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[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
王志伟 纪燕玲 陈永敢
通常禾本科植物内生真菌专指"epichlo内生真菌",包括Epichlo属真菌和Neotyphodium属真菌。Epichlo属真菌偶尔会在植物茎秆上形成子座,而Neotyphodium属真菌在宿主植物体上一般不表现任何症状。这些真菌在培养基上对植物病原具有明显的拮抗作用,能增强植物的抗虫、抗旱、抗病、抗寒能力,促进肥料吸收,促进植物生长和分蘖、增产等,有时也会使宿主植物生产过量的生物碱,造成家畜中毒。因此,如何筛选和利用具有优秀农艺性状且没有合成生物碱能力的禾本科植物/内生真菌共生体是epichlo内生真菌资源利用的关键。本文还结合我国近年来多种小麦族植物内生真菌的新发现,讨论了将禾...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
王永 纪燕玲 王晗 陈永敢 王志伟
调查我国7省12个不同地区的禾本科植物内生真菌,经分离、培养后鉴定得到2种Epichlo属和4种Neotyphodium属内生真菌。采用改良的QS(improved quick and safe,IQS)法进行禾本科植物内生真菌基因组DNA的提取,并通过PCR进行验证。以生长在平板上的菌丝为起始材料,仪器要求简单、操作简便,快速安全、省时省力,整个提取过程大约40 min。该方法和常规SDS法相比,时间缩短到2周,为原来的1/4。以IQS法提取的DNA为模板,检测禾本科植物内生真菌中的NRPS基因,并在NCBI上进行比对分析,发现与已有的NRPS基因高度相似。这种快速提取法所获得的基因组DN...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
陆涛 李杏辉 王杨 王贵英 王志伟
2010年在南京紫金山地区采集小颖羊茅(Festuca parvigluma Steud.)的完整植株和成熟种子,通过染色、分离、特异性基因片段检测等方法探究内生真菌Neotyphodium sinofestucae Chen,Ji et Wang在其体内的分布和种传特性。从植株茎秆、叶鞘、叶片和种子稃片及颖果等部位分别检测和分离到具有禾本科植物内生真菌特征的真菌。同时,从含有内生真菌的种子培育实生苗,并从实生苗中检测和分离到类似的内生真菌。通过对tubB基因片段的PCR扩增和检测,证明分离自小颖羊茅的样品与其实生苗的分离菌株是相同的N.sinofestucae。上述结果表明:N.sinofe...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
纪燕玲 孙相辉 王志伟
2006至2008年的夏季,从黄山景区海拔500~1600 m处,采集至少23个属的631株禾本科植物,通过镜检,其中的内生真菌检出率为39%。内生真菌的分布与宿主植物的种类、宿主植物的地理分布类型等有关,拂子茅植物的检出率高达67%。在所调查的6个地理分布类型中,内生真菌大量分布在北温带分布的植物类型中。从短柄草中发现了香柱菌(Epichlo sp.),其子座等形态学特征与欧洲菌株存在很大差异,这是我国新报道的第2例有性型内生真菌。
关键词：
内生真菌 分布 禾本科植物 黄山 资源
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
张红侠 纪燕玲 邢转青 王志伟
本研究在2011和2012年夏季从安徽省黄山市4个采样点采集大雀麦(Bromus magnus Keng)559株,镜检结果表明含菌率为48.0%～77.8%。含菌植物样品经表面消毒分离得到31株菌,根据形态学特征将这些菌株分为2个菌群:快速生长(fast growing,FG)菌群,生长速度为每周16.0～18.8 mm;慢速生长(slow growing,SG)菌群,生长速度为每周4.3～5.3 mm。FG菌群分生孢子[(4.5～5.1)μm×(2.9～3.6)μm]及分生孢子梗(15.8～24.6μm)等无性形态结构比SG菌群略大。从同一地点、同种宿主植物中分离得到分属于FG和SG菌群的...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
