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[期刊] 中国水产科学  [作者] 梁从飞  赵金良  甘远迪  王飞  Thammaratsuntorn Jeerawat  伍勇  李传阳  罗明坤  
为了探讨盐碱胁迫条件下鱼类渗透生理调节机制,以尼罗罗非鱼(OreOchrOmis nilOticus)为实验材料,Pcr扩增得到了na~(+)/3hcO~(-)共转运子(nBce1)基因c Dna部分序列,比较了单盐(盐度10、盐度15)、单碱(1.5 g/l、3 g/l na hcO3)、盐碱混合(盐度10,碱度1.5 g/l;盐度15,碱度3 g/l)胁迫后不同时间(0 h、6 h、12 h、24 h、48 h、72 h、96 h)血清渗透压、离子浓度(na~(+)、K~(+)、cl–、ca2~(+))以及鳃碳酸酐酶(ca)活性、ca与nBce1基因m rna表达变化。结果显示,不同胁迫条...
[期刊] 中国水产科学  [作者] 吴俊伟  赵金良  赵岩  罗明坤  王燕  赵永华  
为了解尼罗罗非鱼(OreOchrOmis nilOticus)在碱环境适应过程中氨代谢调节途径,本研究选取了5个氨代谢相关酶:谷氨酰胺合成酶(glutamine synthetase,gs)、碳酸酐酶5a(carbOnic anhydrase 5a,ca-5a)、谷氨酰胺酶(glutaminase 2,gls2)、氨甲酰磷酸合成酶(carbamyl phOsphate synthetase 1,cps1)、氨转运蛋白(ammOnium transpOrter rh type c-2 like,rhcgl2),研究了急性碳酸盐碱度胁迫条件下,尼罗罗非鱼血氨浓度变化、氨代谢相关酶基因表达水平及其酶...
[期刊] 水产学报  [作者] 赵丽慧  赵金良  Thammaratsuntorn Jeerawat  赵岩  
为了解鱼类适应盐碱水环境的生理变化机理,将尼罗罗非鱼从淡水直接转入4个不同盐碱混合梯度组(A组:盐度10,碱度1 g/LNaHCO3;B组:盐度10,碱度2 g/LNaHCO3;C组:盐度15,碱度1 g/LNaHCO3;D组:盐度15,碱度2 g/LNaHCO3)中进行为期96 h的急性胁迫实验,分别检测胁迫后0、6、12、24、36、48、72和96 h时尼罗罗非鱼的血清渗透压、血清Na+、K+、Cl-浓度以及鳃中Na+-K+-ATP酶(NKA)和碳酸酐酶(CA)基因相对表达量的变化过程。结果显示,血清渗透压、离子浓度以及鳃中NKA基因和CA基因mRNA表达量变化程度均与其盐碱胁迫浓度间呈...
[期刊] 淡水渔业  [作者] 涂翰卿  赵金良  赵岩  曹晓颖  
为了解罗非鱼在碱水环境适应过程中的氨代谢机制,将尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)放在(2、4、6 g/L)碳酸盐(Na HCO3)碱水环境中进行急性胁迫。检测碱胁迫72 h内的血氨浓度,肝、肾、鳃组织及水体、尿液、血液尿素浓度变化,肝、脑、鳃谷氨酰胺(Gln)浓度,肝、脑谷氨酰胺合成酶(GS)活性,肝氨甲酰磷酸合成酶(CPS)活性,不同组织中GS、CPS、谷氨酰胺酶(GLS)的基因表达变化。结果显示:急性胁迫下尼罗罗非鱼血氨浓度上升,于12 h到达峰值。随着血氨升高,各组织中的尿素浓度0~6 h快速升高,CPS活性0~2 h快速升高,基因相对表达量0~24 h升高,表明尿素代谢途径0-6 h内启动。肝谷氨酰胺浓度0~6 h快速升高到达峰值,肝GS活性0~6 h和12~24 h快速升高,组织中GS、GLS基因相对表达量在0~24 h升高,表明谷氨酰胺代谢途径0~6 h内启动。结果表明,在碱胁迫条件下,尼罗罗非鱼在胁迫早期同时启动尿素代谢途径与谷氨酰胺代谢途径共同参与调节血氨浓度。
