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[期刊] 中国农业科学
[作者]
王潇 王志钢 杜瑞平
【目的】研究白细胞介素-10作为黏膜分子佐剂是否可以增强口蹄疫DNA疫苗(pcD-VP1)的黏膜免疫应答。【方法】利用RT-PCR技术以Balb/c小鼠脾脏组织总RNA为模板,扩增出小鼠的IL-10基因,并构建真核表达质粒proVAX-IL-10,通过鼻腔接种方式,将口蹄疫DNA疫苗(pcD-VP1)和真核表达质粒(proVAX-IL-10)共同免疫小鼠,用ELISA法检测免疫小鼠黏膜部位(肺脏、生殖道)sIgA滴度,免疫组织化学法检测气管、生殖道和小肠中sIgA的表达情况,CSFE染色法检测小鼠扁桃体淋巴细胞增殖反应水平,用胞内细胞因子染色法通过流式细胞仪检测扁桃体部位CD4+阳性T细胞内I...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
孙岩 仲飞 李秀锦 王幸兴 王璐 贾启恒 韩冬梅 李振 张峰 潘红丽
【目的】白介素-7是动物体一种重要的多功能细胞因子,在促进B细胞、T细胞的形成和发育,在协同其它细胞因子提高机体免疫能力等方面发挥重要作用。本试验利用犬细小病毒VP2 DNA疫苗,在小鼠体内分析了犬白介素-7(cIL-7)基因的免疫增强作用。【方法】采用RT-PCR方法从犬脾淋巴细胞中扩增cIL-7基因,然后将cIL-7基因插入到真核表达载体pcDNA3.1A中,分别构建成与Myc/His标签融合和非融合的cIL-7真核分泌型表达载体pcDNA-cIL7/MH和pcDNA-cIL7。由磷酸钙介导将pcDNA-cIL7/MH质粒转染HEK 293T细胞使其进行瞬时表达,以Western-blot...
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
张馨玉 金华利 杨若耶 肖冲 朱开春 张富春 王宾
以寻求有效DNA疫苗黏膜免疫途径为目的,利用带有负电荷的具有黏膜粘附性多糖-壳聚糖来包裹口蹄疫DNA疫苗pcD-VP1形成纳米级颗粒,用此颗粒经滴鼻、口服、直肠和生殖道4种黏膜免疫小鼠,检测小鼠的针对口蹄疫的体液和细胞免疫水平。结果显示:壳聚糖/pcD-VP1滴鼻免疫小鼠,抗体的高峰来临比只免疫pcD-VP1提前2周,直肠免疫处理中也呈现如此效果;经口服和生殖道途径的免疫,均没有呈现比pcD-VP1免疫组更好的抗体水平。但壳聚糖/pcD-VP1在生殖道和直肠免疫途径里均比pcD-VP1免疫组P.P.结的T细胞增殖水平高。所以,除口服途径以外,在滴鼻、直肠和生殖道免疫中,壳聚糖对质粒的包裹均一定...
关键词：
黏膜免疫 壳聚糖 DNA疫苗
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
李云岗 田夫林 周开锋 高凤山 李新生 马慧玲 夏春
为研究猪IL-2真核表达质粒对乳酸杆菌载体口蹄疫VP1 DNA疫苗(Lactobacillus acidophilusSFMD-1)猪体免疫的分子佐剂效应,通过RT-PCR方法从猪的肠系膜淋巴结克隆猪IL-2基因,基于pRc/CMV2载体,构建编码猪IL-2的真核表达质粒pCSIL2,以RT-PCR方法分析了该质粒转染PK15细胞以后的mRNA表达。结果显示预期的429 bp IL-2带仅出现在pCSIL2转染细胞。试验猪单独免疫L.acidophilusSFMD-1或者联合免疫pCSIL2质粒,后者能够增强FMDV-VP1特异的T细胞和B细胞反应,免疫后5周,单独免疫组和联合免疫组的抗体水平...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
夏庆祥 张德庆 吴家强 牛星 王小龙 牛钟相
【目的】构建猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP5基因C3d-P28分子佐剂重组质粒,探明C3d-P28分子佐剂的免疫增强效果。【方法】用大肠杆菌疫苗对健康猪进行免疫激活,提取猪肝脏总RNA,RT-PCR克隆C3d-P28并连接至pUC19载体,构建pUC19-P28.n(2、4、6)串联体,然后分别将P28.n(2、4、6)连接至真核表达载体pcDNA3.1构建成pcDNA3.1-P28.n(2、4、6)。RT-PCR扩增PRRSV GP5基因,分别定向克隆至pcDNA3.1-P28.n(2、4、6)中,构建pcDNA3.1-GP5-P28.n(2、4、6)重组质粒;提取重组质粒进行双酶...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
