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[期刊] 华北农学报
[作者]
潘李珍 樊玉珍 李根
Aa-778单层细胞接种BTV-17后,于第三天出现细胞集聚,进而融合,脱落。细胞病变在第四天达高潮,第六天后,由于抗感染细胞繁殖逐渐覆盖单层空洞而恢复原样。用荧光抗体技术观察到Aa-778病变细胞中BTV-17包涵体和病毒抗原堆积物。TCID_(50)测定,初步表明第一代细胞病毒不仅能在Aa-778细胞中繁殖传代,而且它的毒力类似于在BHK_(21)细胞中的毒力。
关键词：
细胞系 蓝舌病病毒 敏感性 白纹伊蚊
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
罗晓雯 曾令兵 江南 艾桃山 范玉顶 李波 谢德兵 孟彦 周勇
鱼类细胞是开展鱼类病毒分离鉴定、功能基因分析以及生物制品制备等研究的重要物质基础。鳜(Siniperca chuatsi)是深受养殖者和消费者欢迎的养殖品种。随着鳜鱼养殖产量的逐年增加，其病害问题尤其是病毒病问题也日趋严重，但是，可用于鳜鱼病毒分离和基因功能分析的鳜细胞系缺乏。本研究采用组织块消化法，对来源鳜脑组织的细胞进行原代培养，建立了鳜脑组织细胞系，命名为MFB。MFB细胞在28℃含10%胎牛血清的L-15中已稳定传代超过70次，第25代鳜脑组织细胞的染色体众数为56。采用免疫荧光细胞化学技术(β-tubulin和Neu-N)鉴定MFB细胞的神经元纯度，结果显示，培养的MFB细胞为神经元类细胞。病毒敏感性实验结果显示，鳜蛙虹彩(MFRaIV)、大口黑鲈蛙虹彩(LMBRaIV)和大鲵虹彩病毒(GSIV)均可在MFB细胞中产生典型细胞病变效应，病毒滴度分别为10~(8.68±0.12)、10~(8.36±0.15)、10~(10.15±1.85) TCID_(50)/mL。使用脂质体Lipofectamine~(?)2000将pEGFP-N1转入MFB细胞，转染效率可达20%。本研究建立的鳜脑组织细胞系不仅对多种蛙虹彩病毒敏感，而且转染质粒效率较高，为鳜病毒性病原的分离及基因功能研究奠定了前期基础。
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
王津津 刘莹 于力 贾鹏 陈兵 史秀杰 郑晓聪 兰文升 何俊强 刘荭
草鱼（Ｃｔｅｎｏｐｈａｒｙｎｇｏｄｏｎ ｉｄｅｌｌｕｓ）性腺细胞系（ｇＣｏ）是中国科学院水生生物研究所在２０世纪７０年代开展草鱼出血病研究时建立的一株细胞系，迄今已传至３００多代，在中国鱼类病毒学研究领域发挥了重要作用。本研究采用形态学观察、细胞生长曲线测定、细胞周期测定、细胞核型分析、细胞凋亡检测、电镜观察等方法，对ｇＣｏ的生长特性及鲤春病毒血症病毒（ｓＶＣＶ）在该细胞中的增殖特性等进行了研究。结果显示，ｇＣｏ细胞的最适生长温度为２５℃，在Ｍ１９９和ＭｅＭ等细胞培养液中均能较好地生长，培养液中最适的胎牛血清浓度为１０％。测定了ｇＣｏ细胞系对ｓＶＣＶ病毒的敏感性，发现与鲤（Ｃｙｐｒｉｎｕｓ Ｃ．．．
[期刊] 水产学报
[作者]
雷存科 陈中元 张奇亚
利用３个不同物种的水生动物细胞系，包括爪蟾肾细胞系（Ａ６）、大鲵胸腺细胞系（ＧＳＴＣ）和鲤上皮瘤细胞系（ＥＰＣ），分别用沼泽绿牛蛙蛙病毒（ＲＧＶ）和大鲵蛙病毒（ＡＤＲＶ）感染，进一步研究细胞病变显微形态、病毒滴度、细胞病变与不同感染时间的相关性等。结果显示，在光镜下可见感染病毒的细胞发生病变，Ａ６和ＥＰＣ细胞肿胀或破裂；ＧＳＴＣ细胞收缩或聚在一起形成多层。同种水产动物细胞系对不同蛙病毒的敏感性不同，在Ａ６、ＥＰＣ和ＧＳＴＣ细胞中，ＲＧＶ的滴度分别为１０～（３．６）、１０～（５．９）和１０～（６．６） ＴＣＩＤ＿（５０）／ｍ Ｌ；ＡＤＲＶ的滴度分别为１０～（４．３）、１０～（５．４）和１０～（６．．．
[期刊] 西南农业学报
[作者]
李文良 毛立 杨蕾蕾 许宝军 唐朝忠 杨恒 郝飞 张纹纹 邵坤 李华春 江杰元
