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[期刊] 水产学报
[作者]
邵安琪 李嘉政 张俊波 万荣 杨金龙 梁箫
为探究纤维素对海假交替单胞菌生物被膜的生物学特性及其对厚壳贻贝幼虫附着变态的影响，实验设置海假交替单胞菌(初始细菌密度5×10~8个/m L)分别与浓度为0.02、0.20、2.00、20.00 mg/L的纤维素共孵育形成生物被膜，检测形成的生物被膜对厚壳贻贝幼虫变态的诱导作用变化，比较生物被膜成膜能力、胞外产物等生物学特性变化，并分析其与厚壳贻贝幼虫附着变态的关系。纤维素浓度为2.00或20.00 mg/L时，所形成的生物被膜对幼虫附着变态的诱导活性显著降低。通过分析加入纤维素后海假交替单胞菌形成的生物被膜生物学特性发现，随着纤维素浓度升高，生物被膜中细菌的分布更为分散，细菌密度和膜厚呈逐渐降低趋势，生物被膜胞外产物中α-多糖、β-多糖和脂质的生物量显著降低，而蛋白无明显变化。在海假交替单胞菌生物被膜形成过程中，纤维素主要通过降低胞外α-多糖、β-多糖和脂质的产生，进而间接调控厚壳贻贝幼虫附着变态。研究结果为探究海假交替单胞菌纤维素对生物被膜形成及对厚壳贻贝附着变态调控分子机制提供理论依据，为整治生物污损等实际问题提供新思路。
[期刊] 水产学报
[作者]
邵安琪 李嘉政 张俊波 万荣 杨金龙 梁箫
探究纤维素对海假交替单胞菌（Pseudoalteromonas marina）生物被膜的生物学特性及其对厚壳贻贝幼虫附着变态的影响。海假交替单胞菌（初始细菌密度 5×10~(8 )个/mL）分别与浓度为0.02、0.2、2、20 mg/L的纤维素共孵育形成生物被膜，检测形成的生物被膜对厚壳贻贝幼虫变态的诱导作用变化，比较生物被膜成膜能力、胞外产物等生物学特性变化，并分析其与厚壳贻贝幼虫附着变态的关系。纤维素浓度为2或20 mg/L时，所形成的生物被膜对幼虫附着变态的诱导活性显著降低。分析纤维素加入海假交替单胞菌形成的生物被膜生物学特性发现，随着纤维素浓度升高，生物被膜中细菌的分布更为分散，细菌密度和膜厚呈逐渐降低趋势，生物被膜胞外产物中α-多糖、β-多糖和脂质的生物量显著降低，而蛋白无明显变化。在海假交替单胞菌生物被膜形成过程中，纤维素主要通过降低胞外α-多糖、β-多糖和脂质的产生，进而间接调控厚壳贻贝幼虫附着变态。研究结果为探究海假交替单胞菌纤维素对生物被膜形成及对厚壳贻贝附着变态调控分子机制提供理论依据，为整治生物污损等实际问题提供新思路。
[期刊] 水产学报
[作者]
吴静娴 李嘉政 胡晓梦 丁文扬 杨金龙 梁箫
为探究脂多糖（LPS）对海洋细菌生物被膜形成、海洋贝类幼虫变态所产生的作用，深入了解影响厚壳贻贝附着变态的因素，本实验使用不同浓度的LPS直接刺激厚壳贻贝幼虫，观察其对幼虫附着变态的直接作用；同时在海假交替单胞菌形成生物被膜的过程中添加不同浓度的LPS，通过分析生物被膜生物学特性的变化，及变化后的生物被膜对厚壳贻贝幼虫附着变态的影响。结果显示，3种浓度的LPS均可直接诱导厚壳贻贝幼虫的变态；10 mg/L浓度LPS处理后的生物被膜其细菌密度、膜厚明显降低，且膜厚降低了12.1%，胞外产物中多糖、脂类显著增加，其中代表性多糖可拉酸的含量增加了35.4%，同时其对幼虫变态的诱导作用也提高了53.3%。因而，在厚壳贻贝幼虫的附着变态过程中，LPS具有直接诱导作用，同时还可以通过调控生物被膜胞外物质，特别是可拉酸的生成，间接影响厚壳贻贝幼虫的附着变态。本研究成果对于为贝类与海洋细菌互作关系研究、厚壳贻贝养殖产业的改善以及海洋防污技术研发具有重要推动价值。
[期刊] 水产学报
[作者]
梁箫 刘红雨 杨丽婷 常睿珩 彭莉华 李一峰 杨金龙
