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[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 王永  纪燕玲  王晗  陈永敢  王志伟  
调查我国7省12个不同地区的禾本科植物内生真菌,经分离、培养后鉴定得到2种Epichlo属和4种Neotyphodium属内生真菌。采用改良的QS(improved quick and safe,IQS)法进行禾本科植物内生真菌基因组DNA的提取,并通过PCR进行验证。以生长在平板上的菌丝为起始材料,仪器要求简单、操作简便,快速安全、省时省力,整个提取过程大约40 min。该方法和常规SDS法相比,时间缩短到2周,为原来的1/4。以IQS法提取的DNA为模板,检测禾本科植物内生真菌中的NRPS基因,并在NCBI上进行比对分析,发现与已有的NRPS基因高度相似。这种快速提取法所获得的基因组DN...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 张晨炜  纪燕玲  杨守玲  亢燕  王志伟  
在我国吉林省长春市3个采样点共采集96株鹅观草属植物样品,经鉴定为犬草(Roegneria canina)。通过检测,样品中内生真菌的含菌率高达67.7%。分离得到5个菌株并对它们进行形态学特征调查,分离菌株呈典型的Neotyphodium属真菌特征。选择菌株Rjl7101和Rjl7104,利用tefA和tubB基因片段进行系统发育分析,结果表明分离菌株与Neotyphodiumsinicum聚为一枝。根据以上结果,确定分离菌株为N.sinicum。这是首次在犬草中发现N.sinicum,也扩大了N.sinicum在我国的分布地区范围,进一步说明我国拥有极为丰富的内生真菌资源且分布广泛。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 纪燕玲  孙相辉  王志伟  
2006至2008年的夏季,从黄山景区海拔500~1600 m处,采集至少23个属的631株禾本科植物,通过镜检,其中的内生真菌检出率为39%。内生真菌的分布与宿主植物的种类、宿主植物的地理分布类型等有关,拂子茅植物的检出率高达67%。在所调查的6个地理分布类型中,内生真菌大量分布在北温带分布的植物类型中。从短柄草中发现了香柱菌(Epichlo sp.),其子座等形态学特征与欧洲菌株存在很大差异,这是我国新报道的第2例有性型内生真菌。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 王志伟  张晨炜  詹漓晖  亢燕  纪燕玲  
[目的]本文旨在确定圆柱披碱草(Elymus cylindricus)内生真菌的分类地位。[方法]选择5株分离自新疆、青海的圆柱披碱草内生真菌菌株,采用sds法提取基因组dnA,利用选择性引物对其tub b和tEf A基因片段进行扩增和克隆测序,下载ncbi中的相似序列并进行比对分析,用mEGA 6.0软件构建系统发育树。[结果]成功获得差异极小的各菌株序列,且tub b序列确认为仅1个拷贝,而2个菌株的tEf A序列则有2个拷贝。在最大简约树上披碱草菌株的tEf A和tub b第1拷贝均在Eby(EpichloE bromicolA/E.yAnGzii)大支上,与E.sinicA比较接近;t...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 张红侠  纪燕玲  邢转青  王志伟  
本研究在2011和2012年夏季从安徽省黄山市4个采样点采集大雀麦(Bromus magnus Keng)559株,镜检结果表明含菌率为48.0%~77.8%。含菌植物样品经表面消毒分离得到31株菌,根据形态学特征将这些菌株分为2个菌群:快速生长(fast growing,FG)菌群,生长速度为每周16.0~18.8 mm;慢速生长(slow growing,SG)菌群,生长速度为每周4.3~5.3 mm。FG菌群分生孢子[(4.5~5.1)μm×(2.9~3.6)μm]及分生孢子梗(15.8~24.6μm)等无性形态结构比SG菌群略大。从同一地点、同种宿主植物中分离得到分属于FG和SG菌群的...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 程飞飞  高龙  江龙飞  郑芳林  纪燕玲  王志伟  
选择含有内生真菌的鹅观草,采集其成熟种子,经过南京的6—9月室温处理后冷藏。经过发芽、育苗以及田间栽培试验,调查并分析这些植物的长势、分蘖数、株高、茎宽、叶宽的变化,最后检测这些鹅观草植株中内生真菌的有无。结果表明:含内生真菌(EI)的鹅观草植株群苗期生长比较旺盛、分蘖比较多,但在成熟期株高、茎秆直径及叶宽与不含菌植株无显著差异。从EI鹅观草植株中随机分离获得4个内生真菌菌株,其形态学特征和系统发育学特征显示,分离菌株均为Neotyphodium sinicum Wang,Ji et Kang。本研究首次证明了在田间条件下内生真菌N.sinicum能促进其宿主鹅观草的苗期生长和分蘖,揭示了禾本...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 纪燕玲   韩魁   茅冬梅   陈永敢   王志伟  
