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[期刊] 中国农业科学
[作者]
曾得意 王鸣华 施海燕 李波
【目的】制备精喹禾灵的特异性抗体并建立精喹禾灵的间接竞争ELISA测定方法。【方法】精喹禾灵在碱性条件下水解合成了半抗原精喹禾灵酸,并与载体蛋白BSA和OVA偶联,分别合成了免疫抗原和包被抗原,偶联比分别为29.23和7.87。将Hapten-BSA免疫兔子获得多克隆抗体。【结果】抗血清的效价为200000。经酶联免疫吸附反应分析(ELISA)测定,精喹禾灵的抑制中浓度(IC50)为0.03495μg·ml-1,最低检测浓度(IC10)为0.002μg·ml-1,检测范围为0.002～0.5μg·ml-1。其与结构相似的物质几乎没有交叉反应,表明该方法具有很强的特异性,且在水样中的添加回收率为...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
辛泽毓 周燮 张能刚
以茉莉酸－牛血清白蛋白复合物作为免疫原，获得了兔抗茉莉酸甲酯抗血清，并在此基础上建立了茉莉酸固相抗原型ＥＬＩＳＡ。此外，利用茉莉酸甲酯和辣根过氧化物酶标记的茉莉酸对鼠抗茉莉酸甲酯单克隆抗体的竞争结合，建立了茉莉酸固相抗体型ＥＬＩＳＡ。上述两种ＥＬＩＳＡ的检测灵敏度分别为０．４２ｐｍｏｌ和０．２０ｐｍｏｌ，检测范围分别为０．９８～１０００ｐｍｏｌ和０．６３～２０ｐｍｏｌ，批内变异系数分别为３．４４％和１．６２％，批间变异系数分别为２．４７％和２．０６％。样品的平均回收率分别为７３．３％和７６．９％。
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
张文君 朱文达 何燕红
通过田间试验观察10%精喹禾灵乳油对花生田禾本科杂草马唐和稗草的防除效果,并测定花生田间离地不同高度层的透光率,分析杂草防除对花生田间光照、养分和产量的影响。结果表明:10%精喹禾灵乳油能有效控制花生田禾本科杂草的危害,对马唐的密度防效和鲜重防效分别为90.40%~100.00%和91.70%~100.00%,对稗草的密度防效和鲜重防效分别为89.64%~99.81%和89.99%~99.79%;施用10%精喹禾灵乳油能显著提高花生田间的透光率,降低杂草对田间养分的吸收,促进光合作用的进行,从而提高花生的产量。
关键词：
精喹禾灵 花生 透光率 养分 产量
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
孙亚林 朱文达 陈文勇 袁友明 王明锐
采用田间试验和仪器测定分析的方法,观察了10.8%精喹禾灵乳油对夏大豆田禾本科杂草稗草、马唐、牛筋草的防除效果,以及杂草防除对田间光照、养分和大豆产量的影响。结果表明:10.8%精喹禾灵乳油能有效控制夏大豆田禾本科杂草的发生危害,对稗草、马唐、牛筋草的综合密度防效为94.00%~100.00%,综合鲜重防效为95.02%~100.00%;施用10.8%精喹禾灵乳油能显著提高大豆田间的透光率,降低杂草对田间养分的吸收,促进光合作用的进行,从而提高大豆产量。
关键词：
精喹禾灵 夏大豆 控草效果
[期刊] 华北农学报
[作者]
黄少白 周燮
用碳二亚胺(EDC)法将赤霉素A_4(GA_4)与卵清蛋白(OVA)连接,形成GA_4-OVA复合物用于包板,利用GA_4-Me与GA_4-OVA对兔抗GA_4-PAbs竞争结合反应,建立了GA_(1,3,4,7)间接酶联免疫检测法(ELISA).其灵敏度、检测范围和最小检测样品量分别为45pg,0.2～200ng和50～500mg,样品的平均回收率为97%,批内和批间的变异系数分别为4.2%和4.8%.
关键词：
赤霉素 酶联免疫检测法(ELISA)
[期刊] 中国农业科学
[作者]
李新朋 姜金庆 钱爱东 王自良 范国英 单晓峰 康元环 李艺
【目的】氟喹诺酮类药物(FQs)在畜牧业中广泛用于预防和治疗细菌性疾病,不合理使用导致在动物性食品中残留,严重危害消费者健康,其检测受到世界各国重视。制备抗多种FQs单克隆抗体(m Abs),建立间接竞争ELISA(ic ELISA)检测方法,为动物性食品中FQs多残留检测奠定基础。【方法】环丙沙星(CPFX)羧基上引入氨基丁酸后为半抗原(CPFX-A),质谱鉴定;分别用碳二亚胺法(DDC)和混合酸干法将半抗原与牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联合成免疫原(CPFX-A-BSA)和包被原(CPFX-A-OVA),紫外和红外光谱鉴定是否偶联成功;CPFX-A-BSA免疫Balb/c小...
