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[期刊] 西南农业学报
[作者]
黄燕芬 王自布 施琴 谢奇
目的】建立良好的百蕊草悬浮细胞培养体系,为后续利用基因工程改造百蕊草代谢途径获得高次生代谢产物新品种,实现野生资源的替代奠定基础。【方法】以百蕊草愈伤组织为材料,探寻百蕊草悬浮细胞生长与营养消耗规律的基础上,优化培养液氮和磷的初始投入量及铵态氮和硝态氮的比例(NH_4~+/NO_3~-)。【结果】在30 d的培养过程中,悬浮细胞生长曲线出现较明显的延滞期(0～6 d)、对数生长期(7～15 d)、稳定生长期(16～24 d)和衰亡期(24 d后);百蕊草悬浮细胞培养28 d时,起始总氮浓度70 mmol/L、磷酸盐浓度1.3 mmol/L情况下,悬浮细胞干物质量均达最大值,低于或高于此两浓度都不利于细胞的健康生长;在此基础上进行悬浮培养细胞对硝态氮、铵态氮的需求探究。结果发现,培养过程中悬浮细胞生长对硝态氮的消耗多于铵态氮,铵态氮的利用消耗先于硝态氮,铵态氮的浓度过高会抑制细胞生长,NH_4~+/NO_3~-为20/50最适于细胞生长。【结论】在培养周期内百蕊草悬浮细胞生长曲线呈"S"形;以MS为基本培养基,氮浓度为70 mmol/L,磷酸盐浓度为1.3 mmol/L,NH_4~+/NO_3~-为20/50较有利于百蕊草细胞的悬浮培养;培养基总糖、蔗糖、还原糖以及硝态氮、无机磷的消耗均在其对数生长期较快,铵态氮在生长初期消耗快于硝态氮。
关键词：
百蕊草 基质营养物质 悬浮细胞
[期刊] 华北农学报
[作者]
张楠 王保军 张秀清 张京声 孙君社
研究了元宝草悬浮细胞生长及其金丝桃素类物质(金丝桃素和假金丝桃素)的代谢规律。悬浮培养细胞的生长周期为18 d,其中4~10 d是对数期。金丝桃素类物质在10 d达到46.06μg/g(DW),其含量增加与细胞鲜质量增长相偶联。可溶性糖的消耗与细胞的生长以及金丝桃素类物质的代谢有着密切的关系,是影响细胞鲜质量和金丝桃素类物质增长的重要因素。
[期刊] 林业科学研究
[作者]
梁军 魏刚 吕全 贾秀贞 张星耀
研究了印楝细胞悬浮培养系的建立及印楝细胞悬浮培养的条件。结果表明,印楝细胞悬浮系的建立以B5培养基,NAA2 0～4 0mg·L-1,采用直接倾倒法作为接种方法为好;基于生物量、印楝素含量和印楝素产率综合分析认为,印楝细胞悬浮培养的最佳条件为B5培养基,NAA2～4mg·L-1,蔗糖30g·L-1,培养温度25℃,及根据培养容器的大小选择合适的转速和装液量。
关键词：
印楝 细胞悬浮培养 印楝素 植物源农药
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
武发菊 尚勇良 安芳兰 董文教 宋玉霞 董金杰 陈苗苗 牟克斌 黄银君 刘学荣
【目的】研究在幼仓鼠肾细胞(BHK-21)悬浮培养过程中,不同浓度氨对其生长代谢的影响。【方法】用添加0,1.8,2.5,5.5,8.0和15.0 mmol/L氨的培养基培养BHK-21细胞,每隔12 h取样1次,用细胞计数仪进行细胞计数,测定细胞活力,采用AO/EB双染色法和Annexin V-FITC/PI流式细胞仪2种方法检测细胞的凋亡情况,同时测定细胞培养过程中葡萄糖、氨和乳酸浓度的变化。【结果】在BHK-21细胞连续培养过程中,当氨的添加浓度低于1.8 mmol/L时,其对细胞的生长几乎不产生抑制作用,细胞活性、细胞总数与对照组差异不显著,未出现细胞聚集成团现象;当氨添加浓度达到15...
[期刊] 林业科学
[作者]
范桂枝 翟俏丽 于海娣 王晓东 王博 詹亚光
以产三萜的白桦悬浮系为试验材料,在优化白桦悬浮细胞生长与三萜积累的培养基种类和接种量的基础上,分析白桦悬浮细胞生长和三萜积累的动力学关系,同时考察1个培养周期内白桦细胞内外主要营养成分的变化。结果表明:1)在MS,NT,IS,WPM,1/2MS,B56种培养基和10～40g·L-1接种量中,有利于白桦细胞生长和三萜生产的培养基为B5和接种量为20～30g·L-1FW;2)在1个培养周期内,白桦悬浮细胞培养过程中三萜的产量与细胞生物量是相偶联的,随着生物量的增加三萜产量呈增长趋势,其中,白桦细胞在第12天比生长速率达到最高0.18,三萜合成速率和比合成速率在第9天达到最高值,分别为0.73mg·...
