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[期刊] 中国农业科学
[作者]
刘锦 张冀芳 梁建丽 程锋 武剑 王晓武
【目的】探索硫代葡萄糖甙合成中关键基因-甲基硫代烷烃基苹果酸合成酶(methylthioalkylmalate,MAM)基因在白菜基因组中的进化情况,为研究白菜MAM的功能提供理论指导。【方法】根据白菜数据库BARD信息分析拟南芥、盐芥和白菜MAM的共线性关系,利用MEME在线软件预测MAM序列的高度保守基序(motif),通过R软件分析93份白菜材料MAM的表达模式,并利用MEGA5.05软件构建MAM的系统进化树。【结果】白菜的3个亚基因组均保留着MAM的同源基因。其中与拟南芥具有共线性的5个同源基因可能源自基因组古三倍化复制,其它两个同源基因可能是由转座扩增产生的;基序分析结果表明,与拟...
关键词：
白菜 硫甙 白菜MAM 共线性 进化树
[期刊] 中国农业科学
[作者]
何洪巨 陈杭 W.H.Schnitzler
对芸薹属中白菜类、芥菜类和甘蓝类蔬菜的硫代葡萄糖苷 (简称硫苷 )组成与含量进行了评价。结果表明 ,散叶甘蓝硫苷总含量最高 ,其次是包包青菜、包心芥菜、芥蓝 ,小白菜的含量最低。不同的品种硫苷的类型和含量不同。白菜类中 ,小白菜主要的硫苷为 3 丁烯基和 1 甲氧基 3 吲哚基甲基硫苷 ,菜心中为 3 丁烯基和 2 羟基 3 丁烯基硫苷 ,薹菜中为 1 甲氧基 3 吲哚基甲基和 4 戊烯基硫苷。在芥菜类中 ,发现了两种不同硫苷类型 ,烯丙基硫苷是包包青菜、包心芥菜主要的硫苷 ,约占总含量的 90 % ;而在小叶芥中 3 丁烯基为主要的硫苷 ,约占总含量的 70 %。甘蓝类中羽衣甘蓝主要含...
关键词：
芸薹属 硫代葡萄糖苷 HPLC分析
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
胡克玲 朱祝军
研究不同含量(0、10、50、100和200μL·L-1)乙烯利处理对小白菜品种‘上海青’和‘油冬儿’的生长和硫代葡萄糖苷(简称硫苷)含量的影响.结果表明,与对照相比,200μL·L-1乙烯利处理显著降低两种小白菜的鲜重.10μL·L-1乙烯利处理显著提高‘上海青’总脂肪族硫苷和总硫苷的含量;而‘油冬儿’的总脂肪族硫苷和总硫苷含量在100μL·L-1乙烯利处理下才显著提高.乙烯利处理对‘油冬儿’的总吲哚族硫苷含量的影响不显著,但较高含量(100和200μL·L-1)乙烯利处理显著提高‘上海青’的总吲哚族硫苷含量.乙烯利处理均降低‘上海青’的芳香族硫苷含量,却提高‘油冬儿’的芳香族硫苷含量.‘上...
关键词：
硫代葡萄糖苷 小白菜 生长 乙烯利
[期刊] 华北农学报
[作者]
田多成 何洪巨 严慧玲 颉建明 康俊根
采用HPLC方法分析了作图群体双亲及F283个单株的硫代葡萄糖苷总含量,在已构建的高密度甘蓝遗传图谱的基础上,运用MapQTL 4.0软件对结球甘蓝F2群体硫代葡萄糖苷总含量进行QTL定位和分析。最终检测到3个控制甘蓝硫代葡萄糖苷含量性状的QTLs(分别位于LG7上的qGS-7-1和位于LG8上的qGS-8-1、qGS-8-2),其贡献率分别为13.6%,7.5%,5.6%。并得到同时控制硫代葡萄糖苷含量QTLs共分离的分子标记me27-em25-2和E38M55-7,均可为辅助选育富含硫代葡萄糖苷甘蓝品种提供理论依据。
关键词：
结球甘蓝 硫代葡萄糖苷 数量性状位点
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
甘莉 金良 邹国岭
探讨了氯化钯法测定油菜籽硫甙含量的方法中不同放置时间，不同温度，不同品种（系）和硫甙含量对测定结果的影响。结果表明：温度低于33℃时，放置4－16h均不影响硫甙含量测定。而35℃时，放置时间不能超过12h。低于33℃以下时，放置时间不能少于4h。但对于高硫甙品种，合适的温度和时间范围均变窄。且加入氯化钯试剂后，宜在20-27℃条件下显色，过高的温度会导致测定结果偏高。
[期刊] 华北农学报
[作者]
张丽 何洪巨 赵学志 陈翠蓉 郑鹏婧
以20个不同萝卜品种为试材,采用高效液相色谱法(HPLC)研究了幼苗期硫代葡萄糖苷的含量与组成。结果表明:不同品种幼苗中总硫苷含量不同,其中,秋白萝卜>春白萝卜>樱桃萝卜。进一步对硫苷组成进行分析,发现了9种不同的硫苷,其中,4种硫苷属于脂肪族,4种属于吲哚族,1种属于芳香族硫苷。不同类型品种幼苗中的硫苷组成不尽相同。秋白及4个春白萝卜品种中含有上述9种硫苷;春白萝卜品种二年子和花知中含有8种硫苷,缺少1个吲哚族硫苷-1-甲氧基吲哚-3-甲基硫代葡萄糖苷;而所有樱桃萝卜品种中均缺少1个脂肪族硫苷-4-甲硫基丁基硫代葡萄糖苷。在对不同萝卜品种幼苗中各种硫苷所占总硫苷百分比分析时发现:秋白萝卜品种...
