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[期刊] 中南林业科技大学学报
[作者]
刘剑 刘君昂 周国英 李河 杨菁
采用愈创木酚变色、苯胺蓝平板退色和酶活性测定筛选出高效降解竹材木质素的菌株。结果表明:通过腐烂的竹材等34份样品分离纯化出139株真菌;通过0.04%愈创木酚和0.1‰苯胺蓝平板初筛,从分离纯化的139株真菌中筛选出具有产木质素降解酶活性的7株降解菌;7株降解菌经液体产酶培养基复筛得到2株高效产降解木质素酶活的菌株:培养7 d,漆酶、木质素过氧化物酶和锰过氧化物酶活性分别达72.558、23.769、55.044和34.611、38.781、82.646 U/mL;2株降解菌FG-35和FG-98分别鉴定为革耳菌Panus lecomtei和烟管菌Bjerkandera adustus。
关键词：
竹材 木质素 降解菌 分离筛选 鉴定
[期刊] 浙江林学院学报
[作者]
周国英 李河
鉴定1株从腐竹中筛选的高效选择性降解竹材木质素的优良菌株ZNLD-18,为生物法提取可纺性竹原纤维奠定基础。利用真菌通用引物ITS 1和ITS 4扩增并测定菌株的rDNA ITS区序列,序列总长541 bp。把所得序列在GenBank中进行Blast搜索得到同源性较高的同属不同种菌株序列。比较这些序列的遗传距离,显示菌株ZNLD-18与Trametes versicolor的ITS区序列同源性为99%以上。利用PAUP软件构建分子系统发育树,通过对该树的分析并综合菌株的形态特征,鉴定菌株ZNLD-18为白腐菌Trametes versicolor。
[期刊] 林业科学研究
[作者]
张金萍 王敬文 姜景民 杨卫东
The diagnostic methods of extracelluar oxidase mat were used to select lignin-degrading enzymes producers among nineteen Ganoderma lucidum fungal strains.The results showed that the producing laccase activity of G.sp.var.Tianzhi was the highest,followed by that of G.lucidum 10 and G.lucidum 8.The pr...
关键词：
漆酶 木质素降解酶 锰过氧化物酶 灵芝菌
[期刊] 华北农学报
[作者]
梁军锋 张洪生 张克强 张金凤 李野 赵润
为筛选木质素高效降解菌,对筛选的方法体系进行了研究。结果表明,利用三种定性筛选平板结合定量的木质素磺酸钙降解的方法,能明显提高筛选效率,从16个菌株中筛选到3株对木质素有较强降解能力的菌株Tp1、Tf1与Ls21。为进一步验证所筛菌株的降解效果,选取其中综合性能较好的Tf1菌株(凤尾菇,Pleurotus sajor-caju),对小麦秸秆与玉米秸秆进行固态发酵试验,并以黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosporium)BKMF-1767作参照,结果表明,Tf1对小麦秸秆与玉米秸秆木质素的降解率分别为38.4%与47.7%,均高于参照菌株(分别为32.2%和34.6%)。
关键词：
秸秆 木质素 筛选 降解 白腐菌
[期刊] 浙江农林大学学报
[作者]
李雅琳 李素艳 孙向阳 郝丹 蔡琳琳 常晓彤
