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[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 高巍  孟庆翔  
采用体外产气量法 ,以球磨与未球磨玉米秸细胞壁为底物 ,对瘤胃微生物不同区系降解植物细胞壁的相对贡献和发酵特征进行了研究。用化学试剂和抗生素来分离瘤胃细菌、原虫和真菌 ,并设计下列微生物区系 :全瘤胃液 (WRF)、细菌 (B)、原虫 (P)、真菌 (F)、细菌 +原虫 (B +P)、细菌 +真菌 (B +F)、原虫 +真菌 (P +F)和负对照(CON)。结果表明 ,细胞壁经球磨后可以显著提高瘤胃微生物的产气量和降解率 (P
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)  [作者] 梁学武  刘庆华  陈发兴  鲍若虹  
采用Lentinusedodes(Berk.)Sing.(简称Le)、Auriculariapolytricha(Mont.)Sacc.(简称Ap)及Dictyophoraindusia-ta(Vent.exPers.)Fischer(简称Di)等3种担子菌不同组合处理,研究其对平菇菌糠细胞壁成分及干物质(DM)瘤胃降解率的影响.结果表明:经Le+Di组合处理后,平菇菌糠中性洗涤纤维(NDF)、半纤维素(HC)及酸性洗涤木质素(ADL)较对照组分别下降11.83%-12.84%(P<0.05)、33.41%-36.46%(P<0.05)及21.98%-25.67%(P<0.05);DM瘤胃降解...
[期刊] 华北农学报  [作者] 董瑞兰  于光辉  
瘤胃是反刍动物进行饲料消化的发酵罐,瘤胃中寄存的复杂微生物主要包括瘤胃细菌、原虫和真菌,其相互作用为饲料的消化吸收提供了可靠的保障。研究原虫对细菌活性的影响,以探讨原虫是否有助于促进或保持瘤胃细菌的活性。以2头安装有永久性瘤胃瘘管的西门塔尔牛作为瘤胃液供体动物,同时以羊草为发酵底物,设置3个处理,分别包括细菌组、原虫组及原虫+细菌组。各处理羊草的发酵规律采用体外培养法连续测定24 h。发酵结束后测定瘤胃液的pH值,各处理组羊草的总产气量和各气体成分(包括CH4、CO2和H2)含量以及各挥发性脂肪酸(VFA)的产量用气相色谱仪测定。结果表明,细菌+原虫组的总产气量显著高于细菌组(P
[期刊] 中国农业科学  [作者] 王梦芝  王洪荣  徐爱秋  张洁  陈旭伟  
【目的】研究以稻草为主的日粮条件下徐淮白山羊瘤胃细菌和原虫的类群结构。【方法】以4只安装瘤胃瘘管的徐淮山羊为试验动物,PCR扩增瘤胃细菌16SrDNA序列,利用分子克隆与测序分析、细胞计数等技术,解析瘤胃细菌和原虫群体的类群组成。【结果】获得的细菌克隆基本归为两簇:与瘤胃球菌R.bromii YE282相似性为95%的XHGR1、与瘤胃R-7菌相似性为98%的XHGR3,XHGR2位于另立的R.flavefaciens簇。瘤胃球菌属细菌占细菌克隆总数的比例较高(33.33%),原虫生物量略低于细菌,占瘤胃生物总量的44.83%。群体主要有内毛属、双毛亚科、前毛属、头毛属和等毛科等原虫,其中内毛...
