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[期刊] 中国农业科学
[作者]
黄文 谢笔钧 王益 杨尔宁 罗锐
选用江苏省泰兴市大佛指白果为原料,采用盐溶和盐析的方法,从白果中分离制备出清蛋白(GAP)、球蛋白(GGP)和盐溶蛋白(GSP)。白果蛋白中以清蛋白和球蛋白为主,醇溶蛋白、碱溶蛋白和复合蛋白含量很少。化学成分分析表明,制得的GAP、GGP和GSP中以GAP的蛋白质纯度高,氨基酸组成丰富、合理,属于优质蛋白质。活性试验结果表明GAP的抗氧化活性远高于GGP。
关键词：
白果 盐溶 盐析 清蛋白 抗氧化
[期刊] 上海水产大学学报
[作者]
魏文志 夏文水 吴玉娟
从小球藻中提取蛋白质,并研究了小球藻蛋白质抗氧化特性。通过反复冻融、细胞破碎、离心、盐析和凝胶层析,从小球藻中得到两种蛋白质(ProⅠ和ProⅡ),获得率分别为0.280%和0.664%。经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳显示为单条带,分子量分别为20.2 ku和20.4 ku。紫外可见光谱显示,ProⅠ在280 nm有一特征吸收峰,ProⅡ在280 nm和675 nm处各有一特征吸收峰。体外设计清除超氧阴离子自由基(O2?.)和羟自由基(.OH)实验,结果显示两种蛋白质能清除超氧阴离子自由基,黑暗条件下能清除羟自由基,但光照条件下生成羟自由基。
关键词：
小球藻 蛋白质 分离纯化 抗氧化活性
[期刊] 中国农业科学
[作者]
张名位 郭宝江 张瑞芬 池建伟 魏振承 徐志宏 张雁
目的分离、纯化和鉴定黑米抗氧化的主要活性成分。方法以体外总抗氧化能力为活性跟踪指标,对黑米抗氧化提取物用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇等不同极性溶剂萃取分部后得到抗氧化能力最强的部分,再用SephadexLH-20分离得到抗氧化主活性成分,采用紫外-可见光谱、红外光谱、ESI-MS质谱和核磁共振(1HNMR和13CNMR)波谱法对其进行结构解析。结果黑米抗氧化提取物的5种溶剂萃取物以水部和正丁醇部的抗氧化能力最强,其总抗氧化能力分别为383和392ku·g-1,其中,从水部可得到4种抗氧化主活性成分,总抗氧化能力分别为976、878、1134和1087ku·g-1。波谱结构解析表明,4种成分均...
关键词：
黑米 抗氧化活性成分 结构鉴定
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
葛智超 郎蒙 李燕
以裸藻为原料，将粗提后的裸藻多糖（EGPS）经DEAE-纤维素和Sephadex G-100柱层析进行分离纯化，得到3个主要组分EGPS1-A、EGPS1-B、EGPS3-A，并对其进行纯度鉴定和抗氧化活性分析，将纯化后抗氧化活性较好的裸藻多糖进行分子量测定、单糖组成分析。纯度鉴定结果表明柱层析后得到的3个多糖组分纯度较高，红外光谱表明其均具有典型的糖类特征吸收峰。抗氧化实验表明3个多糖组分中EGPS1-A的综合抗氧化活性最高，EGPS1-A的分子量为136.8ku，单糖组成包括甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖、岩藻糖，单糖组分间物质的量比值是0.072：0.43：0.049：0.01：0.26：0.62：0.53：0.18：1.01。
关键词：
裸藻多糖 分离纯化 单糖组成 抗氧化活性
[期刊] 水产学报
[作者]
陈俊杰 陈季旺 谭玲 廖鄂 程水源 夏文水
为从蛋白质水平解释竹叶抗氧化物浸泡-乳清分离蛋白涂膜对富硒虹鳟的保鲜机理，将鲜活富硒虹鳟去除头、内脏和表皮，切块后浸泡在1.0%的竹叶抗氧化物（AOB）溶液中（去离子水作为对照），再进行乳清分离蛋白（WPI）溶液涂膜，25℃下鼓风吹干表面水分后置于4℃冰箱中贮藏1、4、7、10和13 d。测定鱼肉中肌原纤维蛋白和TCA-可溶性肽的含量、蛋白质的分子内价键，以及肌原纤维蛋白的总巯基含量、表面疏水性和二级结构，分析涂膜对冷藏富硒虹鳟蛋白质理化性质的影响。结果显示，冷藏期间，WPI组的肌原纤维蛋白含量和二级结构中β-折叠的含量显著高于对照组（P0.05）。3个试验组中，1.0% AOB+WPI组的肌原纤维蛋白、总巯基、氢键、二级结构中α-螺旋和β-折叠的含量在冷藏期间最高，H_(0)、TCA-可溶性肽、二硫键和二级结构中β-转角含量最低。WPI在鱼块表面形成一层薄膜，可以隔绝空气，降低微生物的污染；AOB含有黄酮类、多酚类等，可以清除自由基，抑制巯基氧化和二硫键的生成，延缓肌原纤维蛋白的变性。多酚中的亲水基团也有助于降低肌原纤维蛋白的表面疏水性，提高溶解性。这些结果表明，竹叶抗氧化物浸泡结合乳清分离蛋白涂膜，抑制了蛋白质的变性和降解，延缓了富硒虹鳟的品质劣变。
