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[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)  [作者] 武少兰  张芳艺  罗小芳  李昕霖  吴敏文  郑舒桓  杨成龙  江玉姬  
以多肽得率为指标,酶解秀珍菇蛋白质制备多肽,通过正交试验优化制备工艺.正交试验结果表明,酶解各因素对秀珍菇多肽得率影响程度的大小为:pH>时间>温度>酶浓度;确定的最佳酶解工艺参数为:pH 11、时间1.5 h、温度55℃、碱性蛋白酶浓度6 000 U·g~(-1),制备的多肽得率为70.96%;体外抗氧化能力测定结果表明:2.5 mg·mL~(-1)秀珍菇多肽对DPPH、ABTS~+和羟基自由基的清除率分别为81.57%、99.81%、98.84%;SDS-PAGE检测结果表明,秀珍菇多肽的分子质量约为5.8 ku;氨基酸分析结果表明,秀珍菇多肽含有8种必需氨基酸,占氨基酸总量的43.2%.综上,在最佳酶解工艺下制备的秀珍菇多肽具有分子质量低且抗氧化能力强的特点.
[期刊] 中南林业科技大学学报  [作者] 胡润锋  李浚哲  李鹏飞  周军  李湘洲  
【目的】优化硒化桑叶多糖的制备工艺,获得抗氧化活性更高的硒化桑叶多糖。【方法】以硒含量为指标,利用HNO_3-Na_2SeO_3法对桑叶多糖(MLP)进行硒化修饰制备硒化桑叶多糖(MLP-Se),单因素实验分别考察Na_2SeO_3与MLP的质量比、HNO_3体积分数、反应温度和反应时间对制备的MLP-Se中硒含量的影响,进一步利用响应面法优化MLP-Se的制备工艺。对MLP和MLP-Se进行扫描电镜-能谱(SEM-EDS)分析、凝胶色谱(GPC)分析、粒径和zeta电位分析、红外光谱(FT-IR)分析,探究硒化改性对桑叶多糖结构的影响,最后还研究了MLP和MLP-Se的体外抗氧化活性。【结果】制备MLP-Se的最佳工艺条件为反应时间7 h、反应温度85℃、HNO_3体积分数0.54%、Na_2SeO_3与MLP的质量比1.27,此条件下制备的MLP-Se中硒含量为3.147 mg·g~(-1),建立的响应面模型可用于分析预测MLP-Se的制备;SEM-EDS分析表明硒化修饰改变了MLP的表观形貌且MLP-Se中存在硒元素;GPC分析表明MLP和MLP-Se的相对分子质量分别为2.099×10~3和2.385×10~3 k Da,硒化修饰增大了MLP的分子量;硒化修饰后桑叶多糖的粒径减小,zeta电位绝对值增大,硒化修饰提高了MLP在溶液体系中稳定性;FT-IR分析表明MLP已被成功硒化,且硒与多糖是通过C-O-Se和Se=O结合;体外抗氧化活性分析表明硒化修饰可以提高MLP的抗氧化能力,MLP-Se对DPPH自由基和ABTS自由基的IC_(50)值分别为0.883和0.681 mg·g~(-1),明显低于MLP对DPPH自由基和ABTS自由基的IC_(50)值2.157和1.792 mg·g~(-1)(P<0.05)。【结论】硒化修饰可以改良MLP的理化性质,提高MLP的抗氧化能力,研究有利于桑叶多糖在功能性食品、保健品和药物等领域的开发利用。
[期刊] 北京林业大学学报  [作者] 周杏子  王子娜  曾红胜  夏尔东  陈林  任迪峰  鲁军  
核桃粕作为核桃油加工的副产物,含有丰富的蛋白质、脂肪和维生素等营养物质。通过对核桃粕的预处理、菌种驯化、稳定性研究以及发酵工艺的优化,确定核桃粕乳酸菌发酵乳的最优制备工艺,并通过体外试验确定其抗氧化活性。结果表明:核桃粕预处理适宜料液的体积比为1∶10,打浆温度为80℃,蔗糖酯添加量为0.3%;乳酸菌经渐进驯化法驯化培养后,产酸量比驯化前提高了50%,活菌数比驯化前提高约17倍;核桃乳在115℃、15 min的杀菌条件下稳定性较高,为最适杀菌条件;相对于羧甲基纤维素钠和卡拉胶,蔗糖酯对核桃乳具有很好的稳定作用,其适宜添加量为0.3%;核桃乳发酵的最优接种量为3%,发酵温度37℃,发酵时间10 ...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 陈思远  刘永祥  曹小舟  张逸婧  陈海娟  沈新春  
【目的】探究能有效地从小麦胚芽清蛋白二步双酶酶解物中分离得到高活性抗氧化肽的工艺。【方法】以小麦胚芽清蛋白为原料,DPPH自由基清除率和Fe~(2+)螯合能力为抗氧化活性的评价指标,通过胰蛋白酶进行酶解,依次采用超滤膜和凝胶过滤色谱(SePHaDex G-75)对酶解产物进行分离纯化,筛选出活性较高的组分;采用碱性蛋白酶对获得的活性较高组分进行酶解,通过凝胶过滤色谱(SePHaDex G-15)和反相高效液相色谱(RP-HPLC)分离纯化其酶解产物;采用质谱技术(eSI-TOF MS/MS)对抗氧化活性最高的组分进行结构鉴定。【结果】分离得到3个活性组分(峰)P_a、P_b、P_C,采用DPP...
