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[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 沈赞明  韩正康  
试验用 3头安装永久性瘤胃瘘管的成年水牛。采用自身对照方式在不同日粮条件下分别测定了瘤胃液内纤维素酶 (CMCase和FPase)活力以及厌氧真菌孢子数量。试验分为 4期 :稻草期 (Ⅰ期 ) ,稻草 +精料期 (Ⅱ期 ) ,稻草、精料 +羟甲基尿素期 (Ⅲ期 )和稻草、精料、羟甲基尿素 +硫酸铵期 (Ⅳ期 ) ,每期 2 0d。Ⅱ期稻草添喂精料 (2kg/d)时CMCase和Fpase平均活力分别下降 39% (P
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 姚文  陈杰  韩正康  
以4头装有永久性瘤胃痿管的海子母水牛为实验动物,研究了稻草日粮条件下添加羟甲基尿素对瘤胃内纤维素消化代谢的影响。实验采用自身对照设计。结果表明:添加羟甲基尿素后,瘤胃内总脱氢酶活力和纤维素酶活力均显著上升;总挥发性脂肪酸(TVFA)浓度明显提高;纤维素消失率显著增加。可见,稻草日粮条件下添加羟甲基尿素能提高瘤胃微生物的活力,尤其是纤维素分解力,从而对瘤胃内纤维素消化代谢有一定的改善。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 沈赞明  韩正廉  
在系列Ⅰ(青草、干草、稻草)和系列Ⅱ(稻草添加精料及非蛋白氮)日粮条件下.分别测定了3头装有永久性瘤胃瘘管的去势公水牛瘤胃真菌孢子数量,体外培养120h的混合真菌胞外羧甲基纤维素酶(CMCase)和滤纸酶(FPase)的活力变化。结果表明:青草期瘤胃真菌数量及CMCase和FPase活力均显著高于稻草期(P<0.05);干草期CMCBse和FPase活力居中。稻草添加精料日粮时.稻草日粮(!期)添加混合精料(2kg/d)(Ⅱ期),瘤胃真菌数量无明显变化,但FPase活力显著降低(P<0.05);精料加羟甲基尿素(80g/d)添加于稻草日粮(Ⅲ期)对瘤胃真菌数量基本无影响,CMCase和FPas...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 孙镇平  陈杰  韩正康  
4头装有长久性气垫式瘤胃瘘管和临时性颈静脉血管插管的雄性水牛冬季舍饲,以稻草为日粮(对照),试验期每头牛添喂羟甲基尿素(FDU)80g/d和混合精料1kg/d。添喂FDU和混合精料后,水牛瘤胃液pH明显下降(P<0.001),瘤胃液稀释率提高44.269%(P<0.001),容积有所增加。氨氮(NH3-N)一昼夜平均增加83.34%(P<0.001),微生物蛋白增加62.88%(P<0.001),血清尿素氮浓度提高95.13%(P<0.001)。表明水牛冬季饲喂稻草添喂FDU和少量精料,能明显改善瘤胃氮代谢。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 李静  高兰阳  沈益新  
为探讨稻草青贮利用的可能性,研究了添加乳酸菌或/和纤维素酶对稻草青贮品质的影响。将4个水稻品种(日本晴、Genjah Wangkal、武运粳7号和武育粳3号)的新鲜稻草切碎后添加乳酸菌(1×105CFU·g-1)或/和纤维素酶(1g·kg-1),用聚乙烯袋真空青贮60d。试验结果表明,添加乳酸菌使青贮料pH值降低了6.07%(P<0.01);丁酸(BA)和氨态氮(NH3-N)含量分别降低了38.65%(P<0.01)和46.52%(P<0.01);乳酸(LA)、粗蛋白(CP)和可溶性碳水化合物(WSC)含量分别提高了70.70%(P<0.01)、7.19%(P<0.01)和6.76%(P<0....