[期刊] 中国水产科学
[作者]
彭文 王江勇 丁雪娟
利用超速离心和CsCl梯度离心的方法,从杂色鲍(Haliotis diversicolor Reeve)血淋巴中分离纯化血蓝蛋白(Hcs),SDS-PAGE检测提取的血蓝蛋白由1种亚基构成,分子量为400kD;Native-PAGE电泳检测2个亚基(Isoform)分别为HdH1、HdH2;透射电镜下其四级结构为圆柱体,以多十聚体、二十聚体和少量的十聚体形式存在于血淋巴中。杂色鲍血蓝蛋白在以邻苯二酚为底物的条件下表现出微弱的酚氧化酶活性(Km=25.66mmol/L),胰蛋白酶和SDS能使其酚氧化酶活性增强;以左旋多巴(L-DOPA)为底物则不表现出酚氧化酶活性。
关键词：
杂色鲍 血蓝蛋白 分离纯化 酚氧化酶活性
[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
潘月 雷美玲 吕兆林 任美玲 王小玉 王媛媛 张柏林
对超临界CO2流体萃取技术提取的竹叶粗多糖采用分级醇沉、脱蛋白质及纤维素柱层析等技术分离纯化,研究分离纯化后的竹叶多糖产物的物化指标。研究结果表明:经超临界CO2流体萃取技术提取得到的毛竹叶粗多糖,采用体积分数为70%的乙醇沉淀,得到预纯化产物,预纯化产物得率17.75%,多糖含量9.586 mgg,总抗氧化能力2.556 mgg VC;预纯化产物再经Sevag法脱蛋白质及DEAE-52纤维素层析柱层析,获得一种中性竹叶多糖,其平均分子量为5.051×104,IC50值为0.178 mgg竹叶多糖,与VC(IC50值为0.158 mgg)相比,具有较好的DPPH清除能力。
关键词：
毛竹 竹叶多糖 分离 纯化
[期刊] 华北农学报
[作者]
白辉 武鹏程 刘丽娟 李莉云 刘国振
在优化水稻叶片蛋白质提取方法的基础上,利用免疫沉淀对水稻中的XA21蛋白质进行了富集纯化,继而通过TCA-丙酮法脱盐,用尿素、硫脲溶解后进行双向电泳分离和Western检测,实现了对高分子量、低丰度表达的、可能的膜蛋白XA21的分离检测,为其翻译后修饰方式研究奠定了基础。
关键词：
水稻 免疫沉淀 双向电泳
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
赵晓蕾 田甜 胡远亮 赵述淼 梁运祥
通过高效凝胶过滤层析和反相高效液相色谱先后对大米渣蛋白酶解后的多肽溶液进行分离纯化,分别得到组分2和组分RF9;再经反相高效液相色谱-质谱联用对组分RF9进行分析鉴定得到抗氧化肽氨基酸序列L-Q-P-Y(Leu-Gln-Pro-Tyr),分子质量为520.277u。合成的抗氧化肽片段L-Q-P-Y质量浓度为1 mg/mL时,对DPPH自由基清除率达到85.84%。
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
周亚迪 汪之颖 姚旻晶 范鸿冰 洪惠 罗永康
为系统考察酶解时间、酶种类和酶加入的顺序对猪血浆蛋白酶解产物抗氧化性的影响,采用风味蛋白酶、碱性蛋白酶及双酶(风味蛋白酶,碱性蛋白酶不同的加入顺序)在各自最适条件下对猪血浆蛋白进行酶解,并研究酶解产物的功能特性。结果表明:0~120min内,随着酶解时间的延长,水解度升高,各酶解产物的抗氧化性均有所增强;60~180min内,双酶酶解产物的清除DPPH自由基的能力、亚铁离子螯合能力和还原力显著高于单酶酶解产物(P<0.05);90~150min内,先加碱性蛋白酶后加入风味蛋白酶酶解的酶解产物的水解度、清除DPPH自由基能力和还原力显著高于先加风味蛋白酶酶解后加入碱性蛋白酶酶解的酶解产物(P<0...
