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[期刊] 中国水产科学
[作者]
常玉梅 何强 孙言春 梁利群 孙效文
为了从不同层面解析达里湖瓦氏雅罗鱼（Ｌｅｕｃｉｓｃｕｓ ｗａＬｅｃｋｉｉ）耐高碱的生理机制，本研究对达里湖瓦氏雅罗鱼在２个时间段（２２ ｄ和６０ ｄ）和３个不同浓度碳酸盐碱度（１８ ｍｍｏＬ／Ｌ、３０ ｍｍｏＬ／Ｌ和５０ ｍｍｏＬ／Ｌ）胁迫下的１５种血浆游离氨基酸（ＰＦａａｓ）含量的变化趋势进行了分析。结果显示，血浆ＰＦａａｓ总量随着碱度的上升而显著增加，而且随着胁迫时间的延长，由必需氨基酸增量为主转向非必需氨基酸增量为主；作为能量代谢的主要底物，非必需氨基酸中的脯氨酸（Ｐｒｏ）和缬氨酸（ＶａＬ）含量随着碱度的增加而显著增加（Ｐ＜０．０５），尤其是Ｐｒｏ在碱度胁迫组中的含量增幅为对照组的２３倍．．．
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
何强 常玉梅 苏宝锋 孙博 孙效文 梁利群
采用封闭流水式呼吸室法，研究了不同浓度碳酸盐碱度（以下简称ＣＡ，１０、３０、５０、７０、９０、１１０ ｍｍｏｌ／ｌ）对体质量为（８４．６２±６．７０）ｇ的达里湖瓦氏雅罗鱼耗氧率、氨氮排泄率、血氨含量及排氨基因Ｒｈ家族（ＲｈＡｇ、Ｒｈｂｇ、ＲｈＣｇ１和ＲｈＣｇ２）在鳃组织中表达量的影响。结果表明，随着碱度的升高，瓦氏雅罗鱼的耗氧率和排氨率均表现为先下降后上升的趋势，且都显著低于对照组（Ｐ＜０．０５）。在ＣＡ９０时，耗氧率和排氨率均达到最低值，表明ＣＡ９０可能是达里湖瓦氏雅罗鱼所能承受的最大碱度胁迫。相反，随着碱度的升高，瓦氏雅罗鱼的血氨含量呈现先上升后下降的趋势，在ＣＡ９０时达到峰值。然而在ＣＡ．．．
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
魏威 何玉英 李朝霞 周雨欣 李健 谢拥军
采用cDNA末端快速扩增(RACE)技术获得中国对虾(Fenneropenaeus chinensis) ATG5基因cDNA全长，命名为FcATG5。利用实时荧光定量技术分析了FcATG5的组织表达及其在pH和碳酸盐碱度胁迫下的表达特征，并利用RNAi技术验证其功能。基因分析显示，FcATG5 cDNA全长为2225 bp，开放阅读框为810 bp，编码269个氨基酸，预测其编码的蛋白质分子量为31.10kDa，理论等电点为5.59，为疏水性蛋白，包含一个APG5自噬相关蛋白结构域，无跨膜结构，不包含信号肽。同源性和系统进化分析显示，FcATG5具有高度保守性，与凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)同源性最高，达98.14%。组织表达分析显示，FcATG5在中国对虾各组织中均有表达，其中，肌肉中表达量最高(P<0.05)，血淋巴细胞中最低(P<0.05)，表明该基因的表达量越高，越有利于中国对虾存活。结果表明，FcATG5在pH、碳酸盐胁迫下的表达量均显著升高(P<0.05)，推测自噬可能参与中国对虾应对非生物胁迫的调控。本研究结果对水生动物特别是甲壳动物中细胞自噬研究具有重要的借鉴意义，有助于推进中国对虾盐碱水养殖的研究进程。
[期刊] 海洋渔业
[作者]
刘一萌 包锬 李航 么宗利 孙真 高鹏程 周凯 王菲 来琦芳
