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[期刊] 上海水产大学学报  [作者] 李苹苹  丁霄霖  
探讨了酶法与Sevage法联用脱除紫贻贝(Mytilus edulislinnaeus)多糖蛋白。通过正交中心组合实验,应用响应面分析法考察酶法脱蛋白的工艺条件。结果表明,酶法脱蛋白的最优工艺参数为:pH7.1,枯草杆菌中性蛋白酶加入量0.5 U/mg粗多糖,温度41℃,氯化钙加入量7.4 mg/g,时间3 h。在酶解的基础上应用Sevage法脱除游离蛋白,适宜的工艺条件为:氯仿∶正丁醇=5∶1,料液比4∶1,振摇时间20 min。酶法与Sevage联用法脱除贻贝多糖蛋白的脱除率为78.5%;与其它传统脱蛋白方法比较,该法适应范围广、样品损耗少、经济、快速、效果理想,为多糖的分离纯化研究提供了...
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 孙智达  M.A.H.Ismond  
油菜在中国和加拿大都是非常重要的经济作物。菜籽饼中蛋白质含量在28% ~45 % 之间,但也含大量抗营养物质,其中多酚类物质对蛋白质的色泽影响较大,到目前为止,它仅能部分被人们用来作为动物饲料。本研究采用新的提取方法,即先用80 % 乙醇脱除酚类物质,然后以0.01~0 .1 mol/LNaCl 和0 .01 ~0 .1 mol/LNaH2PO4 ,pH 值控制在5 .0 ~6 .0 进行提取。结果显示0.01 mol/LNaCl 和0 .01 mol/LNaH2PO4 ,pH 为5 .0 时提取效果最佳。此种方法在有效脱除营养物质后,可得到优质菜籽蛋白质
[期刊] 西南农业学报  [作者] 刘品华  谢景文  康照金  冯亚娟  汪帆  
【目的】去除鼠曲草粗多糖中蛋白质的最优方法,是研发的基础。【方法】以蛋白质清除率和粗多糖损失率为指标,进行综合评价。采用碱性法、酸性法、醋酸铅法、三氯乙酸法、Sevag法、酶法,研究了去除蛋白质的效果。【结果】醋酸铅法、三氯乙酸法、木瓜蛋白酶-三氯乙酸法去除蛋白质的效果较好,其蛋白质清除率分别为97.55%、81.97%、100.00%,粗多糖损失率分别为12.17%、5.89%、52.71%。【结论】由综合指标评价可知,其效果依次为醋酸铅法、三氯乙酸法、木瓜蛋白酶-三氯乙酸法。
[期刊] 上海水产大学学报  [作者] 刘凤  陶慧卿  何培民  
对紫菜多糖提取液中的杂蛋白质去除方法和条件优化进行了研究。采用Sevag法与三氯乙酸(TCA)法去除紫菜多糖中的游离蛋白质,分别研究了不同溶剂体积比、用量、处理温度和时间等主要因子对蛋白质去除的影响。结果表明,Sevag法最佳脱蛋白条件为氯仿∶正丁醇=3∶1,样品:氯仿-正丁醇=3∶1,振荡时间为30 min;三氯乙酸法(TCA法)最佳脱蛋白条件为反应温度80℃、三氯乙酸用量4%、反应时间30 min。两种脱蛋白方法比较发现:三氯乙酸法去除蛋白质质的效果优于Sevag法。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 杨大伟  雷红灵  吴永尧  朱玉昌  
为了脱除碎米荠粗多糖溶液中的色素,以活性炭为吸附剂,选择脱色温度、脱色时间与活性炭用量等进行单因素与正交试验,并对试验结果进行方差分析.结果表明,脱除碎米荠粗多糖色素的适宜条件为:脱色温度70℃,脱色时间4h,活性炭用量0.8%.为减少多糖被活性炭吸附造成的损失,提高碎米荠多糖的得率,以蒸馏水为解吸剂,选择解吸温度、解吸时间及解吸剂用量进行三因素九水平均匀试验,试验结果进行回归分析,解吸多糖的适宜条件为:解吸时间100min,解吸温度78℃,蒸馏水用量为活性炭的10倍.
