采用菌物学、生物化学等方法,对樟子松根部深色有隔内生真菌(DSE)D011和D014的分类地位进行分子验证,并从菌株生长和营养代谢的角度研究了DSE对盐胁迫的响应。结果表明:1)菌株D011和D014的ITS序列分别与Phialocephala.fortinii(D011)和P.helvetica(D014)相似度达到95%,Gen Bank登录号分别为KF973 196和KF973192;2)在Na Cl和Na2SO4胁迫条件下,DSE菌株D011和D014的生长和营养代谢与盐浓度呈明显的相关性,不同盐浓度条件下差异显著(p

【目的】研究NaCl胁迫下深色有隔内生真菌(DSE)菌株对白皮松的生长、光合荧光参数和矿质离子含量的影响。【方法】进行NaCl胁迫和接种处理，NaCl胁迫设置4个浓度水平：0%、0.1%、0.2%、0.3%;设置接种Paraphoma radicina(Pr),Phialophora mustea(Pm),Alternaria tenuissima(At),Acrocalymma vagum(Av)和未接种对照(CK)组。NaCl胁迫处理30 d,测定侵染率、植株生物量、光合荧光参数以及K~+、Na~+含量等。【结果】Pr、Pm、At、Av菌株的侵染率分别在0.3%、0.2%、0.1%、0.2%NaCl浓度达到最高。相比于0%NaCl胁迫，0.3%NaCl胁迫下的接菌白皮松地上、地下及总生物量均显著提高。接菌处理提高了白皮松总叶绿素含量和光合参数；降低叶绿素荧光ABS/RC、DIo/RC值，提高TRo/RC、ETo/RC值。此外，在0.3%NaCl浓度下，接种Pm、At、Av菌株的白皮松地上部分Na~+含量显著降低，分别下降34.0%、26.6%、26.3%;接种Pm、Av菌株的白皮松地下部分Na~+含量显著低于未接菌白皮松，分别下降24.4%和26.6%;在0.2%NaCl浓度下，接种Pr、Pm、At、Av菌株的白皮松地下部分K~+含量分别显著增加42.9%、58.99%、56.96%、55.92%,从而提高了植株K~+/Na~+比。【结论】适度的NaCl胁迫可提高DSE侵染率，接种DSE能降低NaCl胁迫对白皮松光合的影响，调节体内K~+、Na~+离子含量，缓解白皮松受到的胁迫伤害，以维持逆境下白皮松的生长发育。

【目的】探究干旱胁迫下深色有隔内生真菌（Dark septate endophytes, DSE）对樟子松Pinus sylvestris var. mongolica幼苗的接种效应。【方法】采用棚内盆栽试验，以2年生樟子松幼苗为材料，进行J09、J32、J35、A065和灭菌PD培养液5种接种处理，设置正常浇水（WW）、中度干旱胁迫（MW）和重度干旱胁迫（LW）3种干旱处理，观测不同处理下DSE定殖形态，测定幼苗生长指标、幼苗生理指标、根际土壤理化性质及根际土壤酶活性。【结果】随着干旱胁迫的加剧，菌丝直径变粗，横隔变短，微菌核增多；与不接种相比，在MW干旱胁迫时，DSE对樟子松的促生作用最显著，樟子松的地径、地上鲜质量、地下鲜质量、地上干质量和地下干质量最高分别提高了67.72%、36.13%、41.58%、36.13%和41.48%；与不接种相比，干旱胁迫下，接种DSE显著提高樟子松幼苗超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、过氧化物酶（POD）的活性和谷胱甘肽（GSH）的含量，最高分别可达229.60%、67.80%、28.16%和37.83%；接种DSE可显著降低幼苗丙二醛（MDA）、可溶性糖（PSS）和脯氨酸（PRO）的含量，与未接种相比，最高分别为74.16%、105.91%和51.24%;DSE能提高土壤有机质（OM）、全氮（TN）、速效氮（AN）、全磷（TP）、速效磷（AP）、全钾（TK）和速效钾（AK）的含量，与未接种相比，最高分别增加了19.85%、40.64%、35.25%、57.92%、48.11%、55.62%和68.84%；与未接种相比，DSE还能不同程度地提高土壤过氧化氢酶（S-CAT）、蔗糖酶（S-SC）和脲酶（S-UE）活性，最高分别可达71.85%、128.64%和65.05%，特别是干旱胁迫下，接种J09和A065对寄主植物的生物量、形态和生理指标有显著的正向影响；接种J09和A065后，根际土壤酶活性和理化性质显著提高，而接种J35显著抑制了樟子松幼苗的生长指标和生理指标。【结论】DSE定殖形态的变化可能是提高寄主植物的耐旱机制之一，DSE的定殖种类显著影响寄主植物耐旱性；接种J09和A065可以通过改善植物的生长指标、提高生理指标、维持较高的根际土壤理化性质和根际土壤酶活性等方式来缓解中度干旱胁迫和重度干旱胁迫对寄主植物的不利影响。因此，J09和A065有潜力应用于樟子松微生物肥料中。