通过青海湖裸鲤(Gymnocypris przewalskii)转录组数据获得热激蛋白60基因(GpHsp60)的序列片段,利用RACE克隆完善GpHsp60的mRNA全序列,得到序列全长2 995 bp:包括开放阅读框1 728 bp, 5′UTR和3′UTR分别为137 bp和113 bp;编码氨基酸575个,分子量为61.34 kDa,理论等电点为5.38,具有线粒体Hsp60高度保守序列。通过实时荧光定量PCR检测发现,青海湖裸鲤幼鱼受碳酸盐碱度(29 mmol·L~(-1))胁迫后,GpHsp60基因在脑、鳃、肝、肾、心脏、肠、肌肉、脾脏和皮肤等组织都有所表达。与对照组相比,胁迫组青海湖裸鲤幼鱼鳃(1.99倍)、脑(1.95倍)、肝脏(3.52倍)、心脏(2.29倍)、肌肉(3.53倍)和肾脏(4.34倍)中GpHsp60基因都呈现高表达,说明以上组织细胞中的Hsp60可能被招募参与应答水环境碱度胁迫;而肠(0.257倍)和脾脏(0.251倍)组织中的Hsp60表达量却呈现下降,这可能与组织细胞线粒体功能效率降低有关;皮肤组织在受碱度胁迫后GpHsp60基因表达量无显著变化,表明青海湖裸鲤幼鱼皮肤组织未参与对碳酸盐碱度胁迫的应答。研究结果为揭示Hsp60基因在青海湖高碳酸盐碱度环境中生活的特有物种青海湖裸鲤在碱度胁迫下发挥的作用,为探讨和研究高碳酸盐碱度胁迫下水生生物体内分子响应机制研究提供了基础数据。
关键词：
青海湖裸鲤 热激蛋白60 碳酸盐碱度
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
李亚伦 何玉英 王琼 管晨惠 周玉洁 李朝霞
为探究急性盐碱胁迫下中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis) ABC转运蛋白(ATP-binding cassette transporter) G5基因的表达特征，本研究应用RACE克隆技术获得中国明对虾ABCG5基因，并将其命名为FcABCG5。该基因cDNA全长为2 718 bp，开放阅读框1 923 bp，共编码640个氨基酸，预测的蛋白分子量为71.39 kDa，理论等电点为9.12，预测基因位于内质网上，为疏水性蛋白，包含一个NBD和一个TMD结构域，不包含信号肽。同源性与系统进化分析结果显示，FcABCG5转运蛋白保守性强，与斑节对虾(Penaeus monodon) ABCG5蛋白同源性最高，达到98.91%。组织特异性分析结果显示，FcABCG5在各组织中均有表达，鳃中表达水平最高(P<0.05)，眼柄中最低(P<0.05)。盐碱胁迫下，FcABCG5在鳃组织中的表达量呈先升高后下降的趋势，胁迫6 h时达最高值(P<0.05)，比对照组高2.12倍，利用dsRNA干扰实验对该基因进行敲降，盐碱胁迫下，沉默FcABCG5基因会使对虾的死亡率高达60%，显著高于对照组40% (P<0.05)，说明该基因的表达量越高，对中国明对虾的存活越有利。本研究中受胁迫的中国明对虾FcABCG5表达量高，可能是由于鳃在直接接触盐碱水环境后，通过FcABCG5介导的物质转运启动渗透压调节，应对渗透压失衡。
[期刊] 中国水产科学
[作者]
么宗利 应成琦 周凯 王慧 来琦芳
以广盐性养殖的凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)为研究对象,采用抑制消减杂交(suppression subtractive hybridization,SSH)和定量PCR的方法,研究其在高碳酸盐碱度胁迫下转录组水平的基因表达差异,以期从基因组水平研究对虾对高碳酸盐碱度胁迫的适应机制。结果表明,以高碳酸盐碱度(20 mmol/L)胁迫第4天凡纳滨对虾鳃组织和低碱度(2 mmol/L)对照组鳃组织为材料,通过斑点杂交筛选,发现鳃组织中有158个克隆子表达上调,291个克隆子表达下调。挑选150个高表达差异的克隆子进行测序,获得100个序列,其中50个得到成功注释。经过GO分...
