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[期刊] 中国农业科学
[作者]
孔雪 宋志刚 焦洪超 林海
【目的】利用皮下注射人工合成糖皮质激素的方式模拟应激,通过核磁共振(NMR)技术研究应激及色氨酸对肉仔鸡下丘脑代谢状况的影响,为探明下丘脑食欲调控机制提供依据。【方法】10日龄AA肉仔鸡32只随机分为4组,早6:00禁食3h后,以2.0mg·kg-1BW剂量皮下注射地塞米松,同时灌注色氨酸(生理盐水溶解,500mg·kg-1BW),对照组分别皮下注射、灌服生理盐水,3h后取血浆及下丘脑。下丘脑用高氯酸萃取后进行核磁共振研究。【结果】通过1HNMR谱,发现应激改变了肉鸡下丘脑乳酸,葡萄糖,ATP,肌醇,3-羟基丁酸的相对含量;未检测到色氨酸信号的改变。【结论】NMR技术能够检测到应激状态下下丘脑...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
赵敏蝶 刘杰 赵茹茜
[目的]本文旨在预测和筛选靶向调控鸡糖皮质激素受体（Glucocorticoid Receptor， GR）表达的microRNAs。[方法]用TargetScan、PicTar和miRDB三种软件分别预测靶向鸡GR 3'UTR microRNAs并取交集；构建包含鸡GR 3'UTR的重组质粒及突变质粒，通过双荧光素酶实验鉴定microRNA和鸡GR 3'UTR的靶向性；用TargetScan和miRDB两种软件分别预测候选microRNAs的靶基因，用DAVID软件对预测出的共同靶基因进行GO功能分析；Western blot检测分别过表达候选microRNAs对鸡DF1细胞 GR蛋白表达的影响。[结果]miR124-3p、miR142-3p、miR204/211、miR183、miR18-5p和miR181a/181b是三种软件预测靶向GR 3'UTR的交集microRNA；双荧光素酶实验的结果表明miR142-3p、miR204/211和miR18-5p靶向结合GR 3'UTR；两种软件预测三个候选microRNA的靶基因中都有GR且富集分子功能不同；在DF1细胞中过表达三个候选microRNA后，miR142-3p和miR204/211显著降低GR蛋白水平的表达（P < 0.05）。[结论] miR142-3p、miR204/211和miR18-5p靶向结合鸡GR 3'UTR且miR142-3p和miR204/21可以降低鸡DF1细胞中GR蛋白的表达水平。
关键词：
鸡 糖皮质激素受体 microRNA
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
张荣庆 李素珍 周光宏 邵彩梅 韩正康
随日粮中添加 clenbuterol 剂量增加,经汽车长途运输后,肉鸭行为发生异常,死亡率明显提高;心率明显加快,心律不齐,T 波高耸;血清中皮质醇、皮质酮水平显著升高.剂量、心率、血清皮质酮三者呈高度正相关,提示高剂量 clenbuterol 增加了肉鸭对应激的敏感性.
[期刊] 西南农业学报
[作者]
赵景鹏 姜克杰 董辉
利用同位素双标法,测定在NO供体硝普钠(SNP)、NO合酶(NOS)抑制剂NG-硝基、L-精氨酸甲酯(L-NAME)和糖皮质激素皮质酮(corticosterone)存在条件下,基础状态或胰岛素诱导的肉鸡离体腓骨长肌的2-脱氧葡萄糖(2-DG)转运速率。结果表明:①SNP引起肌肉基础状态和胰岛素诱导的2-DG转运速率增加,表明NO是调节骨骼肌糖代谢的一个重要细胞因子。②皮质酮引起静态肌肉2-DG转运速率增加,可能与其破坏肌纤维膜的完整性有关。③皮质酮引起肌肉胰岛素诱导的2-DG转运速率下降,加入SNP后,胰岛素机能明显改善,表明应激早期,机体NO浓度的下降,可能与糖皮质激素诱发的胰岛素抵抗有一...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
黄金秀 罗绪刚 吕林 刘彬
【目的】研究初生肉仔鸡血清和下丘脑摄食调节相关激素的发育规律并进行品种间比较。【方法】观测了北京油鸡和AA鸡在孵出后0、1、3、5、7、9和11d的采食量,血清和下丘脑的胰岛素和瘦素及下丘脑NPY和α-MSH水平的变化。【结果】北京油鸡和AA鸡的生长规律基本一致,但前者的ADFI和ADG极显著低于后者(P<0.01)。北京油鸡血清胰岛素随日龄的波动较大,而AA鸡除0d外,其它日龄维持在7.5μIU·ml-1左右。北京油鸡血清瘦素在各个日龄间无明显差异,而AA鸡1和3d血清瘦素显著高于0d(P≤0.03)。北京油鸡下丘脑瘦素随日龄增长呈下降趋势,而AA鸡1d下丘脑瘦素高于0d(P<0.01),而...
