过程中具有不同的调节作用。
[期刊] 中国农业科学  [作者] 李海军  于泊洋  段云娇  刘星宇  翁娅政  杜晨光  王秀梅  
【目的】在绵羊有腔卵泡发育过程中,多层卵丘细胞紧密包绕着卵母细胞形成卵丘-卵母细胞复合体(cumulus-oocyte complex,COCs)特殊结构,存在于卵泡腔内。卵泡成熟后,绵羊COC从卵泡内排出,进入输卵管,等待受精。现有的卵丘-卵母细胞复合体蛋白鉴定技术,或者将包含各级卵泡的卵巢组织直接进行切片处理,或者将COCs从卵泡内分离,在完整卵丘-卵母细胞复合体水平上进行免疫染色。但这两种方法在检测绵羊有腔卵泡COCs中目的蛋白表达时,存在显著缺陷。研究旨在对常规石蜡组织切片技术进行改进,以期满足绵
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 刘红林  范必勤  陈宜峰  汪河海  
昆明鼠卵母细胞hCG注射后18 ̄19h用体积分数为7%的乙醇作用5 ̄6min,能够获得较为理想的激活效果,激活率高达90%。乙醇激活处理时,卵丘细胞以及细胞外Ca\+\{2+\}、Mg\+\{2+\}的有无对卵子的激活效果均无显著影响。37℃下激活处理与30℃下相比,激活率无显著差异,但卵子碎裂率显著提高。性成熟前小鼠超排的卵子虽然也能被激活,但激活率低于成熟后小鼠超排的卵子。哺乳动物卵母细胞成熟分裂抑制剂NaF和IBMX不能抑制乙醇处理卵的孤雌激活,但显著地抑制了激活卵子的卵裂。
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 张建超  夏国良  崔胜  吕忠显  李美玲  邵育静  
实验研究了一氧化氮合成酶抑制剂 L - NAME对昆明白小鼠卵母细胞成熟和排卵的影响。初情期前的昆明白小鼠注射 PMSG促进发情 ,注射 h CG促进排卵 ,并在注射 h CG前后各 3h注射 L- NAME。注射h CG后 18h颈椎脱臼处死小鼠 ,取输卵管冲卵。统计排卵数及卵母细胞的减数分裂情况发现 ,注射 L- NAME后排卵数明显减少 ,卵母细胞减数分裂恢复异常 ,大部分排出的卵母细胞处于 MI期 ;PB1的排出率降低 ,形态异常或退化死亡的卵母细胞数增加。结果直接证明 :在体内 ,NO可促进小鼠卵母细胞的减数分裂的恢复 ;NO对于小鼠排卵具有重要的促进作用 ;NO对小鼠卵母细胞质的成...
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 华再东  郑新民  魏庆信  许厚强  刘西梅  李莉  
通过采集屠宰场废弃猪卵巢,体外分离和培养猪卵母细胞,探讨基础培养基、激素、卵泡直径大小及卵丘细胞层数对猪卵母细胞体外成熟的影响。结果表明:改良TCM199(mTCM199)较NCSU-23培养猪卵母细胞成熟率显著提高(P
[期刊] 中国水产科学  [作者] 王静  刘慧芬  刘梦园  程凯歌  马晓  于淼  赵艳静  聂国兴  李学军  
2015年7月至2017年10月在河南省驻马店宿鸭湖水库采集花?(Hemibarbus maculatus Bleeker)雌鱼样本190尾,体长7.12~32.21 cm,体重10.55~330.22 g,采用组织学和扫描电子显微镜技术观察了花?卵母细胞发育各时期的特征。结果表明,花?卵母细胞发育可分为5个时相,第I时相卵母细胞处于卵原细胞增殖阶段;第Ⅱ时相卵母细胞处于初级生长阶段,出现滤泡膜;第Ⅲ时相卵母细胞出现皮质液泡,细胞质膜之间形成放射带;第Ⅳ时相卵母细胞处于大生长后期,卵黄颗粒增多。电镜下观察发现放射带表面形成微孔状结构,核仁外排,可能与卵母细胞内营养物质积累有关;第Ⅴ时相卵母细胞中细胞核消失,卵母细胞发育为成熟卵子,与卵膜脱离,准备排卵。繁殖季节,花?卵巢成熟系数达到13.78%~17.04%。研究结果可为花?人工繁殖和育种工作提供参考。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 曹鸿国  刘俊平  张涌  
 对小鼠卵母细胞进行孤雌激活用于单性生殖研究。取成年昆明白小鼠进行超数排卵,乙醇激活,同小鼠输卵管上皮细胞共培养并添加mM16培养基培养至早期囊胚阶段,移至小鼠胎儿成纤维细胞饲养层上,换成ES细胞培养液继续培养,分离消化ICM,重新接种,对分离出的ES样细胞集落进行分离培养鉴定。结果显示,小鼠卵母细胞激活率为96.99%,2-细胞发育率为93.17%,桑椹胚发育率为80.33%,囊胚发育率为73.22%。小鼠孤雌激活囊胚中分离的ES样细胞集落具有一系列ES细胞所特有的特征,如呈现出岛屿状形态,碱性磷酸酶染色为阳性,体外能够自发分化成上皮样或单个散在分布的细胞等。试验证明,小鼠孤雌胚中可以分离出...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 王锋  
利用屠宰牛的卵巢 ,研究了卵巢内 (IO)卵母细胞体外成熟、受精及发育能力。结果表明 ,成熟培养液中添加FSH (10 μg·mL-1)、hCG (2 0 μg·mL-1)和E2 (1μg·mL-1)等激素对IO卵母细胞受精发育能力有极显著促进作用(P
[期刊] 西南农业学报  [作者] 曹忻  张德荣  罗海玲  石国庆  
为研究不同月份对绵羊卵母细胞采卵数及体外成熟的影响,采用切割法获得不同月份绵羊卵母细胞,统计分析可用卵母细胞数和体外培养成熟率。结果表明:随着月份的延续,卵母细胞获得数从5月的(3.53±0.27)(个/d)稳步增加到11月的(5.16±0.15)(个/d),差异极显著(P<0.01)。卵母细胞体外成熟率也显著提高,其中8月份成熟率极显著高于5月、6月、7月(P<0.01);9月、10月、11月卵母细胞成熟率又极显著的高于8月(P<0.01),同时季节和气温对绵羊卵母细胞采卵数和利用也有显著影响(P<0.01)。因此,不同月份采卵显著影响可用绵羊卵母细胞数和卵母细胞体外成熟水平。
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