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)  [作者] 梁学武  姚亮  刘庆华  鲍若虹  
选用 4头装有永久瘤胃瘘管的杂交黄牛 ,采用 4× 4拉丁方设计研究白腐真菌改善菌糠结构性碳水化合物瘤胃降解特性的效果 .结果表明 ,白腐真菌能明显改善香菇菌糠结构性碳水化合物瘤胃降解特性 .香菇菌糠经 Y4 、Y5和 Y8等 3种白腐真菌处理后 ,干物质 (DM)、中性洗涤纤维 (NDF)、半纤维素 (HC)及酸性洗涤木质素 (ADL)的瘤胃动态降解率和潜在降解部分均有较大幅度提高 ,其中以 Y8菌种处理效果最好 .香菇菌糠经 Y8菌种处理后 ,DM、NDF、纤维素 (CEL)、HC及ADL的瘤胃动态降解率分别提高 62 .91 % (P
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 曹阳春  杨红建  沈博通  
为获得高产纤维降解酶瘤胃厌氧真菌,从放牧饲养条件下随机选出10头屠宰后的青海大通牦牛瘤胃中采集食糜样本,通过亨盖特滚管技术筛选得到29株厌氧真菌菌株。以小麦秸秆为底物,测定这些菌株第6天培养液中乙酰酯酶、阿魏酸酯酶、木聚糖酶、羧甲基纤维素酶和微晶纤维素酶的活性。29株真菌之间5种酶活性差异显著,阿魏酸酯酶活性最高的菌株比活性最低的菌株活性高出7.9倍,差异最显著;而羧甲基纤维素仅高出2.5倍,差异最不显著。对各菌株5种酶活性进行相关分析,乙酰酯酶、阿魏酸酯酶、木聚糖酶和羧甲基纤维素酶相互之间均存在显著的正相关性(r>0.67,P
[期刊] 中国农业科学  [作者] 吕莉华  侯先志  王海荣  王贞贞  高爱武  
【目的】建立一种适用于瘤胃主要纤维降解细菌的RT-PCR定量检测方法,通过培养技术监测瘤胃纤维降解细菌在不同环境下的数量变化,为深入研究反刍动物瘤胃发酵机理以及对纤维素资源的有效利用提供技术支持。【方法】分别以Fibrobacter succinogenes、Ruminococcus flavefaciens与Ruminococcus albus的16SrDNA为靶序列设计相应的引物,建立SYBRGreenⅠRT-PCR定量体系。【结果】本研究所采用的引物及相应的PCR反应体系具有较高的特异性和灵敏度,检测极限可达50拷贝。采用RT-PCR方法检测瘤胃纤维降解细菌的定量结果与传统计数结果具有一...
[期刊] 林业科学  [作者] 田呈明  赵鹏  曹支敏  
对落叶松-杨栅锈菌入侵不同抗性寄主过程中的细胞壁降解酶活性进行测定,明确聚甲基半乳糖醛酸酶(PMG)、果胶甲基反式消除酶(PMTE)、羧甲基纤维素酶(CX)、β-葡萄糖苷酶(β-G)4种降解酶在该菌入侵中的作用。研究发现:抗病和感病组合中PMG均在接种后第2天和第5天出现2个活性高峰,在第5天时达到最大值。PMTE、CX和β-G活性分别第3、2和3天达到活性高峰,其中PMG和PMTE的活性高,而CX和β-G的活性则相对较低。在感病组合内PMG、PMTE、CX、β-G活性较抗病组合大,表明这4种细胞壁降解酶对该菌入侵起一定的作用。
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 杨迎青  孟凡  兰波  徐沛东  张顺梁  李湘民  
为明确芦笋茎枯病菌细胞壁降解酶的活性及测定条件,利用3,5-二硝基水杨酸法(DNS法)测定7种常见细胞壁降解酶的活性,比较不同底物对3种主要酶的诱导作用,并从温度、时间、pH值等方面优化酶活性的测定条件。结果表明:7种细胞壁降解酶中,多聚半乳糖醛酸酶(polygalacturonase,PG)的活性较高,其次是果胶甲基半乳糖醛酸酶(polymethylgalacturonase,PMG)和β-1,4-内切葡聚糖酶(endo-β-1,4-glucanase,Cx),其他4种酶活性较低。在3种主要细胞壁降解酶中,Cx以1%羧甲基纤维素钠盐(CMC)作为底物的诱导效果较好,PG和PMG以1%柑橘果胶...
[期刊] 沈阳农业大学学报  [作者] 薛春生  何瑞玒  肖淑芹  钮梦燕  孙佳莹  冯辉  
细胞壁降解酶是植物病原菌主要致病因子之一。提取活体内、外辣椒疫霉菌(PhytoPhthora caPsici)产生的细胞壁降解酶(cell wall degrading enzymes,cwdes),对其种类及活性进行分析。结果表明:辣椒疫霉菌在活体内能产生多聚半乳糖醛酸反式消除酶(Pgte)、果胶甲基反式消除酶(Pmte)、多聚半乳糖醛酸酶(Pg)、果胶甲基半乳糖醛酸酶(Pmg)和纤维素酶(cx)5种cwdes;在活体外产生Pg、Pmg、Pmte和Pgte等4种cwdes;Ph值为5,温度为30℃和反应30min是Pg和Pmg活性的最佳反应条件,Pgte和Pmte酶活反应的最佳条件分别是Ph...
