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[期刊] 水产学报
[作者]
王小冬 魏布 刘兴国 陆诗敏 顾兆俊 金娇辉
为了研究红假单胞菌属光合细菌的规模化培养方法,2015年1月5日至2016年4月26日,将淡水鱼配合饲料与自来水混合后放置在玻璃温室,于有机玻璃柱中腐烂、发酵培养,培养期间不添加其他物质,也不添加菌种种源。实验过程中,随着饲料的腐烂,容器内壁上逐渐出现了暗红色物质附着,并且附着面积逐渐扩散到整个内壁,然后水体也逐渐转变为暗红色。结果显示,饲料腐烂过程中,水体TN、TP和TOC最高可分别达近1 200 mg/L、700 mg/L和2 700 mg/L,随后水体TN、TP和TOC出现降低趋势。微生物高通量测序分析结果显示,当水体呈现暗红色时,附着态微生物样品和浮游态微生物样品均以红假单胞菌属为最大的优势属,红假单胞菌属在附着态样品和浮游态样品中的相对丰度分别达到73.19%和54.31%,即实现了浮游态和附着态红假单胞菌属光合细菌的高密度培养。推断本实验中红假单胞菌规模化培养方法的机理:首先,异养菌降解饲料原料为小分子物质,随后在适当的水温、光照等物理因素的影响下,其中高浓度的氮、磷、碳以及金属离子、维生素、微量元素等小分子物质满足了红假单胞菌的高密度生长需求而大量生长成为优势种类。这提供了一种利用水产配合饲料与水一起发酵进行红假单胞菌属光合细菌规模化培养的方法,可为其他降解大分子有机物的异养菌的规模化培养提供参考。
关键词：
红假单胞菌 光合细菌 配合饲料 培养方法
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
章健 任欣正
对青枯菌(Pseudomonas solanacearum)产生颉颃作用的无致病力青枯菌菌株 nOE-104产生的细菌素效价为128AU/ml;丝裂霉素 C 可将其效价提高至512AU/ml;UV 照射无诱导效应.CPG 培养液中产生的 nOE-104细菌素粗提液,经硫酸铵沉淀,沉淀物于磷酸钠缓冲液中透析后,通过 DE-52离子交换柱分离纯化.纯化的 nOE-104细菌素具有生物活性,分子量为19100;电镜下观察不到其粒体;对热不稳定,50℃处理10min 即失活;有机溶剂如甲醇、氯仿等对其生物活性无影响;最适pH 为6～8.蛋白酶 K 可以完全破坏 nOE-104细菌素活性,而核酶、胰蛋白...
关键词：
青枯菌 细菌素 生物学特性
[期刊] 林业科学研究
[作者]
吴明 邱晓力 蒋科毅
A kind of mixed bacterial manure was prepared,which was composed of four bacterium,namely,Bacillus megatherium var.phosphaticum,B.mucilaginosus,Azorhizobium sp.and cellulose-decomposing microorganisms.Preservation experiments of the mixed bacterial manure were carried out under different temperature...
