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[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 何宏轩  张西臣  尹继刚  杨举  李建华  陈丽凤  李德昌  
碘醚柳胺脂质体定向剂是抗肝片吸虫药—碘醚柳胺的一种新剂型,为了探讨其是否对绵羊细胞免疫机能有影响,本试验将8只通过粪检为肝片吸虫病阳性的绵羊分为两组每组4只,试验组以0.3mg·kg~(-1)体重皮下注射碘醚柳胺脂质体定向剂,对照组以3mg·kg~(-1)体重皮下注射碘柳胺注射液,分别于用药前和用药一周后用 E-玫瑰花环形成试验对 T 细胞计数,并对用药前后的数据进行 t 检验。结果为:试验组用
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 何宏轩  张西臣  陈丽凤  尹继刚  杨举  李建华  李德昌  
用脂质体包裹抗肝片吸虫药—碘醚柳胺,经改良的冷冻溶融法制备成碘醚柳胺脂质体定向剂(包裹率为58%).给绵羊单剂量皮下注射(0.3mg·kg~(-1),B.W.),用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定该药在绵羊体内不同时间的血浆药物浓度以及组织中的药物含量。结果表明该药的药代动力学符合一室模型,动力学方程为:C=3.1146(e~(0.012t-e~(-1.5155t)).药代动力学参数为:达峰时间(T_(max))为2.81±0.7492d,峰
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 陈丽凤  张西臣  杨永胜  何宏轩  尹继刚  杨举  
本研究用改良的冷冻融溶法制备出碘醚柳胺(Rafoxanide,Raf)脂质体定向剂,并对其药物特性进行了观察与测定.用 Raf 与聚乙烯吡咯烷酮(Polyvinylpyrrolidone,PVP)共沉方法解决了 Raf 在水性介质中不溶的问题,从而为制备该药脂质体创造了必要条件.以薄膜分散法和冷冻融溶法为理论基础,采用单因素比较法优选出制备碘醚柳胺脂质体的最佳处方组成:药脂比为1:27(W/W);卵磷脂(Pc)与胆固醇(Chol)
[期刊] 华北农学报  [作者] 邵凯  
利用蛋氨酸锌对绵羊进行消化代谢和免疫机能的研究。结果表明 :(1)饲喂蛋氨酸锌 (Zn Met)有降低绵羊瘤胃液 pH值的趋势 ;氧化锌组和蛋氨酸锌组的瘤胃液中NH3-N浓度都比对照组高 ,而ZnMet组的NH3-N水平比ZnO组有所降低 ,但较平稳。ZnMet具有一定的过瘤胃性能。(2 )ZnMet组绵羊布氏杆菌试管凝集反应抗体滴度明显高于ZnO组和对照组 (P
[期刊] 中国农业科学  [作者] 蔡勇  阿依木古丽  臧荣鑫  刘翊中  杨具田  乔自林  曹忻  徐红伟  吴建平  
【目的】探讨绵羊前体脂肪细胞冷冻保存的最佳冻存保护剂种类和浓度。【方法】在含20%胎牛血清的DMEM/F12培养液中分别添加不同浓度的DMSO、EG、PG、G和PVP作为冻存液,对原代培养的绵羊前体脂肪细胞进行冷冻保存后,检测复苏细胞存活率、细胞增殖能力、细胞中脂肪沉积量,测量GPDH活性,并用实时荧光定量PCR检测PPARγ和LPL mRNA的表达水平,最后对复苏细胞进行染色体核型分析。【结果】各种冻存保护液中,10%DMSO和5%DMSO+5%PVP组细胞存活率最高,与对照组相比差异不显著(P>0.05),其它各试验组复苏细胞存活率均显著低于对照组(P<0.05);各试验组中10%DMSO...
