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[期刊] 水产学报
[作者]
陈守峰 杨汝晴 陈玉磊 孙乐常 张凌晶 刘光明 曹敏杰
为探究脯氨酰内肽酶(prolyl endopeptidase，PEP)在皱纹盘鲍性腺发育过程中的作用，实验采用荧光定量PCR (qRT-PCR)技术分析皱纹盘鲍不同组织中PEP的表达情况。通过硫酸铵分级沉淀和连续柱层析，从皱纹盘鲍性腺中分离纯化得到高纯度天然PEP。利用LC/MS/MS鉴定肽片段序列，以Suc-Gly-Pro-MCA为底物分析PEP的酶学性质。利用圆二色谱分析温度对PEP结构的影响。采用免疫印迹(Western Blot)和qRT-PCR分析鲍鱼性腺在不同发育时期PEP的蛋白和基因表达水平。结果显示，皱纹盘鲍的性腺中，PEP基因表达量和酶活性最高。利用硫酸铵分级沉淀和连续柱层析，从性腺中分离纯化得到分子量约为82 ku，等电点约为5.5的PEP，LC/MS/MS分析得到502个氨基酸残基，与NCBI中皱纹盘鲍脯氨酰内肽酶(KY214290)一致。PEP的最适温度和最适pH分别为25 ℃和6.0，在15～25 ℃和pH 5～8能够保持较高的酶活力。随着温度升高，PEP的二级结构有明显的改变，拟合热变性温度为（51.4±0.2）℃。PEP在雄性和雌性性腺的各个生长期均能被检测到，在雄性性腺的成熟中期和雌性性腺的成熟后期表达量最高。研究表明，PEP在鲍鱼性腺不同发育时期表达量的差异表明其可能参与到性腺发育的过程。
[期刊] 水产学报
[作者]
游银川 张凌晶 颜龙杰 翁凌 刘光明 曹敏杰
为了研究鲍鱼肌原纤维中副肌球蛋白(PM)的性质,以皱纹盘鲍为原料,采用硫酸铵盐析和羟基磷灰石柱层析相结合的方法,从肌肉中纯化得到PM。利用肽质量指纹图谱测定其内部肽片段氨基酸序列;采用双向电泳测定其等电点;用圆二色谱研究其二级结构特征,进一步利用红外光谱对其官能团进行表征。SDS-PAGE结果显示,PM分子量约为97.0 ku。肽质量指纹图谱分析获得36条肽段共403个氨基酸残基,与盘鲍和太平洋牡蛎PM的一致性分别为99.7%和72.0%,表明纯化蛋白确为PM。双向电泳测得PM等电点约为5.4,证明其为一
[期刊] 水产学报
[作者]
康平 汪秋宽 宋琳琳 徐玲
采用(NH4)2SO4分段盐析、透析、阴离子(DEAE-52)交换柱层析、SephadexG-200凝胶柱层析等分离纯化技术,通过SDS-PAGE电泳分析了皱纹盘鲍内脏酶的组成,结果表明鲍内脏酶主要含有两种褐藻胶裂解酶Ⅰ,Ⅱ,一种纤维素酶,一种琼脂酶。对酶的酶学性质分析结果表明两种褐藻胶裂解酶Ⅰ,Ⅱ的最适pH分别为8.6,7.2,最适温度为35℃,分子量分别为35.2 ku,67 ku;两种褐藻胶裂解酶的热稳定性比较差,且易受金属离子影响;纤维素酶的最适pH为5.0,最适温度为40℃。并确定了皱纹盘鲍内脏酶分离纯化的方法及参数,为进一步研究鲍内脏复合酶的性能提供了基础参数。
关键词：
皱纹盘鲍 褐藻胶裂解酶 纤维素酶 纯化
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
赵改名 胡东华 柳艳霞 田玮 赵景丽 高晓平
通过匀浆、硫酸铵沉淀、Sephadex G-100凝胶过滤和Phenyl-Sepharose HP疏水层析,从猪后腿肉中分离纯化了一种亮氨酰氨肽酶,并对其部分生化特性进行了研究。结果表明:亮氨酰氨肽酶的得率为12.14%,纯化了77.62倍;亮氨酰氨肽酶的最适温度为40℃左右,最适pH为7.0左右,Mg2+对酶活性有激活作用,Zn2+、Cu2+、Co2+、EDTA和EGTA对酶活性有抑制作用;Ca2+、Fe2+和Mn2+对亮氨酰氨肽酶活性的影响取决于离子浓度,浓度为0.5 mmol·L-1时对酶具有激活作用,而浓度为1.0 mmol·L-1时则表现为抑制作用。