关键词：
复合菌剂 保存 土壤接种
[期刊] 中国水产科学
[作者]
常仁亮 冯秋星
糊状光合细菌制品所用菌种 ,经鉴定属球形红假单胞菌 (Rhodopdedomonasspheroides)。在增殖培养后 ,浓缩成糊状光合细菌 ,再培养 7～ 9d后 ,吸收光谱值 (OD)可达到 1.90 8,其产品跟踪检测浓缩比可达到 4 0∶1,水分含量小于 94 % ,生物量为 1.2 %～ 2 .0 % ,比活率为 95%～ 2 0 3%。经 2年贮藏 ,糊状光合细菌的复活性能及技术指标稳定 ,不影响使用价值
关键词：
糊状光合细菌 培养 球形红假单胞菌
[期刊] 淡水渔业
[作者]
杨绍斌 廉大海 祝莹 李威
光合细菌作为环保型饲料添加剂 ,具有营养丰富、净化水质、防治鱼病、维持水体生态平衡的作用。采用大棚简易富集培养法 ,可大量培养光合细菌 ,此技术成本低、效益高、操作简单 ,适于在北方淡水养鱼中推广使用。
关键词：
光合细菌 大棚 富集培养
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
王维玲 刘文枝 马杰 周勇 范玉顶 曾令兵
本文研究了在Cephodex微载体悬浮培养系统中规模化培养鲫脑组织细胞(Gi CB)和鲤疱疹病毒Ⅱ型(Cyprinid herpesvirusⅡ,CyHV-2)的工艺。结果表明,Cephodex微载体适合GiCB细胞的贴壁培养,细胞贴壁期培养基中血清浓度为10%,微载体浓度为6 g/L;细胞初始接种密度为2.5×105cells/m L时,以转速35 r/min,每静置30 min搅拌2 min的间歇搅拌条件贴壁率最佳,8 h后贴壁率可达90%以上;增殖期以45 r/min的连续搅拌速度可获得最佳的细胞生
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
洪葵 陈国强 孙素琴 黄为一
用ＦＴ－ＩＲ技术定性和定量检测细菌ＰＨＡ（ｐｏｌｙｈｙｄｒｏｘｙａｌｋａｎｏａｔｅ），可在细胞水平上区分ＰＨＢ（ｐｏｌｙ－ｈｙｄｒｏｘｙｂｕｔｙｒａｔｅ）及中链ＰＨＡ合成菌，并可进行半定量分析。
[期刊] 水产学报
[作者]
曾胡龙 蔡生力 戴习林 臧维玲
经反复分离筛选,从对虾养殖环境中分离得到5株亚硝化菌和3株硝化菌,均为革兰氏阴性细菌。设计了一套简易培养系统培养分离得到的硝化细菌,根据培养结果筛选出其中最具生长与硝化能力的优势亚硝化菌和硝化菌,同时检验应用该模式进行硝化细菌培养的效果。培养结果表明筛选的几株硝化细菌均有很强的生长和硝化能力,其中Y105和X101分别是亚硝化菌和硝化菌中最具优势的菌株。采用所设计的简易培养模式,在遮光、30℃、连续无菌充气的培养条件下,同时不补加营养物质和调整pH值,即可在短时间内获得较高密度(10~6～10~8 mL~(-1))的硝化细菌菌液,其中亚硝化菌富集培养时间为13～19 d,硝化菌为6～12 d。
关键词：
硝化细菌分离 富集培养 硝化能力
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
唐雪 马海田
剪切9日龄三黄肉鸡鸡胚肝组织,胰酶消化分离肝细胞,用改良的M199培养液进行培养。结果显示,分离的肝细胞即时存活率为93.7%±2.6%;过碘酸席夫试剂染色后,胞质中布满粉红色糖原颗粒;肝细胞活力和白蛋白分泌功能在第3天达到最高水平,这是体外研究禽类肝脏功能和代谢的最佳时机。
关键词：
鸡胚肝细胞 原代培养 形态 功能
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
李辉信 陈小云 胡锋
从小麦根际土中分离得到一种能取食B1和B2两种细菌的土壤食细菌线虫 ,并在马铃薯蔗糖培养基上富化培养成功。经鉴定该线虫为原小杆线虫属 (Protorhabditissp .) ,B1为假单胞菌属 (Pseudomonassp .) ,B2为醋杆菌属(Acetobactersp .)。用牛肉膏蛋白胨细菌培养基培养B1和B2两种细菌时 ,细菌无多糖产生 ,线虫不能取食细菌而生长繁殖 ;当用马铃薯蔗糖真菌培养基培养B1和B2两种细菌时 ,细菌分泌丰富的多糖 ,线虫生长繁殖较好。多糖是线虫生长繁殖的重要外部环境
关键词：
土壤食细菌线虫 富化培养 多糖
[期刊] 林业科学
[作者]
赵博光 梁波 徐梅 赵林果
用荧光染色显微生测法检测液体培养基的无细胞滤液毒性,研究从松材线虫虫体上分离鉴定的荧光假单胞GcM5-1A菌株在寄主体外培养的产毒现象。结果表明:GcM5-1A液体培养的无细胞滤液对黑松细胞的毒性随培养天数增加而增强,培养到第4天时,无细胞滤液的毒性开始进入相对稳定期。因此,在进行该菌株毒素的分离鉴定工作中,可将4d作为其培养时间。使用DM-36透析膜对培养4d的GcM5-1A无细胞滤液透析后的毒性测定结果显示:其膜内和膜外组分生测毒性分别与对照培养基的无细胞滤液毒性之间的t检验差异显著,证明其透析膜内、膜外组分均有毒性。该结果表明:GcM5-1A菌株的毒素不是单一化合物,而是由比较多的物质组...
