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[期刊] 淡水渔业
[作者]
王永明 史晋绒 蒲德永 金丽 黄林 张耀光
研究了不同水体、盐度(NaCl溶液)和pH对稀有鮈鲫(Gobiocypris rarus)精子活力的影响,并测定了精子的大小、密度。结果显示:稀有鮈鲫精子头部长(1.246±0.083)μm,宽(1.053±0.172)μm,尾长约(37.21±2.536)μm;精子密度为(4.623±0.170)×109 ind./mL;精子活力以江水中最高;精子生存的最适NaCl浓度为0.55%,此溶液中精子的快速运动时间,有效运动时间及寿命分别为(36.04±2.55)s、(50.57±2.69)s和(87.83±9.02)s;精子在pH为8.0的蒸馏水中活力最强,此时精子的快速运动时间,有效运动时间及...
[期刊] 淡水渔业
[作者]
吴羿锦 胡雨 李嘉蕙 王志坚
通过对稀有鮈鲫(Gobiocypris rarus)进行单次电刺激和连续电刺激,探讨了电刺激对稀有鮈鲫精子寿命的影响。结果显示:稀有鮈鲫精子寿命具有日节律现象;单次电刺激能显著提高精子寿命,且3 h后达到峰值;隔天一次的连续电刺激也能显著提高精子寿命。
[期刊] 淡水渔业
[作者]
陈冬明 焦平 杨调燕 王志坚
设定基温(23℃),研究了温度骤变(23℃→35℃、37℃、39℃→23℃)条件下不同的处理时间对稀有鮈鲫(Gobiocypris rarus)不同发育阶段的胚胎和仔鱼的影响,以期为评估温排水对鱼类的影响提供基础资料。结果表明,稀有鮈鲫不同发育阶段的胚胎和仔鱼均能耐受温度骤变(23℃→35℃→23℃),与对照组(23℃)没有产生显著性差异;但当温度骤变为(23℃→37℃、39℃→23℃)时,随着骤变温度的升高以及处理时间的延长,不同发育阶段的胚胎和仔鱼畸死率升高,耐受能力表现出较大差异。其中,眼黑期>肌肉效应期>胚孔封闭期;混合营养期>外源性营养期>内源性营养期。
[期刊] 淡水渔业
[作者]
詹素平 刘小红 王志坚
运用石蜡切片技术和扫描电镜技术对稀有鮈鲫（Ｇｏｂｉｏｃｙｐｒｉｓ ｒａｒｕｓ）鳃结构进行观察，并采用浓度为２ ｍＧ／Ｌ的ｃｄ ｃＬ＿２水溶液对稀有鮈鲫进行急性毒理实验。结果显示：稀有鮈鲫具４对鳃，由鳃耙、鳃弓、鳃丝及鳃小片组成。鳃的各个部位表面均有上皮细胞覆盖；鳃耙和鳃弓具味蕾，鳃弓上还具不同类型的黏液细胞；相邻鳃小片的上皮细胞间也分布有黏液细胞，在鳃小片基部有氯细胞着生。鳃丝表面有不规则凹陷和微嵴，具沟、坑、孔等结构；鳃小片两面均呈凹凸状。在２ ｍＧ／Ｌ的ｃｄ ｃＬ＿２水溶液暴露下，鳃受到损伤，发生鳃小片充血呈球状，鳃上皮水肿、脱落，黏液细胞增多等现象；并随时间延长受损程度加重。
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
艾振江 刘梅芳 何冬兰 程国军 李晓华
以稀有放线菌小单孢菌40027菌株为指示菌,从土壤中分离得到1株新噬菌体,命名为ΦSCU20。在测试的9株放线菌菌株中,仅能感染小单孢菌40027菌株和A-M-01菌株。电镜观察显示噬菌体ΦSCU20由多面体的头部和尾部组成。噬菌体ΦSCU20生物学特性研究表明,噬菌体ΦSCU20形成噬菌斑时培养基中适宜的Ca2+和Mg2+浓度分别为8 mmol/L和20 mmol/L;噬菌体ΦSCU20在储存液中适宜的pH值为8;噬菌体ΦSCU20不耐高温,经40℃保温30 min后,其活力降低到48.65%,经60℃保温30 min后,则完全失活;噬菌体ΦSCU20基因组特性研究表明,该噬菌体的基因组为双...