[期刊] 上海海洋大学学报  [作者] 周昊天  张成硕  王艳玲  赵金良  赵岩  
设计急性胁迫实验,采用实时荧光定量、生物信息学、双荧光素酶报告和体内miRNA抑制的方法,探究miR-192在尼罗罗非鱼应答碳酸盐碱度胁迫中的作用。结果如下:(1)实时荧光定量PCR实验表明,在急性碱胁迫(6g/L NaHCO_(3))尼罗罗非鱼6h后,鳃组织中miR-192的表达显著下调,溶质转运蛋白基因(solute carriers16A7,SLC16A7)表达显著上调(P < 0.05);(2)借助生物信息分析预测到SLC16A7可能是miR-192的靶基因;(3)利用双荧光素酶报告实验发现miR-192会与SLC16A7的3’UTR结合;(4)体内对miR-192抑制后,SLC16A7的表达显著上调(P < 0.05)。综上,本研究证实了miR-192参与了尼罗罗非鱼应答碱胁迫中的调控过程,SLC16A7是miR-192的直接靶基因。本研究为探明miRNAs调控尼罗罗非鱼应答碱胁迫的分子机制提供了一定基础。
[期刊] 水产学报  [作者] 蔡然  陈立敏  辛颖  赵早亚  俞筱筝  黄金凤  廖宗甄  李文笙  
为探究盐度胁迫对尼罗罗非鱼免疫的影响,对体质量(35.0±5.0) g的尼罗罗非鱼进行了急性和慢性的盐度胁迫实验,对免疫相关指标进行了检测和分析。在急性盐度胁迫中,设置0、5和15盐度组,分别在胁迫后6、12、24、48和96 h进行取样,检测血清SOD、CAT、GSH-Px和AKP的活性。在慢性实验中,设置0、10、20和30盐度组,胁迫8周后检测血清SOD、CAT、GSH-Px和AKP活性,并进行了无乳链球菌易感性实验。结果显示:①血清中SOD活性在急性盐度胁迫6、12和24 h时都有随盐度上升而上升的趋势,但在96 h时盐度15组酶活性显著低于盐度5组;在慢性盐度胁迫下,各组的酶活性呈现出随着盐度升高而显著性下降的趋势。②血清CAT活性在急性盐度胁迫下12和24 h时呈现出随着盐度升高而显著下降的趋势;在慢性胁迫下不存在显著性差异。③血清中GSH-Px活性在急性和慢性胁迫后,均呈现随着盐度升高而降低的趋势。④血清AKP活性在胁迫后6 h随盐度升高呈现出显著下降趋势;在慢性盐度胁迫下,盐度20组显著低于其他实验组。⑤尼罗罗非鱼对无乳链球菌易感性实验中,盐度10组的易感性和盐度0组之间无显著差异,盐度20和30组的易感性高于盐度0组。研究表明,两种盐度胁迫均会引起免疫相关指标的变化,急性盐度胁迫实验表明,盐度5和15可导致尼罗罗非鱼机体氧化损伤,但尼罗罗非鱼可以逐渐适应这一变化;慢性盐度胁迫实验表明,盐度高于20会抑制尼罗罗非鱼多种免疫指标活性,造成其对无乳链球菌的易感性升高。
[期刊] 水产学报  [作者] 李学军  郭瑄  聂国兴  孔祥会  乔志刚  
为深入研究养殖新品种吉丽罗非鱼[尼罗罗非鱼(♀)×萨罗罗非鱼(♂)]的耐盐性能,对吉丽罗非鱼及其两个亲本尼罗罗非鱼和萨罗罗非鱼进行了慢性盐度胁迫实验,分析了3种罗非鱼耐盐性能的差异,建立了盐度胁迫过程中死亡率与致死盐度及时间的回归模型,结果显示:(1)3种罗非鱼的耐盐能力差异显著,吉丽罗非鱼的耐盐性能接近于萨罗罗非鱼,远高于尼罗罗非鱼,耐盐胁迫时3种罗非鱼的平均致死盐度分别为57.9、66.7和18.5。(2)盐度胁迫实验中尼罗罗非鱼个体间死亡时间差异最大,萨罗罗非鱼个体之间差异最小,吉丽罗非鱼介于其间;吉丽罗非鱼和萨罗罗非鱼死亡时间都有极显著的正态负偏移,离群值和极值较多,尼罗罗非鱼有较显著...
