【目的】研究类胡萝卜素裂解双加氧酶基因AgCCD4在不同颜色芹菜中的基因型及相对表达量,结合类胡萝卜素含量测定,分析AgCCD4对芹菜组织中类胡萝卜素积累的影响,为进一步研究CCD亚家族基因在不同颜色芹菜组织着色中的作用奠定基础。【方法】采用同源比对法检索芹菜基因组中的CCD家族基因AgCCD4。从‘津南实芹’‘黄太极’‘紫杆一号’和‘赛雪’4种不同颜色芹菜中分别克隆获得芹菜类胡萝卜素裂解双加氧酶基因AgCCD4。对芹菜AgCCD4的蛋白氨基酸序列组成、蛋白质理化性质、亲缘关系、空间结构等进行分析,预测其保守结构域和二级结构以及建立三级结构模型。采用荧光定量PCR技术检测AgCCD4在不同颜色芹菜不同组织中的表达水平。采用超高效液相色谱(UPLC)对4种颜色芹菜的叶片、叶柄和根中叶黄素和β-胡萝卜素的含量进行测定。采用农杆菌介导的瞬时表达转化法,研究AgCCD4蛋白在烟草表皮细胞中的亚细胞定位。【结果】序列分析结果表明AgCCD4包含1个长度为1 779 bp的开放阅读框(ORF),编码592个氨基酸。‘赛雪’中AgCCD4的核苷酸序列与其他品种相比存在18个碱基和9个氨基酸位点的差异,蛋白质相对分子质量分别为65.07 kD和65.12 kD,等电点分别为6.03和5.95。进化树分析表明,芹菜AgCCD4与菊科的向日葵和莴苣CCD4进化关系较近。AgCCD4蛋白的二级结构中包含多个α-螺旋和无规则卷曲,三级结构主要以β-折叠为主。亚细胞定位分析表明AgCCD4是一个定位在叶绿体上的蛋白。对4种颜色芹菜叶片、叶柄和根中叶黄素和β-胡萝卜素的含量进行测定,结果显示芹菜根中均未检测到叶黄素和β-胡萝卜素,叶片中叶黄素和β-胡萝卜素含量均以‘津南实芹’最高,分别为1 102.58μg·g-1 DW和241.92μg·g-1DW,‘紫杆一号’最低,分别为57.12μg·g-1 DW和45.65μg·g-1 DW。在叶柄中,仅在‘黄太极’中检测到β-胡萝卜素,叶黄素也只在‘津南实芹’和‘黄太极’中被检测到。荧光定量PCR结果显示,AgCCD4在芹菜叶片中表达量最高,在根中最低。‘紫杆一号’和‘赛雪’叶片中AgCCD4的相对表达量相似,都显著高于‘津南实芹’和‘黄太极’。【结论】本研究从4种颜色芹菜中分别克隆得到AgCCD4,其中‘赛雪’的基因序列和其他品种存在差异,其蛋白均含有RPE65保守结构域。AgCCD4表达量在芹菜不同组织中具有显著差异。芹菜中AgCCD4表达量与类胡萝卜素含量呈负相关。植物体中类胡萝卜素的含量和种类影响植株的颜色变化,AgCCD4可能通过降解类胡萝卜素来调控芹菜组织着色。

【目的】克隆万寿菊(Tagetes erecta L.‘Scarletade’)类胡萝卜素裂解双加氧酶基因CCD1(TeCCD1),分析其序列特征和表达特性,为阐明其在类胡萝卜素降解途径中生物学功能及进一步探讨万寿菊花色形成机理提供理论基础。【方法】依据万寿菊花蕾转录组数据,利用同源序列比对结果设计引物,结合RT-PCR技术克隆获得万寿菊CCD1 cDNA全长,分析其序列特征;利用Real-time PCR分析舌状花未开花蕾、半开花蕾、开放的头状花序和完全开放的头状花序4个不同发育时期的基因表达特性。【结

为研究视黄酸(RA)对肉仔鸡不同组织内β胡萝卜素15,15′-加单氧酶(βCMOOX)活性及其mRNA转录的调控,将32只18日龄肉仔鸡随机均分为4组,分别为正常日粮(ND)组、低维生素A对照组(LVA)、全反式视黄酸(ATRA)组和13顺式视黄酸(13-cisRA)组,均饲喂基础日粮至59日龄。56～59日龄,每组每只鸡分别灌服1mL大豆油、1mL大豆油、4μmol.L-1ATRA和4μmol.L-113cisRA。结果表明:ATRA显著降低十二指肠(P<0.01)、空肠(P<0.01)和肾脏(P<0.05)内βCMOOX活性,且显著抑制十二指肠(P<0.01)、空肠(P<0.01)和肾脏(...