关键词：
白桦 悬浮细胞 三萜 营养成分
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
臧新 梅兴国 周忠强 常俊丽
红豆杉细胞培养生产紫杉醇,是一种潜在的大规模生产紫杉醇的重要途径,然而和其它植物细胞培养一样,红豆杉细胞的紫杉醇含量较低等问题,限制着该技术的产业化进程。寻找提高和稳定紫杉醇产量的方法,是目前需要解决的主要问题。筛选合适的生物或非生物诱导子(如真菌培养物、茉莉酸甲酯、水杨酸、Cu2+、Ce4+、Ag+),提高细胞的紫杉醇产量,成为国内外研究的热点。
[期刊] 林业科学研究
[作者]
阙国宁 诸葛强
以牡竹属黄竹（ＤｅｎｄｒｏｃａｌａｍｕｓｍｅｍｂｒａｎｃｅｕｓＭｕｎｒｏ）的竹节及无菌苗根颈为外植体，培养于含有５ｍｇ／Ｌ２，４－Ｄ、０．２ｍｇ／ＬＫＴ和２００ｍｇ／ＬＬＨ的ＭＳ培养基上诱导愈伤组织，然后移至相同成份或不同浓度２，４－Ｄ的液体培养基中，进行悬浮培养，以建立分散性良好的悬浮细胞系。利用悬浮细胞和无菌苗叶片经酶解获大量原生质体，其产量分别约为每克鲜重２．５×１０５个和５×１０５个，活力均可达８０％。
关键词：
黄竹,细胞悬浮培养,原生质体分离
[期刊] 浙江农林大学学报
[作者]
陈红贤 于笑笑 王晨阳 张敏 刘忠华
对国槐Ｓｏｐｈｏｒａ ｊａｐｏｎｉｃａ槐角种胚细胞悬浮培养的动力学进行研究，在优化细胞接种量的基础上，分析测定培养周期内不同培养阶段的槐角细胞生长和培养基中碳源、氮源、磷源的消耗，以及细胞的鲜质量、干质量和黄酮产量的变化，从而了解细胞生长、营养消耗与次生代谢产物积累的基本规律，为建立结构化动力学模型奠定基础。结果表明：（１）初始接种量为４０．０００ ｇ·Ｌ－１时，最利于细胞的培养；（２）细胞的培养周期约为２７ ｄ，经过２７ ｄ的培养，生物量和黄酮的产量达到最高，分别为９．７３３ ｇ·Ｌ－１和５３．５６６ ｍｇ·Ｌ－１，对细胞比生长速率和黄酮比合成速率进行分析，得出黄酮的积累和细胞的生长为部分生．．．
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
胡博然 徐文彪 马峰旺
以宁夏农科院选育的新品种宁杞 1号 3年生树为试材 ,对影响枸杞胚细胞悬浮培养及其再生系统建立的培养基与激素配比进行了研究。结果表明 ,以人工授粉后 18d的幼果 ,剖取成熟胚作为外植体 ,选择 MS+6 BA1.0 mg/ L+IBA0 .5 m g/ L 培养基诱导愈伤组织 ,经单细胞悬浮培养建立了稳定的细胞系 ;MS+6 BA0 .2mg/ L 培养基较为适宜枸杞胚状体萌发成苗 ,该再生苗转移到 MS+NAA0 .2 mg/ L 生根培养基上 ,诱导生根并获得完整植株 ;共移栽成活 14株 ,成活率达 38.8%。
关键词：
宁夏枸杞 胚培养 细胞悬浮培养 植株再生
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
余舜武 朱永生 余毓君 章荣德 张端品
为了缩短建立胚性细胞悬浮系的进程 ,快速获得松脆胚性愈伤组织 ,以普通小麦、大麦和多花黑麦草为材料 ,采用能促进植株再生的高浓度铜离子作为毒害筛选因子 ,以MSD培养基为基本配方 ,2 .5mg L的 2 ,4 D浓度 ,不同梯度浓度的铜离子处理愈伤组织。结果表明 ,0 .1mmol L的Cu2 + 对愈伤组织具有较好的筛选作用 ,能使松脆胚性愈伤组织保存下来 ,而其它类型愈伤组织褐化死亡。产生的松脆性愈伤组织能很快适应悬浮培养 ,从而快速建立胚性细胞悬浮系。用密实细胞体积及其斜面高度评价细胞悬浮系的特点 ,发现悬浮细胞不仅具有很强的生长势 ,提高了愈伤对营养缺乏的忍受度 ,而且保持了高分化潜...