[期刊] 西南农业学报  [作者] 李晓娇  段绍丽  曹凯红  宋志姣  
【目的】建立硒化铁皮石斛多糖(Selenium-containing Dendrobium officinale polysaccharide, Se-DCP)的最佳制备工艺,并探究Se-DCP对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)、羟基(OH)和超氧离子(O_(2)~(-))自由基的清除能力,为铁皮石斛的深入开发提供理论基础和试验依据。【方法】硒化:以云南龙陵铁皮石斛为试材,采用微波辅助-浸提法提取铁皮石斛多糖(Dendrobium officinale polysaccharide, DCP),以亚硒酸钠为硒化剂,冰乙酸为催化剂对DCP进行硒化修饰获得Se-DCP;结构表征:通过电感耦合等离子体原子发射光谱法(ICP-AES)法测定Se-DCP中的硒含量,由傅里叶变换红外光谱(FTIR)法对Se-DCP的官能团进行表征;工艺优化:以硒含量为指标,考察亚硒酸钠用量、硒化时间、硒化温度和冰乙酸用量对硒化的影响,通过正交试验优化硒化反应条件;抗氧化试验:以VC为阳性对照,测定Se-DCP对·DPPH、·OH和O_(2)~(-)·的清除能力。【结果】Se-DCP的最佳制备工艺为:亚硒酸钠用量为1∶0.5(DCP∶亚硒酸钠),硒化时间为24 h,硒化温度为80 ℃,冰乙酸用量为0.6 mL,在此条件下产物Se-DCP的硒含量为2.35 mg/g;红外光谱结果表明,Se-DCP结构中存在Se=O键和Se-O键,为DCP的亚硒酸酯;抗氧化试验中,当Se-DCP的浓度大于1.4 mg/mL,Se-DCP对·DPPH 和 O_(2)~(-)·的清除率均大于90%(高于Vc),对·OH的清除率大于88%(与Vc相当)。【结论】Se-DCP的制备工艺简单,硒含量较高,且有较好的抗氧化活性,因此可作为理想的有机硒食品原料。
[期刊] 北京林业大学学报  [作者] 符群  吴桐  廖声玲  王梦丽  
【目的】通过对北方林区刺玫果醇提物的制备及其主要活性成分进行研究,为刺玫果的进一步合理利用提供参考。【方法】采用高剪切乳化技术辅助乙醇提取刺玫果活性成分,在单因素试验基础上,以醇提物得率为指标,采用响应面法对主要工艺参数进行优化。对刺玫果醇提取物中总多酚、总黄酮、槲皮素和绿原酸进行提取,与DPPH·、OH·和·ABTS+的清除能力利用Pearson法做相关性研究。【结果】回归模型较好的反映了刺玫果黄酮醇提物与料液比、剪切转速、剪切时间的关系;确定最佳提取工艺为:料液比为1:25 g/mL,剪切转速为18 000 r/min,剪切时间为3 min,得率为(14.94±0.47)%,回归模型的失拟值不显著,说明该回归模型模拟较好。绿原酸对DPPH·清除能力最强,在0.150μg/mL时清除率达到80.84%;总黄酮对OH·清除能力最强,在0.484μg/mL时清除率为82.32%;槲皮素对·ABTS+清除能力最强,在4.7μg/mL时清除率达到91.32%。总黄酮与DPPH·、·OH、·ABTS+这3种自由基清除率相关系数最大,并与这3者清除能力的相关系数分别为0.886、0.976、0.989(P <0.01)。【结论】采用高剪切乳化技术辅助乙醇提取的刺玫果醇提物得率比普通超声辅助醇提法效果更好,醇提物得率增加了(2.11±0.51)%,且不破坏刺玫果主要成分活性,刺玫果中总黄酮含量与抗氧化能力相关性最强。
[期刊] 水产学报  [作者] 杨帆  栗丽  陈荫  王斌  王加斌  
