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[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
沈婷 张园园 王辰 王世梅
[目的]为了明确草莓根腐病的致病因子,降低其发病率,从草莓病株根部分离病原菌,并研究拮抗菌白刺链霉菌(Streptomyces albospinus)CT205固体制剂对草莓根腐病的防控效果。[方法]从草莓病株根部分离出了1株病原菌Y3,采用形态观察及r DNA-ITS序列分析对病原菌Y3进行鉴定,用平板对峙培养测定拮抗菌CT205对菌株Y3的抑制作用,利用最佳固体发酵培养基及发酵条件对拮抗菌CT205进行固体发酵,通过连作致病土盆栽试验评价菌株CT205固体制剂对草莓根腐病的防控作用。[结果]初步鉴定病原菌Y3为尖孢镰刀菌(Fusarium sp.)。试验发现拮抗菌CT205对病原菌Y3的抑...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
沈婷 张园园 王辰 王世梅
[目的]为了明确草莓根腐病的致病因子，降低其发病率，从草莓病株根部分离病原菌，并研究拮抗菌Streptomyces albospinus CT205 固体制剂对草莓根腐病的防控效果。[方法]从草莓病株根部分离出了 1 株病原菌 Y3，采用形态观察及 rDNA-ITS 序列分析对病原菌 Y3 进行鉴定，用平板对峙培养测定拮抗菌 CT205对菌株 Y3 的抑制作用，利用最佳固体发酵培养基及发酵条件对拮抗菌 CT205 进行固体发酵，通过连作致病土盆栽试验评价菌株 CT205 固体制剂对草莓根腐病的防控作用。[结果]初步鉴定病原菌 Y3 为尖孢镰刀菌（Fusarium sp.），试验发现拮抗菌 CT...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
沈婷 张园园 王辰 王世梅
［目的］为了明确草莓根腐病的致病因子，降低其发病率，从草莓病株根部分离病原菌，并研究拮抗菌ＳｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅＳ ａｌｂｏＳｐｉｎｕＳ ｃｔ２０５ 固体制剂对草莓根腐病的防控效果。［方法］从草莓病株根部分离出了 １ 株病原菌 ｙ３，采用形态观察及 ｒＤｎａ－ｉｔＳ 序列分析对病原菌 ｙ３ 进行鉴定，用平板对峙培养测定拮抗菌 ｃｔ２０５对菌株 ｙ３ 的抑制作用，利用最佳固体发酵培养基及发酵条件对拮抗菌 ｃｔ２０５ 进行固体发酵，通过连作致病土盆栽试验评价菌株 ｃｔ２０５ 固体制剂对草莓根腐病的防控作用。［结果］初步鉴定病原菌 ｙ３ 为尖孢镰刀菌（ＦｕＳａｒｉｕｍ Ｓｐ．），试验发现拮抗菌 ｃｔ．．．
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
沈婷 张园园 王辰 王世梅
［目的］为了明确草莓根腐病的致病因子，降低其发病率，从草莓病株根部分离病原菌，并研究拮抗菌白刺链霉菌（ＳｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅＳ ａｌｂｏＳｐｉｎｕＳ）ｃｔ２０５固体制剂对草莓根腐病的防控效果。［方法］从草莓病株根部分离出了１株病原菌ｙ３，采用形态观察及ｒ Ｄｎａ－ｉｔＳ序列分析对病原菌ｙ３进行鉴定，用平板对峙培养测定拮抗菌ｃｔ２０５对菌株ｙ３的抑制作用，利用最佳固体发酵培养基及发酵条件对拮抗菌ｃｔ２０５进行固体发酵，通过连作致病土盆栽试验评价菌株ｃｔ２０５固体制剂对草莓根腐病的防控作用。［结果］初步鉴定病原菌ｙ３为尖孢镰刀菌（ＦｕＳａｒｉｕｍ Ｓｐ．）。试验发现拮抗菌ｃｔ２０５对病原菌ｙ３的抑．．．