【目的】制作应用于园林绿化废弃物的以木质素降解菌为原材料的高效液体菌剂。【方法】通过苯胺蓝平板褪色圈法和愈创木酚平板变色圈法从分离纯化得到的22株菌中筛选目标菌株,并用内转录间隔区(ITS)测序法对目标菌株进行鉴定,然后通过单因素试验对目标菌株的培养时间、接种量和培养基配方(碳源和氮源)进行优化,最后根据单因素试验结果,采用均匀实验结合人工神经网络算法寻找目标菌株的最佳发酵条件。【结果】根据平板褪色和显色结果,选定菌株Q01为目标菌株。经鉴定,菌株Q01为栓菌属Trametes真菌。根据单因素试验和均匀试验结果,确定菌株Q01的最优发酵条件为培养时间5 d,接种菌液体积分数为12.5%;培养基配方为木质素磺酸钠14.00 g·L~(-1)、蛋白胨12.30 g·L~(-1)、酵母粉5.00 g·L~(-1)、豆饼粉3.00 g·L~(-1)、五水合硫酸铜0.12 g·L~(-1)、氯化钠0.53 g·L~(-1)、pH自然。优化条件后菌株Q01的生物量提高1.27倍,锰过氧化物酶活性提高31.71倍,木质素过氧化物酶活性提高19.12倍,漆酶活性略有降低,但3种木质素酶的总酶活性提高了4.38倍。【结论】菌株Q01在优化后的发酵条件下制得的液体菌剂具有高酶活性和高生物量的特点,在降解园林绿化废弃物木质素方面具有一定应用潜力。图6表3参29
[期刊] 中国农业科学
[作者]
李红亚 李术娜 王树香 王全 朱宝成
【目的】分离、筛选产芽孢的高效木质素降解细菌,并进一步研究其对木质素的降解作用,为木质素微生物降解规模化应用提供理论依据。【方法】采用苯胺蓝(Azure-B)变色圈法,结合木质素降解酶活力测定从牛粪中分离筛选出产芽孢的木质素降解菌。通过形态特征观察、生理生化试验、16S rDNA以及gyrB序列分析对其中活性最强的菌株进行种属鉴定。利用菌株进行玉米秸秆堆积发酵,监测发酵过程中木质素过氧化物酶(LiP)酶活力、锰过氧化酶(MnP)酶活力以及玉米秸秆中木质素含量的变化,考察菌株对玉米秸秆木质素的降解作用。利用气相色谱-质谱联用(GC/MS)方法对菌株发酵后玉米秸秆中的木质素降解产物进行分析,推测菌...
[期刊] 林业科学研究
[作者]
康跃 李素艳 孙向阳 龚小强 余克非 蔡琳琳 王琳
[目的]为获得能够高效降解园林废弃物的真菌并研究其降解能力,从经过堆肥处理的园林废弃物中分离和筛选出1株木质素降解能力较强的真菌。[方法]经过形态分析、ITS分子序列分析,构建系统发育树,鉴定出该株木质素降解真菌种属,并利用该菌株进行固态发酵实验,研究其在固态发酵过程中漆酶、锰过氧化物酶的酶活力变化及其对不同园林废弃物中木质素的降解能力。[结果]从经过堆肥处理的园林废弃物中共挑选出真菌18株,筛选出1株高效的木质素降解真菌,编号为菌株No.11,经鉴定该菌株为构巢曲霉(Aspergillus nidulans(Eidam) G.Winter)。以冬青卫矛叶、冬青卫矛枝、圆柏叶、圆柏枝、连翘枝叶为底物的模拟固态发酵的漆酶酶活力峰值分别为388.7、326.3、461.4、342.7、588.5 U·L~(-1),锰过氧化物酶酶活力峰值分别为138.3、121.1、104.6、128.6、73.3 U·L~(-1)。添加菌株No.11使冬青卫矛叶、冬青卫矛枝、圆柏叶、圆柏枝、连翘枝叶40 d后木质素降解率分别提高了20.40%、22.44%、29.90%、25.28%、15.77%。[结论]筛选出的构巢曲霉对北京地区常见园林废弃物冬青卫矛、圆柏和连翘枝叶中的木质素具有较好的降解能力,在降解园林废弃物方面可能更具有优势。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
李海红 龚文姣 同帜 王颖
【目的】应用白腐真菌处理造纸黑液,探讨白腐真菌对造纸黑液中木质素的降解效果及其影响因子,确定最佳降解条件。【方法】从自然界腐朽木材上分离培养白腐真菌,利用专用培养基对其进行分离和纯化,分析木质素溶液质量浓度(污染负荷)、pH值、搅拌速度、碳源和氮源质量浓度、[Fe2+]质量浓度对白腐真菌降解木质素效果的影响。【结果】确定白腐真菌降解造纸黑液中木质素的最佳条件为:木质素质量浓度为153.0 mg/L,pH值为5,搅拌速度为250 r/min,葡萄糖质量浓度为1 g/L,酒石酸铵质量浓度为0.20 g/L,[Fe2+]质量浓度为0.08 mg/L。【结论】得到了白腐真菌降解造纸黑液中木质素的最佳条...
