- 年份
- 2024(6008)
- 2023(8751)
- 2022(7939)
- 2021(7570)
- 2020(6382)
- 2019(14822)
- 2018(14936)
- 2017(28716)
- 2016(15924)
- 2015(17999)
- 2014(18017)
- 2013(17762)
- 2012(16176)
- 2011(14426)
- 2010(14121)
- 2009(12713)
- 2008(12070)
- 2007(10184)
- 2006(8692)
- 2005(7330)
- 学科
- 济(58319)
- 经济(58255)
- 管理(43694)
- 业(41262)
- 企(34917)
- 企业(34917)
- 方法(29532)
- 数学(25514)
- 数学方法(25230)
- 学(15554)
- 农(15079)
- 中国(14038)
- 财(13812)
- 业经(12983)
- 地方(12059)
- 理论(10529)
- 和(10257)
- 农业(10186)
- 贸(10052)
- 贸易(10047)
- 易(9738)
- 技术(9703)
- 环境(9650)
- 务(9222)
- 财务(9165)
- 财务管理(9151)
- 制(9039)
- 教育(8968)
- 企业财务(8669)
- 划(8448)
- 机构
- 大学(221884)
- 学院(219614)
- 管理(89484)
- 济(79321)
- 理学(78764)
- 理学院(77850)
- 经济(77441)
- 管理学(76478)
- 管理学院(76111)
- 研究(72762)
- 中国(50706)
- 科学(50061)
- 京(47285)
- 农(40014)
- 业大(37554)
- 所(37335)
- 研究所(34749)
- 财(34341)
- 中心(32491)
- 农业(31990)
- 江(30224)
- 北京(29406)
- 范(29087)
- 师范(28736)
- 财经(28556)
- 院(26428)
- 经(26028)
- 技术(25238)
- 州(24959)
- 师范大学(23313)
- 基金
- 项目(160809)
- 科学(125519)
- 基金(116368)
- 研究(114441)
- 家(102357)
- 国家(101521)
- 科学基金(86833)
- 社会(68621)
- 社会科(64883)
- 社会科学(64863)
- 省(64172)
- 基金项目(63205)
- 自然(59690)
- 自然科(58280)
- 自然科学(58267)
- 自然科学基金(57184)
- 划(54228)
- 教育(52207)
- 资助(47439)
- 编号(46795)
- 成果(37406)
- 重点(35637)
- 部(34401)
- 创(33792)
- 发(33678)
- 课题(31943)
- 创新(31445)
- 科研(31412)
- 计划(30974)
- 大学(29709)
共检索到300761条记录
发布时间倒序
- 发布时间倒序
- 相关度优先
文献计量分析
- 结果分析(前20)
- 结果分析(前50)
- 结果分析(前100)
- 结果分析(前200)
- 结果分析(前500)
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
郑璐平 谢荔岩 林奇英 谢联辉
对病毒诱导的基因沉默(VIGS)的发现、载体的开发、作用机理和优势的研究,以及VIGS在植物基因功能鉴定上的应用和展望进行了综述.
