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[期刊] 林业科学  [作者] 李晓青  叶冰莹  陈由强  朱锦懋  安平  
本文介绍了福建柏Fokieniahodginsii(Dunn)HenryetThomas总DNA的提取介质组成分 ,建立了一个快速、简便且高效提取和鉴定福建柏鲜叶、干叶、种子总DNA的方法。该方法所提DNA的产率分别为 :1 5 0~ 2 5 0 μg/g鲜叶 ,1 0 0~ 1 5 0 μg/g干叶和 1 4 0~ 1 6 0 μg/g种子 ;绝大多数粗提总DNAOD2 6 0 /OD2 80 =1 .80±0 .0 2 ;提取的鲜叶、种子和单种子胚乳总DNA皆为 4 8kb,而干叶总DNA为 5 0Kb ,都适于限制性酶切和RAPD反应 ;一般实验时间为 4h。该方法既不需氯化铯梯度离心和...
[期刊] 北京林业大学学报  [作者] 时向阳  魏江春  姜玉梅  田素忠  郭守玉  
利用液氮破碎地衣体的上下表皮层及藻层,再用氯化苄在弱碱条件下破坏真菌细胞壁,从而获得地衣真菌总DNA.此方法简便、省时、价廉,获得的总DNA蛋白质污染少,产量高,可进一步进行PCR扩增.
[期刊] 林业科学研究  [作者] 尤勇  洪菊生  
杉木DNA的简便提取方法*尤勇洪菊生关键词杉木针叶DNA巯基乙醇次生物质杉木(Cunninghamialanceolata(Lamb)Hook.)是我国的特有树种,其分子生物学研究目前在国内外开展的较少,其近缘种的研究也较少。为了开展杉木分子生物学的...
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 沙爱华  张端品  
用水稻、玉米、棉花和油菜的干种子作材料进行了分离DNA的试验。试验结果表明,从4种作物的干种子中都能分离到质量较好的DNA,得到的DNA可以用于RAPD和SSR分析。这一方法最显著的特点是充分利用了DNA分离的原理,只保留了细胞裂解、DNA沉淀和溶解等关键步骤,而省略了一些诸如去除蛋白质及有机物的中间步骤,因而具有简便、快速等优点,特别适合于一些需要快速得到研究结果的分析,如种子纯度鉴定、分子标记辅助选择等。
[期刊] 中国农业科学  [作者] 程红梅  彭于发  金芜军  贾士荣  
【目的】DNA的提取是GMO(Genetically modified organism)作物检测中重要步骤,DNA的质量关系到GMO检测的成败。【方法】本研究以大豆油为材料,探索出一种快速、简便的提取大豆油DNA的方法。【结果】该方法能从10ml大豆油中提取0.4μg高纯度DNA,可用于PCR检测。提取市场上出售的十几种精练大豆油的DNA,针对35S、Nos、EPSPS和Lectin基因进行了PCR检测,分别扩增出不同的目的片段。【结论】大豆油中有残存的DNA碎片,在转基因大豆油中能扩增出外源基因的片段。本研究为大豆油的外源基因的检测提供了可行方法。
[期刊] 林业科学研究  [作者] 黄少甫  赵治芬  陆军  庄杰云  
杉木DNA的快速提取黄少甫,赵治芬,陆军,庄杰云关键词杉木,DNA提取,酶切分子标记限制性片段长度多态性(RestrictionFragmentLenghPolymorphism,简称RFLP)和随机扩增的多态性DNA(RandomAmplified...
