[目的]为分离和鉴定红楠炭疽病的病原菌,筛选出适宜的防治药剂。[方法]本研究采用组织块分离法分离红楠炭疽病的病原菌,通过针刺回接法确定其致病菌,进一步采用形态学和分子生物学相结合的方法对红楠炭疽病的病原进行鉴定,最后采用菌丝生长速率法测定7种不同的杀菌剂对红楠炭疽病菌的室内毒力,根据EC_(50)值的大小选出抑制效果最好的杀菌剂。[结果]分离并鉴定引起红楠炭疽病的病原为Colletotrichum sp.;不同杀菌剂对红楠炭疽病菌的抑制效果明显不同,其中98.4%多菌灵的抑菌效果最好,不同供试浓度对红楠炭疽病菌的抑制率均为100%;此外97%吡唑醚菌酯和98%福美双也表现出较好的抑制作用,EC_(50)值分别为(19.74±1.79)、(55.92±5.34)μg/mL。[结论]首次确定引起红楠炭疽病的病原为Colletotrichum sp.,并筛选出抑制活性较好的杀菌剂,分别为98.4%多菌灵、97%吡唑醚菌酯和98%福美双。

【目的】明确近年来严重危害砀山梨的炭疽病病原菌种类,研究常用杀菌剂对致病菌菌丝生长、分生孢子萌发的抑制作用。【方法】对6个取自不同梨品种上的病果、病叶样本分别进行发病组织培养、单孢分离纯化,根据病原菌的形态特征和致病性,并结合其rDNA-ITS序列分析,进行病原菌种类鉴定。采用常用杀菌剂分别对病原菌菌丝和分生孢子进行处理,观测其化学抑制效果。【结果】从不同病斑上分离出了6个纯化菌株,其形态特征相同,且与已报道的炭疽病菌(Colletotrichum spp.)形态特征相似;用上述纯培养菌株接种于健康果实和叶片上,又引起与田间原标本相同的病害症状;通过病原菌rDNA-ITS克隆测序、BLASTn...

为四川省雅安市石棉县核桃炭疽病病害防治提供依据，对该地区发病叶片、果实和枝干分别进行发病组织培养、分离纯化，通过致病性测定、菌落形态观察和ｒＤＮＡ－ＩＴＳ序列测定对病原菌进行鉴定，并采用菌丝生长速率法和孢子萌发法，室内测定２５种杀菌剂配方对病原菌菌丝生长和孢子萌发的抑制作用。结果表明：１）病原菌经分离纯化后得到的９个菌株，根据各菌株在ＰＤＡ平板正反面的不同形态分为２类，分别选择１个具有代表性的菌株Ｐ５１和Ｐ５７作后续鉴定。２个菌株接种果实和叶片后发病率均为１００％，病原重分离均得到接种的病原，其形态特征均与刺盘孢属ＣｏｌｌｅＴｏＴｒＩＣｈｕｍ ｇｌｏｅｏＳＰｏｒＩｏＩＤｅＳ真菌相似；将２个菌株．．．

【目的】明确广东省番木瓜果实疑似炭疽病病害的致病菌,并筛选防控该病害的适宜化学药剂,为番木瓜炭疽病的诊断和有效防治提供科学依据。【方法】在广东省广州市番木瓜果园采集番木瓜果实水渍状炭疽病疑似病果,对番木瓜病果进行组织分离及致病性测定,利用传统形态学和分子生物学方法鉴定病原菌;采用菌丝生长速率法测定8种杀菌剂对该病原菌的室内毒力。【结果】从病果样品中分离出5个形态特征相似的菌株(C1～C5),随机选取C1作为代表性菌株进行致病性测定和鉴定。致病性分析发现,番木瓜果实接种C1病原菌2 d即可表现出明显的水渍状病斑,从表现症状的部位可以重新分离到该病原菌。形态学观察发现,C1初生菌丝为白色辐射状,随后变灰白色,菌丝体上覆盖着一些橘红色分生孢子盘;孢子梗透明,有分隔;分生孢子透明,单细胞,细胞壁光滑,两端圆,形状规则呈圆柱形,壁薄,内含物呈颗粒状;分生孢子大小为13.2μm×5.1μm。这些形态学特征与短孢炭疽菌(Colletotrichum brevisporum)一致。分子生物学鉴定结果显示,供试菌株C1核糖体内转录间隔区(internal transcribed spacer,ITS)、甘油醛-3-磷酸脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)、β微管蛋白(β-tubulin,TUB2)和肌动蛋白(actin,ACT)基因序列与短孢炭疽菌(C. brevisporum)模式菌株BCC 38876对应基因的序列一致性分别为100%,93%,98%和100%。系统发育树分析结果表明,供试菌株C1与短孢炭疽菌单独聚为一支。结合形态学、分子生物学、致病性及发病特征明确了导致广东省番木瓜炭疽病的病原菌为短孢炭疽菌。室内毒力测定结果显示,在8种杀菌剂中,45%咪鲜胺水乳剂对C1菌株的抑制效果最明显,抑制中浓度(EC_(50))为0.082 0 mg/L,其次为250 g/L丙环唑乳油和40%苯醚甲环唑悬浮剂,EC_(50)分别为0.263 5和9.714 3 mg/L。【结论】在中国大陆首次鉴定了番木瓜果实炭疽病的致病菌短孢炭疽菌。45%咪鲜胺水乳剂、250 g/L丙环唑乳油和40%苯醚甲环唑悬浮剂对番木瓜短孢炭疽菌具有明显的抑制作用。