[期刊] 中国水产科学
[作者]
吴俊伟 赵金良 赵岩 罗明坤 王燕 赵永华
为了解尼罗罗非鱼（ＯｒｅＯｃｈｒＯｍｉｓ ｎｉｌＯｔｉｃｕｓ）在碱环境适应过程中氨代谢调节途径，本研究选取了５个氨代谢相关酶：谷氨酰胺合成酶（ｇｌｕｔａｍｉｎｅ ｓｙｎｔｈｅｔａｓｅ，ｇｓ）、碳酸酐酶５ａ（ｃａｒｂＯｎｉｃ ａｎｈｙｄｒａｓｅ ５ａ，ｃａ－５ａ）、谷氨酰胺酶（ｇｌｕｔａｍｉｎａｓｅ ２，ｇｌｓ２）、氨甲酰磷酸合成酶（ｃａｒｂａｍｙｌ ｐｈＯｓｐｈａｔｅ ｓｙｎｔｈｅｔａｓｅ １，ｃｐｓ１）、氨转运蛋白（ａｍｍＯｎｉｕｍ ｔｒａｎｓｐＯｒｔｅｒ ｒｈ ｔｙｐｅ ｃ－２ ｌｉｋｅ，ｒｈｃｇｌ２），研究了急性碳酸盐碱度胁迫条件下，尼罗罗非鱼血氨浓度变化、氨代谢相关酶基因表达水平及其酶．．．
[期刊] 淡水渔业
[作者]
涂翰卿 赵金良 赵岩 曹晓颖
为了解罗非鱼在碱水环境适应过程中的氨代谢机制,将尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)放在(2、4、6 g/L)碳酸盐(Na HCO3)碱水环境中进行急性胁迫。检测碱胁迫72 h内的血氨浓度,肝、肾、鳃组织及水体、尿液、血液尿素浓度变化,肝、脑、鳃谷氨酰胺(Gln)浓度,肝、脑谷氨酰胺合成酶(GS)活性,肝氨甲酰磷酸合成酶(CPS)活性,不同组织中GS、CPS、谷氨酰胺酶(GLS)的基因表达变化。结果显示:急性胁迫下尼罗罗非鱼血氨浓度上升,于12 h到达峰值。随着血氨升高,各组织中的尿素浓度0~6 h快速升高,CPS活性0~2 h快速升高,基因相对表达量0~24 h升高,表明尿素代谢途径0-6 h内启动。肝谷氨酰胺浓度0~6 h快速升高到达峰值,肝GS活性0~6 h和12~24 h快速升高,组织中GS、GLS基因相对表达量在0~24 h升高,表明谷氨酰胺代谢途径0~6 h内启动。结果表明,在碱胁迫条件下,尼罗罗非鱼在胁迫早期同时启动尿素代谢途径与谷氨酰胺代谢途径共同参与调节血氨浓度。
[期刊] 林业科学
[作者]
姜英淑 陈书明 王秋玉 卢宝明
分别对黄山店欧李进行25d的高浓度NaHCO3溶液处理、干旱处理以及碳酸盐与干旱共同处理,测定胁迫期间该物种各理化指标的变化,研究欧李对不同环境胁迫的抗逆机制。结果表明:欧李的叶绿素a、丙二醛和脯氨酸含量在不同的逆境处理间差异显著;碳酸盐处理的电解质外渗率、POD活性、脯氨酸含量等生理指标变化平缓,与对照差异不明显;干旱处理和盐与干旱协同处理的各项指标波动很大。相关分析表明:不论是碳酸盐胁迫还是干旱胁迫,欧李的电解质外渗率、MDA含量和POD活性存在一定程度的正相关,碳酸盐处理下POD活性与电解质外渗率和MDA含量间达到显著的正相关。
关键词：
欧李 干旱胁迫 碳酸盐胁迫 生理指标
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
安思琪 何琳 范建勋 原居林 林志华
缢蛏(Sinonovacula constricta)为广盐性贝类，自身存在抵抗外界盐度胁迫的渗透调节机制。为探究缢蛏在适应盐度胁迫过程中发挥渗透调节作用的主要游离氨基酸(free amino acids， FAA)及其降解途径，本研究测定了不同盐度(5、20和35)胁迫下缢蛏组织中的渗透压、游离氨基酸含量，并结合其肌肽合成酶基因(carnosine synthase， Sc-CARNS)的表达及相关生理指标的变化研究了Sc-CARNS基因的功能。结果显示，缢蛏鳃、足和血淋巴中渗透压和总游离氨基酸含量随着盐度的升高而升高，且各组织渗透压都在盐度胁迫24 h后达到稳态。