关键词：
白腐真菌 木质素 生物降解 造纸黑液
[期刊] 林业科学
[作者]
王凤娟 李伟庆 牟志美 王彦文 刘庆信 高绘菊
【目的】研究木质素降解子囊菌Paraconiothyrium variabile GHJ-4分泌的漆酶(laccase)、锰过氧化物酶(MnP)和木质素过氧化物酶(LiP)3种木质素降解酶的酶活性变化规律及其酶学性质,为利用该菌株进行木质素降解酶的工业化生产和应用提供依据。【方法】分别以愈创木酚、2,6-二甲基苯酚和黎芦醇为底物测定laccase,MnP和LiP的酶活性,研究3种酶的最适反应温度和pH、温度和pH稳定性及金属离子对其活性的影响。【结果】GHJ-4菌株发酵18,15和21天后,分别获得lac
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
谭非 张加强 黄伟志 林玲
采用微波辅助加热方法,以KOH和Na OH作为催化剂,考察了木质素降解产生的酚羟基含量的变化;研究了反应时间、反应温度、木碱比对木质素酚羟基含量的影响.结果表明,降解木质素的最佳条件为:反应温度160℃,反应时间45 min,木碱比1∶1.在此条件下,KOH及Na OH催化降解木质素中酚羟基的含量分别提高58%和53%.通过红外光谱(FT-IR)、1H核磁共振(1H-NMR)、凝胶渗透色谱仪(GPC)等研究了木质素降解改性结构的变化.GPC测定结果表明,降解后木质素的分子量明显降低.FT-IR检测结果表明酚羟基含量发生变化.FT-IR及1H-NMR的检测结果表明,反应前后木质素苯环骨架结构基本保持不变.
关键词：
木质素 微波加热 碱活化 水热反应
[期刊] 浙江农林大学学报
[作者]
李雅琳 李素艳 孙向阳 郝丹 蔡琳琳 常晓彤
【目的】以2株不同的木质素降解菌[菌株A(构巢曲霉Aspergillus nidulans)、菌株Q(栓菌属1种Trametes sp.)]为材料，分别制作应用于园林绿化废弃物降解或者堆肥的高效固体发酵菌剂。【方法】采用单因素实验确定固体发酵培养基的碳氮源和外加营养组分种类，再通过正交实验对碳氮源添加量进行优化，最后根据碳氮源优化结果，采用均匀实验结合人工神经网络算法寻找2株木质素降解菌的外加营养组分接种量和最佳固体培养基发酵条件。【结果】优化后的菌株Q固体菌剂培养基基质为麸皮30.000 g作为基底，添加豆饼粉3.000 g和玉米粉0.188 g；外加营养组分(按基质的质量比)为硫酸镁(MgSO_4) 1.434%、磷酸二氢钾(KH_2PO_4)0.115%和硫酸亚铁(FeSO_4·7H_2O)1.497%；接种条件为接菌量6.000%、料水比(质量比)1.000∶0.992、保护剂1.000%。优化后的菌株A固体菌剂培养基基质为麸皮30.000 g作为基底，添加豆饼粉1.500 g和木质素磺酸钠1.500 g；外加营养组分(按基质的质量比)为MgSO_4 0.123%、KH_2PO_4 0.213%、FeSO_4·7H_2O 1.280%；接种条件为接菌量21.000%、料水比1∶1、保护剂19.000%。菌株Q和菌株A在优化培养基上发酵7～9 d获得最大发酵生物量，菌株Q的D(260)为0.596，菌株A的D(260)为0.478。【结论】2株木质素降解菌在优化后的发酵条件下制得的固体菌剂具有高生物量的特点，在降解园林绿化废弃物的木质素方面具有一定潜力。图6表5参22
关键词：
木质素降解菌 优化 固体菌剂 发酵
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
韩立荣 张双玺 祝传书 张兴
【目的】分离筛选木质纤维素材料的高效降解菌,为植物农药残渣的资源化利用及其他废弃有机物的合理利用提供依据。【方法】采用纤维素刚果红平板培养基,对采自陕西秦岭山区的土样和腐烂枝干进行初筛,再以川楝残渣为惟一碳源进行摇瓶培养复筛,最后对获得的高纤维素酶活力菌株进行形态学和分子生物学鉴定。【结果】初筛获得了38株能够产生纤维素酶的菌株。在此基础上,对其中15株菌进行液体发酵并测定纤维素酶活性,得到4株纤维素酶活性较高菌株F4-1、F1-3、F10-2和F2-3。经形态观察和18S rDNA基因片段分析,将这4株菌分别归为枝状枝孢菌(Cladosporium cladosporioides)、萨氏曲霉...