关键词：
肉仔鸡 采食量 胰岛素 瘦素 神经肽
[期刊] 西南农业学报
[作者]
李青芝 陈叶雨 吴晓雲 刘亚 赖见生 李华 杨焕超 宋明江 龚全 林珏
【目的】糖皮质激素受体(GR)参与了机体渗透调节、应激和免疫调节等多种生物学过程。因此，对GR表达特征的分析有利于揭示其在鱼类抗应激反应过程中的功能。【方法】以长江鲟转录组测序得到的Unigene序列作为基础，获得了GR的cDNA序列，同时研究了GR基因在各个组织及饥饿胁迫下的表达情况。【结果】GR基因开放阅读框为2316 bp，编码771个氨基酸，包含保守的锌指结构域和激素受体配体结合域，及鱼类特有的9-aa插入序列WRARQNMDG。GR在长江鲟各组织中广泛分布，其中，免疫器官脾脏、肝脏和鳃组织中表达量较高，在心脏和大脑组织中也有较高的表达水平。饥饿条件下，肝脏中GR相对表达量随饥饿时间的增加而逐渐上升，在饥饿7和14 d后，其表达量均显著高于对照组；肠道中GR在饥饿第7天表达量出现峰值，显著高于第0天(P<0.05)。复投喂后，肠道和肝脏中GR表达量恢复到了对照组水平。【结论】本研究表明GR参与了长江鲟对抗饥饿胁迫的应激反应过程。
[期刊] 水产学报
[作者]
陈凯 习丙文 滕涛 秦婷 潘良坤 谢骏
为了解团头鲂糖皮质激素受体(GR)在应激反应中的调控机制,本研究以皮质醇注射模拟应激事件,采集组织样品,常规检测血糖、血清皮质醇水平;利用荧光定量PCR检测了gr在不同组织中的表达丰度及其参与调控的功能基因的表达变化;并通过常规石蜡切片开展了组织病理学研究。结果显示,gr1在脾脏、鳃、头肾等组织中有较高的表达量,gr2则在肝、垂体、肠等组织中具有较高的表达丰度。应激恢复过程中,下丘脑gr1表达量存在波动,gr2在0 h表达显著上调,gr1/gr2值逐渐增大;垂体中gr1和gr2均呈现先升后降的趋势,gr1/gr2值在2 h达到峰值水平;头肾中gr1表达量有波动,而gr2在0 h和2 h的表达量显著低于其他检测点的表达量,gr1/gr2值逐渐减小;肝脏中gr1的表达量在0 h和2 h的表达量显著高于其他检测点,gr2表达有上下波动的现象,gr1/gr2值有减小的趋势,而pepck表达则出现了显著上调,在2 h达到峰值;皮肤中gr1先升高后降低,gr2在0 h和2 h的表达量显著低于其他检测点,gr1/gr2值在2～8 h维持在较大值,而occ表达呈现先增加后降低的变化趋势;鳃中gr1与gr2均在2 h时发生了显著上调,gr1/gr2值在2～8 h维持在较大值,occ表达峰值出现在2 h。组织学研究显示鳃丝有增生现象,肾间组织中类淋巴细胞增多,其他所检视组织无明显病理改变。应激反应过程中gr在不同组织不同亚型间存在不同的表达变化,以及和不同组织器官中相关功能基因的相关性显示了GR在相关调控中的复杂性,而组织学研究结果则表明了应激反应存在诱发病理变化的风险。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
张晓威 梁静 夏东 赵茹茜 杨晓静