[期刊] 中国水产科学
[作者]
陈思奇 朱永久 吴兴兵 杨德国 刘应保 李晓莉
为探究大鳍鳠(Mystus macropterus)精子生物学特性及环境因子对其精子活力的影响， 提高精子活力， 本研究对其精液pH、渗透压、精子密度、精子运动参数进行测定， 对精子的结构进行观察， 同时设定pH、葡萄糖和离子(NaCl、KCl、CaCl_(2))梯度， 应用计算机辅助精子分析系统(CASA)观察其对精子活力的影响。结果表明， 大鳍鳠精子由头部、颈部和尾部组成， 无顶体， 有侧鳍。大鳍鳠平均精子密度为2.50×10~(9)个/mL， 精液pH为7.0～7.2， 精浆渗透压为(634.16±6.66) kPa。精浆中离子成分以Na~(+)含量最高， 其次是K~(+)， 之后依次为Mg~(2+)、Ca~(2+)、Fe~(3+)、Zn~(2+)， 未检测出Cu~(2+)。精浆水解氨基酸总量为169239.21 μmol/L， 其中以亮氨酸含量最高， 蛋氨酸含量最低。大鳍鳠精子经去离子水激活后， 运动率、快速运动时间和寿命分别为(48.61±14.85)%、(34.00±4.00) s、(396.50±9.50) s， 直线运动速率、曲线运动速率及平均路径运动速率分别为(11.50±6.26) μm/s、(24.21±8.68) μm/s、(14.00±5.99) μm/s。精子在pH 7.0～9.0的偏碱性水中活力较强， 最适pH为8.0; 精子在NaCl、KCl、CaCl_(2)浓度为1g/L、5 g/L、6 g/L时， 运动率达到峰值; 葡萄糖浓度为7 g/L时精子活力达到最高。研究表明， 大鳍鳠精子适宜pH为7.0～9.0; 适宜浓度的NaCl、KCl、CaCl_(2)和葡萄糖对大鳍鳠精子活力具有较好的促进作用。
关键词：
大鳍鳠 精子活力 CASA 精浆成分
[期刊] 海洋渔业
[作者]
黄晓荣 张涛 冯广朋 赵峰 刘鉴毅 宋超 章龙珍 庄平
选取6 ind健康的雄性俄罗斯鲟(Acipenser gueldenstaedti),经人工催产后获得成熟的精子,测定了精子密度、精浆渗透压、p H和生化成分,研究不同保存温度和p H对精子活力与寿命的影响,并比较几种离子对精子的抑制作用和再激活效果。研究结果表明:俄罗斯鲟精子密度为(2.12±0.89)×109cell·m L-1,精浆渗透压为(87.83±2.79)m Osm·L-1,精浆中K+(1.61±0.26)mmol·L-1,Na+(29.13±1.79)mmol·L-1,Cl-(21.83±1.84)mmol·L-1,Ca2+(0.11±0.03)mmol·L-1,Mg2+(0....
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
黄晓荣 庄平 章龙珍 闫文罡 江琪 陈丽慧 冯广朋 张涛 赵峰
选取健康成熟的纹缟虾虎鱼(Tridentiger trigonocephalus)进行人工采精,设定不同的盐度和温度梯度,观察其对精子活力及寿命的影响。测定了精子的大小、密度,并观察了精子的超微结构。结果表明,随着盐度和温度的上升,精子的活力和寿命都先增加后降低,在盐度5和温度19℃时,精子的活力和寿命分别达到最高。测得精子密度为(1.73×109±0.08×109)/mL,细胞核长径为(0.98±0.12)μm,短径为(0.81±0.08)μm,鞭毛的长度为(7.28±1.06)μm。电镜结果表明:纹缟虾虎鱼精子由头部和尾部(鞭毛)二部分组成,头部的细胞核近圆形,内有核空泡。精子细胞质膜与核...
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
叶斐菲 刘红 蔡生力 王豪杰 李媛媛
稀有鮈鲫是一种新型的模式实验鱼,具有利用转基因技术培育开发成为观赏性鱼类的潜在可能。本实验采用PCR方法,从稀有鮈鲫基因组DNA中分离得到大小为1584bp的β肌动蛋白(β-actin)基因片段。序列分析表明,该片段包括长为1507bp的启动调控区和77bp的部分转录区序列。启动调控区包括一段长为109bpβ-actin基因上游调控序列,不翻译的外显子1和内含子1。上游调控序列中含有TATAbox,CAATbox和CArGbox等与转录活性密切相关的作用元件,并且在稀有鮈鲫β-actin基因第一个内含子中也含有1个CArG调控元件。将该启动子片段克隆到绿色荧光表达载体(pAcGFP1-1)上,...
