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[期刊] 西南农业学报  [作者] 徐文婷  张雅琼  董文汉  白燕冰  李泽生  孙文丽  杨生超  谢世清  梁泉  
铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)是典型的菌根植物,共生真菌对铁皮石斛生长具有促进作用。本研究选用草炭土、菇渣、玉米芯等3种基质按不同比例配制了9种固体菌剂,比较测定了9种菌剂在室温条件下菌株的保存情况。选用保存效果最好的基质分别与内生真菌Chs-1-1、R2、S3制备菌剂进行铁皮石斛田间试验,测定了菌剂中内生真菌在铁皮石斛植株内的定殖能力和菌剂的促生效果。结果表明,草炭土的保存效果最好,在6个月后菌体数量达到8.1×107CFU/g;田间试验中,接种处理后铁皮石斛幼苗的存活率显著高于对照,最高者达95.78%;接种菌剂能有效提高幼苗的株高和根...
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 谢玲  张雯龙  蓝桃菊  陈艳露  覃丽萍  NARISAWA Kazuhiko  刘斌  
从不同植物的茎和叶中分离获得204株真菌,通过对白菜的致病性测定筛选获得1株能显著促进白菜生长的内生真菌菌株24L-4。结合形态学特征观察进行ITS-r DNA和18S-r DNA序列分析,对其进行鉴定,确定为DevrIeSIA LAgerSTroem。该菌株对铁皮石斛组培苗的株高、叶宽、茎径和干质量分别较未接种对照处理增加33.3%、65.7%、27.3%和45.1%,显著高于对照处理。同时,盆栽试验表明:D.LAgerSTroem铁皮石斛盆栽苗的茎径、鲜质量和干质量分别较无接种对照增加104.0%、83.9%和114.7%,显著高于对照处理。显微镜观察发现:D.LAgerSTroem可定殖...
[期刊] 浙江农林大学学报  [作者] 余望寅  姚冠  扎西拉姆  普琼  刘京晶  周湘  
【目的】揭示不同栽培环境对铁皮石斛Dendrobium catenatum内生细菌群落结构的影响,解析与石斛多糖含量存在潜在关联的功能菌种。【方法】针对温室人工基质培养和仿野生立木附生培养2种栽培体系下的铁皮石斛C9品系根、茎、叶等各部组织内生细菌,采用Illumina测序平台的Miseq进行高通量测序分析其菌落结构和多样性,同时利用逐步回归法分析内生细菌分布与组织多糖质量分数的关联性。【结果】铁皮石斛在2种栽培环境不同组织中的菌群结构差异显著(P<0.05),附生立木仿野生环境比温室环境下物种丰富度更高。同时,根部所含分类操作单元(OTUs)数量最多(112~630个),叶部则最少(28~73个)。其中,厚壁菌门Firmicutes(16.7%~34.9%)、拟杆菌门Bacteroidetes(8.7%~35.6%)和变形菌门Proteobacteria(15.9%~42.0%)的OTUs占优势。从菌种生理功能上看,固氮相关的菌种如弗兰克菌科Frankiaceae在树培环境下相对丰度更高,推测可能受树培寡氮环境的影响使固氮菌富集。逐步回归分析结果显示:不动杆菌Acinetobacter在根、茎、叶不同组织中的相对丰度与多糖质量分数变化关联度最大,其次为假单胞菌Pseudomonas。【结论】铁皮石斛内生细菌资源相当丰富,而栽培方式影响菌群分布,且与石斛多糖质量分数具有关联性。图4表1参27
[期刊] 西南农业学报  [作者] 尹利方  陈泽斌  夏体渊  耿开友  赵凤  靳松  李静雯  牛燕芬  
对污染铁皮石斛组培苗的内生细菌进行分离和鉴定,为预防铁皮石斛组织培养过程中内生细菌污染提供科学依据。采用NA培养基分离纯化细菌,通过形态特征、生理生化指标结合16S rDNA序列同源性分析,对引起铁皮石斛组培苗污染的内生细菌进行鉴定。引起铁皮石斛组培苗污染的内生细菌为SH42菌株,其形态特征及生理生化指标与莫海威芽孢杆菌(BAcilluS mojAveNSiS)基本相同;16S rDNA序列分析结果表明,SH42与B.mojAveNSiS(Am948970)聚在同一系统发育分支,其同源性为99.4%。因此确定引起铁皮石斛组培苗污染的内生细菌SH42为莫海威芽孢杆菌。