以孔鳐软骨为材料,采用盐酸胍抽提、丙酮分级沉淀,制备孔鳐软骨蛋白;以DPPH·和HO·清除活性为导向,采用胰蛋白酶酶解、膜超滤、DEAE-52阴离子交换层析、Sephadex G-15凝胶层析和反相高效液相色谱(RP-HPLC)等技术,制备抗氧化肽,并对其活性进行系统评价。结果显示,孔鳐软骨蛋白经胰蛋白酶酶解和分离纯化得到2个抗氧化肽RCPE-A和RCPE-B,经氨基酸序列分析确定其序列分别为Gly-Glu-Glu-Gly-ProArg-Gly (GEEGPRG)和Gly-Glu-Glu-Gly-Thr-Met-Gly-Leu (GEEGTMGL),质谱(ESI-MS)测定其分子量分别为700.71和792.87 u。体外自由基清除实验结果显示,RCPE-A与RCPE-B对DPPH·(EC50 2.94和1.16 mg/mL)、HO·(EC_(50) 0.34和0.54 mg/mL)、ABTS~+·(EC_(50) 0.34和0.10mg/mL)和O_2~-·(EC_(50) 0.11和0.03 mg/mL)具有良好的清除作用,RCPE-A与RCPE-B亦显示出较强的脂质过氧化抑制作用。研究表明,孔鳐软骨蛋白酶解物及制备多肽可用于抗氧化相关的功能食品开发,也可以用作抗氧化剂延长相关产品的货架期。
[期刊] 渔业科学进展  [作者] 赵玲  耿晓晓  刘淇  殷邦忠  曹荣  李志超  
以海参水煮液的冻干粉为原料,选取中性蛋白酶、胃蛋白酶和胰蛋白酶分别酶解制备多肽,测定其对·OH、O-2·和DPPH·自由基的清除能力,并与合成抗氧化剂TBHQ对比。结果表明,3种蛋白酶酶解制得的海参水煮液多肽对·OH、O-2·和DPPH·自由基的清除能力均随样品质量浓度的升高而增强;其中,中性蛋白酶酶解制得的海参水煮液多肽清除·OH、O-2·和DPPH·自由基的IC50值依次为8.565、6.658和2.015mg/ml,其对O-2·的清除能力优于TBHQ。经液相色谱法测定,中性蛋白酶、胃蛋白酶和胰蛋白酶酶解制得的海参水煮液多肽分子量分别分布在
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 德力格尔桑  韩杰  玛丽娜  乌兰塔娜  
探索蒙古绵羊脾蛋白的最佳酶解条件,确定最具抗氧化活性的脾肽及其分子质量。将不同饱和度硫酸铵沉淀制得的脾蛋白分别经胰蛋白酶、木瓜蛋白酶及二者混合物(质量比1∶1,下称酶混合物)水解制得脾肽,经G-25柱层析分离后,电泳确定脾肽分子质量。分别在非脂质的DPPH.和.OH体系,及脂质的卵磷脂和猪油体系中对制得的脾肽进行体外抗氧化活性试验,结果表明:60℃,pH7.0,酶混合物添加量5.0%(质量分数),5.5 h为最佳酶解条件。饱和度为60%的硫酸铵沉淀制得的脾蛋白电泳条带最多,此脾蛋白经酶混合物水解后,柱层析分离得到F1、F2、F3、F44个峰区,其中F3(分子质量6 ku)的脾肽在非脂质体系中清...
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 周亚迪  汪之颖  姚旻晶  范鸿冰  洪惠  罗永康  
为系统考察酶解时间、酶种类和酶加入的顺序对猪血浆蛋白酶解产物抗氧化性的影响,采用风味蛋白酶、碱性蛋白酶及双酶(风味蛋白酶,碱性蛋白酶不同的加入顺序)在各自最适条件下对猪血浆蛋白进行酶解,并研究酶解产物的功能特性。结果表明:0~120min内,随着酶解时间的延长,水解度升高,各酶解产物的抗氧化性均有所增强;60~180min内,双酶酶解产物的清除DPPH自由基的能力、亚铁离子螯合能力和还原力显著高于单酶酶解产物(P<0.05);90~150min内,先加碱性蛋白酶后加入风味蛋白酶酶解的酶解产物的水解度、清除DPPH自由基能力和还原力显著高于先加风味蛋白酶酶解后加入碱性蛋白酶酶解的酶解产物(P<0...
