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[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
韩旭 赵敏 卢磊
疣孢漆斑菌代谢产生的胆红素氧化酶在环境保护等领域有较大的应用潜力。为了提高胆红素氧化酶的产量,采用单因素试验和正交试验相结合的方法,研究培养基中C、N、金属离子及诱导剂对疣孢漆斑菌3.2190产酶的影响。结果表明,在产酶培养基中,葡萄糖和大豆蛋白胨为最适C源和N源,添加2mmol/L铜离子和0.1mmol/L的诱导剂均可以提高发酵液的酶活。正交试验得到的优化组合为:葡萄糖10g/L,大豆蛋白胨7.5g/L,CuSO41mmol/L,没食子酸0.1mmol/L,优化后发酵液酶活提高了3倍。初步纯化的胆红素氧化酶最适反应温度为40℃,最适pH值为7.5。在1000U/L的酶活下,只需50min就可...
[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
卢磊 赵敏 赵丽艳 梁书诚 李泰仑 杜美惠
为了研究血红密孔菌漆酶重组表达后的酶学性质和染料脱色效果,利用超滤、阴离子交换层析和凝胶层析从毕赤酵母发酵液中纯化出重组漆酶。结果表明:重组漆酶分子质量为62.8kD,氧化底物2,2′-连氮-二(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)(ABTS)、丁香醛连氮和2,6-二甲氧基苯酚的最适pH分别为2.2、4.2和4.0,动力学常数Km分别为20.73、48.48和1252.39μmol/L;该漆酶在有机溶剂中的活性稳定性:甲醇>乙醇>丙酮>二甲基亚砜;在铜离子和铝离子中酶活比较稳定,汞离子对酶活有较强的抑制作用;纯化的重组漆酶在无介体时可有效脱色RB亮蓝,但对靛红和结晶紫的脱色较为缓慢;当添加介体ABTS...
关键词：
漆酶 酶学性质 介体 染料脱色
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
汪春蕾 李凡姝 孙海琼 赵敏 苏秋钰 亓旭辉
利用含铜离子的富集培养基，从东北林业大学实验林场蒙古栎林下的土壤中筛选出具有较高漆酶活性的１株细菌，采用形态学、生理生化反应以及１６Ｓ ｒ ＤＮＡ序列同源性分析等方法，鉴定其为芽孢杆菌属细菌，命名为ＢＡｃｉｌｌｕＳ Ｓｐ．５｀ＭＳ。以丁香醛连氮为底物，以芽孢干重计算，其芽孢漆酶的活性高达５６．７３ ｕ／ｇ。菌株５｀ＭＳ芽孢漆酶的最适ｐＨ值为６．６，最适反应温度为７０℃。在１００℃条件下，该芽孢漆酶反应活性仍可达最适条件下的３４．６１％。当染料脱色体系中添加介体乙酰丁香酮时，菌株５｀ＭＳ芽孢漆酶１ Ｈ内对活性黑、靛红及结晶紫的脱色率均达９２％以上，４ Ｈ内对活性蓝的脱色率达８２．８％。
关键词：
芽孢杆菌属 芽孢漆酶 染料脱色
[期刊] 林业科学
[作者]
于存 池玉杰
锰过氧化物酶(MnP)是白腐菌分泌的一种能有效降解木质素及多种异生物质的过氧化物酶。首先对一色齿毛菌在初始条件下进行培养,获得其产生MnP的活性规律曲线,进而进行最佳碳源和最佳氮源的筛选及2次正交试验对一色齿毛菌产MnP的培养条件进行优化;然后对优化后的胞外酶液进行5种染料的脱色研究。结果表明,一色齿毛菌产MnP的最优组合为:果糖10 g·L-1、硝酸铵0.2 g·L-1、Mn2+2.67 mmol·L-1、pH 5.5、250 mL三角瓶70 mL装液量、150 r·min-1摇瓶培养、接种=8 mm的菌片9片、在34℃下培养7天后MnP活性高达95.47 U·L-1,是初始培养条件最高酶...