【目的】为了明确番木瓜炭疽病主要病原菌种类及适宜的防治药剂。【方法】从海南采集番木瓜炭疽病病果,采用柯赫氏法则对病原菌进行分离、纯化、致病性测定,根据病原菌的形态特征,结合其rDNA-ITS区域的序列分析对病原菌进行鉴定,并采用生长速率法测定17种杀菌剂对该病原菌生长的抑菌活性。【结果】从分离的炭疽菌中,得到2种强致病菌(代表菌株分别为C1和G1),其中C1菌株与辣椒炭疽菌(Colletotrichum capsici)形态特征相似,G1菌株和胶孢炭疽菌(C.gloeospcrides)形态特征相似。通过采用引物ITS1/ITS4对2个病原菌序列扩增并测序,将2个菌株rDNA-ITS序列与GenBank中相关菌株的ITS序列进行同源性比较,发现C1菌株与辣椒炭疽菌(C.capsici)同源性达到了99%,G1菌株与胶孢炭疽菌(C.gloeospcrides)的同源性同样达到99%。【结论】500 mg/mL咪鲜胺水分散粒剂对2菌株的抑菌效果最好,平均EC_(50)值仅为0.03μg/mL,其次为300 mg/mL咯菌腈悬浮剂和250 mg/mL丙环唑乳油,平均EC_(50)值分别为0.04和0.11μg/mL,确定番木瓜炭疽病主要由辣椒炭疽菌(C.capsici)和胶孢炭疽菌(C.gloeospcrides)引起,500 mg/mL咪鲜胺水分散粒剂、300 mg/mL咯菌腈悬浮剂和250 mg/mL丙环唑乳油对番木瓜炭疽菌抑菌效果好。

【目的】明确黑老虎炭疽病原菌种类，筛选出适宜的防治药剂，为黑老虎炭疽病的识别和大田防治提供理论依据。【方法】采用组织块分离法对广东省云浮市黑老虎炭疽病原菌进行分离，基于科赫法则确定其致病菌，采用形态学和分子生物学相结合的方法对菌株进行种类鉴定，并采用菌丝生长速率法对其进行生物学测定及不同药剂的室内毒力检测。【结果】通过对病叶分离纯化共获得6种菌株，选取具有代表性的典型菌株A1进行形态鉴定以及ITS序列分析，确定黑老虎炭疽病原菌属炭疽菌属（Colletotrichum sp.）。通过对菌株A1进行生物学测定，明确其以PDA培养基为最适生长培养基，以28 ℃为最适生长温度，以53 ℃水浴处理10 min为菌株致死条件，以pH 6.0为菌丝最适宜生长pH，以连续黑暗（暗24 h）为最适光照条件，以麦芽糖和酵母粉分别为最佳碳、氮源。同时，在福美双、溴菌腈、多菌灵和嘧菌酯4种供试药剂中，多菌灵的抑菌效果最佳，EC_(50)值为0.14 μg/mL；其次是福美双和溴菌腈，EC_(50)值分别为55.26和55.32 μg/mL，抑菌效果较好；嘧菌酯的EC_(50)值为791.95 μg/mL，EC_(50)值在100～1000 μg/mL，抑菌效果不明显。【结论】广东省云浮市黑老虎炭疽病原菌为炭疽菌属。多菌灵、福美双及溴菌腈对黑老虎炭疽病原菌菌丝生长具有较好的抑制作用，可以作为黑老虎炭疽病的候选田间防治药剂。