从广西8个甘蔗主产区分离得到10个DSE菌株。这些菌株的核糖体DNA的28S基因D1/D2区序列与Genbank中最相似序列构建的系统发育树结果表明:10个菌株在系统树上聚为3个大分支。其中4个菌株以68%的支持率与枝孢属Cladosporium、茎点霉属Phoma、Lophiostoma sp.和Emericella sp.聚为一大类;5个菌株在84%的支持率上与Conlarium sp.、Cercophora sp.和Schizothecium sp.聚为一大类;1个菌株与Phialocephala fortinii聚为一类,支持率为100%。10个菌株均能与甘蔗共生而无致病性,其中7个菌...

以盆栽国槐Sophora japonica幼苗为试材,进行200 mmol·L-1氯化钠(NaCl)胁迫处理,采用菌液定量灌根法,通过测定国槐苗高增长量、根冠比、干质量,丙二醛(MDA)质量摩尔浓度,叶绿素、脯氨酸(Pro)质量分数,超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)活性等生理指标,探讨8株优势内生真菌分别灌根对国槐幼苗生长及生理的影响。结果表明:200 mmol·L-1氯化钠胁迫下,每种菌株处理下的国槐幼苗生物量与生理变化趋势基本一致。菌株H-1,H-3,H-4和H-6灌根处理的国槐幼苗抗盐

【目的】明确不同碳源及氮源对４种深色有隔内生真菌（Ｄａｒｋ ｓｅｐｔａｔｅ ｅｎＤｏｐｈｙｔｅｓ，Ｄｓｅ）生长的影响，确定４种Ｄｓｅ生长的最适碳源和氮源，为深色有隔内生真菌的研究和应用奠定基础。【方法】以沙门外瓶柄霉（ｅｘｏｐｈｉａｌａ ｓａｌｍｏｎｉｓ）、甘瓶霉（ｐｈｉａｌｏｐｈｏｒａ ｍｕｓｔｅａ）、菊异茎点霉（ｐａｒａｐｈｏｍａ ｃｈｒｙｓａｎｔｈｅｍｉｃｏｌａ）和枝状枝孢菌（ｃｌａＤｏｓｐｏｒｉｕｍ ｃｌａＤｏｓｐｏｒｉｏｉＤｅｓ）４种深色有隔内生真菌为材料，在固体和液体条件下培养，研究不同碳源（葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、甘露醇、果糖、乳糖、可溶性淀粉和山梨醇）和氮源（磷酸氢二铵、草酸铵、．．．

【目的】以樟子松根部深色有隔内生真菌（Dark Septate Endophytes, DSE）的分离鉴定和抗病促生菌株的筛选为目标，验证其对于樟子松的抗病性及生长发育的影响，为进一步研究深色有隔内生真菌-樟子松互作抗病机制打下基础。【方法】采用形态学鉴定和分子生物学技术相结合的方法，对樟子松根内深色有隔内生真菌进行了分离、鉴定，然后通过对峙培养和发酵液抑菌实验筛选抑制立枯丝核菌（Rhizoctonia solani）的高效生防菌株，以及将深色有隔内生真菌接种到一年生樟子松苗上测定其对樟子松的促生作用。【结果】共分离得到24株DSE菌株，主要包括Phialocephala bamuru、Phialocephala fortinii、Alternaria tamaricis、Paraphoma chrysanthemicola、Paraphoma radicina等。对峙培养条件下A024、A002对立枯丝核菌抑制效果最好，达到74.69%和71.20%，其中A024对立枯丝核菌的相对抑制效果达到22.47%，在抑制立枯丝核菌生长的同时，自身菌落生长未受到限制。发酵液抑菌实验中，抑制效果最好的菌株包括A024、A083和A002，抑制率分别为69.41%、64.11%和54.11%，可有效抑制立枯丝核菌菌丝的生长。樟子松一年生苗接种实验，菌株A003、A024对樟子松表现出较好的促生作用，同对照相比苗高、地径和生物量分别提高21.34%和15.40%、34.14%和30.67%、70.52%和35.85%。【结论】通过筛选得出的深色有隔内生真菌菌株A024对立枯丝核菌的抑制效果显著，且菌株A024和A003显著促进樟子松苗木的生长发育。本研究可为进一步研究深色有隔内生真菌-樟子松互作抗病机制提供理论依据和实践基础。