[期刊] 水产学报  [作者] 余振兴  朱倩  姚翠鸾  
LC3B是检测自噬程度的标志性分子,但是在低等动物体内缺少特异性强的LC3B抗体。为研究贝类的自噬性细胞死亡,本研究通过将紫贻贝的LC3B编码序列克隆到pET-32a原核表达载体中构建重组表达载体,进而对IPTG诱导浓度、诱导表达时间进行摸索;采用亲和层析对重组蛋白进行纯化,并采用SDS-PAGE检测及Western blot进行验证;利用获得的重组蛋白免疫新西兰兔,制备其多克隆抗体。结果显示,在20℃,转速为150 r/min条件下,当IPTG浓度为0.6 mmol/L,诱导表达10 h后,可以得到高表
[期刊] 水产学报  [作者] 杨美圆  陈海兵  黄彦超  缪栋  王军琦  侯英雪  包卫洋  
为了阐明紫贻贝幼体附着变态的内在机理,在天然诱导物-微生物膜的诱导参照下,通过使用G蛋白偶联受体(GPCRs)和信号通路的活化剂与抑制剂初步研究了其对该物种幼体附着变态过程的调控作用。结果显示,GPCRs活化剂Gpp[NH]p与抑制剂GDP-β-S没有诱导和抑制活性,表明可能非GPCRs的其他细胞反应过程参与了紫贻贝幼体的附着变态。腺苷酸环化酶/环腺苷酸(AC/cAMP)信号通路相关、理论上具有诱导活性的6种神经性试剂,除了磷酸二脂酶抑制剂(IBMX)外,其他在10-8~10-3M浓度下48、72 h后都没有活性,并且高浓度下表现出较高的神经性药物毒性。IBMX仅在10-4M浓度72 h后呈现...
[期刊] 水产学报  [作者] 吴静娴  李嘉政  胡晓梦  丁文扬  杨金龙  梁箫  
为探究脂多糖(LPS)对海洋细菌生物被膜形成、海洋贝类幼虫变态所产生的作用,深入了解影响厚壳贻贝附着变态的因素,本实验使用不同浓度的LPS直接刺激厚壳贻贝幼虫,观察其对幼虫附着变态的直接作用;同时在海假交替单胞菌形成生物被膜的过程中添加不同浓度的LPS,通过分析生物被膜生物学特性的变化,及变化后的生物被膜对厚壳贻贝幼虫附着变态的影响。结果显示,3种浓度的LPS均可直接诱导厚壳贻贝幼虫的变态;10 mg/L浓度LPS处理后的生物被膜其细菌密度、膜厚明显降低,且膜厚降低了12.1%,胞外产物中多糖、脂类显著增加,其中代表性多糖可拉酸的含量增加了35.4%,同时其对幼虫变态的诱导作用也提高了53.3%。因而,在厚壳贻贝幼虫的附着变态过程中,LPS具有直接诱导作用,同时还可以通过调控生物被膜胞外物质,特别是可拉酸的生成,间接影响厚壳贻贝幼虫的附着变态。本研究成果对于为贝类与海洋细菌互作关系研究、厚壳贻贝养殖产业的改善以及海洋防污技术研发具有重要推动价值。
[期刊] 西南农业学报  [作者] 谢丽源  彭卫红  甘炳成  
对桑黄多糖提取液中的蛋白质去除方法和条件进行了优化。采用Sevag法与三氯乙酸(TCA)法去除桑黄多糖中的游离蛋白质,比较两种方法对蛋白质去除的影响。结果表明,三氯乙酸法去除蛋白质的效果优于Sevag法,其最佳脱蛋白条件为:5%三氯乙酸用量,处理3次,反应时间30 min,在此条件下,蛋白质去除率为82%,多糖损失率为10.8%。
[期刊] 沈阳农业大学学报  [作者] 梅新娅  
为了探讨南瓜多糖的制备方法,采用热水浸提和乙醇沉淀提取南瓜粗多糖,分别用三氯乙酸(TCA)法、NaCl法和CaCl2法研究其脱蛋白,用薄层层析(TLC)对南瓜多糖的单糖组成进行分析。结果表明:与其他2种方法相比,TCA法脱蛋白效率最高,但其多糖损失率也较高。另外,CaCl2法脱蛋白效率比NaCl法要高。南瓜多糖是由葡萄糖、葡萄糖醛酸、半乳糖、阿拉伯糖、木糖和鼠李糖这6种单糖组成。说明依次用热水浸提、乙醇沉淀和TCA法脱蛋白的方法能制备高纯度的南瓜多糖。
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 陈昌福  曾妍雄  楠田理一  