为研究脂滴包被蛋白(Perilipin)在猪脂肪组织中的表达分布情况及其与糖皮质激素作用的关系,选取氟烷基因隐性纯合子猪(Halnn)和氟烷基因显性纯合子猪(HalNN)为动物模型,采用半定量实时荧光PCR(rqRT-PCR)技术分析其背脂和肾周脂中perilipin基因及脂肪代谢和糖皮质激素作用相关基因的表达。结果显示:两种氟烷基因型猪的体重、背膘厚和背膘指数无显著差异,但Halnn肾周脂重(P=0.09)和肾周脂指数(P=0.10)有低于HalNN猪的趋势。双因子方差分析结果表明Halnn猪脂肪组织中perilipin mRNA水平显著高于HalNN猪(P<0.05),而糖皮质激素受体基因...
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
俞明远 王利利 马彤辉 张文君 王齐桓 秦力猛 滕可导 马云飞
为研究运输应激对动物行为、内分泌以及脑内神经型一氧化氮合酶（ＮｅｕｒｏＮａｌ Ｎｉｔｒｉｃ ｏｘｉｄｅ ｓｙＮｔｈａｓｅ，ＮＮｏｓ）表达的影响，采用摇床加制动束缚模拟公路运输途中的摇晃、拥挤和限制活动等因素，建立大鼠运输应激模型（３５℃，１２０ｒ／ｍｉＮ，应激２ｈ）。将１８只大鼠随机分为对照组、应激组和应激恢复组，采用旷场试验评定大鼠行为反应，放免法测定大鼠血清皮质酮含量，免疫组化法检测大鼠下丘脑视上核（ｓｕｐｒａｏｐｔｉｃ Ｎｕｃｌｅｕｓ，ｓｏＮ）中ＮＮｏｓ的表达。结果显示，与对照组相比，应激组大鼠的自主活动明显减少（ｐ＜０．０１），血清皮质酮（ｃｏｒｔｉｃｏｓｔｅｒｏＮｅ，ｃｏｒｔ）含量显．．．
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
倪迎冬 袁丽霞 饶开晴 李玥 杨晓静 赵茹茜
采用隔日限饲方式对0～2周龄(早期)和7～9周龄(后期)三黄肉鸡进行限饲处理,分别于2和9周龄时各组随机选取10羽肉鸡宰杀后采样。结果显示:与对照组相比,早期限饲组鸡体重极显著降低(P0.05,n=10);早期限饲组鸡的平均日采食量低于对照组,而后期限饲组鸡平均日采食量升高;限饲期间肉鸡料重比增加,而自由采食期间无差异。Real-time PCR测定结果显示:肉鸡下丘脑神经肽Y(NPY)、阿片-促黑素细胞皮质素原(POMC)和瘦素(leptin)受体mRNA转录丰度均随日龄增加而显著升高...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
张根华 赵茹茜 周浩良 陈伟华 陈杰
应用地高辛标记反意生长抑素ｃＲＮＡ探针原位杂交技术，研究５日龄ＡＡ肉鸡生长抑素ｍＲＮＡ阳性神经元胞体在下丘脑内的分布。结果表明：生长抑素ｍＲＮＡ阳性神经元主要分布在下丘脑外侧核吻侧部、后内侧核和后核吻侧部以及乳头体外侧核。生长抑素ｍＲＮＡ阳性神经元胞体为圆形、梭形和椭圆形，直径７～２０μｍ。胞质内均有强度不等的黑色或蓝黑色杂交反应物。生长抑素ｍＲＮＡ神经元胞体在下丘脑各核区的分布数目存在明显差异，其中下丘脑外侧核内的阳性胞体密度高于其它核区，提示下丘脑外侧核的生长抑素神经元的生理功能很活跃。有些核区显示的生长抑素ｍＲＮＡ阳性神经元有突起，说明这些神经元的树突或轴突可能可以储存生长抑素ｍＲＮＡ。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
钱庄 朱怀森 吕英军 刘红林 鲍恩东