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
王辰 张谷月 张园园 沈婷 王世梅
[目的]为了获得白刺链霉菌(Streptomyces albospinus)CT205菌株摇瓶发酵最佳配方和适宜的发酵条件,并初步研究其次生代谢产物的性质。[方法]通过碳、氮源单因子试验、正交试验和主要发酵条件优化试验,以菌浓度和抑菌圈大小为指标确定其最佳发酵培养基配方和发酵条件。通过GF254薄板层析、生物测定、紫外检测、稳定性试验,研究菌株CT205发酵产生的次生代谢产物性质。[结果]菌株CT205发酵最佳培养基配方:蔗糖20.0g·L-1,可溶性淀粉30.0g·L-1,蛋白胨2.0g·L-1,黄豆粉8.0g·L-1,MgSO4·7H2O0.5g·L-1,K2HPO4·7H2O0.5g·L...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
王辰 张谷月 张园园 沈婷 王世梅
［目的］为了获得白刺链霉菌（ＳｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅＳ ａｌｂｏＳｐｉｎｕＳ）ｃｔ２０５菌株摇瓶发酵最佳配方和适宜的发酵条件，并初步研究其次生代谢产物的性质。［方法］通过碳、氮源单因子试验、正交试验和主要发酵条件优化试验，以菌浓度和抑菌圈大小为指标确定其最佳发酵培养基配方和发酵条件。通过ＧＦ２５４薄板层析、生物测定、紫外检测、稳定性试验，研究菌株ｃｔ２０５发酵产生的次生代谢产物性质。［结果］菌株ｃｔ２０５发酵最佳培养基配方：蔗糖２０．０Ｇ·ｌ－１，可溶性淀粉３０．０Ｇ·ｌ－１，蛋白胨２．０Ｇ·ｌ－１，黄豆粉８．０Ｇ·ｌ－１，ｍＧＳｏ４·７Ｈ２ｏ０．５Ｇ·ｌ－１，Ｋ２Ｈｐｏ４·７Ｈ２ｏ０．５Ｇ·ｌ．．．
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
王辰 张谷月 张园园 沈婷 王世梅
［目的］为了获得ＳｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅＳ ａｌｂｏＳｐｉｎｕＳ ｃｔ２０５摇瓶发酵最佳配方和适宜的发酵条件，并初步研究其次生代谢产物的性质。［方法］通过碳、氮源单因子试验、正交试验和主要发酵条件优化试验，以菌浓度和抑菌圈大小为指标确定其最佳发酵培养基配方和发酵条件。通过 ＧＦ２５４薄板层析、生物测定、紫外检测、稳定性试验，研究菌株 ｃｔ２０５ 发酵产生的次生代谢产物性质。［结果］菌株 ｃｔ２０５ 发酵最佳培养基：蔗糖 ２０．０Ｇ·ｌ－１，可溶性淀粉 ３０．０ Ｇ·ｌ－１，蛋白胨 ２．０ Ｇ·ｌ－１，黄豆粉 ８．０ Ｇ·ｌ－１，ｍＧＳｏ４·７Ｈ２ｏ ０．５ Ｇ·ｌ－１，Ｋ２Ｈｐｏ４·７Ｈ２ｏ ０．．．
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
王辰 张谷月 张园园 沈婷 王世梅
[目的]为了获得Streptomyces albospinus CT205摇瓶发酵最佳配方和适宜的发酵条件，并初步研究其次生代谢产物的性质。[方法]通过碳、氮源单因子试验、正交试验和主要发酵条件优化试验，以菌浓度和抑菌圈大小为指标确定其最佳发酵培养基配方和发酵条件。通过 GF254薄板层析、生物测定、紫外检测、稳定性试验，研究菌株 CT205 发酵产生的次生代谢产物性质。[结果]菌株 CT205 发酵最佳培养基：蔗糖 20.0g·L-1，可溶性淀粉 30.0 g·L-1，蛋白胨 2.0 g·L-1，黄豆粉 8.0 g·L-1，MgSO4·7H2O 0.5 g·L-1，K2HPO4·7H2O 0...