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
黄婷妹 蔡生力 刘红
稀有鮈鲫(Gobiocypris rarus)是我国特有的一种小型鲤科鱼类,目前已作为一种新型模式生物应用于实验研究。运用普通PCR方法克隆得到一段长6 299 bp的序列,序列分析发现编码区与稀有鮈鲫卵黄蛋白原cDNA序列相似性为100%。再参考6 299 bp序列5'端设计两对特异性引物,进行基因组步移,获得长度为1 285 bp的序列。经过序列拼接后得到7 573 bp的序列,分析发现其中含卵黄蛋白原基因全序列长度为6 595 bp卵黄蛋白原基因上游调控序列长度为978 bp。进一步分析开放性阅读框得知:稀有鮈鲫卵黄蛋白原基因含有26个外显子和25个内含子,编码1 299个氨基酸序列,C...
[期刊] 水产学报
[作者]
居建 朱珠 杨辉 魏文志 张莹莹
双酚A（BPA）是一种具有雌激素效应的塑化剂，对雄性生殖影响显著，载脂蛋白E（ApoE）对精巢中甘油三酯和胆固醇等脂质的运输过程有重要作用。本研究探讨BPA对精巢ApoE基因的影响及调控机制，以期找到BPA所引起的雄性生殖问题与脂代谢之间的潜在联系。将稀有鮈鲫暴露于BPA（15 μg/L）1、3和5周，通过实时荧光定量（qPCR）、免疫印迹（WB）及免疫荧光（IF）检测BPA对ApoE基因表达和分布的影响，通过染色质免疫共沉淀（ChIP）和DNA甲基化检测探究BPA对ApoE的调控机制。结果显示，qPCR、WB及IF结果显示BPA可以显著影响精巢ApoE基因的表达和分布。ChIP结果表明ApoE的启动子区存在一个雌激素相关受体γ（Esrrg）阳性作用位点，ApoE mRNA的表达变化与Esrrg的募集变化一致。DNA甲基化检测结果显示ApoE的启动子区处于未甲基化状态，BPA处理对其无显著影响。研究表明，BPA可以通过调控稀有鮈鲫精巢ApoE基因启动子区域的Esrrg的募集直接干扰ApoE基因表达，BPA可能通过影响稀有鮈鲫精巢脂质转运影响其生殖功能。本研究结果将为后续从脂质代谢角度探究环境内分泌干扰物对雄性生殖的影响提供参考。
[期刊] 水产学报
[作者]
倪秦伟 孙阳 刘林怡 吕利群
为了研究Ⅱ型草鱼呼肠孤病毒(GCRV-Ⅱ)的流行规律，本实验基于稀有鮈鲫感染GCRV-JX02的研究模型，利用分子生物学检测、逆转录实时定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)等方法开展GCRV-Ⅱ水平和垂直传播的研究。结果显示，水平传播中浸泡感染和共培养感染都能使稀有鮈鲫成为GCRV-Ⅱ的无症状携带者，阳性检出率分别为50%和80%；其中共培养感染直接导致8%的稀有鮈鲫死亡。感染后无症状的稀有鮈鲫经热休克处理，浸泡感染与共培养感染组的死亡率分别为57.14%和100%，总体阳性检出率分别为80.95%和100%。腹腔注射感染GCRV-JX02后存活的无症状稀有鮈鲫每0.01 g精巢与卵巢中病毒拷贝数分别为3.64×10~6和6.84×10~6个。垂直传播实验中稀有鮈鲫单个的卵子、未受精卵、受精卵和幼鱼的平均病毒拷贝数为1.98×10~3、1.15×10~4、4.75×10~3和6.74×10~4个，幼鱼中病毒的拷贝数显著高于卵子与受精卵时期，表明GCRV-JX02不仅能够在稀有鮈鲫中垂直传播，还能伴随幼鱼的发育不断扩增。本研究阐明了不同传播途径下GCRV-Ⅱ的传播潜力，有助于评估草鱼出血病的流行风险，且为筛选阻断草鱼呼肠孤病毒传播的药物提供了有效的动物模型。
[期刊] 淡水渔业
[作者]
陈冬明 刘小红 黄自豪 王志坚