关键词：
病毒诱导的基因沉默 载体 功能鉴定
[期刊] 华北农学报
[作者]
张怡 徐克东 杨松 李豪 曹鹏 魏森 韦丹丹 李成伟
构建蔊菜的病毒诱导基因沉默(Virus induced gene silencing,VIGS)体系,旨在建立蔊菜的快速基因功能验证的方法。通过RT-PCR扩增出棉花、大豆、拟南芥的1-脱氧木酮糖-5-磷酸合成酶(Cloroplasto alterados,CLA)基因片段,并将其分别构建到烟草脆裂病毒(Tobacco rattle virus,TRV)介导的VIGS载体,通过农杆菌GV3101侵染蔊菜并观察蔊菜的表型变化。结果显示,3种不同的CLA基因所侵染的蔊菜均出现不同程度的白化现象,半定量RT-PCR检测显示CLA的mRNA被显著降解,表明成功构建了蔊菜的VIGS体系。
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
李萌晗 王威 邹积鑫 李东栋
为开展油棕油脂代谢调控相关基因鉴定研究，以油棕八氢番茄红素脱氢酶基因（phytoene desaturase gene,PDS）作为报告基因，探索以病毒载体TRV为载体在油棕胚状体上应用病毒诱导基因沉默（virus-induced gene silencing,VIGS）的可能性，并对油棕胚状体VIGS体系的相关参数进行优化。结果显示：以EHA105为菌种、侵染菌液OD600=0.5、侵染时间5 min、乙酰丁香酮（AS）质量浓度20 mg/L、共培养48 h、侵染后培养时间为12 d能取得最佳的基因沉默效果。在此基础上，利用优化后的VIGS体系对油棕二酰甘油酰基转移酶基因（diacylglycerol acyltransferase gene,DGAT）进行沉默，取得了预期的基因沉默效果。
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
李萌晗 王威 邹积鑫 李东栋
以油棕八氢番茄红素脱氢酶基因（phytoene desaturase gene,PDS）作为报告基因，探索以病毒载体TRV为载体在油棕胚状体上应用病毒诱导基因沉默（virus-induced gene silencing,VIGS）的可能性，并对油棕胚状体VIGS体系的相关参数进行优化。结果显示：以EHA105为菌种、侵染菌液OD600=0.5、侵染时间5 min、乙酰丁香酮（AS）质量浓度20 mg/L、共培养48 h、侵染后培养时间为12 d能取得最佳的基因沉默效果。在此基础上，利用优化后的VIGS体系对油棕二酰甘油酰基转移酶基因（diacylglycerol acyltransferase gene,DGAT）进行沉默，取得了预期的基因沉默效果。
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
王献兵 张凌娣 李大伟 韩成贵 于嘉林
RNA沉默是真核生物用来抵抗病毒入侵的一种普遍而又古老的防御机制,而病毒在进化过程中也相应地产生了一些与之抗衡的功能,其中编码沉默抑制子就是对抗RNA沉默的有效策略。它们分别能够在不同阶段,以不同的方式干扰来自于寄主的RNA沉默,从而有效地建立侵染。本文主要针对目前已经发现的由植物病毒编码RNA沉默抑制子的作用特征、鉴定方法以及作用副效应进行综述,并讨论了RNA沉默抑制子的研究及应用前景。
关键词：
RNA沉默 抗病毒 抑制子 进化
[期刊] 中国农业科学
[作者]
董永鑫 卫其巍 洪浩 黄莹 赵延晓 冯明峰 窦道龙 徐毅 陶小荣
【目的】在中国大豆品种上建立以苹果潜隐球形病毒（apple latent spherical virus,ALSV）为载体的基因沉默体系，为中国大豆品种的基因功能和遗传育种提供一种简便、省时、易操作的技术体系。【方法】构建以农杆菌介导接种的ALSV病毒侵染性克隆载体。从大豆品种威廉姆斯82(Williams 82)中特异扩增327 bp的八氢番茄红素脱氢酶（GmPDS）基因cDNA片段，插入病毒载体pALSV2。通过农杆菌浸润法将病毒载体导入模式植物本氏烟（Nicotiana benthamiana）,17 d后富集病毒粒子，摩擦接种大豆第一轮真叶，以接种病毒空载作为对照组，持续观察测试大豆植株系统叶表型，并结合逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）或荧光定量PCR(qRT-PCR)检测ALSV衣壳蛋白基因（CP）和GmPDS的表达水平。【结果】ALSV﹕GmPDS接种大豆品种威廉姆斯82和南农1138-2,20 d后，前者系统叶未见白化表型，而后者系统叶出现明显的白化表型；qRT-PCR检测结果表明，发生白化的南农1138-2植株中GmPDS的表达水平显著降低，未出现白化表型的威廉姆斯82中GmPDS的表达水平没有出现显著变化。在此基础上，采用相同的方法，测试了ALSV在其他9种大豆品种中诱导GmPDS的沉默效率，发现在南农47、安豆203、祥斗4号、中黄13、山宁29、齐黄34等大豆品种上接种ALSV﹕GmPDS后植株系统叶均产生白化表型，而菏豆12、中黄311和山宁16等3个品种的GmPDS均不能诱导有效沉默。【结论】构建了农杆菌介导的ALSV病毒载体，利用本氏烟扩繁富集ALSV病毒，将提纯的病毒粒体摩擦接种大豆真叶，在多个中国大豆品种上成功建立了基因沉默体系。
[期刊] 中国农业科学
[作者]
赵玉兰 苏晓峰 程红梅
【目的】筛选大丽轮枝菌(Verticillium dahliae)糖代谢相关基因,证实其与大丽轮枝菌的生长发育和致病性相关,为防治由大丽轮枝菌引起的棉花黄萎病提供理论基础。【方法】利用寄主诱导的基因沉默(host-induced gene silencing,HIGS)技术对大丽轮枝菌糖代谢相关基因进行筛选。将单个或多个含靶标基因的病毒载体注射本氏烟草瞬时表达基因,7—10 d后八氢番茄红素脱氢酶PDS会出现明显的烟草白化症状,蘸根法接种大丽轮枝菌V.d991,对应的大丽轮枝菌靶标基因会被干扰,接菌14 d后,观察转基因烟草表型,统计烟草病情指数,同时利用荧光定量PCR技术检测转基因烟草中大丽...
