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[期刊] 西南农业学报  [作者] 赵景鹏  姜克杰  董辉  
利用同位素双标法,测定在NO供体硝普钠(SNP)、NO合酶(NOS)抑制剂NG-硝基、L-精氨酸甲酯(L-NAME)和糖皮质激素皮质酮(corticosterone)存在条件下,基础状态或胰岛素诱导的肉鸡离体腓骨长肌的2-脱氧葡萄糖(2-DG)转运速率。结果表明:①SNP引起肌肉基础状态和胰岛素诱导的2-DG转运速率增加,表明NO是调节骨骼肌糖代谢的一个重要细胞因子。②皮质酮引起静态肌肉2-DG转运速率增加,可能与其破坏肌纤维膜的完整性有关。③皮质酮引起肌肉胰岛素诱导的2-DG转运速率下降,加入SNP后,胰岛素机能明显改善,表明应激早期,机体NO浓度的下降,可能与糖皮质激素诱发的胰岛素抵抗有一...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 孔雪  宋志刚  焦洪超  林海  
【目的】利用皮下注射人工合成糖皮质激素的方式模拟应激,通过核磁共振(NMR)技术研究应激及色氨酸对肉仔鸡下丘脑代谢状况的影响,为探明下丘脑食欲调控机制提供依据。【方法】10日龄AA肉仔鸡32只随机分为4组,早6:00禁食3h后,以2.0mg·kg-1BW剂量皮下注射地塞米松,同时灌注色氨酸(生理盐水溶解,500mg·kg-1BW),对照组分别皮下注射、灌服生理盐水,3h后取血浆及下丘脑。下丘脑用高氯酸萃取后进行核磁共振研究。【结果】通过1HNMR谱,发现应激改变了肉鸡下丘脑乳酸,葡萄糖,ATP,肌醇,3-羟基丁酸的相对含量;未检测到色氨酸信号的改变。【结论】NMR技术能够检测到应激状态下下丘脑...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 赵敏蝶   刘杰   赵茹茜  
[目的]本文旨在预测和筛选靶向调控鸡糖皮质激素受体(Glucocorticoid Receptor, GR)表达的microRNAs。[方法]用TargetScan、PicTar和miRDB三种软件分别预测靶向鸡GR 3'UTR microRNAs并取交集;构建包含鸡GR 3'UTR的重组质粒及突变质粒,通过双荧光素酶实验鉴定microRNA和鸡GR 3'UTR的靶向性;用TargetScan和miRDB两种软件分别预测候选microRNAs的靶基因,用DAVID软件对预测出的共同靶基因进行GO功能分析;Western blot检测分别过表达候选microRNAs对鸡DF1细胞 GR蛋白表达的影响。[结果]miR124-3p、miR142-3p、miR204/211、miR183、miR18-5p和miR181a/181b是三种软件预测靶向GR 3'UTR的交集microRNA;双荧光素酶实验的结果表明miR142-3p、miR204/211和miR18-5p靶向结合GR 3'UTR;两种软件预测三个候选microRNA的靶基因中都有GR且富集分子功能不同;在DF1细胞中过表达三个候选microRNA后,miR142-3p和miR204/211显著降低GR蛋白水平的表达(P < 0.05)。[结论] miR142-3p、miR204/211和miR18-5p靶向结合鸡GR 3'UTR且miR142-3p和miR204/21可以降低鸡DF1细胞中GR蛋白的表达水平。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 张荣庆  李素珍  周光宏  邵彩梅  韩正康  
随日粮中添加 clenbuterol 剂量增加,经汽车长途运输后,肉鸭行为发生异常,死亡率明显提高;心率明显加快,心律不齐,T 波高耸;血清中皮质醇、皮质酮水平显著升高.剂量、心率、血清皮质酮三者呈高度正相关,提示高剂量 clenbuterol 增加了肉鸭对应激的敏感性.