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 田龙  
采用氯磺酸-吡啶法合成猕猴桃果水溶性多糖硫酸酯,对试剂比例、反应温度和反应时间等因素对取代度的影响进行了研究,并用体外试验观察了多糖硫酸酯对超氧阴离子、羟自由基、DPPH的清除作用以及对H2O2诱导的红细胞氧化溶血和大鼠肝匀浆脂质过氧化的保护作用,结果表明猕猴桃果水溶性多糖硫酸酯具有显著的体外抗氧化活性。
[期刊] 华中农业大学学报(自然科学版)  [作者] 周丽玲  罗佳倩  常霞  林军  黄帆  李高阳  
为探究不同柑橘膳食纤维的性能差异及提高柑橘加工副产物综合利用率,利用酶解法制备4种柑橘皮渣膳食纤维(脐橙、苹果柚、沃柑、柠檬),采用扫描电子显微镜、傅里叶变换红外光谱及X射线衍射对纤维形态结构进行表征,并测定理化性质及体外抗氧化活性,通过主成分分析评价不同柑橘纤维综合品质。结果显示,酶法制备的柑橘纤维性能存在品种差异,柠檬纤维总纤维含量(67.63±0.46)%最高,脐橙纤维组成比例最好,沃柑、脐橙纤维水合性能和体外抗氧化活性最强,苹果柚纤维在4种纤维中表现出最高表观黏度。综合评价从高到低排序为:脐橙纤维、沃柑纤维、苹果柚纤维、柠檬纤维。结果表明,酶法制备的4种柑橘膳食纤维均有较好生理活性,其中脐橙纤维综合品质最佳,作为食品添加剂有较广应用前景。
[期刊] 水产学报  [作者] 谭洪亮  郁迪  王斌  胡发远  马剑茵  
为制备金枪鱼鱼骨胶原肽,并对其抗氧化活性进行研究,利用酶解、超滤、凝胶色谱和反相高效液相色谱制备抗氧化胶原肽,采用氨基酸序列分析仪测定其氨基酸序列,利用质谱(ESIMS)确定其分子量,采用羟自由基、DPPH自由基、ABTS自由基和超氧阴离子自由基清除实验和脂质过氧化抑制实验对胶原肽抗氧化能力进行评价。结果显示,金枪鱼鱼骨胶原蛋白经胃蛋白酶和胰蛋白酶2步酶解和分离纯化得到1个十肽(TFCH-P2),经氨基酸序列分析和质谱(ESIMS)确定其氨基酸序列为Gly-Pro-Ala-Gly-Pro-Ala-Gly-Glu-Gln-Gly(GPAGPAGQEG),分子量为839.87 u([M+H]+84...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 方勇  杨方美  赵殿峰  杨文建  赵立艳  辛志宏  马宁  施瑛  胡秋辉  
【目的】研究木瓜蛋白酶对条斑紫菜R-藻红蛋白的抗氧化性和肿瘤增殖抑制活性的影响。【方法】采用超声波破壁法提取条斑紫菜R-藻红蛋白,用DEAE柱层析法纯化后进行木瓜蛋白酶酶解,通过正交试验设计,以还原力A700为考察指标确定酶解反应的最佳工艺参数,进一步测定获得的R-藻红蛋白及其酶解物的还原力、清除羟自由基能力和对人肉瘤细胞U2O及人肝癌细胞HepG-2的肿瘤增殖抑制活性。【结果】R-藻红蛋白的最佳酶解工艺条件为:木瓜蛋白酶添加量25 000 U.g-1,pH 7.0,温度50℃,酶解时间4 h。在此条件下,R-藻红蛋白酶解物还原力为0.573,较未酶解的R-藻红蛋白提高了2.35倍;清除羟自由...
[期刊] 沈阳农业大学学报  [作者] 杨玉红  吴优  赵奕彭  康振宇  郭睿昕  李豆  廖林  康宗利  
为了从软枣猕猴桃内生真菌中获得具有抗氧化活性的蒽醌类化合物,本研究以自主筛选的软枣猕猴桃内生真菌Z2为发酵菌株,大黄酸作为标准品,通过乙酸镁甲醇显色法来定量检测目标产物含量。选取发酵时间、萃取溶剂以及液料比3个影响因素,进行3因素3水平正交试验。确立了发酵提取蒽醌的最佳工艺条件:发酵时间为5d,萃取溶剂为正丁醇,料液比为1∶50,在此条件下蒽醌提取率为22.04mg·L(-1);通过测定清除DPPH、超氧阴离子、烷基等自由基能力以及还原Fe(3+)能力来研究蒽醌类物质的抗氧化活性。结果表明:蒽醌类物质浓度
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