用β-胡萝卜素和玉米黄质对萝卜芽苗菜进行处理，得出了不同类胡萝卜素种类和浓度对萝卜芽苗菜下胚轴长度和抗氧化能力的影响。结果表明：与对照相比，β-胡萝卜素和玉米黄质处理均能促进芽苗菜下胚轴长度的增长，降低芽苗菜贮藏后丙二醛（MDA）含量和超氧阴离子（O_2·~–）生成速率，并且适宜浓度可有效提高芽苗菜贮藏后的抗氧化酶（POD、SOD）活性以及DPPH自由基清除能力。在β-胡萝卜素和玉米黄质处理中，5 mg/L的β-胡萝卜素或20mg/L的玉米黄质处理下萝卜芽苗菜的下胚轴最长；和对照组相比，贮藏后萝卜芽苗菜中O_2·~–生成速率和MDA含量在5～10 mg/L的β-胡萝卜素和10～20 mg/L的玉米黄质处理下较低；40 mg/L的β-胡萝卜素和20～40mg/L的玉米黄质处理下的萝卜芽苗菜在贮藏后具有较高的POD、SOD活性以及DPPH自由基清除能力。综合分析表明，与β-胡萝卜素处理相比，玉米黄质处理可以使萝卜芽苗菜具有较低的MDA含量和较高的POD活性，更有利于维持芽苗菜的贮藏品质，延缓腐烂的发生。

【目的】分析不同类型枇杷果实着色过程中果肉类胡萝卜素的变化特点,探讨果肉外观颜色差异形成的原因。【方法】以‘大红袍’、‘青种’分别代表红沙和白沙两类不同枇杷品种,自果实开始着色起,分期采样,进行枇杷果肉类胡萝卜素提取、纯化和HPLC分析。【结果】果实进入着色期后,果肉叶黄质含量迅速下降,至果实成熟时下降平缓,而α-胡萝卜素、β-胡萝卜素、β-隐黄质和玉米黄素成分均呈上升趋势,尤其在采收前7～14d上升迅速。果实成熟后,‘大红袍’果肉的类胡萝卜素总量为‘青种’的2倍以上;两品种果肉叶黄素类色素含量接近,但类胡萝卜素含量差异较大,‘大红袍’的胡萝卜素含量是‘青种’的4倍左右。【结论】胡萝卜素积累的...

为研究甲基萘醌MK-4对类胡萝卜素(β-胡萝卜素和番茄红素)氧化的保护作用,通过模拟胃液低pH条件下铁诱导的类胡萝卜素的氧化,评价了甲基萘醌MK-4对膳食类胡萝卜素保留率的影响,并以β-胡萝卜素为例,利用液相色谱-质谱(LC-MS)分别鉴定了2种不同体系(不加MK-4,加入MK-4)中β-胡萝卜素的反应产物的种类和数量。结果表明:甲基萘醌MK-4对Fe(Ⅱ)诱导的类胡萝卜素氧化的保护效果最佳,保留率可提高至原来的2倍。在胃液中,当Fe(Ⅱ)存在时,不加MK-4时,β-胡萝卜素的反应产物涉及的种类和数量最多,包括顺式异构体、环氧化合物、醛类化合物以及降解产物4类,共计10种化合物;而加入MK-4后,β-胡萝卜素的反应产物减少至7种化合物,未检测到醛类化合物及降解产物。通过对比反应前后胶束中的MK-4的高效液相色谱图发现,MK-4对β-胡萝卜素的保护作用并不是消耗其自身。

【目的】研究密集烘烤定色阶段烤烟类胡萝卜素降解及相关酶活性的变化,为密集烤房烘烤工艺优化和完善提供理论依据。【方法】采用河南农业大学设计的电热式温湿自控密集烤烟箱,按照低温中湿变黄、中湿定色烘烤工艺,对比研究定色期不同升温速度对类胡萝卜素各组分含量变化及相关酶活性的影响。【结果】类胡萝卜素含量随烘烤过程推进逐渐降低,慢速升温烘烤(T1)类胡萝卜素各组分(β-胡萝卜素、叶黄素、新黄质、紫黄质)降解量相对较大,比快速升温烘烤(T2)分别高10%、2%、32%和32%,但处理间差异不显著(P>0.05)。烘烤条件对酶活性影响显著,并且脂氧合酶(LOX)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)、多酚氧化酶(PPO)...

利用降落PCR的方法 ,从谷子基因组中获得lcy b基因。全序列分析表明 ,其开放阅读框为 1782bp ,编码的蛋白由 5 94个氨基酸组成 ,分子质量为 6 772 4u。将获得的谷子lcy b基因序列与已发表的其他植物lcy b基因序列比较 ,发现所得到的基因序列与单子叶植物黄水仙的同源性明显高于与双子叶植物的同源性。蛋白质序列比较发现中部和尾部的部分区段内氨基酸同源性较高 ,且都存在FLYAMP序列和FAD/NAD(P)结合区等植物LCY B的特征序列。Southern杂交结果表明 ,lcy b在基因组中以单拷贝存在。

以不同香型烤烟C3F烟叶为材料,采用GC/MS方法,分析比较了烟叶中的类胡萝卜素降解香气物质。结果表明:不同香型烤烟的类胡萝卜素降解形成的各种香气物质含量存在较大差异,表现为中间香型>浓香型>清香型,但是金合欢基丙酮A、β-大马酮、巨豆三烯酮B、巨豆三烯酮D、β-紫罗兰酮等物质在三者中均占有较高比例。对类胡萝卜素降解香气物质与感官评吸质量的相关分析发现,清香型烤烟中二氢猕猴桃内酯与香韵呈显著正相关,芳樟醇、金合欢基丙酮和类胡萝卜素总量与香气量呈显著正相关;中间型烤烟中,浓度与芳樟醇、β-大马酮、β-二氢大马酮呈显著或极显著负相关;浓香型烤烟中,多数物质与各评吸指标呈显著或极显著的正相关。