【目的】蓝舌病病毒是一种重要的虫媒病毒,血清型较多,为了解近年来江苏省盱眙县蓝舌病病毒流行情况及血清型分别情况。【方法】本研究于2015-2016年在盱眙县桂五镇建立了5头蓝舌病血清学阴性山羊作为监控动物群。从2015年5-10月,每周采血1次,2015年11月至2016年4月,每月采血1次,用BTV C-ELISA试剂盒进行血清学监测。用RT-PCR检测转阳前2周、1周和转阳本周的血液样品,选择阳性样品处理后接种鸡胚,收获死亡鸡胚肝脏,用PBS悬浮捣碎的鸡胚肝脏,上清接种于C6/36细胞一代、BHK-2
关键词：
蓝舌病病毒 分离 血清型 监控
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
苏鑫铭 徐亚林 于春梅 曹瑞兵 周斌 陈溥言
根据Cre基因序列设计并合成1对引物,PCR扩增出Cre基因编码区,克隆于pIREShyg载体,得到重组质粒pIREShyg-Cre,转染HEK-293A细胞后经400μg.mL-1 Hygromycin B的筛选,将其中1个阳性克隆命名为293A-Cre。利用伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)S03109株(带有gfp报告基因表达盒及loxP位点)感染293A-Cre细胞,荧光显微镜观察、PCR及Western blot检测gfp基因的表达。结果表明,S03109感染293A-Cre二代后loxP位点间的gfp表达盒被删除,获得重组病毒S0419。将S0419感染已...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
杨凤美 王飞 张雯 酒立君 罗静 吴楠 吴恒
【目的】建立葡萄风信子体细胞胚再生体系,通过外部形态判断愈伤组织的类型,并探索胚性愈伤组织对头孢霉素和潮霉素的敏感性。【方法】以多年生葡萄风信子‘蓝穗’的盛花期叶片为试验材料,通过正交试验筛选胚性愈伤组织诱导时适宜的植物生长调节剂质量浓度及配比;石蜡切片法观察不同愈伤组织内部的细胞结构,诱导具有胚性的愈伤组织形成体细胞胚,进而获得再生植株;在培养基中加入头孢霉素或潮霉素,观察2种抗生素对胚性愈伤组织生长和体细胞胚发生的影响。【结果】葡萄风信子胚性愈伤组织诱导的适宜培养基为MS+0.5mg/L 2,4-D+0.1mg/L TDZ,在该培养基上诱导率高达100%。石蜡切片观察发现,外观质地紧密、节...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
郑小英 吴瑜 张东京 洪晓月 奚志勇
白纹伊蚊(Aedes albopictus)是全球范围最具有侵略性的入侵物种之一,是中国大陆登革病毒和寨卡病毒等病原体的主要传播媒介。传统的蚊媒控制方法对白纹伊蚊的控制效果不理想。我们通过显微胚胎注射建立了携带三型沃尔巴克氏体(Wolbachia)菌型(wAlbA、wAlbB和wPip)的白纹伊蚊HC蚊株,应用昆虫不相容技术结合昆虫绝育技术(IIT-SIT),在选定的2个试验现场进行持续释放大规模生产的HC雄蚊,以压制目标区域的白纹伊蚊种群。研究结果显示:在2个试验现场基本清除白纹伊蚊的种群,证明IIT-SIT是一种高效、绿色环保的蚊媒控制工具,应用于登革热、寨卡病毒病等蚊媒疾病的传播控制切实可行,给蚊虫防控提供崭新的思路。
[期刊] 林业科学研究
[作者]
张欣 冯颖 丁伟峰 马涛
采用来源于3个目14种昆虫的离体细胞系对苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒AcNPV(Autographa californica nuclear polyhedrosis virus)和家蚕核型多角体病毒BmNPV(Bombyx mori nuclear polyhedrosis virus)进行敏感性测定。试验结果表明:各昆虫细胞系对两种病毒的敏感性不同,来源于双翅目及直翅目的细胞系均不能被这两种病毒感染;AcNPV可侵染来源于鳞翅目的Sf21、Sf9、HighFive、RIRI-PX及HZ,宿主范围较广;而BmNPV仅能侵染BmN细胞,宿主专一。AcNPV对Sf9细胞的感染率最高,接种病毒10 ...