[期刊] 中国林业科学研究院
[作者]
蒋筠雅
蜻蜓作为食用昆虫受到了世界各地人民的喜爱。我国有食用蜻蜓稚虫和成虫的习俗,相关的报道主要见于西南地区,但已有的调查和研究十分有限,存在对食用种类、地区和人群认识不全面,食用习俗缺失,营养和保健价值不清楚等问题,严重阻碍了我们对这一珍贵食物资源的认识,而受到经济发展和社会快速变迁的冲击,蜻蜓的传统利用知识正在迅速消失。本研究主要在我国蜻蜓的主要食用地区云南省和贵州省进行实地考察,样品采集和鉴定,掌握蜻蜓食用的常见种类、习俗等基础信息;对采集到的常见种类开展营养成分测定,包括基本营养组成、氨基酸组成、脂肪酸组
关键词：
食用昆虫 营养分析 蛋白质含量 抗氧化
[期刊] 中国农业科学
[作者]
陈思远 刘永祥 曹小舟 张逸婧 陈海娟 沈新春
【目的】探究能有效地从小麦胚芽清蛋白二步双酶酶解物中分离得到高活性抗氧化肽的工艺。【方法】以小麦胚芽清蛋白为原料，ＤＰＰＨ自由基清除率和Ｆｅ～（２＋）螯合能力为抗氧化活性的评价指标，通过胰蛋白酶进行酶解，依次采用超滤膜和凝胶过滤色谱（ＳｅＰＨａＤｅｘ Ｇ－７５）对酶解产物进行分离纯化，筛选出活性较高的组分；采用碱性蛋白酶对获得的活性较高组分进行酶解，通过凝胶过滤色谱（ＳｅＰＨａＤｅｘ Ｇ－１５）和反相高效液相色谱（ＲＰ－ＨＰＬＣ）分离纯化其酶解产物；采用质谱技术（ｅＳＩ－ＴＯＦ ＭＳ／ＭＳ）对抗氧化活性最高的组分进行结构鉴定。【结果】分离得到３个活性组分（峰）Ｐ＿ａ、Ｐ＿ｂ、Ｐ＿Ｃ，采用ＤＰＰ．．．
[期刊] 林业科学
[作者]
吴彩娥 范龚健 李婷婷 吴海霞 徐文斌
为探究银杏营养贮藏蛋白质的结构与功能的关系,采用DEAE-Sepharose FF离子交换色谱和Sephadex G-75葡聚糖凝胶色谱对银杏营养贮藏蛋白进行分离纯化,得到一条36 kDa的蛋白。质谱分析结果表明:该蛋白中的2个肽段序列与大豆贮藏蛋白质(29 kDa)和薯蓣块茎贮藏蛋白质(30 kDa)的部分氨基酸序列吻合。红外光谱结果表明:β-折叠构象是银杏营养贮藏蛋白质的主要二级结构。
关键词：
银杏 营养贮藏蛋白质 分离纯化 结构鉴定
[期刊] 中国水产科学
[作者]
祝雯 林志铿 吴祖建 林奇英 谢联辉
采用硫酸铵分级沉淀 ,BlueSepharose 6FastFlow、SPSepharoseFastFlow和HPLC柱层析 ,从河蚬 (Corbiculafluminea)中分离纯化蛋白CFp a。经SDS PAGE测定 ,其分子量为 2 4 .0kD ;经苯酚硫酸法测定 ,其含糖量为 2 .3%。 10～ 16 0 μg/mLCFp a分别处理肝癌细胞BEL74 0 4 72h后 ,采用四氮唑还原法 (MTT)检测癌细胞的生长活性 ,结果显示 ,CFp a对BEL74 0 4癌细胞生长的抑制率在 2 4 .6 %～ 79.2 %。采用质量浓度为 2 0 μg/mL和 4 0 μg/mL的C...
关键词：
河蚬 蛋白纯化 癌细胞 诱导凋亡
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
薄慧杰 卢长明 吴刚 武玉花 肖玲 白延红 陈耀锋
通过PCR扩增,从pCAMBIA1300-bar质粒中获得bar基因编码区全长,经酶切鉴定和测序后证实,bar基因分离成功。用BamH和Hind酶切,将bar基因与原核表达载体pET28a(+)连接,构建成重组质粒pET28bar。将重组质粒pET28 bar转化大肠杆菌菌株BL21(DE3)后,获得高效表达。SDS-PAGE电泳分析显示,目的蛋白主要以包涵体形式存在,蛋白质分子量约为27 ku。将包涵体离心、洗涤和纯化后,得到高纯度的目的蛋白。该蛋白可以替代植物外源蛋白进行转bar基因产品的食用安全性检测,也可用于转bar基因产品ELISA检测的抗体制备。
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