对 4种类胡萝卜素的高效液相色谱 (HPLC)测定方法进行比较 ,选出了适合本实验室的测定方法 :分析柱为Nova pakC18(3 9mm× 30 0mm) ,以乙腈和三氯甲烷 (92∶8)为流动相 ,检测波长为 4 70nm和 4 5 0nm双波长 ,并采用该方法对胡萝卜、南瓜、羽衣甘蓝 3种蔬菜的数百份样品进行了α 胡萝卜素、β 胡萝卜素及茄红素含量的测定

【目的】以橙色叶球大白菜(Brassica campestris ssp.pekinensis(Lour.)Olsson)为试材,研究类胡萝卜素的提取条件及其含量和组分的测定方法。【方法】通过单因素试验和L12(43)正交试验,筛选有机溶剂提取类胡萝卜素的最佳提取条件,利用分光光度法对类胡萝卜素的总量进行测定;建立类胡萝卜素成分的RP-HPLC测定体系,并利用RP-HPLC法对类胡萝卜素的主要成分叶黄素、番茄红素、β-胡萝卜素进行分析。【结果】橙色叶球大白菜类胡萝卜素提取的最佳工艺为:以乙醇-丙酮溶液(V(乙醇)∶V(丙酮)=1∶1)为溶剂,料(g)液(mL)比为1∶20,在60℃下浸提50m...

以油棕果为材料，分别提取油棕果5个发育时期的类胡萝卜素，采用高效液相色谱法进行分离，鉴定其中叶黄素、蕃茄红素、α-胡萝卜素、β-胡萝卜素的成分和含量，并分析其变化规律。结果表明，高效液相色谱法可对油棕果中的叶黄素、蕃茄红素、α-胡萝卜素、β-胡萝卜素完全分离并进行定性和定量分析。随着油棕果实成熟度的增加，α-胡萝卜素和β-胡萝卜素的含量逐渐增加，其中在果实发育后期，β-胡萝卜素是α-胡萝卜素的3～4倍；相反地，叶黄素从青果期到成熟期的含量是逐渐减少的；蕃茄红素的含量变化不大。油棕在成熟过程中总类胡萝卜素含量不断增加，主要转化为以α-胡萝卜素和β-胡萝卜素为主。

【目的】通过分析了枸杞功能成分玉米黄素、β-胡萝卜素和主要酯化类胡萝卜素在干制加工中生物合成和降解规律,为改善加工条件,最大限度保存枸杞中类胡萝卜素,提高枸杞感观品质提供理论依据。【方法】采用反相高效液相色谱法、外标法定量测定不同采收期枸杞在干燥过程中主要类胡萝卜素的变化。【结果】干制起始阶段,玉米黄素、β-胡萝卜素含量大幅增加,是鲜果含量的2～22倍;干制中期,均有不同程度的降解,其中秋果的降解幅度较大;干制后期,两种色素含量有小幅增加并达到平衡状态。玉米黄素双棕榈酸酯在干制起始阶段全面降解,降幅达到40%以上;干制中期有小幅增加并最终达到稳定状态。夏果中的类胡萝卜素总量明显比秋果高。【结论...

为探究β-胡萝卜素强化对卤虫体内类胡萝卜素组成和含量的影响，以渤海湾卤虫（Artemia）为研究对象，设置5个β-胡萝卜素强化剂梯度（1、3、5、7、9mg·L~(-1)），并设1个无添加对照组，分别比较卤虫无节幼体和成虫在强化后体内类胡萝卜素组成和含量的变化。结果表明，强化后的卤虫体内检测到β-胡萝卜素、角黄素和海胆酮3种类胡萝卜素。营养强化后，卤虫无节幼体和成虫体内β-胡萝卜素含量随着强化剂量增大显著上升（P<0.05）；无节幼体海胆酮和成虫体内角黄素含量变化大致上与β-胡萝卜素强化梯度表现出显著相关性（P<0.05）。饥饿12h后，β-胡萝卜素下降显著，但强化组β-胡萝卜素沉积量依然显著高于对照组（P<0.05），表现出良好的富集效果。因此，通过营养强化的卤虫，不仅可以作为外源类胡萝卜素的生物载体，还可以利用其体内代谢转化为养殖苗种提供多级类胡萝卜素营养。

采用有机溶剂提取类胡萝卜素 ,对冻干菹草类胡萝卜素的浸提条件进行了研究 ,得到的最佳参数是 :浸提液为石油醚 -丙酮 (1∶3,v/v)混合溶剂 ,料液比为 90mL/ g ,在常温下分 3次浸提 ,总浸提时间为 1.5h。在此条件下冻干菹草粉中总类胡萝卜素的提取率为 95 .5 %。