[期刊] 草业科学  [作者] 邹爱爱  魏亚琴  杨宇泽  曹磊  孙康永杰  万学瑞  王川  
为构建高效表达的内切葡聚糖酶基因工程菌,本研究以牛瘤胃液中微生物全基因组为模板,通过PCR扩增方法得到eg片段,将其克隆至表达载体pMG36e中获得分泌型表达载体pMG36e::eg;将测序正确后的重组质粒电转导到乳酸菌(Lactococcus lactis NZ9000)中,得到L. lactis NZ9000/pMG36e::eg重组菌株,将发酵上清液通过10%三氯乙酸(Trichloroacetic acid, TCA)/丙酮沉淀法浓缩蛋白后,用刚果红染色法和3, 5-二硝基水杨酸(3, 5-Dinitrosalicylic acid, DNS)法检测该蛋白酶活性,使用滤纸酶活力(filter paper enzyme activity, FPA)法检测该蛋白酶的总酶活,并对重组内切葡聚糖酶进行酶学性质研究。结果表明:从牛瘤胃微生物中克隆得到一个基因大小为1 500 bp左右的条带,该酶分子量为50 kDa左右,经刚果红染色有明显水解圈,水解圈直径为2.32 cm;采用DNS法测定该重组蛋白的酶活为12.401 9U·mL~(-1),用FPA法测定总酶活为12.246 9 U·mL~(-1);重组蛋白酶对羧甲基纤维素钠、滤纸、微晶纤维素、脱脂棉均有酶活性;最适反应温度为90℃;最适反应pH为6;其中Cu~(2+)、Mn~(2+)、Ba~(2+)、Zn~(2+)、Co~(2+)等均可以提高重组酶的酶活力,而Fe~(2+)可抑制重组内切葡聚糖酶活力。本试验纤维素酶eg基因在L. lactis NZ9000中的稳定高效表达为提高青贮饲料的营养价值和消化率提供了技术支持。
[期刊] 林业科学研究  [作者] 索风梅  王浩杰  丁中文  徐天森  
纤维素酶是天牛体内重要的消化酶类,本文以松墨天牛为对象,研究了该虫肠道纤维素酶随禁食时间、取食时间不同的变化规律。结果显示,随着禁食时间的延长,纤维素酶3种组分酶活性均表现为先升高,后降低;而随着取食时间的延长,松墨天牛体内的纤维素3种组分酶活性变化规律相一致,由开始的低活性逐渐升高,并最终趋于稳定。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 王炳晓  柴同杰  苏鹏程  吕静  姚美玲  戈胜强  秦梅  
【目的】从奶牛瘤胃液中分离出具有分解纤维素能力的兼性厌氧细菌,用于绿色粗饲料微生物添加剂的研发。【方法】从奶牛瘤胃中采取瘤胃液,接种于羧甲基纤维素钠平板,采用严格厌氧结合需氧培养方式进行培养,通过刚果红染色,筛选出分解纤维素能力强的兼性厌氧细菌;采用生化试验结合16S rDNA序列分析方法对细菌进行鉴定,并绘制系统发育树;同时对细菌生长特性及有无致病性进行初步测定。【结果】共分离到63株具有分解纤维素能力的细菌,其中29株有较强的分解纤维素能力,包括24株G-菌,5株G+菌;24株G-细菌中,18株为肺炎克雷伯氏菌肺炎亚种,3株为铜绿假单胞杆菌,2株为大肠杆菌,1株为产酸克雷伯氏菌;5株G+细...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 刘敬敏  陈玉林  寇慧娟  曹宝红  张恩平  周光现  张思慧  
【目的】研究含不同水平硫酸钠日粮对陕北白绒山羊瘤胃纤维素降解率的影响,为选择适宜的硫添加水平提供理论依据。【方法】选择4只健康、体质量(28~32 kg)相近且安装永久性瘤胃瘘管的陕北白绒山羊为试验动物,采用4×4拉丁方单因素试验设计,试验分4个时期进行,每个时期14 d,分别饲喂硫酸钠添加水平为0(对照组),2.0,4.8,6.4 g/kg的4种日粮,测定瘤胃内青贮饲料干物质(DM)、中性洗涤纤维(NDF)、酸性洗涤纤维(ADF)的动态降解率,计算青贮饲料瘤胃DM、NDF、ADF的有效降解率(PED),并进行显著性检验。【结果】与对照组相比,日粮中添加硫酸钠对瘤胃食糜外流速率(Kp)无显著影...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 韩正康  蔡天权  陈杰  陈伟华  
反刍动物在发情期血浆雌二醇(E_2)含量大幅度升高,同时消化机能降低,采食量明显减少。关于雌激素对瘤胃消化代谢的作用,尚未阐明。本研究旨在比较水牛、奶牛发情期和间情期瘤胃 E_2 水平和消化代谢的变化。
[期刊] 林业科学  [作者] 吴柯军  闫绍鹏  卢宏  李海峰  王秋玉  
【目的】研究白囊耙齿菌5种胞外分泌木质纤维素酶活性变化以及胞内蛋白质组的表达差异,探讨该菌对不同基质的利用机制,为筛选用于生物制浆、林木病腐防治和工业污染物降解的高效菌株提供科学依据。【方法】选用白桦、红皮云杉木屑作为诱导物,不加木屑为对照,研究白囊靶齿菌5种主要胞外分泌木质纤维素酶的活性以及胞内蛋白质组的表达差异。【结果】木屑诱导下的木质纤维素相关胞外酶活性大都高于对照样品,且锰过氧化物酶和漆酶活性在处理组与对照组间的差异达显著和极显著水平;木质素降解酶系中漆酶活性最强,木质素过氧化物酶次之,锰过氧化物酶最弱;纤维素降解酶系中葡聚糖外切酶活性远大于葡聚糖内切酶活性,2种酶活性总体上趋于稳定,...