【目的】探讨油茶炭疽病复合病菌种类，筛选油茶炭疽病复合病菌的高效杀菌剂，为科学防治油茶炭疽病提供依据。【方法】从湖南、广西、广东、江苏，海南等地油茶成林采集炭疽病叶样本，采用组织分离法分离纯化致病菌，结合形态学和多基因联合系统发育分析进行种类鉴定；通过复合侵染试验研究致病菌之间的关系；采用菌丝生长速率法测定杀菌剂咪鲜胺、苯醚甲环唑、嘧菌酯、啶氧菌酯，氟吡菌酰胺和啶酰菌胺对油茶致病菌的室内毒力。【结果】1）从106个油茶炭疽病病斑中分离获得186株致病菌，其中主要病原菌是炭疽属真菌130株，拟盘多毛孢属真菌18株，新拟盘多毛孢属真菌28株，假拟盘多毛孢属真菌4株，链格孢属真菌6株；分离出单一炭疽病菌的病斑55个，而能同时分离出炭疽病菌和其他致病菌的病斑有51个，其中同一个病斑能同时分离出同属不同种或不同属致病菌的病斑有51个，分离的不同病菌有7种组合方式：同属不同种炭疽菌、炭疽菌和拟盘多毛孢属真菌、炭疽菌和新拟盘多毛孢属真菌、炭疽菌和假拟盘多毛孢属真菌、炭疽菌和链格孢属真菌两两组合以及炭疽菌和拟盘多毛孢属和新拟盘多毛孢属、炭疽菌和拟盘多毛孢属和链格孢属真菌3种菌的组合。2）将炭疽菌属和拟盘多毛孢属，炭疽菌属和新拟盘多毛孢属，炭疽菌同属不同种这3种分离率最多的组合方式致病菌回接到油茶上，发现炭疽病菌和其他致病菌复合接种的病斑显著大于只接同种病菌的病斑，表明油茶炭疽病斑中存在炭疽病菌与其他病原菌复合侵染协同增效的现象。3）室内毒力测定结果显示，苯醚甲环唑和咪鲜胺对炭疽菌属，拟盘多毛孢和新拟盘多毛孢致病菌均具有较强的抑制作用，平均EC50在0.011～0.555μg·mL-1之间；其次是嘧菌酯和啶氧菌酯，这2种药剂对拟盘多毛孢和新拟盘多毛孢的室内毒力最强，平均EC50在0.007～0.020μg·mL-1之间，但对炭疽菌的抑制作用较差；而啶酰菌胺和氟吡菌酰胺对油茶炭疽菌和拟盘多毛孢属致病菌几乎没有抑制作用。【结论】油茶炭疽病斑中存在炭疽菌和其他病菌复合侵染现象，咪鲜胺和苯醚甲环唑可作为防治油茶炭疽病复合侵染的主选药剂。

为明确脆红李叶斑病的病原菌及其抑菌药剂，采用组织分离法对病原菌进行分离纯化，并通过形态学特征结合多基因联合序列分析进行病原鉴定，采用孢子喷洒法和针刺接种法测试其致病性，并进行24种杀菌剂药剂筛选。结果表明，从脆红李叶斑病病叶分离得到4株形态一致的真菌菌株，代表菌株LY12的菌落呈圆形，菌丝白色至浅黄色；分生孢子器球形，黑色，分生孢子无色，单孢，多为椭圆形；采用ITS、TUB2和LSU 3段基因联合构建系统发育树，菌株LY12与荸荠茎点霉(Didymella bellidis)聚为一支。根据形态学特征和系统发育分析，确定LY12为荸荠茎点霉(Didymella bellidis)。致病力测试发现，该病原菌可以侵染川渝地区青脆李、半边红、青萘、金脆李和脆红李的叶片、枝条和果实，其中叶片受害最为严重；也可侵染尤力克柠檬、爱媛38杂柑、塔罗科血橙3个柑橘品种的叶片和果实。室内药剂筛选结果表明，24种杀菌剂中，50% 啶酰菌胺水分散粒剂、38% 唑醚·啶酰菌胺悬浮剂、25% 嘧菌酯悬浮剂、75% 肟菌·戊唑醇水分散粒剂等11种杀菌剂对病原菌菌丝生长有较强的抑制作用，病原菌对50% 啶酰菌胺水分散粒剂最敏感，EC_(50)为0.153 1 μg/mL。