关键词：
猪后腿 亮氨酰氨肽酶 纯化 酶活性
[期刊] 海洋渔业
[作者]
王兴章 李云恩 赵明堂 许夕宁 邢信泽
鲍是营养价值极高的海珍品,深受国内外消费者的喜爱,特别是我国北方的皱纹盘鲍因其味道鲜美、营养丰富而成为鲍中之王。但皱纹盘鲍对环境条件要求较高,适宜其生长繁殖的水域较窄,自然资源较少,天然产的鲍鱼远远不能满足国内外市场的需求。我们在山东省荣成市俚岛镇经过多年的筏式养殖鲍鱼实践,基本摸清了皱纹盘鲍的生态习性和筏式养鲍的生长规律,制订了严格的规章制度和切实可行的操作规程,实行了整个养
[期刊] 水产学报
[作者]
崔龙波 周雪莹 陆瑶华
以组织学、组织化学、扫描电镜和透射电镜观察及酶活性测定等方法研究了皱纹盘鲍的食道。食道可分为前、中、后三段 ,中段又可分为食物通道和食道侧囊。食道粘膜上皮由纤毛柱状细胞、粘液细胞、颗粒状腺细胞、微绒毛细胞和分泌细胞组成。纤毛柱状细胞参与运输食物和分泌物 ,并呈现吸收细胞的结构特征 ;粘液细胞分泌中性和酸性粘多糖 ;颗粒状腺细胞内充盈分泌颗粒 ;微绒毛细胞呈现吸收细胞的特征 ;分泌细胞具很强的蛋白酶等酶活性 ,能以顶浆分泌形式分泌消化酶 ,该细胞还具有吸收和细胞内消化作用。食道中段还呈现3种植物多糖酶活性
关键词：
皱纹盘鲍 食道 组织学 组织化学 酶
[期刊] 水产学报
[作者]
刘艳青 李兆杰 楼乔明 刘小芳 薛长湖
对皱纹盘鲍内脏脂质进行了分析。采用Folch法提取内脏总脂,硅胶柱层析对中性脂及磷脂进行分离;TLC法对中性脂、磷脂不同组分进行分离与其主要组分的制备;10%硫酸—甲醇对样品进行甲酯化,通过气相色谱法对其进行脂肪酸分析比较。结果表明,皱纹盘鲍内脏中磷脂含量可达31.58%,不饱和脂肪酸在磷脂中含量显著高于中性脂中含量。磷脂中含有一定量的缩醛磷脂,磷酯酰乙醇胺(PE)中缩醛型磷脂含量可达50%。研究表明,皱纹盘鲍内脏中含有丰富的磷脂,多不饱和脂肪酸,并含有一定量的缩醛磷脂,具有较好的食用和药用价值,应得到充分利用。
关键词：
皱纹盘鲍 中性脂 磷脂 脂肪酸 气相色谱
[期刊] 水产学报
[作者]
陈全震 杨俊毅 王小谷 高爱根
通过对皱纹盘鲍血细胞的超微结构的观察 ,将其血细胞分成 5种类型 :大颗粒细胞、小颗粒细胞、特殊颗粒细胞、透明细胞和淋巴样细胞。根据胞核的形态和胞质中细胞器的结构特征 ,研究认为大、小颗粒细胞是同一类细胞的不同发育阶段 ,而特殊细胞则是大、小颗粒细胞的原始细胞 ;透明细胞和淋巴样细胞是两类完全分化了的细胞
关键词：
皱纹盘鲍 血细胞 形态 分类
[期刊] 水产学报
[作者]
李霞 王斌 刘淑范 刘明清 王琦
１９９４～１９９６年对大连地区患“裂壳病”的养殖鲍苗种进行光镜和电镜观察。通过观察和人工感染实验证实，该病的病原为一种大小９０～１４０ｎｍ的球状病毒，该病毒主要侵染血细胞。病症为鲍壳薄，壳缘外翻，壳孔相互串连，摄食力降低，生长缓慢，逐渐死亡。并观察了外套膜、足、鳃、肝脏、嗉囔等主要器官的组织病理变化。
关键词：
皱纹盘鲍,“裂壳病”,球状病毒,组织病理
[期刊] 水产学报
[作者]
杨蕙萍 童圣英 王子臣
利用分光光度计比色法测定了２～３ｃｍ的皱纹盘鲍（ＨａｌｉｏｔｉｓｄｉｓｃｕｓｈａｎｎａｉＩｎｏ）的淀粉酶和褐藻酸酶的最适温度和最适ｐＨ以及１１种金属离子对其的影响。结果表明：最适温度分别为３０℃、３５℃，最适ｐＨ分别为６．２４、７．１９，在最适温度下的活化能分别为５．０３×１０４Ｊ／ｍｏｌ和１．３３×１０４Ｊ／ｍｏｌ；皱纹盘鲍的三种主要消化酶的活性依次为：褐藻酸酶＞蛋白酶＞淀粉酶。Ｃｕ２＋、Ｈｇ２＋、Ａｇ＋、Ｐｂ２＋对淀粉酶活性具有显著的抑制作用，其他离子则具有促进作用，其中又以Ｍｎ２＋、Ｂａ２＋、Ｃａ２＋三种金属离子尤为突出，其促进作用比对照组高一倍以上。而对褐藻酸酶，Ｚｎ２＋、Ａｇ＋、Ｈｇ...