从培养不同时间后的柱状嗜纤维菌中提取菌体脂多糖 (LPS) ,测定了其中蛋白质含量及成分的变化 ,并分别作为免疫原接种翘嘴鳜对其免疫原性进行了比较。结果表明 ,培养时间对菌体LPS中蛋白质含量没有明显影响 ,对其蛋白质成分则有一定影响 ,而菌体LPS中蛋白质成分与其免疫原性有关 ,从培养 36h的菌体中提取的菌体LPS的免疫原性最强
[期刊] 水产学报  [作者] 周中盛   贺楚晗   林倩   梁箫   杨金龙  
为了探究生物活性肽对海洋细菌生物被膜形成和贻贝稚贝附着的影响,实验首先通过紫贻贝肽直接刺激厚壳贻贝稚贝,观察其对稚贝附着的诱导能力;随后选用具有不同诱导能力的海洋细菌海假交替单胞菌和南海雷辛格氏菌,在形成生物被膜过程中分别添加不同浓度的紫贻贝肽,分析其对生物被膜形成及膜成分的影响,并进一步研究生物被膜的变化对厚壳贻贝稚贝附着的影响。结果显示,紫贻贝肽可显著诱导稚贝附着,1.0 g/L的紫贻贝肽诱导效果最高,且显著提高生物被膜细菌密度和被膜胞外蛋白含量;10.0 g/L的紫贻贝肽诱导效果最低,且显著降低生物被膜细菌密度和被膜胞外蛋白含量。研究表明,不同浓度的紫贻贝肽对细菌生物被膜产生不同的影响,从而使生物被膜诱导稚贝附着能力受到影响。综上,紫贻贝肽可以直接诱导厚壳贻贝稚贝附着,也能通过影响海洋细菌生物被膜的形成能力和被膜胞外蛋白含量间接影响厚壳贻贝稚贝附着。本研究可为探究生物活性肽的生理功能及其在贻贝稚贝附着阶段的调控提供新的思路。
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 陈昌福  罗宇良  曾妍雄  魏富兵  
从 3种不同血清型的柱状嗜纤维菌中提取菌体脂多糖 (LPS) ,测定了其中蛋白质含量及其成分的变化 ,并分别作为免疫原接种翘嘴鳜 ,对LPS的免疫原性进行了比较。结果表明 ,不同血清型的柱状嗜纤维菌菌体LPS中蛋白质含量没有明显差别 (t测验 ,P >0 .0 5 ) ,而其中蛋白质成分则有明显的血清型特异性。不同血清型的菌体LPS对翘嘴鳜的免疫原性没有明显差别 (t测验 ,P >0 .0 5 )
[期刊] 水产学报  [作者] 洪鹏志  章超桦  杨文鸽  郝记明  张静  
对翡翠贻贝肉酶解动物蛋白 (enzymolyticanimalprotein ,EAP)进行的营养特性研究表明 :粗蛋白含量达72 .8% (干基 ) ,蛋白营养价高 ,氨基酸价为 93(第一限制氨基酸为含硫氨基酸 ) ;且富含赖氨酸、精氨酸、维生素、矿物质等 ;Glu、Asp、Gly等呈味物质含量丰富 ,是制作营养保健食品或海鲜调味料的理想原料。经动物实验表明 :翡翠贻贝肉EAP剂量为 32 0mg·kg-1体重时 ,对昆明小鼠移植性肿瘤S - 180的抑瘤率可达 5 0 .6 % ,且有增强免疫力的活性
[期刊] 中国农业科学  [作者] 李栓明  郭银巧  王克如  谢瑞芝  戴建国  肖春华  李静  李少昆  
【目的】筛选整粒小麦籽粒蛋白质的近红外特征光谱波段并建立优化模型,可实现快速、无损测定整粒小麦籽粒蛋白质含量,为田间便携式小麦籽粒蛋白质含量速测仪设计提供依据。【方法】2012—2013年以蛋白质含量有明显差异的8个冬小麦品种为试验品种,设置3个施氮量和2个灌溉量共6个处理,建立丰富的样本类型,共采集176个小麦籽粒光谱数据;将ASD Field Spec Pro光谱仪采集到的基于全反射下垫面的整粒小麦籽粒反射光谱通过公式A=log(1/R)转换为吸收光谱,对吸收光谱采用S-G平滑、多元散射校正和基线校正等方法进行预处理,以消除背景噪声,然后采用交叉验证偏最小二乘回归方法进行特征波段压缩;分析...
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