控制水域电压为７５ Ｖ，电流２８０ ｍ Ａ，持续电刺激５ ５００ ｍｓ左右，电刺激的作用强度是使鱼既能达到休克昏迷状态又能在几分钟内苏醒。通过对１月龄的稀有鮈鲫（Ｇｏｂｉｏｃｙｐｒｉｓ ｒＡｒｕｓ）进行电刺激，观察电刺激对其性腺发育及性成熟后繁殖的影响，以期为渔政部门评价电捕鱼行为对鱼类资源的影响提供参考。结果表明，电刺激１次组、电刺激３次组和电刺激５次组可以促进雌雄鱼的生长和性腺发育，连续电刺激组对雄鱼的生长和性腺发育影响不大却会抑制雌鱼的生长和性腺发育；电刺激１次组、电刺激３次组和电刺激５次组对性成熟后雌雄鱼的繁殖没有产生显著差异，而连续电刺激组对性成熟后雄鱼的繁殖没有产生显著差异，却会造．．．
[期刊] 水产学报
[作者]
郑宗林 张进 徐靖琳 刘伟 于文博 方媛林 张景森 段聪 周朝伟
为探究稀有鮈鲫MHC Ⅱβ基因的分子特征及其表达特点，采用PCR扩增技术获得了稀有鮈鲫（Gobiocypris rarus）MHC Ⅱβ cDNA序列810 bp，包括开放阅读框（ORF）759 bp，编码252个氨基酸。生物信息分析表明，MHC Ⅱβ氨基酸序列存在4个保守的半胱氨酸残基和GXXGXXXGXXXXXXG结构，与其他亲缘鱼类的一致性为51.78%～80.56%，其编码的蛋白质分子包括1个信号肽、1个MHC Ⅱβ（β-1）结构域、1个IGc1（β-2）结构域和1个跨膜螺旋区域。实时荧光定量PCR（qRT-PCR）结果表明，MHC Ⅱβ在脾脏表达量最高，头肾、鳃、皮肤表达量较高。人工感染鲁氏耶尔森菌后，6 h时头肾表达呈极显著上调，肝脏在12 h开始出现极显著上调，皮肤在24 h和48 h表达极显著，鳃在6～24 h表达极显著，脾脏则是在6 h出现极显著下调，于96 h接近对照组表达水平。初步研究表明，MHC Ⅱβ在鱼类抵御细菌感染的免疫反应中发挥着重要作用，为进一步揭示稀有鮈鲫MHC家族的功能提供了参考依据。
关键词：
稀有鮈鲫 MHCⅡβ 细菌感染 基因表达
[期刊] 淡水渔业
[作者]
杨洋 李林 白冠星 毕建启 万正平 陈锋 梁银铨 张志明
以繁殖季节多线盘■ ( Discogobio multilineatus Cui) 性成熟个体为对象，研究其精子和卵子的生物学特性，并探究了不同因子对其精子活力的影响。结果显示: 多线盘■ 精子由头、颈和鞭毛三部分组成，头部呈圆形，颈部不易观察; 精子密度为( 6. 16 ± 0. 65) × 10~8ind / m L; p H 为 7. 3 ～ 7. 6，偏碱性; 成熟卵子为淡黄色，卵径( 2. 1 ± 0. 03) mm，吸水膨胀后卵径( 3. 6 ± 0. 04) mm; 绝对繁殖力为 197 ～ 2 089 粒，相对繁殖力为 21 ～ 71 粒 /g; 绝对繁殖力( AF) 与体重( BW) 和卵巢重( OW) 呈显著正相关，与体长( SL) 相关性较差。不同水体中精子活力和寿命不同，以红水河水最好，有效运动时间为( 16. 61 ±1. 90) s，寿命为( 28. 83 ±3. 94) s; Na Cl 浓度在 0. 3%～ 0. 6% 范围内精子活力较好，Na Cl 浓度 0. 45% 时，有效运动时间为( 19. 51 ± 1. 72) s，寿命为( 32. 83 ± 5. 22)s; p H 在 7. 0 ～ 9. 0 时精子活力较好，p H 为 8. 0 时，有效运动时间为( 17. 61 ± 0. 69) s，寿命为( 27. 17 ± 1. 51)s; 精子原液在 4 ℃ 下可暂存 3 h 且不影响其活力。
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