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 姜茂成  詹康  贡笑笑  赵国琦  
为研究不同pH和短链脂肪酸(SCFAs)对奶牛瘤胃上皮细胞SCFAs转运蛋白和G-蛋白偶联受体41(GPR41)表达影响,设计6组试验,每组3个重复,培养24h之后,收集细胞提取细胞总RNA。结果表明:在添加SCFAs条件下,pH 6.2、6.8和7.4之间的MCT1表达量差异不显著(P>0.05);pH 6.8且添加SCFAs条件下,MCT1的表达量显著高于缺乏SCFAs pH 6.8和7.4试验组(P<0.01),MCT4的表达量显著高于缺乏SCFAs(P<0.01),NHE1、NHE2和NHE3表达量显著高于缺乏SCFAs时的表达量(P<0.01);随着pH的降低,NHE1、NHE2和NHE3的表达量逐渐上调,而在缺乏SCFAs条件下,GPR41不表达;在添加SCFAs之后,显著激活了GPR41的表达。研究发现SCFAs能够显著加强奶牛瘤胃上皮细胞SCFAs转运蛋白和GPR41的表达量,从而证明细胞对SCFAs的吸收主要依赖于SCFAs转运蛋白和GPR41。
[期刊] 渔业科学进展  [作者] 盘赛昆  姚东瑞  朱强  王淑军  王艳  
以条浒苔为研究对象,以蛋白质提取率为指标,通过单因素试验确定提取条件,后采用均匀设计确定纤维素酶辅助提取工艺条件。结果表明,条浒苔蛋白质的提取条件为pH 11.0,温度60℃,时间5h;纤维素酶辅助提取条件为料液比1∶50,温度30℃,pH 5.5,时间5.5h,加酶量5.0%,纤维素酶处理后再经水提取5h,在此条件下蛋白质的提取率为30.22%~35.74%。为浒苔深加工及资源化利用,测定浒苔蛋白质的功能特性,结果表明,条浒苔蛋白质的等电点pI=3.0,在pH 7时起泡性最好,起泡性随着蛋白质溶液的浓度增加而增强,泡沫稳定性在pH 3和质量浓度2mg/ml时最好,乳化性在4mg/ml时最好,...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 吴子林  丁晓明陆  治年  
以3头装有永久性瘤胃瘘管的水牛为实验动物,用尼龙袋法测定不同加工方法的饼粕、常用能量饲料和副产品的蛋白质瘤胃降解率及降解规律。结果表明,加工方法不同的饼粕,蛋白质降解率不同,热榨可以降低饼粕蛋白质的瘤胃降解率。所测饲料中以麸皮和棉籽饼的蛋白质降解率最高,分别为75.28%和61.29%;玉米蛋白粉和芝麻饼最低,分别为30.19%和29.04%;其它饲料的蛋白质降解率分别为:豆饼45.9%,豆粕55.04%,棉仁粕48.19%,芝麻粕42.30%,菜籽粕44.34%,玉米44.95%,大麦58.59%。
[期刊] 中国农业科学  [作者] 赵向辉  刘婵娟  刘烨  李朝云  姚军虎  
【目的】探讨瘤胃降解蛋白(rumen degradable protein,RDP)水平和非纤维性碳水化合物(non-fibrecarbohydrates,NFC)类型对人工瘤胃发酵、微生物合成和纤维分解菌菌群的影响。【方法】采用2×4双因素试验设计,即2种RDP水平和4种NFC类型(玉米淀粉、蔗糖、柑橘果胶和菊粉)。RDP水平通过向4种日粮中分别添加0(低RDP)或1.56 g(高RDP)酪蛋白酸钠调节。【结果】①主效应上,蔗糖和果胶组的干物质和有机物质表观消失率显著高于其它两组(P<0.01);日粮RDP水平和NFC来源在影响中性洗涤纤维的表观消失率上存在交互作用(P<0.01),低RDP...
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