[目的]Epichlo?内生真菌能够产生抵御牲畜和害虫啃食的生物碱,其中部分生物碱由非核糖体肽合成酶(non-ribosomal peptide synthetase,NRPS)合成。本研究拟分析E. festucae基因组内的NRPS编码基因,并预测其功能。[方法]以E. festucae E2368菌株基因组数据为对象,综合运用HMMER和全局比对等分析方法以及ClustScan、NRPS/PKS analysis和NCBI等数据库进行信息比对。[结果]确认了E2368基因组中含有至少19个候选NRPS基因,其中11个未在Epichlo?内生真菌中报道。序列比对结果表明候选基因均为真菌中已报道的序列,但其中8个基因的功能未知;同时E2368基因组中存在环孢菌素合成酶基因扩增现象。构建候选NRPS基因所有A结构域氨基酸序列发育树,发现不同NRPS基因的A结构域会聚到同一分枝,而相同NRPS基因的A结构域则分散于不同分枝,说明采用简并引物扩增NRPS基因存在一定的局限性。[结论]对E2368基因组中NRPS基因的挖掘,将有助于解析NRPS基因的多样性,促进对新的天然产物的发现和生物合成途径的认识。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 王志伟  纪燕玲  陈永敢  
通常禾本科植物内生真菌专指"epichlo内生真菌",包括Epichlo属真菌和Neotyphodium属真菌。Epichlo属真菌偶尔会在植物茎秆上形成子座,而Neotyphodium属真菌在宿主植物体上一般不表现任何症状。这些真菌在培养基上对植物病原具有明显的拮抗作用,能增强植物的抗虫、抗旱、抗病、抗寒能力,促进肥料吸收,促进植物生长和分蘖、增产等,有时也会使宿主植物生产过量的生物碱,造成家畜中毒。因此,如何筛选和利用具有优秀农艺性状且没有合成生物碱能力的禾本科植物/内生真菌共生体是epichlo内生真菌资源利用的关键。本文还结合我国近年来多种小麦族植物内生真菌的新发现,讨论了将禾...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 詹漓晖  纪燕玲  亢燕  孙相辉  于汉寿  王志伟  
2006年5月在南京市南郊发现了着生内生真菌子座的禾本科植物。子座长47.5~165.0mm,白色,包裹其宿主植物的旗叶叶鞘;于4月下旬形成,7月中旬完全崩溃;在自然条件下、人工交配试验中,子座上均未形成有性生殖结构。宿主植物直立,高90~120cm,有丰富的根状茎;连续2个花期均无抽穗。根据植物外部特征、叶表皮微形态特征以及rDNA-ITS序列的分析结果,将这种不抽穗的禾本科植物鉴定为拂子茅属植物(Calamagrostis sp.)。从29株着生子座的植株和87株不着生子座的植株中全部检出了内生真菌,从中分离得到了20个菌株。根据分生孢子、分生孢子梗的形态特征,分离菌株被鉴定为Neotyp...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 陆涛  李杏辉  王杨  王贵英  王志伟  
2010年在南京紫金山地区采集小颖羊茅(Festuca parvigluma Steud.)的完整植株和成熟种子,通过染色、分离、特异性基因片段检测等方法探究内生真菌Neotyphodium sinofestucae Chen,Ji et Wang在其体内的分布和种传特性。从植株茎秆、叶鞘、叶片和种子稃片及颖果等部位分别检测和分离到具有禾本科植物内生真菌特征的真菌。同时,从含有内生真菌的种子培育实生苗,并从实生苗中检测和分离到类似的内生真菌。通过对tubB基因片段的PCR扩增和检测,证明分离自小颖羊茅的样品与其实生苗的分离菌株是相同的N.sinofestucae。上述结果表明:N.sinofe...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 李雅  宋晓斌  马养民  张弘弛  苏印泉  
为了研究杜仲内生真菌对植物病原真菌的抑制作用,以苹果腐烂病菌(Cytospora sp.)、番茄灰霉病菌(Botrytis cintrea)、西瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.niveum)、黄瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporium f.sp.cucumerinum)、玉米大斑病菌(Helminthos porium turcicum)和白菜黑斑病菌(Alternaria brassicae)为供试菌种,对49株杜仲(Eucommia ulmoides Oliv)内生真菌及其次生代谢物进行了抑菌活性试验。结果表明,有22株内生菌至少对3种测试菌有抑制作用...