张晨炜 纪燕玲 杨守玲 亢燕 王志伟
在我国吉林省长春市3个采样点共采集96株鹅观草属植物样品,经鉴定为犬草(Roegneria canina)。通过检测,样品中内生真菌的含菌率高达67.7%。分离得到5个菌株并对它们进行形态学特征调查,分离菌株呈典型的Neotyphodium属真菌特征。选择菌株Rjl7101和Rjl7104,利用tefA和tubB基因片段进行系统发育分析,结果表明分离菌株与Neotyphodiumsinicum聚为一枝。根据以上结果,确定分离菌株为N.sinicum。这是首次在犬草中发现N.sinicum,也扩大了N.sinicum在我国的分布地区范围,进一步说明我国拥有极为丰富的内生真菌资源且分布广泛。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
王志伟 张晨炜 詹漓晖 亢燕 纪燕玲
［目的］本文旨在确定圆柱披碱草（Ｅｌｙｍｕｓ ｃｙｌｉｎｄｒｉｃｕｓ）内生真菌的分类地位。［方法］选择５株分离自新疆、青海的圆柱披碱草内生真菌菌株，采用ｓｄｓ法提取基因组ｄｎＡ，利用选择性引物对其ｔｕｂ ｂ和ｔＥｆ Ａ基因片段进行扩增和克隆测序，下载ｎｃｂｉ中的相似序列并进行比对分析，用ｍＥＧＡ ６．０软件构建系统发育树。［结果］成功获得差异极小的各菌株序列，且ｔｕｂ ｂ序列确认为仅１个拷贝，而２个菌株的ｔＥｆ Ａ序列则有２个拷贝。在最大简约树上披碱草菌株的ｔＥｆ Ａ和ｔｕｂ ｂ第１拷贝均在Ｅｂｙ（ＥｐｉｃｈｌｏＥ ｂｒｏｍｉｃｏｌＡ／Ｅ．ｙＡｎＧｚｉｉ）大支上，与Ｅ．ｓｉｎｉｃＡ比较接近；ｔ．．．
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
程飞飞 高龙 江龙飞 郑芳林 纪燕玲 王志伟
选择含有内生真菌的鹅观草,采集其成熟种子,经过南京的6—9月室温处理后冷藏。经过发芽、育苗以及田间栽培试验,调查并分析这些植物的长势、分蘖数、株高、茎宽、叶宽的变化,最后检测这些鹅观草植株中内生真菌的有无。结果表明:含内生真菌(EI)的鹅观草植株群苗期生长比较旺盛、分蘖比较多,但在成熟期株高、茎秆直径及叶宽与不含菌植株无显著差异。从EI鹅观草植株中随机分离获得4个内生真菌菌株,其形态学特征和系统发育学特征显示,分离菌株均为Neotyphodium sinicum Wang,Ji et Kang。本研究首次证明了在田间条件下内生真菌N.sinicum能促进其宿主鹅观草的苗期生长和分蘖,揭示了禾本...
关键词：
鹅观草 内生真菌 生长 分蘖
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
詹漓晖 纪燕玲 亢燕 孙相辉 于汉寿 王志伟
2006年5月在南京市南郊发现了着生内生真菌子座的禾本科植物。子座长47.5~165.0mm,白色,包裹其宿主植物的旗叶叶鞘;于4月下旬形成,7月中旬完全崩溃;在自然条件下、人工交配试验中,子座上均未形成有性生殖结构。宿主植物直立,高90~120cm,有丰富的根状茎;连续2个花期均无抽穗。根据植物外部特征、叶表皮微形态特征以及rDNA-ITS序列的分析结果,将这种不抽穗的禾本科植物鉴定为拂子茅属植物(Calamagrostis sp.)。从29株着生子座的植株和87株不着生子座的植株中全部检出了内生真菌,从中分离得到了20个菌株。根据分生孢子、分生孢子梗的形态特征,分离菌株被鉴定为Neotyp...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
纪燕玲 韩魁 茅冬梅 陈永敢 王志伟