关键词：
细胞悬浮培养 胚性愈伤组织 铜离子
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
刘菲 彭克勤 彭志红 夏石头 萧浪涛
以喜树的幼嫩叶片为材料,探讨了MS、SH、B5基本培养基和不同激素(2,4-D、NAA、6-BA)配比对愈伤组织诱导及继代培养的影响,并筛选喜树细胞悬浮培养体系的最优培养基配方.结果表明,喜树幼嫩叶片外植体诱导愈伤培养以SH+2.0mg/LNAA+0.5mg/L6-BA为最优,愈伤组织诱导率为92%.继代培养以MS+2.0mg/L6-BA+0.5mg/LNAA为最适,在此条件下诱导的愈伤组织质地疏松,适于进行悬浮培养.
关键词：
喜树 愈伤组织 组织培养 悬浮培养
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
龙炎杏 张学文 罗莎 肖楠 赵燕
为建立稳定的黄花蒿悬浮细胞系,以黄花蒿428–A植株的子叶、茎、腋芽和叶片为外植体,以MS为基础培养基,采用3因素(6–BA、NAA、2,4–D)4水平的L16(43)正交试验,优化黄花蒿愈伤组织诱导培养基,分析不同质量浓度(0、5、10、15、20、25、30 mg/L)潮霉素对黄花蒿悬浮细胞生长的影响,比较羧苄青霉素(0、100、150、200、250、300 mg/L)对农杆菌的抑制效果,并运用农杆菌介导法对黄花蒿悬浮细胞进行GUS报告基因及色氨酸单加氧酶iaaM基因的遗传转化。结果表明:黄花蒿叶片愈伤诱导率较高,叶片愈伤组织较优培养基为MS+6–BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L,出愈率可达99.33%;潮霉素最适筛选质量浓度为30 mg/L,羧苄青霉素最适抑菌质量浓度为200 mg/L;转基因抗性愈伤GUS组织化学染色及PCR鉴定结果表明,外源基因iaaM已导入并整合至黄花蒿基因组中。
[期刊] 林业科学
[作者]
尹忠平 上官新晨 陈继光 吴少福 黎冬明
通过大孔树脂吸附、硅胶柱层析、Sephadex LH-20凝胶层析、半制备高效液相色谱及重结晶对青钱柳悬浮培养细胞三萜酸进行分离纯化,获得5个单体三萜酸,经高分离度快速液相-飞行时间质谱(RRLCTOF/MS)、核磁共振氢谱(1H NMR)和核磁共振碳谱(13C NMR)等分析,分别被鉴定为2α-羟基齐墩果酸、2α-羟基熊果酸、白桦脂酸、齐墩果酸、熊果酸,其中2α-羟基齐墩果酸和白桦脂酸是首次在青钱柳中得到分离鉴定。
[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
欧阳杰 武彦文 王晓东 赵兵 王玉春
肉苁蓉细胞悬浮培养的生长周期约为25 d,细胞内苯乙醇糖甙(PeG)的比生成速率YP/X与肉苁蓉细胞比生长速率μ大致成线性关系,为生长偶联型.在培养过程中,培养基中的磷酸盐和氨盐被迅速消耗,而硝酸盐的利用稍慢,基于蔗糖、氨盐和硝酸盐的细胞收率系数分别为0.481、60和6.4 g/g,基于蔗糖的PeG收率系数为0.055 g/g.根据细胞基本元素分析及各收率系数之间的关系,计算得出了肉苁蓉细胞悬浮培养的化学计量方程式,为细胞的生物反应器扩大培养提供理论依据.
关键词：
肉苁蓉 苯乙醇糖甙 悬浮培养 动力学
[期刊] 华北农学报
[作者]
李楠 高广瑞 魏景芳 李冬杰 刘颖 薛志忠
采用不同的萃取剂从甘草的根、茎、叶、草药和甘草悬浮培养细胞中萃取甘草酸。结果表明,选择含氨0.5%、浓度为10%的乙醇溶液作为萃取剂,萃取得到的甘草酸粗品含量均高于50%乙醇萃取的萃取含量,检测出在优选甘草悬浮培养细胞中所含的甘草酸铵的含量高于其他材料,其中通过细胞悬浮培养,获得的甘草酸铵含量最高可达160.81 mg/g。
关键词：
甘草悬浮培养细胞 萃取剂 甘草酸
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