为探讨生物被膜动态演替过程中如何影响海洋无脊椎动物附着,实验选取了对厚壳贻贝附着具有不同诱导活性的弧菌Vibrio cyclitrophicus、V. chagasii和Vibrio sp. 22形成单一生物被膜,观察弧菌动态演替中生物被膜细菌密度、膜厚度和胞外产物等生物学特性变化,探究其对厚壳贻贝稚贝附着的影响。结果显示,弧菌生物被膜动态演替过程中,被膜细菌随着时间推移出现聚集现象,细菌密度和膜厚度也随着时间变化呈先增多后减少。除了Vibrio sp. 22,V. cyclitrophicus和V. chagasii生物被膜细菌密度和膜厚度与稚贝附着均有不同程度的相关性。所测弧菌生物被膜胞外产物的显微激光共聚焦结果分析发现,胞外多糖随着时间先增多,然后开始下降。相对比而言,胞外蛋白和胞外脂质无显著性变化。因而,胞外多糖变化规律与稚贝在被膜上附着变化相一致,表明胞外多糖是生物被膜动态演替过程中调控厚壳贻贝附着的重要因素。本实验初步探讨了生物被膜动态演替特征及其对厚壳贻贝稚贝附着的影响,对于后续进一步在海区开展生物被膜的动态演替与海洋底栖动物附着相互关系研究具有重要的学术价值,同时对于人工鱼礁礁体生物附着机理的研究具有重要的实践价值。
[期刊] 水产学报
[作者]
梁箫 杨丽婷 彭莉华 魏玉利 方家松 杨金龙
为探讨深海细菌生物被膜对温度的适应性及对厚壳贻贝幼虫变态的影响，分别在4 ℃、18 ℃、25 ℃、37 ℃条件下培养生物被膜，调查温度对细菌密度、膜厚和胞外产物等生物学特性的影响，以及被膜对幼虫变态发育的影响。结果显示，4个温度条件下产生的生物被膜均可有效促进幼虫变态发育。其中，深海菌株Virgibacillus sp. 1在18 ℃时生物被膜的变态诱导活性最高（35%），且α胞外多糖含量较高，诱导活性与温度和细菌密度均显著相关；同时温度与其细菌密度和膜厚均显著相关。2株深海假交替单胞菌诱导活性与细菌密度均显著相关，温度仅影响Pseudoalteromonas sp. 33细菌密度。研究表明，3株深海细菌均有很好的温度适应性，且都能形成生物被膜；温度变化导致生物被膜的生物学特性改变，最终影响其对幼虫的诱导效果。
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
牟嘉仪 胡晓梦 彭莉华 竹攸汀 梁箫 杨金龙
为研究海洋细菌的运动性在生物被膜形成和贝类附着过程中的作用，本研究以厚壳贻贝(Mytilus coruscus)为研究对象，开展了海假交替单胞菌(Pseudoalteromonas marina)野生型菌株和ΔcheW菌株不同时间段的运动性能分析，调查了运动性能不同的细菌形成生物被膜的膜厚、细菌密度以及胞外产物的动态变化，探究了其生物被膜的动态演替对厚壳贻贝附着的影响。研究发现，野生型菌株和ΔcheW菌株在6、12、24、48、72和96 h等不同时间的运动性能差异显著(P
[期刊] 水产学报
[作者]
杨金龙 慎佩晶 王冲 李一峰 梁箫 沈和定 徐灿 李家乐
为研究微生物膜在厚壳贻贝稚贝附着过程中的作用,通过海洋化学生态学和分子微生物学方法分析了微生物膜形成过程中其干重、附着细菌密度、底栖硅藻密度、叶绿素a含量等随日龄变化情况及其对厚壳贻贝稚贝附着的影响。同时,利用DGGE指纹图谱技术对不同日龄微生物膜中的细菌群落结构多样性进行了分析。结果发现,微生物膜的干重、附着细菌密度及底栖硅藻密度明显随着日龄的增加而增加,在28 d达到最高值,其干重、细菌和硅藻密度分别为0.87 mg/cm2、1.5×107/cm2、1.0×106/cm2,均与日龄显著相关。叶绿素a含量在14 d时达到最大,为2.2μg/cm2,随日龄的增加呈持续下降的趋势,相关性分析表明...