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
赵金杨 王瑞君 江正强
以嗜热棉毛菌W205为出发菌株,研究其固体发酵产脂肪酶条件。结果表明:豆粕粉为固体基质底物,干基质量(g)与营养盐溶液体积(mL)1∶3时的含水量为初始含水量,酵母提取物为单一氮源且添加量为干基的0.06 g/g,初始pH 8.0时,最利于产酶。此条件下发酵第5天获得最高脂肪酶比活性190.1 U/g。酶谱分析结果表明,该菌主要产一种分子质量约30 ku的脂肪酶。
关键词：
脂肪酶 嗜热棉毛菌 固体发酵 酶谱
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
张剑冰 欧广东 孙明 陈亚华 喻子牛
对可毒杀家蝇幼虫的苏云金杆菌中华亚种(Bucillus thuringiensis subsp. chinensis)CT-43菌株进行了质粒消除处理,从中分离出15株突变株,其中7个突变株缺失了140kD ICP(杀虫晶体蛋白Insecticidal crystal protein),8个菌株缺失了130和68 kD ICP,缺失140 kD ICP的菌株同时失去了苏云金素的产生能力。对这些菌株进行质粒检测的结果表明,130 kD和68 kD ICP的产生与一个大质粒L-1有关,而对家蝇幼虫有毒性的140 kD ICP的产生与另一个大质粒L-2有关,同时,质粒L-2还决定着该菌株苏云金素的产...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
姜珊 汤芳 刘云 李德志 任建鸾 张中华 巩倩雯 戴建君
[目的]本文旨在研究前噬菌体phiv205-3片段对禽致病性大肠杆菌DE205B氧化应激耐受力的影响。[方法]利用Red同源重组技术敲除前噬菌体phiv205-3片段,构建前噬菌体片段缺失株DE205BΔphiv205-3,检测野生株和前噬菌体片段缺失株对氧化应激的耐受力;进一步敲除前噬菌体片段中氧化应激耐受相关基因nrdE、nrdF、nrdH、nrdI,构建前噬菌体基因缺失株DE205BΔnrdE、DE205BΔnrdF、DE205BΔnrdH和DE205BΔnrdI,并通过基因序列分析和荧光定量PCR(qPCR)检测这些缺失菌株和野生菌株的氧化应激耐受力。[结果]与野生株相比,前噬菌体片段缺失株DE205BΔphiv205-3氧化应激耐受力下降33%(P<0.05);qPCR检测结果显示,前噬菌体基因nrdF在氧化应激情况下转录水平显著提高(P<0.05);对构建前噬菌体单基因缺失株检测结果显示:与野生株相比,缺失株DE205BΔnrdF在氧化应激环境下的存活率下降21%(P<0.05),而缺失株DE205BΔnrdE、DE205BΔnrdH和DE205BΔnrdI的存活率无显著变化。[结论]前噬菌体片段编码的nrdF基因有助于增强宿主细菌DE205B氧化应激耐受力。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
孙鑫 杨利 郭东辉 马旭东 杜露平 侯立婷 陈瑾 冯秀丽 郑其升 程海卫
[目的]猪CD205分子作为猪DC细胞特异性的抗原提呈受体，在抗原提呈过程中起到关键作用。本研究通过噬菌体展示技术针对猪CD205分子CysR-FN Ⅱ蛋白进行筛选获得其特异性的纳米抗体，为猪CD205靶向抗原提呈的研究奠定基础。[方法]利用前期制备的猪CD205分子CysR-FN Ⅱ蛋白进行羊驼免疫，经6次皮下免疫后，采集羊驼外周血淋巴细胞，提取总RNA并反转录获得cDNA，经PCR扩增编码纳米抗体的基因片段，构建猪CD205分子CysR-FN Ⅱ噬菌体展示纳米抗体基因文库，并运用噬菌体展示技术针对猪CD205分子CysR-FN Ⅱ蛋白进行亲和筛选，随机挑选单克隆菌落并使用Phage-ELISA方法鉴定出针对猪CD205分子CysR-FN Ⅱ蛋白的特异性纳米抗体。[结果]4轮亲和筛选后，通过Phage-ELISA方法鉴定和序列比对分析，共获得12个猪CD205分子CysR-FN Ⅱ蛋白特异性纳米抗体，相对分子质量在17 × 10~(3)左右。[结论]本研究成功筛选获得猪CD205分子CysR-FN Ⅱ蛋白特异性的纳米抗体，为下一步研究构建CD205靶向抗原以及CD205靶向研究奠定了基础。
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
鲁松清 喻子牛
在电镜下观察了苏云金芽胞杆菌菌株ＣＴ－４３的芽胞萌发、芽胞和伴胞晶体的形成过程。芽胞萌发分活化、萌动和脱出３个阶段。芽胞形成分为轴丝形成、前芽胞隔膜形成、前芽胞形成、初生细胞壁形成、芽胞外套形成、芽胞衣片层形成和芽胞形成７个阶段。伴胞晶体形成从芽胞形成第２阶段开始，由一些小结晶聚集而成。晶体镶嵌在菌株ＣＴ－４３中很普遍。结合实验对伴胞晶体形成的调控和外膜的形成等进行了讨论。
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
陈慧杰 刘晓艳 曹诗云 阮丽芳 孙明
苏云金芽胞杆菌CT-43高产苏云金素,其内生质粒pBMB0558上virD4基因编码的VirD4蛋白与Ⅳ型分泌系统中结合底物的偶合蛋白(T4CPs)高度同源。本研究利用插入缺失突变方法,构建同源双交换载体,敲除CT-43中的virD4基因,得到1株突变株BMB1122。HPLC检测结果显示,突变株BMB1122发酵上清液中未检测到苏云金素特征吸收峰;进一步通过LCMS-IT-TOF飞行质谱检测突变株胞内代谢物,结果显示其含有与苏云金素合成途径中的所有前体物分子质量相符的质荷比(m/z),这与出发菌株CT-43的结果一致。初步推测,virD4基因与苏云金素的分泌相关,virD4基因的敲除影响苏云...
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