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[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
史春路 刘小玲 葛海燕
炎症是免疫系统对感染的重要应答。以皮质醇混饲投喂的方法,模拟自然发生的应急反应,研究了应激激素皮质醇对黄颡鱼腹腔渗出炎症细胞的影响。结果表明:通过腹腔注射液体石蜡后诱导的黄颡鱼腹腔渗出炎症细胞主要包括嗜中粒细胞、巨噬细胞和嗜酸性颗粒细胞(EGC)。注射后2 d,腹腔渗出细胞以嗜中性粒细胞为主(占嗜中粒细胞和巨噬细胞总数的61.5%±1.1%);注射后6 d、10 d则以巨噬细胞为主(在嗜中粒细胞、巨噬细胞和EGC分类计数中分别占77.8%±2.8%和82.3%±1.1%);注射后6 d出现EGC,随后数量逐渐增加。炎症过程中腹腔渗出嗜中粒细胞和巨噬细胞对福尔马林灭活金黄色葡萄球菌(F-SA)的...
关键词：
皮质醇 黄颡鱼 腹腔炎性渗出细胞
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
刘小玲 葛海燕 田珍 顾泽茂 雷曼红
用Percoll连续密度梯度离心法分离黄颡鱼头肾巨噬细胞,经含0.1%牛血清的L-15培养液中培养,在光镜和电镜下观察其形态、超微结构和吞噬作用;采用硝基四氮唑蓝(NBT)与多孔酶标仪检测细胞在佛波豆蔻酸乙酯(PMA)刺激下产生的呼吸爆发,并观察外源皮质醇对黄颡鱼体内外头肾巨噬细胞呼吸爆发活动的影响。结果表明:每尾黄颡鱼可分离出1.2~1.6 mL浓度为1×107cells/mL的高纯度头肾巨噬细胞;培养3~18 h后,贴壁纯化的头肾巨噬细胞达到95%~98%;分离培养的头肾巨噬细胞具有巨噬细胞的形态结构特征,对福尔马林灭活的金黄色葡萄球菌(F-SA)的吞噬率达95%以上。PMA刺激分离的头肾...
[期刊] 淡水渔业
[作者]
葛海燕 刘小玲 罗贤奎 胡正波 方伟
采用皮质醇混饲投喂的试验方法,模拟自然条件下的慢性应激,观察和分析了应激激素皮质醇对黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)幼鱼生长和外周血细胞的效应。试验组饲料中皮质醇添加剂量为100 mg/kg,日投饵率为3%,试验期5周。结果表明:(1)外源皮质醇通过减少肠道黏膜皱褶和促进糖异生作用使黄颡鱼幼鱼增重受阻;(2)外源皮质醇使黄颡鱼幼鱼外周血白细胞数量显著减少、淋巴细胞百分比显著降低,但是中性粒细胞和单核细胞百分比则呈上升趋势;(3)外源皮质醇能促进红细胞增生,增加黄颡鱼幼鱼外周血红细胞数量。
[期刊] 淡水渔业
[作者]
李芹 邓丽蓉 刁晓明
研究了禁食及再投喂对瓦氏黄颡鱼(Pelteobagrus vachelli)幼鱼(体质量平均为(3.12±0.16)g)皮质醇及糖代谢的影响。试验分成5组,分别为对照组(G1)正常投喂、禁食1 d(G2)、禁食7 d(G3)、禁食14 d(G4)、禁食21 d(G5)后再恢复投喂。选取样品分析测定了瓦氏黄颡鱼幼鱼禁食和再投喂后皮质醇水平、肝指数、血糖浓度、肝糖原及肌糖原含量。结果表明:G2组幼鱼皮质醇水平与对照组无显著性差异(P>0.05),而G3、G4、G5组则极显著升高(P
[期刊] 华北农学报
[作者]
贺澄日 滕文军 黄会岭 陆钢
“９０６”生长调节剂除对鸡腹腔巨噬细胞随机运动功能的影响（１２．１９±２．６５）与对照组（１１．３±３．０１）比较差异不显著外，对鸡腹腔巨噬细胞吞噬百分率（３５．３％），噬菌指数（１．６５±０．５）及Ｆｃ受体Ｅ花环形成率（３９．７％）与对照组（分别为２７．７％、１．２５±０．５、３１％）相比均差异显著，证明“９０６”生长调节剂对鸡腹腔巨噬细胞功能具有良好的促进作用，其作用机理可能与油菜素内酯有关。
[期刊] 中国水产科学
[作者]
陈明 王秋华 王瑞 甘西 李莉萍 雷爱莹 梁万文 黄维义
利用酵母分泌表达的重组罗非鱼热休克蛋白70(heat shock protein 70 of tilapia,tHsp70),与海豚链球菌(Streptococcus iniae)抗原在体外非共价结合形成tHsp70-抗原复合物,通过对体外培养的腹腔巨噬细胞NO释放水平、吞噬活性及免疫相关基因表达进行检测,研究tHsp70对罗非鱼细胞免疫功能的影响。结果显示,tHsp70在体外能够与海豚链球菌菌体、胞外分泌物(extracellular bacteria products,ECP)结合形成tHsp70-抗原复合物;tHsp70-抗原复合物和tHsp70均可显著增强罗非鱼腹腔巨噬细胞的贴壁和生长...