关键词：
昆虫细胞系 AcNPV BmNPV 感染
[期刊] 淡水渔业
[作者]
曾令兵 陈艳红 胡春生
采用微量细胞培养系统测定草鱼出血病病毒854株在草鱼肾脏组织细胞系(CIK)上的繁殖动态。病毒在感染后12小时滴度开始上升,24～72小时呈对数上升,84小时病毒滴度达到最高点,以后渐趋平稳。
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
冯亚萍 孔杰 罗坤 栾生 曹宝祥 刘宁 卢霞 曹家旺 王明珠 王军 孟宪红
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
刘劲军 蒋杰贤 游兰韶
利用经稀释10-1和10-3的甜菜夜蛾核型多角体病毒(SeNPV)初提液,对甜菜夜蛾各龄幼虫不同实验种群进行饲毒,以研究不同龄期宿主幼虫对SeNPV的敏感性差异.结果表明,宿主幼虫虫龄与其对病毒的敏感性呈显著负相关,虫龄越小,对病毒的敏感性越高.低浓度病毒(8.24×104PIB/mL)感染1～3龄幼虫,患病率达89%以上,患病个体死亡率达94%以上.高浓度病毒(8.24×106PIB/mL)能导致89.6%以上高龄幼虫死亡.SeNPV导致宿主幼虫死亡的时间相对较短.Weibull模型可较好地拟合各试验结果.
[期刊] 水产学报
[作者]
赵柳兰 杨筱珍 范朋 杨丽丽 张金彪 梁攀 洪宇航 成永旭
实验采用Giemsa与Wright’s两种染色方法对黑褐新糠虾血细胞进行染色,根据血细胞大小,所含颗粒与否,颗粒多少和核质比将其分型,并对各型血细胞所占比例进行统计。结果表明,通过比较Giemsa染色与Wright’s染色两种方法的染色时间和效果,Wright’s染色更加适合糠虾血细胞。通过染色,将黑褐新糠虾血细胞分为3种类型,它们分别为透明细胞、半颗粒细胞和颗粒细胞。它们的胞体大小依次增大,核质比依次降低。对此3种类型血细胞比例分别统计后发现,颗粒细胞所占比例最多约(48.38%±0.05%),其次是半颗粒细胞约为(35.22%±0.04%),最少的为透明细胞约为(16.40%±0.01%)...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
丁冠群 刘雪霞 原乔慧 杨娜 李楠 吴寒 甘立军 李义
[目的]本文旨在研究黄酮类化合物含量的变化对植物幼苗中细胞分裂素的响应。[方法]以稳定遗传的35S∷AtPAP2转基因烟草作为试验材料,以细胞分裂素典型的生理效应(抑制主根伸长生长和诱导离体叶片不定芽的再生)为试验模式系统,研究转基因烟草对细胞分裂素的响应。通过分析内源黄酮类化合物的含量,并结合外源施用,初步分析转基因烟草对细胞分裂素敏感的可能机制。[结果]6-苄基腺嘌呤(6-benzylaminopurine,6-BA)(0.2～2.0μmol·L~(-1))和植物体内天然存在的细胞分裂素(反式玉米素和异戊烯基腺嘌呤)处理野生型和转基因烟草,均抑制主根的伸长生长,对转基因烟草的抑制效应明显强于野生型,表明转基因烟草对细胞分裂素的响应更敏感。6-BA处理3 h后,可诱导野生型和转基因植物细胞分裂素响应基因ARR的表达,6-BA的诱导效果在转基因植株上更显著。利用细胞分裂素诱导离体叶片不定芽再生的试验系统,发现转基因烟草长愈伤组织的叶片比例和离体叶片上长芽的平均数均高于野生型,也表明转基因烟草对细胞分裂素的响应更敏感。通过UPLC分析发现,转基因烟草中槲皮素含量明显高于野生型。在培养基中添加50μmol·L~(-1)槲皮素也可以提高野生型烟草幼苗对细胞分裂素的敏感性,而添加生长素极性运输抑制剂2,3,5-三碘苯甲酸和萘基邻氨甲酰苯甲酸则显著增强6-BA对主根伸长生长的抑制效应。[结论]在烟草体内过表达AtPAP2基因,可以提高内源槲皮素的含量,进而通过影响生长素的极性运输来调节植物对细胞分裂素的敏感性。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
孙新 杨志敏 徐朗莱
研究了不同浓度 (0 ,10 ,2 0 ,30和 4 0 μmol·L-1)镉对油菜油研 8号在缺硫和供硫状态下的毒害作用。结果表明 :镉促进油菜对硫的吸收 ,缺硫则加重镉对植株的毒害 ;缺硫处理阻碍了镉向地上部的运输 ,而使根部镉的积累量增加 ;在地上部和根部 ,镉均以蛋白质结合态占优势 ,缺硫处理可增加地上部和根部蛋白质结合态镉的量。
关键词：
镉 缺硫 油菜
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