[期刊] 中国水产科学
[作者]
贾路路 周勇 马杰 范玉顶 刘文枝 刘学芹 曾令兵
利用Cytodex 3微载体悬浮培养系统规模化培养大鲵肌肉细胞(GSM)和大鲵虹彩病毒(GSIV),研究了微载体培养GSM细胞的形态和增殖特性,同时测定了病毒在培养系统中的增殖动态相关指标。结果显示,在Cytodex 3微载体培养系统中,将GSM细胞在贴壁期以转速30 r/min,每静置40 min搅拌2 min的方式间歇搅拌,10 h后贴壁率可达95%,培养基中最适血清浓度为10%,最适微载体浓度为2 g/L,最适细胞初始接种密度为1.2×105 cells/mL;增殖期以25 r/min的连续搅拌方式
[期刊] 淡水渔业
[作者]
刘秋凤 曾令兵 周勇 马杰 范玉顶 张辉 李瑞伟
研究了在悬浮培养系统中使用微载体Cephodex规模化培养草鱼肾脏组织细胞CIK和草鱼呼肠孤病毒(GCRV)的条件并进行了优化。结果表明,Cephodex是一种适合CIK细胞贴壁生长的微载体,搅拌方式(搅拌时间/静止时间)及血清浓度(0%、5%、10%、15%)对CIK细胞在Cephodex微载体上的贴附效率有影响。贴附期以转速35 r/min、每静置45 min搅拌2 min的间歇搅拌方式最佳,8 h后细胞贴附率可达90%以上;细胞贴附期培养基中的血清浓度为5%。当Cephodex微载体用量10 mg/mL、细胞初始接种密度2.5×105cells/mL、连续搅拌速度40 r/min时可获得...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
年洪娟 张杰 樊利强 刘朔 宋福平 黄大昉
【目的】探索荧光假单胞菌的分类方法,分离筛选拮抗性较强的荧光假单胞菌。【方法】利用紫外下产生荧光的特性,采用梯度稀释及鞭毛染色的方法,对采自云南、海南、山东和新疆的488份植物根际土壤进行分离筛选,分离菌株进行ARDRA分析,采用室内平板对峙法筛选对植物病原真菌具有较强拮抗作用的菌株,并对其进行生理生化分析和分子鉴定。【结果】分离筛选到102株紫外下产生荧光的杆状单极生鞭毛菌株。ARDRA分析产生荧光假单胞菌类型、恶臭假单胞菌类型以及一个未知的谱带类型。以油菜立枯病菌作为靶标菌,筛选到25株具有拮抗作用的菌株,其中TC222产生的抑菌圈最大,进一步的生测结果表明该菌株对9种重要的植物病原真菌如...
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
陈昌福
用直接荧光抗体法和细菌培养法对中华鳖体内的嗜水气单胞菌的检测陈昌福（华中农业大学水产学院，武汉４３００７０）ＦＬＵＯＲＥＳＣＥＮＴＡＮＴＩＢＯＤＹＴＥＣＨＮＩＱＵＥＣＯＭＰＡＲＥＤＴＯＰＬＡＴＥＣＵＬＴＵＲＥＭＥＴＨＯＤＦＯＲＣＯＵＮＴＯＦＡｅｒｏ...
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