[期刊] 西南农业学报  [作者] 彭婷  唐作顺  胡庭俊  莫文湛  周天政  
【目的】探讨不同添加剂量的黄芪多糖脂质体对肉鸡生长性能及免疫器官指数的影响,为黄芪多糖的临床推广提供参考。【方法】在肉鸡日粮中添加不同剂量的黄芪多糖脂质体,于试验第14、28及42天计算其平均日增重、饲料转化率、特定生长率、胸腺指数、脾脏指数和法氏囊指数。【结果】黄芪多糖脂质体能够显著提高肉鸡平均日增重、饲料转化率、特定生长率、胸腺指数、脾脏指数和法氏囊指数。【结论】提高肉鸡生长性能的最佳黄芪多糖脂质体添加剂量为100 m L/kg,连续添加14 d效果最佳。提高肉鸡免疫器官指数的最佳黄芪多糖脂质体添加剂量为50 m L/kg,连续添加28~42 d效果最佳。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 范云鹏  王德云  胡元亮  刘家国  赵晓娟  袁菊  高焕  王远垒  
为了观察黄芪多糖(APS)被制备成黄芪多糖脂质体后是否能够提高其生物活性,用MTT法测定了其对鸡T、B淋巴细胞增殖的影响,以APS溶液和空白脂质体作为对照。结果显示:APS脂质体在125~15.625μg.mL-1时无论是单独作用还是协同植物血凝素(PHA)作用均能显著促进鸡T淋巴细胞的增殖,并且在125~31.25μg.mL-1时,效果显著优于APS溶液和空白脂质体(P<0.05);APS脂质体在125~15.625μg.mL-1时无论是单独作用还是协同脂多糖(LPS)作用均能显著促进鸡B淋巴细胞的增殖,并且在31.25μg.mL-1的效果显著优于APS溶液和空白脂质体(P<0.05)。表明...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 张艳丽  许丹  庞训胜  万永杰  王子玉  孟立  宋辉  王锋  
为获得转基因克隆羊的供体细胞,本试验采用组织块培养法结合胰蛋白酶消化法分离纯化得到奶山羊胎儿成纤维细胞(gFFs),绘制了生长曲线,鉴定了胎儿细胞性别及核型特征,并且研究了脂质体量、质粒量和转染时间对gFFs的绿色荧光蛋白(GFP)转染效率的影响。结果表明:该培养体系可以支持奶山羊胎儿成纤维细胞的体外生长,其细胞形态为梭形,高度汇合后呈火焰状,增殖特性以及核型特征均为正常,性别鉴定显示该奶山羊胎儿细胞为雌性,符合体细胞转基因克隆的基本要求。24孔板中采用脂质体转染试剂4.0μL、质粒DNA 1.2μg,转染6 h可以获得最佳的转染效果,转染效率达4.21%。
[期刊] 水产学报  [作者] 赵浩斌  朱作言  
采用脂质体法成功地使gfp基因转入鲫囊胚细胞株CAB细胞基因组,获得了具有G418抗性的细胞。以转化细胞为供体,银鲫卵为受体,核移植得到了转基因的囊胚和原肠胚;并发现4℃处理细胞24h能显著改善核移植胚胎的发育。
[期刊] 水产学报  [作者] 叶寒青  陈松林  沙珍霞  
通过3种脂质体(genejammer,genejuice和metafectene)介导绿色荧光蛋白基因转化花鲈胚胎干细胞,探讨不同脂质体介导的花鲈胚胎干细胞(LJES1)的转化效率,以及影响外源基因转化效率的因素,如细胞接种时间、初始接种密度、DNA和脂质体用量以及它们之间的比例等。实验发现,genejammer转化LJES1细胞效率最高,适合于该细胞系的转化。对于同一种脂质体,DNA与脂质体用量的比例对于绿色荧光蛋白基因转化LJES1最为重要,DNA与genejammer的比例为1∶6时,转化效率最高,为27.3%;DNA与genejuice的比例为1∶4时,转化效率最高,为12.1%;而D...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 步志高  陈万芳  宋大鲁  