[目的]Epichlo?内生真菌能够产生抵御牲畜和害虫啃食的生物碱，其中部分生物碱由非核糖体肽合成酶（non-ribosomal peptide synthetase，NRPS）合成。本研究拟分析E. festucae基因组内的NRPS编码基因，并预测其功能。[方法]以E. festucae E2368菌株基因组数据为对象，综合运用HMMER和全局比对等分析方法以及ClustScan、NRPS/PKS analysis和NCBI等数据库进行信息比对。[结果]确认了E2368基因组中含有至少19个候选NRPS基因，其中11个未在Epichlo?内生真菌中报道。序列比对结果表明候选基因均为真菌中已报道的序列，但其中8个基因的功能未知；同时E2368基因组中存在环孢菌素合成酶基因扩增现象。构建候选NRPS基因所有A结构域氨基酸序列发育树，发现不同NRPS基因的A结构域会聚到同一分枝，而相同NRPS基因的A结构域则分散于不同分枝，说明采用简并引物扩增NRPS基因存在一定的局限性。[结论]对E2368基因组中NRPS基因的挖掘，将有助于解析NRPS基因的多样性，促进对新的天然产物的发现和生物合成途径的认识。
[期刊] 草业科学
[作者]
彭清青 唐炳民 欧为友 段迎珠 孙占清 谢占玲 毛玉晶 陈生全 郭璟 王宝 杨家宝 孟清
黄绿卷毛菇（Floccularia luteovirens）是青藏高原特有真菌资源，对高寒草甸植物群落结构和稳定性有重要影响，可形成典型的蘑菇圈。以往研究大多集中在土壤微生物和植物群落上，然而，目前黄绿卷毛菇蘑菇圈上不同植物内生真菌的多样性尚不清楚。因此，本研究采用传统组织分离法结合ITS序列鉴定方法，分析采自祁连高寒草甸黄绿卷毛菇蘑菇圈上不同植物可培养内生真菌的多样性。结果表明：从6类植物108块组织中分离得到70株内生真菌，总分离率为64.81%，总定殖率为33.33%。多样性与相似性分析表明，矮嵩草内生真菌丰富度（R = 1.73）和多样性（H’ = 1.86，D = 0.83）最高，米尔克棘豆内生真菌均匀度指数(J_(u )= 1)最高；鹅绒委陵菜与麻花艽（C_(s鹅-麻 )= 0.5， C_(j鹅-麻 )= 0.33），火绒草和米尔克棘豆（C_(s火-米 )= 0.40，C_(j火-米 )= 0.25）的内生真菌具有一定相似性；不同组织间内生真菌相似性排序为：根-茎>叶-茎>根-叶。内生真菌结构分析表明，不同植物中优势菌分别为Peziza ostracoderma和Stagonospora sp.；不同组织中相对丰度最高均为Peziza ostracoderma。共现网络分析结果表明矮嵩草是黄绿卷毛菇蘑菇圈上的核心植物（EIC_(矮嵩草 )= 1）；Peziza ostracoderma是核心内生真菌（EIC_(P.o )= 0.75）。本研究结果有助于从植物内生真菌的角度为进一步探究青藏高原特有真菌黄绿卷毛菇蘑菇圈上植物-微生物的互作关系提供新思路。
[期刊] 林业科学
[作者]
周婧 杨琦 李钢 徐静
红树林是生长在热带和亚热带潮间带河口地带的耐盐植物群落,分布在南纬30°与北纬30°之间,具有盐胁迫、高矿物组成、强还原性、频繁的潮汐等特征,也使植物对营养、空间的竞争异常激烈,特殊生境使红树林植物内生真菌多样性丰富,必然会造成不同于其他生态系统的良好生物活性、独特化学结构的活性功能分子。红树属是红树林植物中分布较广泛的一个属,包括8个种,分别是红海榄、红树、红茄苳、美洲红树、Rhizophora harrisonii、R.racemosa、树冬红树和萨摩红树。迄今为止,从红树属分离出内生真菌类群已达23目41科64属,其中对拟盘多毛孢属、青霉属和毛霉属的内生真菌代谢产物研究的最为广泛;从红树属内生真菌中分离鉴定出195种天然产物,包括生物碱类、萜类化合物、香豆素类、色酮类化合物、醌类化合物、杂氧蒽醌类化合物、肽类、酚酸类化合物、内酯类等化合物,从红树属植物中发现许多结构新颖的次生代谢产物,从中国南海红树林红茄苳内生拟盘多毛孢真菌中发现一系列罕见的具有亲脂性取代基的新色酮类化合物pestalotiopsones A-F (107—112),从拟盘多毛孢属JCM2A4中发现2个具有柔性结构的补身烷型倍半萜-环青霉醛酸的新骨架化合物pestalotiopens A和B (83, 84)。