[期刊] 西南农业学报  [作者] 李青芝  陈叶雨  吴晓雲  刘亚  赖见生  李华  杨焕超  宋明江  龚全  林珏  
【目的】糖皮质激素受体(GR)参与了机体渗透调节、应激和免疫调节等多种生物学过程。因此,对GR表达特征的分析有利于揭示其在鱼类抗应激反应过程中的功能。【方法】以长江鲟转录组测序得到的Unigene序列作为基础,获得了GR的cDNA序列,同时研究了GR基因在各个组织及饥饿胁迫下的表达情况。【结果】GR基因开放阅读框为2316 bp,编码771个氨基酸,包含保守的锌指结构域和激素受体配体结合域,及鱼类特有的9-aa插入序列WRARQNMDG。GR在长江鲟各组织中广泛分布,其中,免疫器官脾脏、肝脏和鳃组织中表达量较高,在心脏和大脑组织中也有较高的表达水平。饥饿条件下,肝脏中GR相对表达量随饥饿时间的增加而逐渐上升,在饥饿7和14 d后,其表达量均显著高于对照组;肠道中GR在饥饿第7天表达量出现峰值,显著高于第0天(P<0.05)。复投喂后,肠道和肝脏中GR表达量恢复到了对照组水平。【结论】本研究表明GR参与了长江鲟对抗饥饿胁迫的应激反应过程。
[期刊] 中国农业科学  [作者] 冯京海  张敏红  郑姗姗  谢鹏  李军乔  
【目的】研究高温和氧化应激对体外培养肉鸡骨骼肌线粒体功能的影响,初步探讨高温影响肉鸡肌肉品质的机制。【方法】从16只2周龄AA肉鸡的左右小腿后侧分离腓骨长肌,使用不锈钢支架维持肌肉束的正常长度,在95%O2、5%CO2混合气体饱和条件下,体外孵育2h。分别测定升高孵育温度或在培养介质中添加邻苯三酚后,肉鸡腓骨长肌线粒体活性氧(ROS)产量、钙泵(Ca2+-ATPase)活性和乳酸含量的变化。【结果】升高培养温度显著提高肉鸡骨骼肌线粒体H2O2的产生量(P<0.0001),并影响肌纤...
[期刊] 水产学报  [作者] 陈凯  习丙文  滕涛  秦婷  潘良坤  谢骏  
为了解团头鲂糖皮质激素受体(GR)在应激反应中的调控机制,本研究以皮质醇注射模拟应激事件,采集组织样品,常规检测血糖、血清皮质醇水平;利用荧光定量PCR检测了gr在不同组织中的表达丰度及其参与调控的功能基因的表达变化;并通过常规石蜡切片开展了组织病理学研究。结果显示,gr1在脾脏、鳃、头肾等组织中有较高的表达量,gr2则在肝、垂体、肠等组织中具有较高的表达丰度。应激恢复过程中,下丘脑gr1表达量存在波动,gr2在0 h表达显著上调,gr1/gr2值逐渐增大;垂体中gr1和gr2均呈现先升后降的趋势,gr1/gr2值在2 h达到峰值水平;头肾中gr1表达量有波动,而gr2在0 h和2 h的表达量显著低于其他检测点的表达量,gr1/gr2值逐渐减小;肝脏中gr1的表达量在0 h和2 h的表达量显著高于其他检测点,gr2表达有上下波动的现象,gr1/gr2值有减小的趋势,而pepck表达则出现了显著上调,在2 h达到峰值;皮肤中gr1先升高后降低,gr2在0 h和2 h的表达量显著低于其他检测点,gr1/gr2值在2~8 h维持在较大值,而occ表达呈现先增加后降低的变化趋势;鳃中gr1与gr2均在2 h时发生了显著上调,gr1/gr2值在2~8 h维持在较大值,occ表达峰值出现在2 h。组织学研究显示鳃丝有增生现象,肾间组织中类淋巴细胞增多,其他所检视组织无明显病理改变。应激反应过程中gr在不同组织不同亚型间存在不同的表达变化,以及和不同组织器官中相关功能基因的相关性显示了GR在相关调控中的复杂性,而组织学研究结果则表明了应激反应存在诱发病理变化的风险。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 张晓威  梁静  夏东  赵茹茜  杨晓静  