[期刊] 华北农学报
[作者]
贺澄日 滕文军 黄会岭 陆钢
“９０６”生长调节剂对鸡腹腔巨噬细胞功能的影响ＥｆｆｅｃｔｓｏｆＧｒｏｗｔｈＲｅｇｕｌａｔｏｒ“９０６”ｏｎＦｕｎｃｔｉｏｎｏｆＰｅｒｉｔｏｎｅａｌＭａｃｒｏｐｈａｇｅｓｉｎＣｈｉｃｋｅｎ￥“９０６”生长调节剂是一种含有油菜素内酯（Ｂｒａｓｓｉｎｏｌ...
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
冯伟
当在含有20%热灭活雏鸡抗艾美耳球虫免疫血清的培养基中加入巨噬细胞培养物后,30～120 min内,可以见到巨噬细胞对子孢子和裂殖子的吞噬作用增强,表现为吞噬子孢子和裂殖子的巨噬细胞数增多,和巨噬细胞中的子孢子和裂殖子数量要增多。同时可以观察到吞噬作用前,粘附在巨噬细胞表面的子孢子和裂殖子数量亦比对照组多.巨噬细胞的吞噬作用可以被番木瓜蛋白酶所阻断,表明吞噬作用与血清中 IgG 与寄生虫形成免疫复合物后与巨噬细胞的受体结合有关.子孢子在非灭活的新鲜血清组的存活率低于灭活血清组.在非灭活血清组约有90%的子孢子有萎缩肿胀,或空泡等现象.
[期刊] 中国农业科学
[作者]
张志敏 王建华 赵兴华 公小兵 余永涛 崔忠华 耿果霞
【目的】探索苦马豆素(SW)与小鼠腹腔巨噬细胞功能之间的关系,为SW免疫研究提供新的试验依据。【方法】将70只小鼠随机分为7组,其中5组分别按0.05、0.2、0.8、3.2和6.4mg·kg-1每天灌服SW生理盐水,连续21d,另2组为生理盐水和空白对照组。收集小鼠腹腔巨噬细胞,经脂多糖(LPS)诱导活化,用ELISA法检测TNF-α生成,酶法检测一氧化氮合酶(NOS)活性,化学法检测H2O2浓度,MTT比色法检测杀伤肿瘤细胞活性及吞噬中性红能力。【结果】SW剂量在0.2～3.2mg·kg-1之间,能够提高小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬和杀伤活性﹑NOS活性,促进TNF-α和H2O2生成,且均呈剂量...
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
刘雨曦 孙亦如 王思进 马思思 喻伟峰 尹绍武 王涛
应激反应对暗纹东方鲀(Takifugu fasciatus)养殖业危害极大，而皮质醇(Cortisol)是判断鱼类应激反应的重要标志物。肠道是鱼体与外界环境接触的媒介，肠道生理状态能反应鱼体的应激水平，但目前肠道在鱼类响应应激反应中的作用不详。本研究以暗纹东方鲀肠上皮细胞为对象，分别采用胰蛋白酶和DMEM培养基、胰蛋白酶和1640培养基、Ⅰ型胶原酶和DMEM培养基、Ⅰ型胶原酶和1640培养基4种方法对其进行原代培养，旨在建立暗纹东方鲀原代肠上皮细胞体外培养方法，并在此基础上探讨皮质醇对暗纹东方鲀肠上皮细胞氧化应激、细胞凋亡和脂代谢的影响。利用CCK-8法检测肠上皮细胞活力，透射电镜观察皮质醇处理后细胞内线粒体的形态结构，荧光定量PCR (qRT-PCR)检测氧化应激相关基因、细胞凋亡相关基因及脂代谢相关基因在肠上皮细胞内的表达模式，Annexin V-FITC/PI法检测细胞凋亡等。结果显示，在4种培养方法中，采用胰蛋白酶消化和DMEM培养基进行培养的肠上皮细胞增殖率最高，贴壁情况最佳；与对照组相比，当皮质醇浓度高于2 000 nmol/L时，肠上皮细胞活力显著下降(P<0.05)；透射电镜显示，所有皮质醇处理组肠上皮细胞内线粒体结构发生改变，线粒体数量增加；随皮质醇处理浓度的升高，肠上皮细胞内氧化应激相关基因(sod、cat和gsh-px)及促凋亡基因(caspase-3、caspase-7、caspase-9、bax和p53)表达量和凋亡指数均显著上升，抗凋亡基因bcl-2表达量显著下降(P<0.05)；脂肪合成相关基因(g6pd、6gpd、pparγ、fas和acc)表达量显著下降，脂肪分解相关基因(hsl、pparα、lpl和cpt-1)表达量显著上升(P<0.05)；TG和TC含量显著下降，NEFA含量显著上升(P<0.05)。结果表明，皮质醇能够促进暗纹东方鲀肠上皮细胞的氧化应激和细胞凋亡，同时促进脂肪的分解并抑制脂肪的合成。本研究以期为暗纹东方鲀抗应激养殖提供一定的参考资料。
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
施兆鸿 张晨捷 彭士明 张艳亮 王建钢 高权新
挑选平均体重为(5.0±1.4)g,平均全长为(8.3±0.8)cm的黄姑鱼(Nibea albiflora)幼鱼,进行低盐度胁迫试验,以23盐度组为对照组,设置9和16两个盐度胁迫组,在0、1、3、7 d进行取样。通过检测鳃Na+/K+-ATP酶(NKA)、Ca2+-ATP酶、H+-ATP酶、乳酸脱氢酶(LDH)、琥珀酸脱氢酶(SDH)活力以及血清皮质醇含量,研究低盐度对黄姑鱼离子调节和呼吸代谢的影响。结果显示,鳃NKA活力在盐度胁迫后出现显著增强(P<0.05);Ca2+-ATP酶活力略有上升后即出现下降的变化,而H+-ATP酶活力呈现上升后恢复的变化。血清皮质醇含量在低盐度胁迫后呈显著的...