关键词：
萝卜 幼苗 硫代葡萄糖苷
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
况成尘 吴谋成
本文报道用DEAE Sephadex A-25作固定相、硫酸钾溶液作流动相的离子交换色谱法,从菜籽中分离4-羟基-3-甲基吲哚硫代葡萄糖苷的方法。
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
况成尘 吴谋成
本文报道了用弱离了交换剂DEAE Sephadex A-25作固定相,K_2SO_4溶液作流动相,采用自动柱层析仪分离制备硫代葡萄糖苷结晶粗品,然后采用制备HPLC,Φ8×250 mm柱,充填Hitachi 3050(ODS),5×10~(-2)乙腈作流动相,进一步分离纯化,制得2-羟基-3-丁烯基硫代葡萄糖苷的钾盐晶体,以质谱(MS),红外图谱(IR),紫外图谱(UV)和HPLC图谱证实,结晶物纯度为色谱纯。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
阮颖 周朴华 刘春林
硫代葡萄糖苷-黑芥子酶系统是十字花科植物中一种特有的底物酶系统.在植物体内,硫代葡萄糖苷存在于液泡中,而黑芥子酶分布在特定的黑芥子酶细胞中.在细胞内,黑芥子酶往往与黑芥子酶结合蛋白和黑芥子酶协助蛋白形成黑芥子酶复合体催化硫代葡萄糖苷的水解.当植物组织受到损伤时,硫代葡萄糖苷与黑芥子酶直接接触,并使硫代葡萄糖苷水解为异硫氰酸、腈等有毒物质来保护自身免遭食草动物进一步的伤害.
关键词：
芥子油苷 黑芥子酶 底物酶系统
[期刊] 华北农学报
[作者]
蒋晓丽 郭世荣 何洪巨 刘伟
研究叶面喷施甲硫氨酸(Met)和茉莉酸甲酯(MeJA)单独和混合处理对芥蓝体内硫代葡萄糖苷(简称硫苷)组分及其含量的影响,为栽培调控提高芥蓝品质提供理论依据。结果表明:各处理芥蓝体内硫苷组分相同,均含有8种硫苷;Met处理对芥蓝总硫苷含量及各组分含量均无显著性影响;MeJA、Met+MeJA处理显著提高总硫苷、吲哚族硫苷、吲哚甲基硫苷和1-甲氧基吲哚甲基硫苷含量,其中MeJA处理含量较高,分别为对照的2.55,16.59,11.85和86.37倍,MeJA、Met+MeJA处理也显著降低了脂肪族硫苷、2-丙烯基硫苷、4-甲基硫氧丁基硫苷和3-丁烯基硫苷含量,其中MeJA处理较对照分别降低了32...