[期刊] 华北农学报  [作者] 陈晓林  牛程旺  李保华  李桂舫  王彩霞  
通过对酶活性的分析,研究证实苹果树腐烂病菌在活体外和寄主体内均能分泌一系列的细胞壁降解酶:多聚半乳糖醛酸酶(PG)、果胶甲基半乳糖醛酸酶(PMG)、纤维素酶(Cx)、β-葡萄糖苷酶和木聚糖酶。不同碳源培养条件下,腐烂病菌产生细胞壁降解酶的活性及达到酶活性高峰的时间存在显著差异;诱导酶液对苹果愈伤组织具有明显的浸解作用,其中木聚糖为碳源产生的细胞壁降解酶,破坏能力最强。此外,研究发现,腐烂病菌在寄主体内产生细胞壁降解酶的活性变化规律不同,PMG和木聚糖酶在接种后最先被检测到活性显著升高,PMG酶活性于接种后第13天达到高峰,随后活性降低,而木聚糖酶和其他3种酶活性则随接种天数的增加活性不断增强;...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 窦春蕊  
[期刊] 中国农业科学  [作者] 王梦芝  程欣  谢文文  张柏松  刘翔  王洪荣  
【目的】研究体外培养条件下,不同油脂对瘤胃原虫吞噬细菌微循环及微生物群体的影响。【方法】3头瘤胃瘘管山羊提供瘤胃液,分别以菜籽油(A)、豆油(B)、玉米油(C)和花生油(D)为底物培养瘤胃微生物,同时设空白对照组,培养10h时用荧光标记瘤胃细菌法进行原虫吞噬细菌试验。【结果】原虫密度以对照组最高,显著高于A、B、C组(P<0.05);细菌密度以B组最高,为4.906×109cells·mL-1,显著高于对照组(P0.05),细菌蛋白组以B组最高,B、C、D均高于对照组(P<0.05)。各组原虫的吞噬速率分别为:267.6(对照组)、196.2(A组)...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 王梦芝  王洪荣  李国祥  曹恒春  卢占军  
【目的】采用荧光染色标记细菌(fluorescence labeled bacteria,FLB)技术,研究山羊瘤胃中原虫对细菌的吞噬速率。【方法】利用4只装有永久性瘤胃瘘管的徐淮山羊,采集瘤胃液以获取瘤胃原虫和细菌。试验设置清洗原虫祛除瘤胃自由细菌的荧光全标组(WFLB)及未清洗原虫保留瘤胃自由细菌荧光标记组(FLB)。【结果】WFLB组和FLB组的吞噬速率分别为398.4cells/(cell·h)和230.4cells/(cell·h),换算为细菌N为:2.15pgN/(cell·h)/和1.24pgN/(cell·h)。【结论】每天每头羊由原虫在瘤胃内循环中带出的细菌N损失在WFLB组...
[期刊] 沈阳农业大学学报  [作者] 魏松红  段淯  张优  张照茹  李昕洋  刘伟  王海宁  
丝核菌属真菌是重要的植物病原真菌,多种丝核菌种类及融合群可侵染水稻,不同丝核菌种类及融合群间致病力具有较大差异,分析不同丝核菌致病力差异对于研究丝核菌属病原菌导致的水稻病害的发生流行以及种群动态具有重要意义。为探究多核和双核丝核菌对水稻致病力差异产生的原因,采用扫描电子显微镜和透射电子显微镜对2种病原菌侵染水稻叶片细胞的超微结构进行观察,利用3, 5-二硝基水杨酸法和实时荧光定量PCR技术对其侵染过程中产生的多聚半乳糖醛酸酶(PG)、果胶甲基半乳糖醛酸酶(PMG)、纤维素酶(Cx)、多聚半乳糖醛酸反式消除酶(PGTE)和果胶甲基反式消除酶(PMTE)的活性差异和多聚半乳糖醛酸酶基因(PG基因)的表达差异进行分析。结果表明:多核菌株菌丝扩展速度与形成侵染结构的数量均显著高于双核菌株。侵染24h时,多核菌株在水稻叶片表面形成较多侵染垫,双核菌株形成的侵染垫数量明显少于多核菌株;侵染48h时,多核菌株侵染的水稻叶片细胞叶绿体解体,而双核菌株侵染的水稻叶片细胞无明显变化。多核菌株与双核菌株在侵染水稻时均能产生5种细胞壁降解酶,且多核菌株细胞壁降解酶活性均显著高于双核菌株。PG酶活性显著高于其他4种细胞壁降解酶活性,多核菌株PG酶活性最高为860.46U·mg~(-1),双核菌株PG酶活性最高为59.27U·mg~(-1)。水稻纹枯病菌多核与双核菌株侵染水稻叶片过程中其PG基因表达趋势相同,但多核菌株PG基因表达量显著高于双核菌株,多核菌株侵染水稻24h时PG基因表达量达到最高,双核菌株在侵染水稻48h时PG基因表达量达到最高。研究结果可为进一步了解丝核菌属真菌的致病机制奠定理论基础。
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