为明确脆红李叶斑病的病原菌及其抑菌药剂，采用组织分离法对病原菌进行分离纯化，并通过形态学特征结合多基因联合序列分析进行病原鉴定，采用孢子喷洒法和针刺接种法测试其致病性，并进行24种杀菌剂药剂筛选。结果表明，从脆红李叶斑病病叶分离得到4株形态一致的真菌菌株，代表菌株LY12的菌落呈圆形，菌丝白色至浅黄色；分生孢子器球形，黑色，分生孢子无色，单孢，多为椭圆形；采用ITS、TUB2和LSU 3段基因联合构建系统发育树，菌株LY12与荸荠茎点霉(Didymella bellidis)聚为一支。根据形态学特征和系统发育分析，确定LY12为荸荠茎点霉(Didymella bellidis)。致病力测试发现，该病原菌可以侵染川渝地区青脆李、半边红、青萘、金脆李和脆红李的叶片、枝条和果实，其中叶片受害最为严重；也可侵染尤力克柠檬、爱媛38杂柑、塔罗科血橙3个柑橘品种的叶片和果实。室内药剂筛选结果表明，24种杀菌剂中，50% 啶酰菌胺水分散粒剂、38% 唑醚·啶酰菌胺悬浮剂、25% 嘧菌酯悬浮剂、75% 肟菌·戊唑醇水分散粒剂等11种杀菌剂对病原菌菌丝生长有较强的抑制作用，病原菌对50% 啶酰菌胺水分散粒剂最敏感，EC_(50)为0.153 1 μg/mL。

为了探明八角金盘灰斑病的病原菌种类,便于对其进行有效防治,以从云南、重庆和贵州等地收集的灰斑病标样为研究材料,通过分离、纯化,采用形态学结合分子系统学分析的方法,进行病原菌的鉴定,并在此基础上进行防治药剂室内筛选研究。结果表明:引起八角金盘灰斑病的病原菌为中央叶点霉;10%苯醚甲环唑水分散粒剂、50%多菌灵可湿性粉剂和10%多抗霉素粉剂等3种杀菌剂对该菌有较强的抑制作用,其EC50分别为1.9298、2.1805和6.0194 mg/L;80%代森锰锌可湿性粉剂和6%春雷霉素可湿性粉剂对该菌的抑制效果较差,其EC50分别为103.2997和161.1234 mg/L。

【目的】明确喜树叶斑病病原菌，并探究不同杀菌剂对病原菌的室内抑菌活性，为防治大田喜树叶斑病提供科学依据。【方法】通过常规组织块分离法分离喜树叶斑病病原菌并进行致病性测定，结合形态特征观察及rDNA-ITS序列分析鉴定病原菌的分类地位；采用菌丝生长速率法测定12种常见杀菌剂对病原菌的室内毒力。【结果】从广西农业职业技术大学中草药园的喜树叶斑病上分离到一株真菌，菌株命名为XS-1，经致病性测定、形态学观察和分子鉴定，确定多主棒孢霉（Corynespora cassiicola）是引起喜树叶斑病的病原菌，为国内首次报道，将该病害命名为喜树棒孢霉叶斑病。杀菌剂室内毒力测定结果表明，12种杀菌剂对菌株XS-1菌丝生长均有较强的抑制作用，其中，20%苯甲咪鲜胺微乳剂的抑制作用最强，其EC_(50)为0.0980 mg/L，其次是20%戊菌唑水乳剂、50%多菌灵可湿性粉剂、20%抑霉唑水乳剂、250 g/L丙环唑乳油和10%苯醚甲环唑水分散粒剂，其EC_(50)分别为0.3737、0.4557、0.4878、0.5746和0.5956 mg/L。【结论】经致病性测定、形态特征观察及分子鉴定，确定引起喜树叶斑病病原菌为多主棒孢霉（C. cassiicola）；20%苯甲·咪鲜胺微乳剂、20%戊菌唑水乳剂、50%多菌灵可湿性粉剂、20%抑霉唑水乳剂、250 g/L丙环唑乳油和10%苯醚甲环唑水分散粒剂对喜树棒孢霉菌丝生长均具有较强的抑制作用，可作为喜树棒孢霉叶斑病田间防治参考用药。