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
杨金龙 于相冰 胡晓梦 贺楚晗 梁箫
为探讨存在于人工鱼礁表面的海洋细菌与贝类附着之间的互作关系，本实验从自然海域中的人工鱼礁表面上分离了9株海洋细菌，并分别构建单一细菌生物被膜，探索不同细菌种属形成的生物被膜特性与厚壳贻贝(Mytilus coruscus)稚贝附着之间的关系。结果显示，9株人工鱼礁表面细菌形成的生物被膜对厚壳贻贝稚贝附着的诱导活性存在显著差异，其中Mesoflavibacter sp.2对稚贝附着的诱导活性最高，Phaeobacter sp.2的诱导活性最低。Sutcliffiella sp.1和Jeotgalibacillus sp.1的细菌密度与诱导活性呈显著正相关，Cytobacillus sp.1和Phaeobacter sp.2的细菌密度与诱导活性呈显著负相关。通过比较分析Mesoflavibacter sp.2和Phaeobacter sp.2生物被膜的蛋白质及多糖含量发现，生物被膜对厚壳贻贝稚贝附着的诱导活性与多糖含量呈显著负相关，与蛋白质含量呈正相关。本研究初步探索了人工鱼礁表面细菌形成的生物被膜对厚壳贻贝稚贝附着的影响，为后续在自然海区进一步开展人工鱼礁表面生物被膜与海洋无脊椎动物附着的互作关系具有重要理论研究意义，同时对于人工鱼礁表面海洋生物附着机制的研究具有重要的实践价值。
关键词：
人工鱼礁 厚壳贻贝 稚贝 附着 生物被膜
[期刊] 水产学报
[作者]
黄道芬 梁箫 彭莉华 郭行磐 张德民 杨金龙
为探讨广泛存在于近海环境中海洋弧菌和贝类附着的相互作用关系,实验从自然微生物被膜和厚壳贻贝成体肠道内分离了海洋弧菌,测定其种属及亲缘性,调查了这些不同来源弧菌形成的微生物被膜与厚壳贻贝稚贝附着的调控作用。结果显示,测试弧菌形成的微生物被膜密度随着初始细菌密度的增加呈现不同程度的增加。源于自然微生物被膜和贻贝肠道内的10株弧菌均能显著促进厚壳贻贝稚贝的附着,不同菌株形成微生物被膜的诱导活性存在显著差异,附着率变化范围为17%67%,其中稚贝在Vibrio sp.17微生物被膜上的附着率为67%±2%。微生物
[期刊] 水产学报
[作者]
孙俊杰 梁箫 郭行磐 陈芋如 丁德文 张德民 杨金龙
为探讨微生物被膜生物学特性、培养基以及大型生物附着三者之间的相互关系，本实验通过微生物分子生态学和海洋贝类生态学等方法调查了不同培养基对海洋细菌所形成微生物被膜的影响及其对厚壳贻贝幼虫附着的影响。结果显示，厚壳贻贝稚贝率与培养基类型和细菌初始密度显著相关，进一步分析表明，Ｚｏ Ｂｅｌｌ ２２１６ｅ和Ｓｅａｗａｔｅｒ ｌｕｒｉａＢｅｒｔａｎｉ（ＳｗｌＢ）条件下分别有６株和９株细菌形成的微生物被膜密度与稚贝率显著相关。扫描电镜结果显示，ＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕＳ Ｓｐ．３在Ｚｏ Ｂｅｌｌ ２２１６ｅ培养基条件下形成微生物被膜的细菌分布较为紧密，ｐＳｅｕｄｏａｌｔｅｒｏｍｏｎａＳ Ｓｐ．８则在Ｓｗ．．．