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
施兆鸿 张晨捷 彭士明 张艳亮 王建钢 高权新
挑选平均体重为（５．０±１．４）ｇ，平均全长为（８．３±０．８）ｃｍ的黄姑鱼（Ｎｉｂｅａ ａｌｂｉｆｌｏｒａ）幼鱼，进行低盐度胁迫试验，以２３盐度组为对照组，设置９和１６两个盐度胁迫组，在０、１、３、７ ｄ进行取样。通过检测鳃Ｎａ～＋／Ｋ～＋－ａＴＰ酶（ＮＫａ）、ｃａ～（２＋）－ａＴＰ酶、Ｈ～＋－ａＴＰ酶、乳酸脱氢酶（ｌｄＨ）、琥珀酸脱氢酶（ＳｄＨ）活力以及血清皮质醇含量，研究低盐度对黄姑鱼离子调节和呼吸代谢的影响。结果显示，鳃ＮＫａ活力在盐度胁迫后出现显著增强（Ｐ＜０．０５）；ｃａ～（２＋）－ａＴＰ酶活力略有上升后即出现下降的变化，而Ｈ～＋－ａＴＰ酶活力呈现上升后恢复的变化。血清皮质醇含量在．．．
[期刊] 华北农学报
[作者]
王秋华 陈明 黄维义 王瑞 李莉萍 甘西 雷爱莹 黄均 梁万文
为获得罗非鱼腹腔巨噬细胞体外分离培养条件和培养形态特征,试验在不同饲养温度和时间点注射角鲨烯的奥尼罗非鱼进行腹腔巨噬细胞分离;通过培养基血清筛选和瑞氏染色对分离的巨噬细胞进行了体外培养及其形态观察。结果表明,19～25℃饲养温度有利于腹腔巨噬细胞分离,大于28℃对分离效果有明显影响;注射角鲨烯后48～72 h是分离腹腔巨噬细胞最佳时期;体外培养显示自体血清有利于罗非鱼腹腔巨噬细胞的存活与生长,胎牛血清不适于罗非鱼腹腔巨噬细胞培养。同时,罗非鱼腹腔巨噬细胞体外培养具有哺乳动物巨噬细胞相似特征,形态不规则、核浆比值低、贴壁生长、可形成多核巨大细胞。为下一步研究罗非鱼腹腔巨噬细胞免疫学功能奠定了基础...
关键词：
罗非鱼 腹腔巨噬细胞 分离 培养
[期刊] 浙江农林大学学报
[作者]
王徵 朱斐
吞噬作用是一种对抗微生物病原体的重要机制,但许多细菌均有抗吞噬作用。利用透射电镜和激光共聚焦显微镜结合细胞生物学技术,对黑腹果蝇Drosophila melanogaster S2细胞吞噬热灭活大肠埃希菌(heat inactivated Escherichia coli,HIEC)和热灭活金黄葡萄球菌(heat inactivated Staphylococcus aureus,HISA)的作用进行了研究。结果表明:S2细胞能够在接种后1 d内有效清除HIEC,但不能清除HISA;经聚肽糖(PG)或脂多
[期刊] 淡水渔业
[作者]
于淼 樊启学 程鹏 张磊 刘文奎 杜海明
通过对鲤(Cyprinus carpio)3 h急性拥挤胁迫(密度70g/L)实验,并在胁迫开始前(对照)、胁迫结束后的第0至168 h采样测量几项血液指标。实验结果显示在3 h拥挤胁迫结束之时(0 h),鲤血清皮质醇、血糖和乳酸水平均显著高于胁迫前对照值(P<0.05),而游离脂肪酸水平极显著低于对照值(P0.05)。该结果提示3 h拥挤胁迫可引起鲤体内血清皮质醇水平及部分血液生化指标发生改变,这可能是为了弥补应激期间机体对能量需求的增大。
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