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
冯英明 喻敏 王昌全 刘家友
铝毒是酸性土壤限制作物生长的主要原因之一,许多作物对微摩尔浓度的铝发生毒害反应。本文分析了铝毒作用位点、细胞死亡机制、细胞营养元素吸收、细胞壁特性变化以及根边缘细胞胞外分泌物的变异,揭示铝毒发生时植物细胞进行多方面主动或被动的反应。
关键词：
铝毒 细胞壁 胞外分泌物
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
刘颖慧 王天宇 黎裕
ERD(脱水诱导早期应答基因)是可以快速应答干旱反应的基因,最早是在拟南芥脱水诱导1 h获得的。目前,在拟南芥中获得16个ERD基因,它们属于不同的基因家族,作用于不同的代谢途径,通过不同的方式增强拟南芥的抗旱性,除了具有快速应答干旱胁迫的特征,还具有应答冷、盐、衰老、ABA等多种逆境胁迫信号的特征。研究这些基因有助于了解拟南芥的抗旱机制。目前对ERD基因的诱导表达和转录调节研究的比较清楚,但是对其中多数基因的作用机制还没有深入研究。本文综述拟南芥脱水诱导早期应答基因的研究现状和研究意义。
[期刊] 华中师范大学学报(自然科学版)
[作者]
喻兆阳 李娟 黎华 费东 薛慧颖
探究KLF4沉默与经不同作用浓度阿霉素处理诱导的DNA损伤对肝癌HepG2细胞增殖凋亡的影响及其作用机制.应用RNA干扰技术,采用siRNA转染HepG2细胞以沉默KLF4基因.采用MTT法检测KLF4沉默前后对HepG2细胞增殖的影响,使用流式细胞术检测KLF4沉默前后对HepG2细胞周期变化影响,应用Western blot法检测转染前后HepG2细胞中KLF4蛋白及细胞周期相关蛋白表达变化.Western blot检测到高浓度的阿霉素促进KLF4的表达,并且低浓度的阿霉素可使得细胞停滞在G_2/M期,高浓度的阿霉素则使部分细胞凋亡(19.31%).将KLF4沉默后,发现细胞生长变缓,低浓度的阿霉素处理后,细胞随时间增加而出现更多的细胞凋亡;高浓度的阿霉素处理后,细胞数明显减少,更多的细胞发生凋亡(28.89%),且在KLF4沉默前后均发现低浓度阿霉素促进p53与p21表达,高浓度阿霉素抑制其表达.阿霉素诱导的DNA损伤可提高KLF4的表达,KLF4依赖于DNA损伤激活的p53促进p21的表达,进而引起G_1/S期细胞周期阻滞.沉默KLF4与阿霉素诱导的DNA损伤可协同抑制肝癌细胞的增殖、促进凋亡,其在肝癌细胞HepG2中扮演十分重要的角色.