[期刊] 华北农学报  [作者] 李景蕻  张丽华  钟静  段连生  
为了探讨菌根真菌与铁皮石斛穴盘苗之间的共生关系,旨在筛选出影响穴盘苗生长的最佳优良共生真菌菌株。以几种不同的兰科菌根真菌和铁皮石斛穴盘苗为试验材料,进行接菌共生培养研究,比较不同菌株对接种共生穴盘苗的影响,结果表明:穴盘苗PS1、PS2、PS3处理的平均鲜质量增长率分别比对照高15.7%,7.4%,19.6%,与对照相比差异均达极显著水平(P<0.01);穴盘苗PS1、PS2、PS3、PS5处理的根增长率分别比对照高44.4%,43.6%,30.2%,33.4%,与对照相比较差异达极显著水平(P
[期刊] 西南农业学报  [作者] 蒋慧萍  庾韦花  张向军  蒙平  陈少珍  
以铁皮石斛分化苗为供试材料,采用常规瓶式培养方式和袋式培养方式进行生根培养。结果显示,两种培养方式生产的组培苗生长状况无明显差异,均表现出生根快且根系发达,生根率达到100%,苗健壮,质量好,移栽成活率高达90%以上;但在培养基灭菌和接种效率、污染率、移植成活率、培养空间利用率和炼苗效率等方面,袋式培养优于常规瓶式培养,可提高生产效率,达到节能增效目的。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 王玲  唐德强  王佳佳  尚云青  刘铭琳  林烨  
【目的】比较铁皮石斛原球茎多糖与野生铁皮石斛多糖的抗菌及体外抗氧化活性,为铁皮石斛组织培养物的应用提供依据。【方法】以大肠杆菌(EschErichia coli)、金黄色葡萄球菌(staphylococcus aurEus)、枯草芽孢杆菌(Bacillus suBtilis)、白色念珠菌(candida alBicans)为供试菌,用抑菌圈法测定2种铁皮石斛多糖对目标菌的抗菌活性;分别用羟自由基(·oh)、超氧阴离子自由基(o-·2)、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(dpph·)法和硫代巴比妥酸法(tBa法)结合分光光度法检测2种铁皮石斛多糖清除·oh、o-·2和dpph·及抗脂质过氧化...
[期刊] 林业科学研究  [作者] 陈连庆  王小明  裴致达  
濒危石斛菌根化吸收、积累P素营养的研究结果表明:可溶性和难溶性不同P源,对菌根化石斛组培苗生长的效应不同,试验处理3(KH2PO4)和处理6(FePO4)的干质量分别为0.018、0.019g,是处理1(K2HPO4)的2.62倍和2.78倍,差异达到极显著水平。可溶性P(KH2PO4)不同浓度对菌根化石斛组培苗的综合效应,表现在苗高、径粗和干质量等主要指标上,处理3为最适宜质量浓度(0.25g·L-1),与处理9(CK)相对比,苗高是2.64倍、径粗是2.16倍和干物质是3.87倍。对苗木N、C、P营养元素的吸收、积累分析,处理3是CK的1.72、1.40和11.53倍;不同有效P含量对石斛...
[期刊] 西南农业学报  [作者] 张禧庆  康冀川  何劲  韩晓丽  黄庆华  
对石斛内生炭角菌进行鉴定及活性成分初步研究。从流苏石斛的茎和长苏石斛的叶片中分离出两株炭角菌,将其编号为lsjz和csyz。运用形态学和分子生物学相结合的方法对这两株菌进行鉴定,结果表明:lsjz和csyz为Xylaria venosula。并测定了这两株菌的发酵终点、胞内及胞外多糖含量、胞内及胞外水溶性蛋白含量、抑菌活性等。
[期刊] 林业科学研究  [作者] 陈连庆  裴致达  韩宁林  张守英  
石斛菌根真菌液培生长特性研究结果表明 :F990 3菌株最适增殖生长温度是 30℃ ,其菌丝体平均每天生长速度最快 ,达 1 2 2 2cm ;培养液pH 3~ 8范围内F990 3菌株均能生长 ,以pH值 7时菌丝体增殖效果最好 ,干菌丝质量 1 4 5 0mg·mL- 1,增殖 131 8倍 ;提供的 8种N源 (硫酸铵、硝酸铵、硝酸钙、硝酸钾、脲、酒石酸铵、甘氨酸、谷氨酸 )中 ,吸收利用效果最好的是酒石酸铵N源 ,菌丝体干质量1 6 84mg·mL- 1,增殖 15 3倍 ,谷氨酸次之 ;提供的 8种C源 (葡萄糖、果糖、蔗糖、麦芽糖、乙醇、甘露醇、糊精、可溶性淀粉 ) ,F990 3...