唐泰山 郭爱珍 陆承平
用大肠杆菌DNA作为鸡新城疫灭活苗的佐剂接种 15日龄雏鸡 ,以鸡新城疫油乳剂灭活苗为对照 ,用血凝抑制实验检测病毒特异性血凝抑制抗体。结果表明 ,大肠杆菌DNA及油乳剂两种佐剂均能增强特异性血凝抑制抗体的效价 ,二者组间抗体滴度差异不显著 ,但大肠杆菌DNA佐剂组雏鸡的体重明显高于油乳佐剂组 (P
关键词：
大肠杆菌DNA 新城疫 雏鸡 免疫增强
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
李祥瑞 谢晋 孙梅 刘杰 潘红杰 沈永林 汪志楷
实验使用伊氏锥虫可溶性抗原免疫小鼠,研究了重组牛白细胞介素-2(rBIL-2)对小鼠 NK 细胞杀伤活性及特异性抗体水平的影响.试验鼠随机分为4个组:Ag 组、Ag+rBIL-2组、rBIL-2组和 PBS 对照组.以LDH 释放法和间接 ELISA 法分别检测各组小鼠 NK 细胞杀伤活性和抗体水平.结果表明,首次免疫后24d·Ag 组 NK 细胞杀伤活性为31.6%,rBIL-2组为99.66%,Ag+rBIL-2组为98.98%,对照组为19.73%,抗体效价 Ag 组为2~4,Ag+rBIL-2组为2~6.说明 rEIL-2可显著提高 NK 细胞杀伤活性及促进抗体生成,提高宿主免...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
魏冰 陈文娟 朱琳 李建军 吕传忠 任东兴 陈庚 付旭彬
[目的]本文旨在研究Th表位肽和聚肌胞苷酸[Poly(I:C)]2种免疫增强剂对猪O型口蹄疫合成肽抗原细胞免疫和体液免疫的增强作用。[方法]将上述2种免疫增强剂分别与O型口蹄疫病毒(FMDV)合成肽抗原混合乳化,分组免疫Balb/c小鼠,分别在免疫后7、14、21和28 d检测小鼠血清中的VP1抗体、IL-4和IFN-γ水平,以及脾脏中T淋巴细胞转化率及脾脏组织形态变化。[结果]免疫后14 d Th表位肽疫苗组和Poly(I:C)疫苗组血清VP1抗体水平显著高于普通疫苗组(P
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
邓楠楠 王印庚 张正 曲江波 廖梅杰 张辰仓 王忠华
用福尔马林灭活哈维氏弧菌、鳗弧菌、迟钝爱德华氏菌、大菱鲆弧菌和溶藻胶弧菌制备成五联灭活疫苗,添加黄芪多糖作为佐剂。分别用添加黄芪多糖佐剂组和无佐剂组对大菱鲆进行腹腔注射,在第7、14、21、28、35、42、56天采取血样并检测抗体效价、溶菌酶活力和SOD活力,第56天进行人工攻毒实验,测定免疫保护力。结果表明,黄芪多糖佐剂组(免疫组2)和无佐剂组(免疫组1)两组的溶菌酶活力和SOD活力都在第28天达到最高值,且黄芪多糖佐剂组显著高于无佐剂组(P<0.05)。两个免疫组抗体效价也都在第28天达到最大值,但黄芪多糖佐剂组要显著高于无佐剂组(P<0.05),其中免疫组2的哈维氏弧菌、鳗弧菌、迟钝爱...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
薛春林 茆达干 杨利国 程宝
【目的】探讨CpGDNA对生长抑素DNA疫苗免疫小鼠免疫效果的影响。【方法】生长抑素质粒pES/2SS分别与CpG-ODN、pE-CpG、细菌DNA、脂质体配合免疫小鼠,疫苗剂量为20μg/只,佐剂等量混合,2周后加强免疫。【结果】雌性小鼠免疫后4、6周,疫苗组平均增重显著高于对照组(P
[期刊] 中国农业科学
[作者]
王存波 常国斌 周琼 廖菁 龚琳琳 陈蓉 胡国顺 雷黎丽 张海波 王克华 包文斌 陈国宏
【目的】以白细胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)基因为候选基因,研究其单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP),及其与部分免疫性状的关系。【方法】根据红色原鸡IL-1β基因序列设计引物一对,利用PCR-SSCP方法检测了如皋鸡、文昌鸡以及安卡鸡IL-1β基因内含子1、2的SNP,同时检测了56日龄的血清IL-1浓度、异嗜性粒细胞/淋巴细胞(heterophil/lymphocyte,H/L)值、绵羊红细胞(sheep red blood cell,SRBC)抗体滴度、新城疫(newcastle disease,ND)抗体滴度、...