[期刊] 中国水产科学  [作者] 宋凌元  程亚美  赵金良  
为探讨盐度胁迫对尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)肝脂肪酸代谢的影响,本研究分别在盐度8和盐度16的水体中对尼罗罗非鱼进行两周的胁迫实验,比较盐度胁迫过程中肝脂肪酸组成变化,以及脂蛋白脂肪酶(lipoprotein lipase, LPL)、苹果酸酶(malic enzyme, ME)和过氧化物酶体增殖物激活受体α亚基(peroxisome proliferator-activated receptor, PPAR-α) mRNA表达量变化。结果表明,胁迫12 h,盐度组血浆渗透压升至最高,16盐度组血浆渗透压显著高于8盐度组(P<0.05),而长链多不饱和脂肪酸(DHA、EPA和ARA为主)含量显著高于淡水组(P<0.05)。盐度组脂蛋白脂肪酶酶(LPL)、苹果酸酶(ME)、过氧化物酶体增殖物激活受体α亚基(PPAR-α)mRNA表达量均显著高于淡水组(P<0.05)。结果表明,盐度胁迫影响了肝脂肪酸组成和脂代谢过程。本研究旨在为鱼类渗透调节中脂类能量利用提供基础资料。
[期刊] 海洋渔业  [作者] 王萍  来琦芳  么宗利  周凯  林听听  王慧  
以青海湖裸鲤(Gymnocypris przewalskii)为研究对象,采用半定量和定量PCR法研究HCO-3分泌相关基因SLC4(solute carrier family 4)和SLC26(solute carrier family 26)家族slc4a1、slc4a2、slc4a4和slc26a6基因组织分布情况,并对不同盐碱环境下肠道中SLC基因家族的表达情况进行定量分析,揭示青海湖裸鲤适应盐碱环境的肠道调节机制。结果表明,slc4a1、slc4a2、slc4a4和slc26a6基因在青海湖祼鲤鳃、肝脏、肾脏和肠道等多个组织中均有表达,且在肠道中的表达量较高,其中slc26a6在肠道...
[期刊] 水产学报  [作者] 王玮蔚  孙雪  王冬梅  沈佳  徐年军  
为探讨小球藻中碳酸酐酶对环境调控的响应规律,提高小球藻的生物量及对无机碳的利用,实验采用生化和荧光定量PCR方法研究了盐度和2种无机碳对蛋白核小球藻生长、胞外碳酸酐酶(CA)活性及3种亚型碳酸酐酶基因(ca)表达的影响。结果发现,培养至第9天时盐度15和30培养藻生长较快,盐度45藻细胞密度降为盐度15的0.83倍;CA活性随着盐度增加而降低,盐度45长时间处理酶活性降低更为明显,3种亚型ca基因表达量则随盐度升高而增加。2倍空气CO2浓度培养藻密度可达空气CO2浓度的1.23倍,但CA活性较低,第8天为空气CO2浓度组的0.41倍,α-ca和γ-ca基因表达量比空气CO2浓度组略有升高。在0...
[期刊] 中国水产科学  [作者] 朱华平  刘玉姣  刘志刚  卢迈新  高风英  可小丽  黄樟翰  
以经过连续多代抗寒选育获得的尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)耐寒品系为实验材料,克隆了尼罗罗非鱼水通道蛋白基因(AQP1)的c DNA序列,并采用实时荧光定量PCR分析方法探讨了低温胁迫对罗非鱼AQP1基因表达水平的影响。序列分析结果显示,尼罗罗非鱼AQP1 c DNA长度为1 098 bp,包含36 bp的5′端非翻译区序列、783 bp开放阅读框(ORF)和279 bp的3′非翻译区序列,编码261个氨基酸。氨基酸序列比对表明,各物种间AQP1序列的同源性较高(96%~59%)。聚类分析表明,尼罗罗非鱼首先与同属鲈形目丽鱼科的斑马拟丽鱼(Maylandia zebr...
[期刊] 渔业科学进展  [作者] 赵丽慧  筴金华  张艳红  任炳琛  梁从飞  赵金良  
为评估尼罗罗非鱼的耐盐碱性能,分别测定了上海、山东、河北3种品系尼罗罗非鱼鱼种96 h的半致死盐、碱度,并在不同盐碱混合浓度(S0A0、S10A0、S10A2、S10A4、S10A6)中进行为期60 d的养殖生长比较。单盐、单碱耐性研究表明,上海、山东、河北3种品系尼罗罗非鱼鱼种的96 h半致死盐度分别为18.528 g/L、20.347 g/L、19.342 g/L,96 h半致死Na HCO3碱度为8.827g/L、8.540 g/L、8.542 g/L。盐碱混合条件下,盐度为10时,96 h半致死碱度分别为河北品系(4.377g/L)>上海品系(3.561 g/L)>山东品系(3.108...