为研究脂滴包被蛋白(Perilipin)在猪脂肪组织中的表达分布情况及其与糖皮质激素作用的关系,选取氟烷基因隐性纯合子猪(Halnn)和氟烷基因显性纯合子猪(HalNN)为动物模型,采用半定量实时荧光PCR(rqRT-PCR)技术分析其背脂和肾周脂中perilipin基因及脂肪代谢和糖皮质激素作用相关基因的表达。结果显示:两种氟烷基因型猪的体重、背膘厚和背膘指数无显著差异,但Halnn肾周脂重(P=0.09)和肾周脂指数(P=0.10)有低于HalNN猪的趋势。双因子方差分析结果表明Halnn猪脂肪组织中perilipin mRNA水平显著高于HalNN猪(P<0.05),而糖皮质激素受体基因...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 李晓庆   李盛   周晓铧   Mohamed Ahmed Fathi   李春梅  
[目的]孵化后期热处理能够在一定程度上提高肉鸡的耐热性,而骨骼肌和肝脏线粒体功能及温敏TRP离子通道与机体耐热性密切相关。因此,本试验旨在研究孵化后期热处理对雏鸡骨骼肌和肝脏温敏TRP离子通道及线粒体功能的影响。[方法] 选取240枚AA肉鸡种蛋随机分为3组 ( 每组8个重复,每个重复10枚种蛋 ) :1 ) CON组:37.5 ℃孵化;2 ) TM1组:在孵化期第16至18天39.5 ℃热处理3 h;3 ) TM2组:在孵化期第16至18天41.5 ℃热处理3 h。出雏后测定一日龄直肠温度,检测胸肌、腿肌和肝脏组织相关基因表达水平。[结果]与CON组相比,孵化后期热处理显著降低了一日龄雏鸡的直肠温度 ( P < 0.001 );TM1组雏鸡腿肌器官指数显著增加 ( P < 0.05 )。与CON组相比,TM2组雏鸡胸肌的avUCP基因表达显著降低 ( P < 0.01 ),COXⅣ ( P < 0.05 )、Tfam ( P < 0.001 )、PGC1α ( P < 0.05 )、ATP5B ( P < 0.001 ) 和IDH3a ( P < 0.01 ) 基因表达均显著增加,TRPV1、TRPV2和TRPV3基因表达均显著降低 ( P < 0.05 ),SERCA1基因表达显著增加 ( P < 0.001 )。与CON组相比,TM2组雏鸡腿肌的avUCP 基因表达显著降低 ( P < 0.01 ),ATP5B基因表达显著增加 ( P < 0.05 );TM2组雏鸡肝脏组织的Tfam和SERCA1基因表达显著增加 ( P < 0.05 )。相关性分析结果显示,温敏TRPs基因表达与线粒体经典产热基因avUCP和avANT表达呈正相关关系,与线粒体氧化磷酸化功能相关基因表达呈负相关关系。[结论]孵化后期热处理可通过降低一日龄雏鸡胸肌的温敏TRPs基因和线粒体产热相关基因表达水平,增加线粒体生物发生及氧化磷酸化功能相关基因表达水平,引起线粒体热适应性变化。
[期刊] 中国农业科学  [作者] 张兰霞  施正香  王新颖  耿爱莲  李保明  
【目的】研究紫外线对肉仔鸡骨骼生长的影响。【方法】将720只1日龄AA肉用仔鸡随机分成两组(公母各半),分别放到除光照制度外其它完全相同的两栋密闭鸡舍,第一舍采用国产普通白炽灯照射;第二舍从第2周开始增加使用紫外线保健灯。两舍内的温度、湿度及免疫接种程序均按常规要求进行。日常管理采用垫料平养,自由采食和饮水。【结果】用紫外保健灯照射肉仔鸡,可促进骨骼生长速度(前3周胫长增加,差异显著,P<0.05;第6周腿肌重增加了3.87%,差异显著,P<0.05);改善骨骼质量[胫骨矿密度增加了6.11%,差异极显著,P<0.01;血清钙、血清磷,碱性磷酸酶(AKP)活性都得到改善];提高了生产性能(体重...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 王庆云  杨维仁  杨在宾  宋修春  