此时，缢蛏鳃、足和血淋巴中随盐度变化含量变化最明显的游离氨基酸(FAA)分别为Ala、Gly、Glu、Pro；Ala、Gly、Arg、Tua；Ala、Ser、Thr、Gly。前期研究结果显示，在缢蛏盐度胁迫转录组中Sc-CARNS表达上调，与盐度调节相关。Sc-CARNS在缢蛏肌肉型组织中表达量最高。低盐胁迫下，Sc-CARNS mRNA表达量和肌肽含量显著升高(P<0.05)，丙氨酸含量变化趋势与肌肽相反。受RNA干扰后，正常盐度和低盐胁迫下，Sc-CARNS基因在足中mRNA表达量和肌肽含量先下降后升高，丙氨酸含量变化则相反，48 h干扰效率和含量变化最高，且肌肽与丙氨酸是1∶1的转化。结果表明，缢蛏属于渗透压随变者，体内FAA中的Ala在渗透调节方面的贡献率最大，CARNS是丙氨酸代谢为肌肽的关键酶，参与渗透压调节过程。本研究揭示了低盐胁迫下缢蛏渗透压调节的关键机理，为揭示竹蛏科(Solenida)贝类独特的盐度耐受性机制提供依据。
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
付萍 吕建建 刘萍 李健
本研究分析了不同盐度环境下三疣梭子蟹（Ｐｏｒｔｕｎｕｓ ｔｒｉｔｕｂｅｒｃｕｌａｔｕｓ）鳃组织中游离氨基酸（Ｆａａｓ）的含量及浓度变化规律，明确Ｆａａｓ的组成及其在盐度适应中发挥的功能。结果显示，在正常海水中，三疣梭子蟹鳃组织中牛磺酸（ｔａｕ）的浓度最高（２．５４ ｍｇ／ｇ），其次分别为丙氨酸（ａｌａ，０．６５ ｍｇ／ｇ）、谷氨酸（ｇｌｕ，０．６４ ｍｇ／ｇ）、精氨酸（ａｒｇ，０．５８ ｍｇ／ｇ）、甘氨酸（ｇｌｙ，０．４８ ｍｇ／ｇ）和脯氨酸（Ｐｒｏ，０．２５ ｍｇ／ｇ）；在盐度１０–５０范围内，梭子蟹鳃中总游离氨基酸（ｔｏＦａａ）的含量随盐度的增加而显著升高（Ｐ＜０．０５），盐度５０时，ｔｏ．．．
[期刊] 中国水产科学
[作者]
房文红 王慧 来琦芳
实验结果表明 ,pH为 8.6、9.0、9.3和 9.5时 ,中国对虾 (Penaeuschinensis)幼虾 2 4h半致死碱度(LC50 )分别为 2 2 .0 0、11.66、6.57和 3.2 8mmol/L ;随着碱度、pH的升高 ,中国对虾幼虾的存活率下降。碱度和 pH对幼虾的致毒效应具综合作用 ,pH 8.6～ 9.0时 ,HCO3- 、CO32 - 共同影响幼虾的存活率 ;pH 9.0～9.5时 ,OH- 协同CO32 - 影响幼虾的成活 ;pH 9.5以上时 ,OH- 逐渐成为影响幼虾成活的主要因子
[期刊] 海洋渔业
[作者]
房文红 王慧 来琦芳 黄聪年
本试验观察了K~+、SO~(2-)_4和碳酸盐碱度对大银鱼仔鱼存活的影响。大银鱼仔鱼在K~+浓度10～302.4mg/L中96h成活率为95～100％;在SO~(2-)_4384～1920mg/L中96h成活率为100％,并且它们能正常生长;碳酸盐碱度低于14me/L时96h成活率为100％,当碱度升到22me/L时其成活率为80％。
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
沈黎明 王舰
用氨基酸自动分析仪测定经PEG、NaCl和高温处理后林生山黧豆幼苗中游离氨基酸的组成和含量。结果表明不同处理，特别是水分胁迫，使林生山黧豆幼苗中以DABA和HSE为代表的游离氨基酸的含量显著增加。本文讨论了不同胁迫条件对植物游离氨基酸组成的影响，以及林生山黧豆幼苗游离氨基酸组成对逆境反应的特点。研究证明，以DABA为主的天门冬族氨基酸是不同发育阶段和不同胁迫条件下林生山黧豆体内游离氨基酸的主体。
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