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
单国民 钱传范 过琴媛 程明 苏巧玲
根据三氮苯类除草剂的结构特征，合成了三种不同的抗原，制备了三种高效价抗体，建立了检测莠去津、西玛津、扑草净残留量的酶联免疫吸附测定（ELISA）方法，方法的检测极限分别为1ng·mL－1，0．5ng·mL－1和2ng·mL－1。三种抗体对待检农药均有很高的特异性，H1BSA抗体对莠去津、西玛津、扑草净、西草净和环嗪酮的交叉反应分别为100％，10％，7．1％，1．4％和0；H2BSA抗体分别为44．6％，100％，0．31％，0．25％和0；H3BSA抗体分别为50．1％，8．9％，100％，25．1％和0．08％。对五种非三氯苯类除草剂丁草胺、氟乐灵、麦草畏、甲草胺、氟磺胺草醚均无交叉反应。
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
朱文达 郭嗣斌
为明确除草剂17.5%草除.精喹禾灵乳油在移栽油菜田的应用前景,研究了对油菜田杂草的控制作用及该药剂对田间光照强度和油菜产量的影响。结果表明:17.5%草除.精喹禾灵乳油对油菜田杂草具有较好的防除效果,药后第20天的总体防效为98.82%-99.94%,随时间的延长药效略有下降,120 d内的控草效果仍可达92%以上;17.5%草除.精喹乳油对田间主要杂草看麦娘Alopecurus aequalis、牛繁缕Malachium aquaticum及菵草Beckmannia syzigachne的防除效果都较好,用药后40 d对3种杂草的防效都在96%以上,120 d以内防效仍可以达到86%以上;...
[期刊] 水产学报
[作者]
纪元 刘岩 宫庆礼
为进一步扩大国内养殖河豚鱼消费市场提供依据,应用小鼠生物法监测了我国辽宁、河北、山东,江苏和福建4种养殖河豚鱼(红鳍东方鲀,菊黄东方鲀,双斑东方鲀和暗纹东方鲀4种组织(皮、肉、肝脏和性腺)中河豚毒素(TTX)含量及周年变化,并用酶联免疫法(ELISA)同步检测了山东红鳍东方鲀的皮,肉和肝脏各组及个别卵巢样品。结果4种养殖河豚鱼的皮,肉和肝脏每组平均含毒量均属无毒(小鼠生物法检测结果小于0.5μg/g,ELISA检测结果小于0.8μg/g)。卵巢发现一强毒例,精巢则全部无毒。通过监测,发现养殖河豚鱼组织器官的毒力呈现一定的周年变化。ELISA法与小鼠生物试验测得的结果相符合。养殖河豚鱼皮,肉和精...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
李华 祭芳 徐剑宏 王裕中 史建荣
【目的】建立快速、灵敏、有效的毒素检测方法,以保证麦类作物的安全生产以及谷物食品的安全性。【方法】以主要赤霉病菌毒素脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)为对象,利用半琥珀酰化脱氧雪腐镰刀菌烯醇的牛血清蛋白偶联物(3-HS-DON-BSA)作免疫原,分别采用腹膜腔注射法和颈、背部多点注射法免疫Balb/c小鼠和豚鼠,获得DON的多抗血清,建立间接ELISA检测方法。【结果】多抗豚鼠血清的效价达到1∶6400,而小鼠混合血清的效价则为1∶12800。引起DON抗体最大结合50%抑制时,所需DON及其类似物3-Ac-DON和T-2毒素的量分别为63μg·ml-1、114μg·ml-1和>1000μg·ml-...