[目的]分离纯化上海应用技术大学萱草种质资源圃中疑似萱草叶枯病的病原菌,并对其进行鉴定;筛选对分离病原菌生长具有明显抑制作用的杀菌剂,为萱草叶枯病的田间防治提供科学依据。[方法]采集上海应用技术大学萱草种质资源圃中疑似萱草叶枯病病叶,采用组织分离法分离、纯化病原菌,并进行回接试验验证。对分离病原菌进行菌落形态和显微形态观察,并进行rDNA-ITS序列分析,采用MEGA 7.0软件中Neighbor-joining法构建其系统进化树,鉴定其分类地位。利用带毒平板法测定50%腐霉利可湿性粉剂、75%百菌清可湿性粉剂、77%硫酸铜钙可湿性粉剂对病原菌的室内毒力。[结果]从疑似萱草叶枯病病叶中分离得到病原菌YK1,其菌落呈雪白色放射状,分子孢子为卵圆形或近椭圆形,呈麦穗状,孢子壁为黑色,内容物透明,孢子大小约为(3.63～7.27)μm×(3.63～7.27)μm,孢子壁约为1.82μm。PCR扩增获得YK1内转录间隔区(ITS)序列,系统进化分析显示,在Limonomyces属菌种大类中YK1与秆褐霉菌(Limonomyces culmigenus)聚在同一分支上。3种低毒杀菌剂对YK1均有一定抑制作用,其中75%百菌清可湿性粉剂对YK1的抑制作用最强,其有效中浓度(EC_(50))为0.114 7 mg/L。[结论]本次萱草叶枯病病原菌为秆褐霉菌(Limonomyces culmigenus),75%百菌清可湿性粉剂对其有较好的抑制作用。

【目的】探明香榧藻斑病的病原种类及其生物学特性，筛选对香榧藻斑病具有良好防治效果的药剂，为香榧藻斑病防治提供科学依据。【方法】在浙江省香榧主产区采集藻斑病病叶，结合传统形态学方法与分子生物学手段对从病叶中分离获得的香榧绿藻进行鉴定，明确病原藻的生物学特性，通过室内毒力测定和林间防治试验筛选防治香榧藻斑病的优良药剂。【结果】1）从香榧藻斑病病叶中分离获得3种病原绿藻类群，结合藻株形态学特点以及SSU-ITS区间序列分析，3种绿藻类群分别被鉴定为链带藻、软克里藻和Tritostichococcus corticulus，均为香榧病原新记录种。3种香榧绿藻的培养条件相似，均适宜在初始pH 11、温度25℃、光照/黑暗为12 h/12 h光周期下的BG-11培养基中生长。2）以混合藻为靶标进行室内毒力测定试验显示，12%松脂酸铜悬浮剂灭藻效果最好，EC_(50)可达8.33 mg·L~(-1)，显著低于其他药剂（P<0.05），其后依次为33.5%喹啉铜悬浮剂、80%波尔多液、20%噻菌铜悬浮剂和45%石硫合剂。林间防治试验表明，施药30天后，12%松脂酸铜和33.5%喹啉铜悬浮剂的防治效果分别达78.11%和71.62%。【结论】从浙江省香榧上新发现3种病原绿藻类群，藻群生物学特性类似。室内毒力测定和林间防治试验表明，12%松脂酸铜和33.5%喹啉铜悬浮剂对香榧藻斑病有较好防治效果。

通过测定10类21种药剂对‘富平尖柿’炭疽病病原菌的MIC值及菌丝生长的毒力(EC50),筛选出效果较好的药剂,并进行田间防治试验,最终选择适宜推广的防治药剂。2012—2014年连续3年采集陕西富平曹村镇的‘富平尖柿’炭疽病病害枝条和叶片样本,比较不同部位及不同分离方法炭疽病菌分离效果,以得到的炭疽病菌株为实验材料,通过设定药剂浓度梯度的含药培养皿,测定22种杀菌剂对病原菌抑制作用,测定MIC设置浓度梯度为0、1、5、10μg/m L,测定EC50设置浓度为0、0.15、0.312、0.625、1.25

[目的]通过室内毒力测定和田间防治效果相结合的方法筛选对柿炭疽病抑制效果较好的药剂。[方法]选取山东青州、广西恭城、河南栾川及陕西富平的4个柿炭疽病代表性菌株作为处理对象,测定10类22种杀菌剂对其抑制作用的MIC值和EC50值,在此基础上筛选5种药剂进行田间试验。[结果]表明:苯并咪唑类、脱甲基抑制剂类(三唑类、DMIs)、苯吡咯类3类杀菌剂效果较好,MIC值均在10μg·m L(-1)L以下,EC50在0.011 2 0.520 3μg·m L(-1)范围内。30%苯醚甲环唑WG 1500倍液、240