[期刊] 海洋渔业  [作者] 郭雯翡  么宗利  来琦芳  史建全  周凯  祁洪芳  李子牛  王慧  
采用抑制消减杂交(suppression subtractive hybridization,SSH)技术,研究了青海湖裸鲤(Gymnocyprisprzewalskii)在高盐碱胁迫下转录水平上的基因表达差异,实验获得差异表达序列91条,其中成功注释60条。以同是鲤科鱼类的斑马鱼(Danio rerio)的基因ID作为参照,用DAVID软件对这些序列进行功能分类,结果从正向文库获得28条功能基因片段,反向文库获得14条。按功能将其分为10类,其中,催化活性、细胞、部分结合相关基因表达上调,结合、免疫相关基因表达下调。分析发现,高盐碱胁迫会改变鱼类的渗透压和酸碱平衡,对免疫系统产生一定的抑制作...
[期刊] 海洋渔业  [作者] 应成琦  陆建学  么宗利  周凯  来琦芳  
在不同盐度(5,10,15,20,25)和碳酸盐碱度(5,10,15,20,25,30,35 mmol/L)胁迫下,研究了胁迫后(1~7 d内)斜生栅藻(Scenedesmus obliqnus)的生长及光合特性。结果表明:高盐度胁迫(15,20,25)对斜生栅藻有显著的胁迫抑制作用,低盐度胁迫(5~10)对其影响不明显。在15,20,25高盐度环境中,随着胁迫时间增加斜生栅藻的细胞密度(A680 nm)、叶绿素a含量和光合速率数值下降幅度显著,胁迫7 d后较对照组分别下降了30.2%~59.7%、16.8%~57.1%和40.2%~91.5%;低盐度(5,10)环境中斜生栅藻的细胞密度、叶绿...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 贾文飞  魏晓琼  聂小兰  王颖  李金英  吴林  
[目的]研究盐碱胁迫处理对越橘‘北陆’生理特性及叶片解剖结构的影响,为盐碱地区引种越橘提供参考依据。[方法]以2年生半高丛越橘‘北陆’为试材,采用盆栽方式,人工模拟盐碱环境进行试验,在1/10改良Hoagland营养液(pH 4.8)中添加不同浓度的NaCl、Na_2CO_3、NaHCO_3进行盐碱胁迫处理,设置复合盐(NaCl+Na_2CO_3)和碱性盐(NaHCO_3+Na_2CO_3)2种盐碱胁迫处理,每种盐碱胁迫处理分别设置30,60,90,120,150,180mmol/L 6个盐浓度水平,以仅浇灌1/10改良Hoagland营养液的处理为对照(CK),探究盐碱胁迫对越橘‘北陆’叶片形态、叶绿素含量、生理生化变化及叶片解剖结构的影响,最后对不同生理指标间的相关性进行分析。[结果](1)在30~60 mmol/L复合盐或者30 mmol/L碱性盐处理下,越橘叶片形态正常;之后随着盐浓度的增加,复合盐和碱性盐处理叶片开始失绿变黄,出现红褐色斑块,最终干枯,出现落叶。(2)随着盐浓度的增加,复合盐和碱性盐处理越橘叶片叶绿素含量均呈降低趋势,叶片细胞膜透性呈升高趋势,可溶性蛋白(SP)、可溶性糖(SS)、脯氨酸(Pro)、丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性均呈先升高后降低的趋势。(3)随着盐浓度的增加,复合盐处理越橘叶片厚度、下表皮厚度、海绵薄壁组织厚度、中脉厚度和叶片组织结构疏松度(SR)总体上均呈降低的趋势,栅栏薄壁组织厚度、叶片组织结构紧密度(CTR)、栅/海均呈先增大后减小的趋势;碱性盐处理越橘叶片厚度、上表皮厚度、下表皮厚度、栅栏薄壁组织厚度、海绵薄壁组织厚度、中脉厚度和SR总体上均呈降低的趋势;CTR、栅/海均呈先增长后降低的趋势。(4)相关性分析表明,复合盐胁迫处理下,SS与CAT、SOD呈显著正相关关系(P<0.05),Pro与CAT、SOD呈极显著正相关关系(P<0.01),SS与Pro、SOD呈显著正相关(P<0.05)。碱性盐处理下,SS与Pro、MDA和CAT均呈极显著正相关(P<0.01);Pro与MDA和CAT均呈显著正相关(P<0.05),与SOD呈极显著正相关(P<0.01)。[结论]越橘‘北陆’幼苗遭受盐碱胁迫时,活性氧清除系统和渗透调节物质共同发挥作用。碱性盐对越橘幼苗生长的影响大于复合盐。
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