[目的]本文旨在确定应激对母猪排卵后黄体组织的正常发育及其功能的影响。[方法]采用注射促肾上腺皮质激素(ACTH)的方式模拟应激状态,利用RT-q PCR和免疫组织化学法研究新生黄体的类固醇合成能力和组织发育状况。[结果]ACTH组母猪血浆中皮质醇含量明显高于对照组母猪,新生黄体内胆固醇侧链裂解酶P450(P450scc)和3β-羟基类固醇脱氢酶(3β-HSD)的表达量比对照组母猪明显下调;ACTH组母猪基质金属蛋白(MMP)和血管内皮生长因子(VEGFa)的表达量明显低于对照组母猪;组织学检测结果也显示
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
许生友 陈兴勇 姜润深 耿照玉
研究优质黄羽肉鸡热应激期间肝脏和下丘脑组织中热休克蛋白70(heat shock protein 70,HSP70)基因mRNA的动态表达规律,为揭示该类型优质鸡种热应激反应机理提供参考。64日龄Anak 40(♂)×岭南黄(♀)杂交后代母鸡置于(38±1)℃恒温室内进行持续热应激处理,采取荧光定量PCR方法分别测定热应激起始(0 h)、热应激后12、24、36、48和60 h肝脏和下丘脑组织中HSP70 mRNA的表达水平。随着热应激时间的延长,肝脏和下丘脑组织中HSP70 mRNA表达水平均显著上升,至热应激36 h时表达水平达高峰值,约为应激起始表达水平的7倍,差异显著(P<0.05);...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
迟良 李兰 潘庆杰 刘焕奇
【目的】克隆乌骨鸡黑色素皮质激素受体-1(melanocortin 1-receptor,MC1R)基因,并对其进行生物学分析和原核表达。【方法】采集乌骨鸡的肌肉组织,提取其总RNA,根据GenBank上公布的原鸡(Gallus gullus)MC1R基因序列设计引物,利用反转录RT-PCR克隆乌骨鸡MC1R基因,对其进行生物学分析,并构建原核表达载体pET32a-MC1R,在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达。【结果】乌骨鸡MC1R序列由945个碱基组成,编码314个氨基酸。成功构建了重组质粒pET32a-MC1R的原核表达系统,并且体外诱导获得了MC1R蛋白。【结论】成功克隆了乌骨鸡MC...
关键词：
乌骨鸡 黑色素 MC1R 原核表达
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
陈兴勇 李丽 姜润深 耿照玉
为研究冷应激发生机制以及冷应激过程中下丘脑神经内分泌系统基因表达变化,选取28日龄淮南麻黄鸡为研究对象,采用全基因组表达谱芯片技术分析冷应激24h后下丘脑组织差异表达基因。通过比较淮南麻黄鸡冷应激24h前后下丘脑组织基因表达谱,表达倍数>3倍的基因共877个,其中下调基因334个,主要涉及HAAO、CHRNA9及STAM2等信号转导接头分子基因的低表达;上调基因543个,主要为CCK、NPY及其受体基因、CAMK2A、SST及TRH等基因。对差异表达基因参与的生物学过程分析可见,在冷应激24h过程中,鸡下丘脑首先启动神经受体-配体相互作用,刺激鸡体产生采食欲望,随后启动脂质代谢途径以供应机体能...
关键词：
淮南麻黄鸡 冷应激 下丘脑 基因表达谱
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