[期刊] 林业科学
[作者]
张奇 李海燕 白钢 熊惠龙 杨文博
制备松材线虫特定纤维素酶的多克隆抗体(Anti_BXC60),通过SDS_PAGE、纤维素酶酶染分析、免疫印迹以及ELISA方法考察该抗血清的特异性。进一步利用抗松材线虫全蛋白抗体(Anti_BX)和Anti_BXC60抗体,建立线虫分泌性蛋白在PVDF膜上双重染色的方法。双重染色分析的结果表明:松材线虫主要通过分泌孔向体外分泌大量的分泌蛋白,而纤维素酶的分泌方式与其他植物线虫相似,是通过口针向外分泌。
关键词：
松材线虫 纤维素酶 双重染色
[期刊] 华北农学报
[作者]
吴仁海 孙慧慧 苏旺苍 鲁传涛 王恒亮 张永超 马毅辉
以粳稻(郑稻18)和籼稻(绵优838)为试验材料,采用水培、盆栽及田间试验相结合,研究了水稻不同生育期对精恶唑禾草灵的敏感性及生理反应。在水稻萌发期,精恶唑禾草灵对粳稻和籼稻胚根生长的抑制中浓度(IC50)分别为0.168 7,0.163 7μg/mL,表明二者在芽期对精恶唑禾草灵均较为敏感。在水稻2～3叶期喷施精恶唑禾草灵后15,30 d,籼稻的IC50分别为279.56,173.49μg/mL,而试验剂量下(12.5～400μg/mL)粳稻生长抑制率低于30%,表明粳稻对精恶唑禾草灵有较高的耐药性。在粳稻4～5叶期喷施精恶唑禾草灵,结果显示,18.45 a.i g/hm2剂量对禾本科杂草防...
关键词：
精恶唑禾草灵 粳稻 籼稻 药害 保护酶系
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
马慧鑫 王磊 汪林庆 周茜 陈松林
本研究克隆得到牙鲆(Paralichthys olivaceus)精氨酸酶Ⅱ基因(ArginaseⅡ,Arg-Ⅱ)全长cDNA序列,并检测了Arg-Ⅱ在牙鲆免疫组织和细菌感染过程中的时空表达模式。结果显示,Arg-Ⅱ基因cDNA全长1882 bp,包含1050 bp开放阅读框,编码349个氨基酸(预测分子量为38.02 kDa,等电点为6.42)。Arg-Ⅱ基因编码的氨基酸序列具有典型的精氨酸酶结构特征,推测与哺乳动物中的功能类似。系统进化分析显示,鱼类Arg-Ⅱ基因合成一簇,其中,Arg-Ⅱ基因与鲈鱼(Lates calcarifer)相关度最高(93%)。实时荧光定量结果显示,Arg-Ⅱ基因在健康牙鲆的肝、脾和鳃等免疫组织中有较高表达。进一步研究发现,经迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)感染的牙鲆成鱼中,主要免疫组织中Arg-ⅡmRNA的表达量在细菌感染后6~12 h显著上调,随后表达量恢复正常。离体培养的牙鲆巨噬细胞经迟缓爱德华氏菌感染后,Arg-Ⅱ基因也呈显著上调模式。因此,本研究结果表明,Arg-Ⅱ基因参与牙鲆响应迟缓爱德华氏菌感染的免疫过程,揭示Arg-Ⅱ基因可能在牙鲆抗病免疫中发挥重要作用。
[期刊] 中国农业科学
[作者]
李向梅 王战辉 肖希龙 王照鹏 温凯 吴小平 夏曦 武晋孝 江海洋
【目的】喹诺酮类药物和庆大霉素均为高效、广谱抗菌药物,对大多数革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌都具有显著的抗菌效果,是中国畜牧业和水产业中常用的两类兽药。由于这两类药物在动物源性食品中的残留可能导致对人类健康的危害,因此,为了保护消费者的健康,研究和制定动物源性食品中同时检测这两类药物的残留检测方法对完善中国的食品安全监测体系具有重要意义。【方法】建立了同时检测牛奶中13种喹诺酮类和庆大霉素残留的胶体金免疫层析方法。采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,并对喹诺酮类和庆大霉素单克隆抗体按比例进行混合标记。同时,采用方阵法系统研究了胶体金标记这两类抗体时的pH值和抗体用量对灵敏度的影响,并对这两类药物抗...
关键词：
喹诺酮类 庆大霉素 残留 胶体金免疫层析
[期刊] 海洋渔业
[作者]
于宁 华雪铭 赵朝阳 冯文和 周鑫 王军 朱站英 周洪琪
实验测定了两种规格(27.0±2.0、12.0±2.0 g)野生克氏原螯虾的肌肉生化成分、组织消化酶和免疫酶活性等。结果表明:大规格虾的肌肉能量以及整虾除肌肉外其它部分的能量均高于小规格虾,肌肉中天冬氨酸、谷氨酸和精氨酸的含量也均高于小规格虾;肝胰脏和肠道内蛋白酶、淀粉酶活力随pH值的增大均呈现先上升后下降的变化规律,两种规格虾肠道中蛋白酶和淀粉酶以及小规格虾肝胰脏中淀粉酶的最适pH值均为7.2,而小规格虾肝胰脏中蛋白酶最适pH值则为7.6;大规格虾血清中血蓝蛋白的含量高于小规格虾,而血清和肝胰脏中超氧化物歧化酶和溶菌酶的活性则都低于小规格虾。
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