【目的】建立深色有隔内生真菌(dark septate endophyte,DSE)的遗传转化体系,获得绿色荧光蛋白(GFP)标记的DSE转化子,为研究DSE在植物根系的侵染定殖行为和侵染定殖规律奠定基础。【方法】以前期从健康枸杞根系分离的1株DSE菌株枝状枝孢菌(Cladosporium cladosporioides)S12菌株为供试材料,确定潮霉素B对其的最低抑制质量浓度,然后研究菌龄(13,15,17,19和21 h)、酶解时间(1.0,1.5,2.0,2.5,3.0和3.5 h)、崩溃酶质量浓度(10,15,20,25,30和35 mg/mL)和渗透压稳定剂种类(NaCl、KCl、CaCl_2和MgSO_4)对S12菌株原生质体制备的影响。采用聚乙二醇(PEG)介导原生质体转化法将PDL2质粒(含hph和gfp基因)转入S12菌株,对所获转化子进行表型、GFP荧光、PCR及拮抗活性(以尖孢镰刀菌枸杞专化型Fusarium oxysporum f. sp. Lycium barbarum LR-1菌株为靶标菌)检测,筛选与野生型S12菌株无明显差异且带有GFP标记的转化子。【结果】S12菌株在YPD液体培养基中培养17 h,以0.7 mol/L NaCl为稳渗剂,用30 mg/m L的崩溃酶酶解2.5 h,原生质体制备数量最多,为4.53×10~6 mL~(-1)。通过PEG介导,将PDL2质粒(含hph和gfp基因)转入S12菌株,可得47株转化子,转化效率2.35株/μg,从中筛选出10株生长速度和产孢量与野生型S12菌株无明显差异的转化子。荧光观察、PCR和拮抗活性检测结果表明,外源基因已成功整合到S12菌株中,成功建立了S12菌株的遗传转化体系,并获得了GFP标记菌株,有6株转化子对LR-1菌株的抑菌率与野生型S12菌株无明显差异。【结论】成功建立了遗传稳定性良好的S12菌株遗传转化体系,筛选出了6株抑菌效果与野生型菌株相当的转化子。

为探究印度梨形孢联合丛枝菌根真菌(AMF)对烟草抗旱性的影响，在温室条件下开展盆栽试验，以云烟87为材料，设立接种无菌水(CC)、印度梨形孢(CP)、AMF(PC)、印度梨形孢和AMF(PP)处理，以自然干旱的方式进行胁迫，测定烟草叶片中脯氨酸(Pro)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、丙二醛(MDA)生理生化指标和干旱相关基因NTNAC1和NAC4表达情况。结果表明，印度梨形孢和AMF均能促进烟草地上部分和地下部分生长，且干旱胁迫后褪绿不明显，干旱症状轻微。干旱胁迫7 d后，与CC组相比，CP、PC和PP组烟草叶片中Pro含量显著升高，分别为CC组的1.39,1.59,1.78倍；烟草叶片中SOD和POD活性呈现先升高后降低的趋势，CP、PC和PP组的SOD活性分别是CC组的1.15,1.22,1.33倍，POD活性分别是CC组的1.33,1.46,1.85倍；烟草叶片中MDA含量降低，CP、PC和PP组的MDA含量比CC组分别减少21.98%,23.98%,24.84%;烟草叶片干旱相关基因NTNAC1和NAC4表达上调，CP、PC和PP组NTNAC1基因表达量分别是CC组的3.37,3.88,5.07倍，NAC4基因表达量分别是CC组的3.04,3.59,5.56倍。该研究表明，印度梨形孢和AMF表现出显著的协同作用，能够显著提高烟草的抗旱性。

采用菌物学、生物化学等方法,对从以色列引进的哈茨木霉T28进行盐碱胁迫研究,从菌株生长和营养代谢的角度研究了该菌株对盐碱胁迫的响应。结果表明:在NaCl、Na2SO4和NaHCO3胁迫条件下,菌株生长和营养代谢与盐碱浓度呈明显的相关性,在cNaCl≤0.4 mol/L和cNa2SO4≤0.2 mol/L胁迫的56 h内,T28均可长满平板(Φ=90mm),生物量为0.17~0.38 g/150 mL和0.51~0.52 g/150 mL,碳利用率为16%~43%和8.4%~8.7%,磷利用率为3.3%~4.7%和4.3%~5.7%。菌株生长和对碳、磷相对利用率受抑制程度均较低;在NaHCO3胁...