[期刊] 华北农学报
[作者]
郑世兰 姜北宇 刘福致 景小冬 姚颖 李林 李艺娟
采用ＮＤＬａｓｏｔａ株为种毒，福尔马林为灭活剂，７号白油为佐剂，吐温８０、司本８０为乳化剂，硫柳汞为防腐剂，高压匀浆泵为乳化工具，研制出ＮＤ油性剂灭活疫苗。其剂型为双相型（Ｗ／Ｏ／Ｗ），呈稀薄乳状液，粒度为１μｍ左右，粘度≤１ｓ，通针性好。４～８℃有效保存期１年。效力≥７０ＰＤ５０，最早产生免疫时间为１２天（１００％保护），生产中常用免疫剂量为２月龄内每只０．５ｍｌ，２月龄以上每只１．０ｍｌ皮下注射，对各日龄鸡安全无副作用。与ＮＤ活毒疫苗同时免疫可使各日龄鸡产生高效价的ＨＩ抗体，雏鸡免疫期为２．５～３个月，成年鸡为１２个月。此苗可有效地预防强毒力嗜内脏型ＮＤ及“非典型”ＮＤ。
关键词：
新城疫(ND),灭活疫苗,油佐剂
[期刊] 华北农学报
[作者]
陈瑾 黄春娟 于晓明 侯立婷 乔绪稳 郑其升 侯继波
为了研究ＰＥＤＶ的新型亚单位疫苗，提高ＰＥＤＶ亚单位疫苗的免疫原性，选取免疫增强剂ＣＶＣ１３０２、ＣＶＣ１３０３与国家兽用生物制品工程技术研究中心构建的可溶性表达ＰＥＤＶ Ｓ蛋白核心表位ＣＯＥ的重组蛋白（Ｐ ＱＺＣＯＥ－ＬＴＢ）混合乳化制成疫苗，免疫４周龄的ＩＣＲ小鼠，首免１４ Ｄ后加免１次，随后采集首免１４（加强免疫前），２１，２８，５５ Ｄ的小鼠血清，分别用琼扩试验的方法定性检测血清Ｉｇｇ抗体以及用ＥＬＩＳＡ试剂盒定量检测小鼠血清Ｉｇｇ抗体滴度动态变化，肠组织ＳＩｇＡ抗体滴度。结果表明，重组蛋白与ＣＶＣ１３０３配合使用免疫小鼠能产生显著高于灭活苗（ＣＶ７７７）阳性对照组的Ｉｇｇ和ＳＩｇＡ抗．．．
[期刊] 淡水渔业
[作者]
郭玉娟 陈学年
为了探讨 A_(3α)肽聚糖对灭活嗜水气单胞菌疫苗免疫效果的影响，用添加肽聚糖的饲料投喂注射接 种经甲醛灭活的嗜水气单胞菌菌苗的彭泽鲫，测定鲫鱼白细胞吞噬活性、血清和体表粘液溶菌酶活性、抗体 效价以及活菌攻毒后的免疫保护率。结果表明，肽聚糖与灭活菌苗联合使用，鱼体表粘液和血清溶菌酶活性、 白细胞吞噬活性、抗体效价以及活菌攻毒后的免疫保护率显著提高，表明 A_(3α)肽聚糖可增强灭活菌苗的免疫效 果。
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