3日龄雏鸡皮下注射淫羊藿-蜂胶合剂,于7,21,35,49日龄分别采用微量全血~3H-胸腺嘧啶核苷(~3H-TdR)掺入法和乳酸脱氢酶(LDH)释放法测定雏鸡外周血 T 淋巴细胞转化率和自然杀伤细胞(NK)活力。注射剂量0.4ml/羽能极显著(P
[期刊] 中国农业科学  [作者] 吕琼霞  张书霞  赵茹茜  
【目的】探讨不同时间运输应激对猪免疫机能的影响及其相关细胞因子的调控作用。【方法】将不同运输时间的猪血清稀释后单独或与植物血凝素A(PHA)和脂多糖(LPS)混合后分别刺激正常猪外周血淋巴细胞,用噻唑蓝(MTT)比色分析法分别检测淋巴细胞增殖指数;另用ELISA方法检测试验猪血清中IL-1β、IL-2、IL-4、IL-6、IL-10及TNF-a含量的动态变化;分析淋巴细胞增殖指数的变化与各种细胞因子之间的相关性。【结果】经1h、2h、4h的运输应激后,1﹕32稀释的受试猪血清对T、B淋巴细胞转化能力均有影响,都是先升高,并以1h运输猪血清的刺激能力最强(P<0.05),随后开始下降,到4h时降...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 周东蕊  杨利国  姜勋平  张书霞  杨灿锋  
选用正在产蛋的罗曼鸡 ,取其排序第 3的卵泡分离颗粒层细胞 ,用含血清培养基培养 ,并用含脂质体每孔 0 0 ,0 6,1 2 ,2 4,4 8μL和 bcl 2基因重组质粒每孔 0 2 μg转染卵泡颗粒细胞。用流式细胞术等方法分析转基因后的原代细胞和传代细胞的生长与凋亡情况。结果发现 ,与未转染组相比 ,转染后的传代细胞分裂速度较快 (P
[期刊] 中国水产科学  [作者] 汪开毓  邓龙君  肖丹  耿毅  黄小丽  陈德芳  
采用反相蒸发法制备嗜麦芽寡养单胞菌的脂质体疫苗,通过灌胃分别给予各组斑点叉尾鮰(Ictalurus punctatus)脂质体疫苗(Ⅰ-Ⅲ组)、嗜麦芽寡养单胞菌灭活苗(Ⅳ组)和生理盐水(Ⅴ组),每2周给药1次,共3次。于接种疫苗后第1天、14天、28天和第49天采集静脉血,测定白细胞的杀菌活性和血清抗体IgM含量的变化,并用细菌攻毒实验检测免疫保护效应。结果显示,本实验制备的脂质体疫苗粒径约为(0.9±0.3)μm,包封率为53.23%,与嗜麦芽寡养单胞菌灭活苗相比能显著增强斑点叉尾鮰吞噬细胞的杀菌活性和血清抗体IgM水平。腹腔注射活菌攻毒后,脂质体疫苗免疫的Ⅰ-Ⅲ组的相对免疫保护率分别为34...
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 耿晓晖  富俊才  韩凯  陈东  
为建立绵羊肌内脂肪前体细胞的体外培养模型,选用组织块法培养绵羊肌内脂肪前体细胞,制备用荧光染料PE(Phycoerythrin)标记的兔抗绵羊Pref-1蛋白的多克隆抗体,通过流式细胞术分离纯化脂肪前体细胞,对纯化后的细胞进行诱导分化以及油红O染色鉴定。结果表明:利用流式细胞仪能分选纯化出被标记的肌内脂肪前体细胞且分选率近30%;纯化后得到的细胞是功能活跃的脂肪前体细胞。研究表明,用绵羊羔羊肌肉组织采用组织块培养法可以建立绵羊肌内脂肪前体细胞培养模型,抗绵羊Pref-1蛋白多克隆抗体可以作为纯化脂肪前体细胞的工具。
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