[期刊] 西南农业学报  [作者] 李静  曾德贤  吴子欢  范林元  刘飞虎  
用种子提取DNA可省却培育幼苗过程而加快实验进度,为此建立了麻疯树(Jatropha curcas L.)种子DNA提取方法。针对麻疯树种子富含蛋白质、多酚及多糖等次生物质的特点,基于CTAB法进行优化,在研磨种子时加入抗氧化剂PVP去除多酚,接着用核分离缓冲液去除多糖,再通过酚-氯仿-异戊醇(体积比=25∶24∶1)抽提去除蛋白质。所提取的麻疯树种子总DNA浓度和质量均较高,经琼脂糖凝胶电泳和ISSR-PCR扩增得到了非常清晰的DNA条带。
[期刊] 浙江林学院学报  [作者] 毛燕  黄必恒  
在不同的条件下对龙柏叶总黄酮含量的提取结果表明 :溶剂乙醇的体积分数、提取时间和提取温度对总黄酮提取量都有不同程度的影响 ,其中乙醇的体积分数对总黄酮的提取量影响最为显著。通过正交试验得出龙柏叶总黄酮提取的最佳条件是溶剂乙醇的体积分数为75 %,提取时间为 2 0min ,提取温度为 90~ 1 0 0℃。表 5参 3
[期刊] 华北农学报  [作者] 罗秋婷  钟君  满玉萍  郭旭英  严海燕  
为探究CTAB方法提取植物DNA中影响DNA产量和质量的诸多因素,以豫花15号花生嫩叶为材料,采用酚氯仿、1 0000 r/min、氯仿、不剪口、氯仿一步、酚氯仿一步、不摇30 min 7种不同的处理方法纯化其基因组DNA,并通过外观、紫外分光光度法和琼脂糖凝胶电泳对所提取的DNA样品进行检测,比较不同因素对DNA提取质量的影响.在充分考虑得率、蛋白质含量及DNA分子完整性等指数后,总结出酚氯仿纯化豫花15号花生叶片DNA的最适方法。
[期刊] 华北农学报  [作者] 易红梅  张芳  王凤格  赵久然  陈景堂  郭景伦  王璐  
利用快提法对不同取样部位及不同取样时期的样品提取DNA并进行PCR检测,结果表明:PCR扩增效果较好的样品包括种子胚、胚乳、未发芽时的水培初生根和次生根的根尖、发芽1 d的胚芽(幼叶)、发芽1~3 d的胚芽鞘、以及发芽3~5 d的中胚轴;而发芽后的水培根尖、发芽3 d的幼叶、发芽5 d的胚芽鞘、发芽10 d的中胚轴提取的DNA扩增效果较差或没有扩增产物。
[期刊] 西南农业学报  [作者] 宣朴  徐利远  余桂容  尹春蓉  
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 王永  纪燕玲  王晗  陈永敢  王志伟  
调查我国7省12个不同地区的禾本科植物内生真菌,经分离、培养后鉴定得到2种Epichlo属和4种Neotyphodium属内生真菌。采用改良的QS(improved quick and safe,IQS)法进行禾本科植物内生真菌基因组DNA的提取,并通过PCR进行验证。以生长在平板上的菌丝为起始材料,仪器要求简单、操作简便,快速安全、省时省力,整个提取过程大约40 min。该方法和常规SDS法相比,时间缩短到2周,为原来的1/4。以IQS法提取的DNA为模板,检测禾本科植物内生真菌中的NRPS基因,并在NCBI上进行比对分析,发现与已有的NRPS基因高度相似。这种快速提取法所获得的基因组DN...
[期刊] 林业科学  [作者] 苟大平  王曦茁  汪来发  田国忠  朱天辉  郭民伟  
【目的】本研究旨在探索快速、简便地直接从病木中提取松材线虫DNA的方法。【方法】运用Chelex-100结合异硫氰酸胍蛋白变性缓冲液建立新的高效快速提取微量木块中线虫DNA的方法,并通过普通PCR与环介导等温扩增(LAMP)对提取的DNA进行检测验证。【结果】建立了提取线虫DNA的新方法 Chelex-100法,并对影响提取效率的Chelex-100浓度、冻融时间和煮沸时间进行了优化。Chelex-100法最适Chelex-100终浓度为1.5%(W/V),最适冻融时间为5 min,最适煮沸时间为8 min。与传统的CTAB法和蛋白酶K法比较,Chelex-100法提取的DNA得率高,相同条件...
[期刊] 沈阳农业大学学报  [作者] 孟庆阳  唐文竹  
获得高纯度的总DNA是进行土壤微生物宏基因组学研究的基础,也是分析生物炭作为土壤改良剂对土壤菌群结构影响的关键。由于生物炭对DNA中磷酸骨架的吸附作用,从添加生物炭的土壤中提取总DNA较为困难。为了寻找合适的提取混有生物炭的土壤总DNA的方法,本研究分别采用E.Z.N.A.Soil DNA Kit法(方法 1)、改良的E.Z.N.A.Soil DNA Kit法(方法 2)、SDS-玻璃珠法(方法 3)、Mo-Bio Power Soil DNA Isolation Kit法(方法 4)和改良的Mo-Bio
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 李佳  沈斌章  韩继祥  甘莉  
一种有效提取油菜叶片总DNA的方法李佳,沈斌章,韩继祥,甘莉(华中农业大学中心实验室武汉430070;华中农业大学农学系武汉430070)关键词DNA,提取方法,试剂,国产,油菜AEFFECTIVEPROCEDUREFOREXTRACTINGTOTA...
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