【目的】研究盐碱胁迫下丛枝菌根（ＡＭ）真菌对沙枣苗木的生长和生理的影响，以期探索ＡＭ真菌提高沙枣苗木耐盐碱机制，为菌根化沙枣苗木在盐碱地推广应用提供理论基础。【方法】采用盆栽法研究了４种不同土壤盐碱度下分别接种根内球囊霉和摩西球囊霉对沙枣苗木的生长影响，并对沙枣苗木的光合特性、ＮＡ＋和Ｋ＋含量、丙二醛含量、脯氨酸含量等各项生理指标进行测定。【结果】２种ＡＭ真菌均能与沙枣苗木建立共生关系，且ＧＩ处理对苗木的侵染率显著高于接种ＧＭ处理，但随着土壤中盐浓度增加，沙枣苗木菌根侵染率有所降低。在同一盐碱度下接种ＡＭ真菌可显著促进沙枣幼苗的生长，在中度盐碱胁迫下（含盐量１．５６％，ｐ Ｈ ９．５２），接种．．．

为寻找天然植物源新的具有农药活性的先导化合物,从冬青卫矛根皮中分离到1株内生真菌,编号为2QR1,初步鉴定其为半知菌亚门,曲霉属(Aspergillus)。室内活性测定结果表明,2QR1菌株发酵液的杀菌活性远高于菌丝体的杀菌活性。该菌株发酵液乙酸乙酯萃取物对小麦根腐病菌、小麦赤霉病菌、苹果炭疽病菌、玉米大斑病菌、番茄叶霉病菌、烟草赤星病菌和马铃薯干腐病菌菌丝生长抑制的有效中质量浓度EC50值分别为53.6,63.1,63.3,98.2,106.5,115.9和166.3μg/mL;对玉米大斑病菌、小麦根腐病菌、烟草赤星病菌和马铃薯干腐病菌抑制孢子萌发的有效中质量浓度EC50值分别为94.8,1...

研究了不同程度土壤持续干旱对冬小麦根系生长及营养代谢的影响。结果表明 ,干旱胁迫使小麦次生根发育迟缓 ,数量减少 ,根系发硬 ,根尖萎缩 ,拔节至扬花阶段对发根潜能的影响最大。根系干物质积累量减少 ,峰值延后 ;根系中氮、磷积累量下降 ,分配比例在生育前中期下降 ,后期上升 ,干旱使后期较多的氮、磷滞留于根中 ,向地上部运转减少 ,中度以上干旱胁迫有较多的氮、磷损失 ;根系中的含糖量下降 ,C/N失调。维持根系对氮、磷良好吸收、分配、运转和C/N协调的土壤含水量不能低于 6 0 %。

选择苗期镉耐性和籽粒镉含量差异明显的 4 个晚粳稻品种为供试材料,研究了有毒重金属镉胁迫对水稻生长和营养代谢的影响。结果表明,镉胁迫显著降低各品种的产量和每株穗数、每穗总粒数、结实率、粒重等经济性状以及不同生育期的地上部干物质重,但苗期镉耐性较强的品种受抑制程度要小于镉耐性较弱的品种,相近耐性类型中籽粒镉含量较高的品种比镉含量较低的品种受害严重。因此可用苗期镉的耐性评价不同基因型耐镉性的差异。镉胁迫显著增加各品种地上部茎叶和籽粒的镉含量和积累量,但增加的程度品种间存在着很大差异。植株镉含量随生育进程而逐步下降,而植株镉积累量随生育进程而增加,与干物质产量一致。本研究还表明,镉胁迫显著影响籽粒中...

我国盐渍地面积有3 300余万hm~2,约占全国土地面积的8%。作为一种典型的非生物胁迫因素,高盐胁迫严重影响植物的生长发育及分布范围。草坪草在城镇绿化和美化中发挥着重要作用,而不同草坪草对盐胁迫的响应存在明显差异。本文就该领域近年来的相关研究进展进行阐述,分析了盐胁迫对不同类型草坪草种子萌发、形态和生长、离子含量与有机物积累、以及活性氧及抗氧化酶等方面的影响,从不同方面比较了不同草坪草对盐分胁迫的响应以及耐盐性的差异,对改善草坪草的耐盐性以及选择合适草种在盐碱地上建植草坪具有重要参考价值。