[期刊] 西南农业学报  [作者] 奚家勤  林碧莲  莫明和  薛超群  王广山  郭建华  方敦煌  
烟草内生菌种类丰富,其在烟草病害生物防治中的作用近年来日益受到关注。本文从烤烟品种K326叶片中分离的内生细菌ZY-9-13菌株对供试的6种植物病原真菌均有拮抗作用,表现出对真菌病原菌的广谱抗菌活性。菌株ZY-9-13发酵液对烟草黑胫病菌(Phytophthora parasitica var.nicotianae)、香蕉枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.cuben)、腐皮镰孢菌(F.solani)、黄瓜枯萎病菌(F.omysporum f.sp.cucumerinum)、小麦赤霉病菌(Gibberella sanbinetti)和立枯丝核病菌(Rhizoctonia ...
[期刊] 草业科学  [作者] 周景乐  陈泰祥  陈水红  李春杰  
大麦属(Hordeum)植物多作为优良牧草和粮食作物被人类利用。禾草内生真菌(Epichlo?属)是生活周期全部或者大部分在宿主体内完成,不使宿主产生外部症状的一类真菌。禾草内生真菌可以改善宿主应对生物胁迫和非生物胁迫的能力。研究大麦属内生真菌共生体,对于开发耐盐碱的牧草或者草坪草新品种具有重要意义。本文简述了国内外大麦属禾草内生真菌共生体在侵染率影响因子、鉴定和抗逆性等方面的研究进展,认为关于大麦属内生真菌共生体的研究中影响带菌率和生物碱含量高低的因素尚不明确,对于大麦属内生真菌共生体的利用亦不充分。希望能够通过本文为大麦属内生真菌共生体的后续研究及利用提供指导。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 曹晓冬  周立刚  李端  徐利剑  
对近年来植物内生真菌产生的36个代谢产物及其生物活性进行了归纳,主要有生物碱类、萜类、甾体类化合物,其中以生物碱类活性物质数量最多;目前活性研究主要集中在医学和农业领域;最后对今后植物内生真菌活性代谢物质的研究进行了展望。
[期刊] 西南农业学报  [作者] 王涛  
【目的】三蕊兰(Neuwiedia singapureana)为兰科拟兰亚科(Apostasioideae)三蕊兰属(Neuwiedia)植物,是兰科中最原始的类群之一。开展三蕊兰可培养内生真菌多样性及其促生潜能研究,可为发掘海南地区三蕊兰内生真菌资源提供科学依据。【方法】以分布于海南吊罗山自然保护区野生三蕊兰为材料,通过分离培养,结合ITS测序及分析开展三蕊兰根内可培养真菌分离鉴定,并对其溶磷能力进行检测。将分离获得的内生真菌与铁皮石斛(Dendrobium officinale)和多花脆兰(Acampe rigida)原球茎进行共培养,检测其对2种兰科植物生长的影响。【结果】在光学显微镜下可明显观察到三蕊兰根细胞内分布的真菌菌丝。共获得三蕊兰根内生真菌24个OTUs,分属于9科14属,木霉属(Trichoderma)真菌分离概率最高;Nectriaceae科5个属(如Cylindrocarpon和Gliocephalotrichum等)真菌分离率次之。其中5株内生真菌具有不同程度的溶磷能力,为Apiotrichum sp.(Neu242),Cylindrocarpon spp.(Neu83和Neu154),Gliocladiopsis sp.(Neu245),和Mucor sp.(Neu123)属真菌。菌株Mucor sp. Neu123和Apiotrichum sp. Neu242对铁皮石斛和多花脆兰幼苗生长具有显著促进作用。【结论】三蕊兰根内具有丰富的可培养内生真菌,筛选鉴定出具溶磷能力的兰科促生真菌,可为兰科植物的人工繁育提供促生菌株资源,也为兰科菌根共生磷营养机制研究奠定基础。
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