【目的】研究不同无机磷水平日粮中添加植酸酶对肉鸡生长性能及骨骼的影响,以确定适宜的无机磷和植酸酶用量。【方法】选取1日龄肉鸡1 500只,随机分为5个处理,对照组日粮中添加16.3 g/kg磷酸氢钙,其余4组分别添加12.3,8.2,4.1和0 g/kg磷酸氢钙后再添加500 FTU/kg植酸酶,各组钙磷比为1.2~1.4,测定各组鸡的生长性能、胫骨鲜重、胫骨脱脂重、胫骨灰分和矿物质元素含量以及胫骨折断强度。【结果】未添加磷酸氢钙组肉鸡的日平均采食量、日增重均显著低于对照组(P...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 李伯江  李平华  吴望军  李齐发  黄瑞华  刘红林  
骨骼肌是动物躯体最重要的组成部分,占到产肉动物躯体的40%,肌纤维作为骨骼肌组织的主要成分,其类型的差异是影响产肉动物肌肉品质的重要因素之一。因此,骨骼肌的生长发育与产肉动物肉的产量有着密切的联系,而其生理生化特性的差异也将会直接影响到产肉动物屠宰之后肉品的质量。一般而言,动物骨骼肌肌纤维数目在胚胎发育期间基本上就已固定,出生之后,由于肌纤维的肥大,动物躯体肌肉块才表现出增大增粗。另外,动物肌肉块在生长发育过程中,其肌纤维组成类型并不是完全固定的,它们会随着骨骼肌对代谢与功能需求的改变而发生转变。骨骼肌的生长发育,以及骨骼肌肌纤维类型的发生与发展是一个非常复杂的生物学过程,受到许多信号通路与因...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 李方华  侯玲玲  马月辉  庞全海  关伟军  
【目的】探讨体外培养条件下北京油鸡骨骼肌卫星细胞分离、培养及鉴定的方法,建立适于北京油鸡骨骼肌卫星细胞体外扩增的培养体系,为今后进一步研究北京油鸡骨骼肌卫星细胞提供技术平台。【方法】以15日龄的鸡胚胸肌为材料,采用联合酶消化法分离骨骼肌卫星细胞,差速贴壁法纯化细胞,使用Pax7、Desmin、Myod等骨骼肌卫星细胞的特异性标志对所得细胞进行免疫荧光鉴定,随后进行成肌诱导分化,并比较了3种培养体系对骨骼肌卫星细胞增殖的影响。【结果】细胞免疫荧光鉴定结果呈阳性,证实所培养的细胞为北京油鸡骨骼肌卫星细胞;成肌诱导后,细胞相互融合形成多核的肌管,成肌特异性标志MHC表达呈阳性;对不同扩增培养体系比较...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 迟良  李兰  潘庆杰  刘焕奇  
【目的】克隆乌骨鸡黑色素皮质激素受体-1(melanocortin 1-receptor,MC1R)基因,并对其进行生物学分析和原核表达。【方法】采集乌骨鸡的肌肉组织,提取其总RNA,根据GenBank上公布的原鸡(Gallus gullus)MC1R基因序列设计引物,利用反转录RT-PCR克隆乌骨鸡MC1R基因,对其进行生物学分析,并构建原核表达载体pET32a-MC1R,在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达。【结果】乌骨鸡MC1R序列由945个碱基组成,编码314个氨基酸。成功构建了重组质粒pET32a-MC1R的原核表达系统,并且体外诱导获得了MC1R蛋白。【结论】成功克隆了乌骨鸡MC...
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 石岩  何诚  梁礼成  乔健  夏国良  
采用超速离心法分离提纯右心室肌原纤维和肌浆网 ,测定低温处理早期肉鸡心肌肌浆网钙泵 (Ca2 + ATP酶 )活性和肌浆网Ca2 +离子浓度 ,以揭示低温处理早期肉鸡右心室功能增强和肉鸡肺动脉高压的机制。结果表明 :1) 19、2 7、33和 4 0d低温处理组SRCa2 + ATP酶活性较对照组显著性升高 ,33d时活性达到最高。肺动脉高压组、肺动脉低压组SRCa2 + ATP酶活性较对照组显著性升高 ,其中肺动脉高压组SRCa2 + ATP酶活性是低压组的 3倍 ,且差异极显著 (P
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