[期刊] 林业科学  [作者] 陈连庆  王小明  裴致达  
石斛组培苗吸收利用N素营养的研究结果表明:不同N源对菌根化石斛组培苗生长(苗高、茎粗和生物量)的促进效应,以N源酒石酸铵为最好。酒石酸铵N源对石斛菌根真菌F9903菌株菌丝体增殖量也为最大值,所以酒石酸铵堪称两者增殖生长的最佳N源。同时,显示它们之间存在着密切的互动关系。浓度不同的酒石酸铵影响着菌根化石斛苗的生长和N、P、C元素的吸收与积累。方差分析结果表明,2.72mol.L-1的酒石酸铵是培育菌根化石斛苗的最适宜浓度。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 谢果珍  唐圆  宁晓妹  邱集慧  谭周进  
将10只雄性KM小鼠随机分为正常组及铁皮石斛多糖组,铁皮石斛多糖组小鼠按临床等效剂量(350mg/kg)灌胃8周,每天1次,每次每只0.4 mL,正常组小鼠灌胃等体积无菌水,灌胃结束后取肠道内容物及黏膜进行16S rRNA基因测序并进行功能预测,探讨铁皮石斛多糖对正常小鼠肠道菌群的影响。结果表明:铁皮石斛多糖提高了肠腔菌群的α多样性,并显著提高了肠黏膜菌群的α多样性,但β多样性的变化无统计学意义;铁皮石斛多糖使肠腔中Diaphorobacter,肠黏膜中Muribaculaceae、Staphylococcus的相对丰度显著增加,并增加了Akkermansia、Phascolarctobacterium、Turicibacter、Faecalibacteriu、Parabacteroides、Parasutterella等短链脂肪酸产生菌及Candidatus_Arthromitus、Bifidobacterium及Prevotella_9等有益菌的相对丰度;铁皮石斛多糖使小鼠肠腔及肠黏膜菌群中辅助因子与维生素代谢和氨基酸代谢的相对丰度提高。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 谢果珍  唐圆  宁晓妹  邱集慧  谭周进  
将10只雄性KM小鼠随机分为正常组及铁皮石斛多糖组,铁皮石斛多糖组小鼠按临床等效剂量(350mg/kg)灌胃8周,每天1次,每次每只0.4 mL,正常组小鼠灌胃等体积无菌水,灌胃结束后取肠道内容物及黏膜进行16S rRNA基因测序并进行功能预测,探讨铁皮石斛多糖对正常小鼠肠道菌群的影响。结果表明:铁皮石斛多糖提高了肠腔菌群的α多样性,并显著提高了肠黏膜菌群的α多样性,但β多样性的变化无统计学意义;铁皮石斛多糖使肠腔中Diaphorobacter,肠黏膜中Muribaculaceae、Staphylococcus的相对丰度显著增加,并增加了Akkermansia、Phascolarctobacterium、Turicibacter、Faecalibacteriu、Parabacteroides、Parasutterella等短链脂肪酸产生菌及Candidatus_Arthromitus、Bifidobacterium及Prevotella_9等有益菌的相对丰度;铁皮石斛多糖使小鼠肠腔及肠黏膜菌群中辅助因子与维生素代谢和氨基酸代谢的相对丰度提高。
[期刊] 华北农学报  [作者] 武荣花  康莹莹  王洁琼  刘佳  崔波  蒋素华  张开明  
以铁皮石斛原球茎为受体,用农杆菌介导1-氨基环丙烷-1-羧酸氧化酶(ACO)的反义基因对铁皮石斛进行遗传转化,并对影响转化的几个因素进行优化,结果表明:经刀切法处理的原球茎,在AS浓度为100μmol/L、农杆菌菌液OD600值为0.8的条件下侵染30 min,共培养60 h,接种到含有30 mg/L Mer和3.0 mg/L PPT的筛选培养基中,遗传转化效率最高。筛选获得的抗性植株经GUS组织化学染色和PCR鉴定,初步证明ACO反义基因已整合到铁皮石斛的基因组中。
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)  [作者] 李璐  赖钟雄  翁浩  
以离体保存5 a的春石斛和铁皮石斛原球茎为材料,采用正交试验对其试管苗壮苗生根的条件进行优化,从鲜重、假鳞茎、颜色、株高和根系生长等方面对植株进行综合评定.结果表明:适宜春石斛壮苗生根的培养基为1/2MS+20 g.L-1白糖+50 g.L-1香蕉匀浆物;适宜铁皮石斛壮苗生根的培养基为1/2MS+10 g.L-1白糖.
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