关键词：
纤维素酶 菌株筛选 形态学特征 分子鉴定
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
蔡曼 杨蕾蕾 周宇光
为获得可用于石油、农药污染生物修复的高效烃降解菌，以高黏度的超稠油为唯一碳源，从大庆油井采出液中分离和筛选烃降解菌，并通过残油族组分及全烃组分的分析，拟阐明这些菌株的烃降解特性。结果表明：菌株Ｈ１１和Ｗ１４对黏度为普通稠油３０倍的超稠油有良好的乳化分散能力，经１６ＳｒｒＮＡ基因序列比对分析，初步鉴定这２菌株均为铜绿假单胞菌ＰＳｅｕｄｏｍｏＮＡＳ ＡｅｒｕｇｉＮｏＳＡ，接种这２菌株后，培养液中稠油的饱和烃相对含量均降低２０％以上，其中接种菌株Ｈ１１后，沥青质的相对含量也降低５％；同时，Ｈ１１和Ｗ１４对长链烃类的降解范围较广，分别最高可作用至Ｃ２６和Ｃ２８碳链长度的化合物，并对烃组分有代谢利用选择．．．
[期刊] 西南农业学报
[作者]
王彦辉 杜良伟 李红红 封国君 罗韬
以功夫菊酯为目标，从生产拟除虫菊酯农药厂污水处理口的淤泥里筛选高效降解真菌，并对降解菌进行鉴定和降解特性研究。经形态学和１８Ｓ ｒＤＮＡ测序鉴定，该高效降解真菌为青霉菌（ＰｅＮｉｃｉｌｌｉｕｍ ＳＰ．）。采用色谱法对降解特性进行研究，结果表明：在ＰＨ＝７．０，温度３０℃，底物浓度５０ ｍｇ／ｌ时降解效果最好，７ Ｄ时对功夫菊酯降解率达到８３．９０％；该菌株还可降解溴氰菊酯、高效氯氰菊睹。
关键词：
功夫菊酯 生物降解 青霉菌 降解特性
[期刊] 浙江农林大学学报
[作者]
吴文娟 闫雪晴 邹春阳 王博伟 何贤
【目的】以毛竹Phyllostachys edulis竹材为原料,经球磨分别通过LiCl/DMSO溶剂体系的溶解、再生处理、纤维素酶水解,得到的酶解残渣进行溶剂抽提、纯化,分离出竹材中的再生酶解木质素(RCEL)。【方法】木质素化学成分按照标准方法测定,木质素结构单元的变化通过红外、碱性硝基苯氧化、核磁共振波普分析,采用X射线衍射比较再生前后的纤维素结晶区变化。用凝胶渗透色谱测定木质素的分子量及其分布。【结果】经由化学成分结果得知:RCEL的得率和纯度都较高。经红外、元素分析、硝基苯氧化、凝胶渗透色谱、核磁共振等手段表征表明:分离得到的竹材RCEL为GSH型木质素,缩合程度略高于纤维素酶解木质素(CEL),其中,紫丁香基结构单元含量较高,达50%,分离过程中结构单元比例没有变化。从分子量及其分布来看,竹材RCEL数均分子量和重均分子量都较高,分离过程中木质素降解较少。经X射线衍射分析,经LiCl/DMSO体系溶胀处理后纤维素的结晶度有所下降。RCEL木质素热失重温度为200～600℃,600℃后失重趋于稳定,木质素缩合程度不同会导致不同的热解特性。【结论】基于LiCl/DMSO溶剂体系的分离方法,对木质素大分子结构有较好的保护作用,对碳水化合物有很好的降解作用,可以改变纤维素结晶区的结构,降低结晶度,从而能促进纤维素的降解,提高酶解效率,有利于高效分离CEL。与传统分离方法得到的球磨木质素(MWL)、 CEL相比,经过LiCl/DMSO溶剂体系处理后得到的竹材RCEL,能较好地代表竹材的木质素。图4表5参23
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