[期刊] 水产学报
[作者]
周中盛 贺楚晗 林倩 梁箫 杨金龙
为了探究生物活性肽对海洋细菌生物被膜形成和贻贝稚贝附着的影响，实验首先通过紫贻贝肽直接刺激厚壳贻贝稚贝，观察其对稚贝附着的诱导能力；随后选用具有不同诱导能力的海洋细菌海假交替单胞菌和南海雷辛格氏菌，在形成生物被膜过程中分别添加不同浓度的紫贻贝肽，分析其对生物被膜形成及膜成分的影响，并进一步研究生物被膜的变化对厚壳贻贝稚贝附着的影响。结果显示，紫贻贝肽可显著诱导稚贝附着，1.0 g/L的紫贻贝肽诱导效果最高，且显著提高生物被膜细菌密度和被膜胞外蛋白含量；10.0 g/L的紫贻贝肽诱导效果最低，且显著降低生物被膜细菌密度和被膜胞外蛋白含量。研究表明，不同浓度的紫贻贝肽对细菌生物被膜产生不同的影响，从而使生物被膜诱导稚贝附着能力受到影响。综上，紫贻贝肽可以直接诱导厚壳贻贝稚贝附着，也能通过影响海洋细菌生物被膜的形成能力和被膜胞外蛋白含量间接影响厚壳贻贝稚贝附着。本研究可为探究生物活性肽的生理功能及其在贻贝稚贝附着阶段的调控提供新的思路。
关键词：
紫贻贝肽 生物被膜 厚壳贻贝 稚贝 附着
[期刊] 水产学报
[作者]
李一峰 杨金龙 王冲 沈和定
探讨低温(4℃)条件下的厚壳贻贝早期幼虫保存可能性,同时调查了不同培育密度对低温保存的影响。在正常条件下,继续培育低温保存后的幼虫,并调查其存活率和生长的变化。结果表明,在低温保存后,早期幼虫存活率较高,超过95%;厚壳贻贝早期幼虫的壳长和壳高出现显著性的增长。不同培育组间,培育密度对厚壳贻贝早期幼虫的存活和生长影响不同,表明密度是幼虫低温保存的一个重要因素。在正常培育条件下,低温保存后的幼虫,3周后其存活率明显低于对照组,但仍超过50%,且其生长速度明显高于对照组。因此,低温培育是保存厚壳贻贝早期幼虫的有效方法,可用于今后贝类幼虫生物学实验和人工育苗技术的改善研究。
关键词：
厚壳贻贝 低温保存 幼虫密度 存活率
[期刊] 水产学报
[作者]
王林雨 史雪 杨跃明 王雨晴 梁箫 杨金龙 李一峰
为探究厚壳贻贝GABA受体在幼虫附着变态发育中的作用，本研究利用GABA及其受体拮抗剂荷包牡丹碱（GABA_(A)受体）和CGP52432（GABA_(B)受体），研究其对厚壳贻贝幼虫附着变态的调控作用。通过分析厚壳贻贝不同发育阶段幼虫转录组数据得到2个GABA受体基因（GABA_(A)R和GABA_(B2)R），其中GABA_(B2)R在变态前期的眼点幼虫阶段相较于其他阶段显著高表达。通过实时荧光定量PCR验证也得到相似的表达模式，表明GABA受体可能参与调控厚壳贻贝幼虫变态发育。药理学实验结果显示10~(-4) mol/L GABA对厚壳贻贝幼虫的变态具有诱导活性（27.2%±3.0%）。在拮抗剂实验中，荷包牡丹碱和CGP52432在10~(-6)～10~(-4) mol/L浓度均显著抑制了厚壳贻贝幼虫变态，且抑制作用随浓度升高而增强。此外，本研究发现GABA及其受体拮抗剂都抑制了厚壳贻贝幼虫的游泳行为。GABA_(A)或GABA_(B)受体拮抗剂均对厚壳贻贝幼虫附着变态具有抑制作用，表明GABA两种受体类型都可能参与调控厚壳贻贝幼虫附着变态过程。研究结果可为进一步解析GABA能信号系统调控厚壳贻贝幼虫附着变态机理提供数据参考。