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
解芸菲 孙超 孙婵 王勇 吕彬 安磊
【目的】运用si RNA沉默小鼠前体脂肪细胞3T3-L1的细胞信号负调控因子3基因(SOCS3),探讨SOCS3在肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导3T3-L1细胞凋亡中的作用。【方法】体外培养3T3-L1细胞,用0,20,40,60,80,100,150,200 ng/mL TNF-α处理细胞24 h后,观察细胞凋亡情况。利用脂质体LipofectamineTM2000,用化学合成的SOCS3小干扰RNA(si RNA)转染3T3-L1细胞,用100 ng/mL TNF-α刺激24 h,荧光显微镜下观察细胞凋亡的变化,RT-PCR检测SOCS3、c-myc和survivinmRNA的表达情况...
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
闫磊 刘家友 刘亚林 曾钰 曾紫君 程锦 姜存仓
酸性土壤中铝(Al)毒害已成为世界性关注问题,且硼(B)在耐铝毒方面广有研究。为更清晰探究硼如何提升植物耐铝性的机制作用,本综述主要从植物外部排斥机制和内部耐受机制两方面介绍了植物耐铝毒机制,探究出硼对植物铝毒害的缓解机制主要包括:(1)诱导有机酸的分泌;(2)调控根系pH的改变;(3)降低细胞壁铝结合位点;(4)调控抗氧化酶及抗氧化剂系统;(5)促使液泡区室化;(6)调控植物生长素的应答,综合以上几方面进行介绍,以期为酸性土壤中硼肥施用提高植株耐铝性提供理论基础。
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
单秀娟 胡芷君 邵长伟 唐政
随着捕捞强度加大,渔业生物为了应对捕捞压力、维持种族繁衍,逐渐产生适应性进化,这一过程称为捕捞诱导进化(Fishing-induced evolution,FIE),通常表现为渔业生物个体变小、性成熟提前,个体对捕捞的敏感性增强,进一步导致渔业种群结构简单、生态系统稳定性下降和渔业经济效益降低。认知捕捞诱导的渔业生物适应性进化,掌握捕捞对渔业种群的作用机制,有利于制定科学合理的渔业资源养护与管理策略。虽然FIE方面已进行了大量研究,但FIE在生理、生态及基因层面上对渔业生物的具体影响过程尚未明确,尤其是在气候变化、多物种相互作用等的动态环境中,FIE的作用方式更为复杂。作者综述了鱼类FIE的主要研究方法,总结了捕捞对大个体的选择性在鱼类生长、性成熟和行为方面的影响,并分析了这种影响对渔业种群恢复与管理产生的效应,以及今后需要解决的关键科学问题,旨在为FIE的进一步深入研究和渔业资源的科学管理提供帮助。
[期刊] 中国卫生经济
[作者]
杨晗 刘跃华
目的:解释供给者诱导需求理论范式、追踪实证研究进展,为我国医疗卫生改革提供借鉴。方法:展开新古典理论、博弈论和行为主义学派对诱导需求的理论推导,纳入经典实证研究和最新的研究进展,系统性回顾供给者诱导需求。结果:供给者诱导需求的产生与激励制度、疾病种类和研究人群有关。结论:约束医院内部激励,医疗服务供给侧结构性改革、发展"互联网+医疗"及建设DRGs的医保支付制度可以有效减少诱导需求。
关键词：
供给者诱导需求 诱导需求理论 综述
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
马勇江 杨学义 窦忠英
哺乳动物胚胎干细胞一般可从胚胎囊胚内细胞团分离得到 ,具有在体外保持不分化的无限增殖能力 ,在合适的培养条件下 ,胚胎干细胞可定向诱导分化形成多种细胞类型。人们对胚胎干细胞进行体外培养与定向分化可以得到大量同源细胞 ,以应用于患疾病的细胞或器官移植治疗等研究。文章概述了胚胎干细胞增殖与分化的信号调节机制、诱导分化方法 ,国内外研究概况及展望 4个方面的内容
关键词：
胚胎干细胞 诱导分化 信号调节机制
文献操作()
导出元数据
文献计量分析
导出文件格式：WXtxt
删除