关键词：
甲硫氨酸 茉莉酸甲酯 硫代葡萄糖苷 芥蓝
[期刊] 华北农学报
[作者]
沈巧玲 刘光敏 王亚钦 赵子璇 魏蕾 何洪巨 刘海河
为探究壳寡糖(COS)对羽衣甘蓝芽苗生长的影响，为芽苗生产上壳寡糖的合理施用提供参考，以京羽一号为试验材料，在种子发芽后施用不同质量浓度COS(25,50,75,100 mg/L)溶液，观察壳寡糖对羽衣甘蓝芽苗生长指标、硫代葡萄糖苷(简称硫苷)含量及抗氧化能力的影响。结果表明，施用75 mg/L COS处理的羽衣甘蓝芽苗总酚、总黄酮、总硫苷质量以及黑芥子酶活性和DPPH自由基清除率呈现上升趋势，且与对照差异显著，较对照分别增加25.99%,17.99%,29.68%,141.88%和2.51%;100 mg/L COS处理的羽衣甘蓝芽苗的产量及总酚、总黄酮、钠和硼含量及黑芥子酶活性也得到了相应提升，且与对照差异显著，较对照分别增加了15.21%,21.29%,22.47%,15.97%,32.63%,97.71%。经相关性分析，可以得出芽苗的产量与类胡萝卜素、总酚、总黄酮含量及DPPH自由基清除率均呈显著正相关关系。综上可得，经壳寡糖处理后可提高羽衣甘蓝芽苗的产量，提升芽苗的营养品质和抗氧化能力，增加芽苗的食用价值。
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
陈蒙 刘海峰
为探究5GT基因在山葡萄花色苷合成过程中的表达规律及作用,以山葡萄(Vitis amurensis)为材料,利用RT-PCR技术克隆山葡萄5GT基因的全长cDNA序列(GenBank登录号为GU237133),将该基因命名为Vam5GT并对该蛋白进行生物信息学分析预测其功能;利用实时荧光定量PCR检测Vam5GT基因在山葡萄8个不同转色时期的表达规律,将克隆获得的Vam5GT基因完整的ORF连接到原核表达载体pET28a上,转化到大肠杆菌E.coli Bl2(DE3),并通过不同浓度的IPTG诱导表达,SDS-PAGE检测表达产物。并构建表达载体pC5GT并转化农杆菌GV3101.用菌液浸泡花序法对拟南芥进行遗传转化。结果显示:克隆获得的Vam5GT cDNA全长1 497 bp,开放阅读框1 347 bp,编码448个氨基酸,该基因表达产物相对分子质量为49.84 ku,等电点为5.23,是不稳定蛋白。该基因属于UDPGT超基因家族,不包含信号肽。Vam5GT在山葡萄花后4周的果皮中表达丰度最高,其他时期表达逐渐下降;该基因原核表达产物与预期大小一致,表明原核表达成功,在含50 mg/L Kanomycin的培养基上对拟南芥T_0代种子进行筛选,先后得到2个阳性幼苗,转化率为0.05%。对移栽成活的2株抗性植株进行PCR检测为阳性。
[期刊] 华北农学报
[作者]
崔洪昌 刘敬梅 Samuel S. Sun
首先对影响葡萄糖磷酸变位酶（ＰＧＭ）稳定性的因素进行了比较研究，结果发现，在所有被检测的因子中，磷酸根对酶的保护作用最强，而Ｔｒｉｓ－盐酸则效果极差。在磷酸缓冲液中添加二硫苏糖醇、ＰＭＳＦ、葡萄糖和镁离子等可能的保持试剂未能进一步提高酶的稳定性。另外，ｐＨ对ＰＧＭ酶的稳定性有较大影响，酸性ｐＨ不利于酶活性的保持，在ｐＨ８．０时酶最为稳定。因此，本实验对ＰＧＭ同工酶的纯化均在ｐＨ８．０的磷酸缓冲液中进行。依次经过抽提、分步硫酸铵沉淀、ＳｅｐｈａｄｅｘＧ７５柱层析以及二乙氨乙基纤维素柱高效液相色谱（ＤＥＡＥ－ＨＰＬＣ）等分离步骤，我们纯化了大白菜品种“白阳”黄化种苗中的３个葡萄糖磷酸变位酶（ＰＧＭ...
[期刊] 华北农学报
[作者]
崔洪昌 李丽 郑晓鹰 Samuel S.Sun
依次经过抽提、分步硫酸铵沉淀、二乙氨乙基纤维素（ＤＥＡＥＣｅｌｕｌｏｓｅ）柱层析，以及聚丙烯酰胺自然胶制备电泳（ＰｒｅｐａｒａｔｉｖｅＰＡＧＥ）等分离步骤，从耐热性较强的“白阳”大白菜品种的黄化种苗中，分离和纯化了与耐热性密切相关的一个葡萄糖磷酸变位酶（ＰＧＭ）同工酶。通过ＳＤＳＰＡＧＥ电泳，纯化的酶样品在２９ＫＤ处呈现一个显著条带。推测此酶为细胞质来源。我们还同时纯化了与耐热性无关的另一个细胞质ＰＧＭ同工酶。结果表明，它们只有自然电泳迁移率（电荷量）的不同，而没有明显分子大小的差别。在整个纯化过程中巯基保护试剂的存在对于ＰＧＭ酶的稳定性至关重要
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
段朝瑞 陈佩 张国军 丁颖 汪文乐 高媛圆 王乐怡 赵飞 冷平
为了解β-葡萄糖苷酶基因是否与葡萄果实成熟有关,从基因库中分离出了3个β-葡萄糖苷酶基因,分别命名为VvBG1,VvBG2和VvBG3,并对其表达进行了分析。结果显示:所获得的3个基因在葡萄浆果成熟过程中均有表达。果皮中,随着果实的成熟,VvBG1变化较平稳;VvBG2在转色期时略有降低,之后不断升高,在完熟期时达到最大值;VvBG3在成熟过程中先升高后降低,在转色期时达到高峰。果肉中,VvBG1和VvBG2分别与果皮VvBG2和VvBG3变化趋势相似;VvBG3在转色前期和成熟期时表达较低,在完熟期达到最大值。种子中,VvBG1在转色前期出现最大值,之后迅速降低;随着果实的成熟,VvBG2不...
关键词：
葡萄 脱落酸水平 β-葡萄糖苷酶基因
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