关键词：
皱纹盘鲍,淀粉酶,褐藻酸酶,金属离子
[期刊] 水产学报
[作者]
杨蕙萍 童圣英 王子臣
利用分光光度计比色法测定了2－3cm的皱纹盘鲍（HaliotisdiscushannaiIno）的蛋白消化酶的最适温度、最适pH以及11种金属离子对其的影响。结果表明：在最适温度50℃下的活化能为4．89×10~4J／mol；最适pH为2．60和5．00。对其最适pH值的分析表明：皱纹盘鲍存在有胃蛋白酶，且活性颇高。在11种离子中，Cu~(2+)、Hg~(2+)、Ag~+对蛋白酶活性具有显著的抑制作用，而Fe~(3+)。Mg~(2+)则具有一定的促进作用。
关键词：
皱纹盘鲍 蛋白酶
[期刊] 水产学报
[作者]
周歧存 麦康森
在以酪蛋白和明胶为蛋白源的精制饲料中添加不同浓度梯度的维生素D,并以海带为对照组饲喂皱纹盘鲍幼鲍103d。结果表明:幼鲍的生长及软体部水分,脂肪和蛋白质含量受到饲料中维生素D添加水平的影响显著,但成活率不受饲料中添加水平的影响;饲料中适量添加维生素D可以提高幼鲍软体部碱性磷酸酶的活力,但饲料中缺乏或过高水平的维生素D导致幼鲍软体部碱性磷酸酶活力的降低;贝壳中灰分及钙、磷含量受饲料中维生素D添加水平的影响显著。以增重,蛋白质增量和软体部碱性磷酸酶的活力为指标,幼鲍饲料中维生素D的适宜含量为100IU·(100g)-1饲料。
关键词：
皱纹盘鲍 维生素D 生长 碱性磷酸酶
[期刊] 水产学报
[作者]
游银川 麻金花 段雪昆 章骞 沈建东 刘光明 曹敏杰
针对加工副产物鲍鱼外套膜利用率低的现象，对鲍鱼腹足和外套膜胶原蛋白相关性质进行比较研究，以期为鲍鱼的综合加工提供一定的理论依据。本研究以皱纹盘鲍为原料分别提取得到腹足酶促溶性胶原蛋白（ｐｅｐｓｉｎ－ｓｏｌｕｂｌｅ ｃｏｌｌａｇｅｎ ｏｆ ａｂａｌｏｎｅ ａｄｄｕｃｔｏｒ，ｐｓｃ１）和外套膜酶促溶性胶原蛋白（ｐｅｐｓｉｎ－ｓｏｌｕｂｌｅ ｃｏｌｌａｇｅｎ ｏｆ ａｂａｌｏｎｅ ｍａｎｔｌｅ，ｐｓｃ２），对ｐｓｃ１和ｐｓｃ２相关特性进行比较分析，并利用ｐｓｃ１制备得到兔抗鲍鱼胶原蛋白多克隆抗体。ｓｄｓ－ｐａｇｅ显示，ｐｓｃ１和ｐｓｃ２分子组成均为（α１）３，且α１的分子量为１４０ ｋｕ，与水产无脊．．．
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
粘立 王志鹏 张海涛 侯旭光 郭战胜
转口期是皱纹盘鲍(Haliotis discus hannai)早期育苗的重要时期，本研究结合16S rDNA高通量测序和生物信息学技术，分析皱纹盘鲍转口前(T0)、转口后第4天(T4)、第10天(T10)、第35天(T35)和第40天(T40)的肠道菌群结构和多样性。结果显示，皱纹盘鲍转口后第35天和第40天的肠道菌群多样性低于转口前及转口后第4天。主成分分析(PCA)显示，T0～T4、T35～T40肠道菌群结构相似度高，T10属于转口期肠道菌群演替变化的过渡阶段。鲍转口期肠道内优势菌门为变形菌门(Proteobacteria)、拟杆菌门(Bacteroidetes)和厚壁菌门(Firmicutes)；优势菌属在转口期不同阶段呈现明显的变化，到后期逐渐趋于稳定。Lentilitoribacter是T0和T4的主要优势菌属；到了T10，弓形菌属(Arcobacter)和弧形菌属(Vibrio)的相对丰度增加，Lentilitoribacter减少；在转口后期(T35和T40)，弧形菌属和Formosa则占绝对优势。LEfSe分析共获得59个生物标志物(Biomarker)，各个组的生物标志物与其阶段的优势菌群相对应。共发生网络图结果显示，T35阶段的网络关系最为复杂，皱纹盘鲍肠道菌群之间的关系随着转口期的进行发生改变。Tax4Fun功能预测显示，随着转口期的进行，稚鲍肠道菌群所编码的基因多与代谢有关。本研究首次以微生物学的角度揭示了转口期皱纹盘鲍对饵料的适应机制，为皱纹盘鲍的健康养殖奠定了理论基础。
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