此外,许多化合物显示出良好的抗肿瘤、抗菌和抗氧化等生物活性,如化合物pestalpolyol 1(119)具有很强的抑制作用,对小鼠淋巴瘤L5178Y细胞的半抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC_(50))值为4.10μmol·L~(-1)。从内生真菌毛霉QEN-189中分离到的吲哚生物碱rhizovarins A,B和F(46, 47, 50)对肺癌细胞A549抑制作用强,IC_(50)值分别为11.5、6.3和9.2μmol·L~(-1),对白血病细胞HL-60有强抑制作用,IC_(50)值为9.6、5和7μmol·L~(-1)。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
李雅 宋晓斌 马养民 张弘弛 苏印泉
为了研究杜仲内生真菌对植物病原真菌的抑制作用,以苹果腐烂病菌(Cytospora sp.)、番茄灰霉病菌(Botrytis cintrea)、西瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.niveum)、黄瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporium f.sp.cucumerinum)、玉米大斑病菌(Helminthos porium turcicum)和白菜黑斑病菌(Alternaria brassicae)为供试菌种,对49株杜仲(Eucommia ulmoides Oliv)内生真菌及其次生代谢物进行了抑菌活性试验。结果表明,有22株内生菌至少对3种测试菌有抑制作用...
[期刊] 草业科学
[作者]
刘俊英 许文博 田沛
为进一步开发利用羊茅属(Festuca)内生真菌，筛选适于内生真菌生长的培养基并比较不同菌株的生长速度，本研究设置了不同的生长培养基，包括不同酸碱度(pH=4、5、6、7、8、9、10)；不同碳源(葡萄糖、麦芽糖、乳糖、D-木糖、D-山梨糖醇、可溶性淀粉)；不同氮源(蛋白胨、胰蛋白胨、硝酸钠、硝酸铵、尿素、草酸铵、硝酸钾)和不同培养基{马铃薯葡萄糖琼脂培养基(Potato dextrose agar，PDA)、马铃薯蔗糖琼脂培养基(Potato sucrose agar，PSA)、察氏培养基(Czapek agar)、玉米粉琼脂培养基(Corn meal agar，CMA)和水琼脂培养基(Water agar，WA)}，选择11株从羊茅属植物分离的香柱菌属(Epichlo?)内生真菌(菌株ID：G1、G2、G3、G4、291-4、291-14A、1、2、9、57A、84F)在这些不同培养基进行培养，探究上述菌株在不同培养条件下生长速度的差异。结果表明，培养基种类和pH对内生真菌的生长速度和产孢速度均有显著影响(P<0.05)，内生真菌的最适生长的pH范围为4～7，利用能力最强的碳源为D-山梨糖醇，氮源为蛋白胨，菌丝生长较适宜的培养基为PDA和PSA培养基，其中生长速度最快的是菌株G1，生长速度最慢的菌株是291-4和菌株291-14A。
[期刊] 草业科学
[作者]
刘欢 陈焘 夏超
植物–土壤反馈是指植物的生长可以改变土壤的生物和非生物特性;反过来,土壤特性的改变可以影响植物的生长,进而改变植物群落的结构和动态。禾草内生真菌对植物–土壤反馈有重要影响。本文主要总结了Epichlo?属禾草内生真菌对宿主植物根际土壤化学性质、根际微生物、植物竞争力以及对生态适应机制的影响。研究发现,禾草内生真菌的侵染会对土壤营养元素产生影响,致使土壤有机碳、土壤全氮含量发生改变。禾草内生真菌对根际土壤微生物生物量和微生物群落产生作用,致使革氏兰阴性细菌、菌根真菌和球囊霉素等产生不同地变化。禾草内生真菌参与宿主植物的生活史,影响宿主植物的种内种间竞争,对生物群落结构和物种丰富度产生影响。
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