关键词：
厚壳贻贝 GABA受体 幼虫 附着变态
[期刊] 水产学报
[作者]
梁箫 刘钰珠 陈珂 李一峰 杨金龙
为理解髓样分化因子88(myeloid differentiation factor 88, MyD88)基因的生物学特性以及对细菌胁迫的响应,本研究克隆了厚壳贻贝MyD88基因(命名为McMyD88-4)cDNA全长序列,其全长3 930 bp,开放阅读框2 607 bp,编码868个氨基酸。其中,13～109位的氨基酸序列为死亡结构域(death domain,DD),347～481位的氨基酸序列为TIR(toll/interleukin-1 receptor)结构域,TIR结构域包含3个高度保守的区域Box 1、Box 2和Box3;McMyD88-4蛋白的空间结构包含6个α螺旋(α-helix)和4个β折叠(β-sheet)。同源性分析显示,McMyD88-4蛋白序列与长牡蛎MyD88最相似,其一致性和相似性分别为60%和77%;其次,与虾夷扇贝、海湾扇贝和菲律宾蛤仔相似度较高,其一致性和相似性分别为40%～51%和58%～67%。系统进化树结果显示,McMyD88-4先与长牡蛎和扇贝聚为一支,然后与黑腹果蝇聚为一支,脊椎动物单独聚为一支。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测发现,McMyD88-4基因在厚壳贻贝各组织和器官中均有表达,其中在外套膜和鳃中的表达量最高,而血细胞中表达量最低。厚壳贻贝经沙氏弧菌感染后,McMyD88-4基因表达量在免疫相关组织中急剧上升,分别在感染后3和6 h达到峰值,且在消化腺中的上调水平显著高于鳃和外套膜。研究表明,McMyD88-4在厚壳贻贝抵御外界病原体侵染过程中,尤其是弧菌感染方面发挥重要作用。
[期刊] 水产学报
[作者]
杨金龙 陈芋如 郭行磐 李一峰 徐灿 李家乐
为研究胆碱受体在厚壳贻贝幼虫变态发育过程中的作用,通过药理学手段调查胆碱类神经递质乙酰胆碱、氯甲酰胆碱及其拮抗剂六甲双铵和阿托品对厚壳贻贝幼虫变态发育调控作用。结果显示:在24 h暴露实验中,氯甲酰胆碱在10-5~10-4mol/L浓度表现出诱导活性,乙酰胆碱则无诱导活性。在持续暴露实验中,氯甲酰胆碱在10-5~10-4mol/L浓度表现出诱导活性,乙酰胆碱在10-6~10-4mol/L浓度表现出诱导活性。在拮抗剂实验中,在10-4mol/L氯甲酰胆碱或10-4mol/L乙酰胆碱存在时,N型胆碱受体拮抗剂六甲双铵对厚壳贻贝幼虫的变态均无抑制效果,表明N型胆碱受体可能并不在幼虫的变态发育过程发挥...
关键词：
厚壳贻贝 胆碱受体 幼虫变态 化学诱因
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