[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
栗君 李国富 卢磊 潘俊波 赵敏 王天女 徐腾飞 王靖瑶
解淀粉芽孢杆菌LC03的芽孢漆酶具有较好的稳定性,通过制备具有漆酶活性的芽孢悬液,研究了芽孢漆酶对4种合成染料RB亮蓝、活性黑、靛红和结晶紫的脱色效果,并筛选出促进染料脱色的漆酶介体,同时考察了酶浓度、介体浓度对模拟染料废水脱色的影响。结果表明:RB亮蓝﹑活性黑和靛红在无介体时不能被脱色,在乙酰丁香酮(ACE)介导下的脱色率都超过了60.00%;在pH9.0时,芽孢漆酶-介体系统对模拟染料废水脱色的酶浓度和介体浓度分别为88.64U/L和0.5mmol/L时,2h后脱色率可超过80.00%,表明该芽孢漆酶在染料废水的处理上具有较好的应用前景。
关键词：
解淀粉芽孢杆菌 漆酶 介体 染料脱色
[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
赵丽艳 赵敏 卢磊 王天女
本文通过一色齿毛菌LS0547漆酶粗酶液与紫脲酸(VA)或乙酰丁香酮(Ace)组成的漆酶--介体系统对结晶紫、靛红、活性黑KN--B染料进行脱色试验,探索pH、温度、染料浓度和漆酶浓度等条件对其脱色效果的影响。结果表明:在介体乙酰丁香酮(Ace)作用下,漆酶脱色靛红和活性黑KN--B效率高;在介体紫脲酸(VA)作用下结晶紫脱色效果好。pH4.0、50℃结晶紫的脱色率为95.42%,40℃靛红脱色率为99.86%,且基本不受pH限制;pH6.0、40℃活性黑KN--B脱色率达92.38%,表明一色齿毛菌漆酶在介体参与下可有效用于工业染料废水的处理。
关键词：
一色齿毛菌 漆酶 介体 染料 脱色
[期刊] 林业科学
[作者]
孙世娜 池玉杰 于存 李月
【目的】对转入猴头菌ＭｎＰ１和ＭｎＰ２基因的２个构巢曲霉转化子菌株Ｔｎ０２Ａ７－Ｈｅ－ＭｎＰ１和Ｔｎ０２Ａ７－ＨｅＭｎＰ２产ＭｎＰ的初始培养条件进行优化，然后用优化后的酶液对３种染料进行脱色研究，以期提高锰过氧化物酶（ＭｎＰ）活性。【方法】采用单因素试验进行最适产酶温度的筛选；正交试验检测血红素浓度、Ｍｎ～（２＋）浓度、ＰＨ值和转速４个因素在３个水平下对酶活性的影响，并通过优化培养验证试验检测酶活性；吸光度法检测优化后的酶液对３种染料的脱色率。【结果】菌株Ｔｎ０２Ａ７－Ｈｅ－ＭｎＰ１产Ｔｎ０２Ａ７－Ｈｅ－ＭｎＰ１最适培养条件为：在ＭＭＰＧＲＴ培养基的基础上，加入２ Ｇ青杨木屑作为产酶底物，Ｍｎ．．．
[期刊] 林业科学
[作者]
张玉龙 池玉杰 冯连荣
【目的】研究白腐菌偏肿革裥菌(Lenzites gibbosa)所产锰过氧化物酶(MnP)纯酶的序列特征、酶学性质及其对染料的脱色能力,为其应用于木质素降解、染料脱色奠定基础。【方法】将纯化后的样品经SDS-PAGE检测后获得的唯一L.gibbosa MnP条带切割,采用Nano液相色谱-电喷雾串联质谱法联用(Nano LC-ESI-MS/MS)多肽测序技术对蛋白氨基酸序列进行测定。利用该SDS-PAGE图谱,建立蛋白分子量与迁移率的标准直线,从标准直线上求出MnP纯酶样品的表观分子量;参照酶活测定方法检
[期刊] 西南农业学报
[作者]
郑苗苗 张令昂 焦战战 邵淑丽
采用LNAS(低氮天冬酰胺-琥珀酸)培养基添加方式,对红平菇HP1(Pleurotus djamor)进行培养,检测不同时间培养液对不同底物的氧化作用,作为锰过氧化物酶的产生及活性测定的主要依据。在含Mn2+的培养液添加底物木屑后锰过氧化物酶最大酶活为358.7 U·L-1,提取经优化筛选后的锰过氧化物酶粗酶液,对4种具有不同化学结构的染料进行了脱色试验。结果表明,对异戊二烯类番红在6 h时脱色率为82.6%。因此,显示出红平菇HP1锰过氧化物酶对番红染料脱色具有较大的应用潜力,进而对废水处理具有更好的应用前景。采用RT-PCR和RACE技术,从红平菇HP1菌株中获得编码锰过氧化物酶基因的c ...
[期刊] 林业科学
[作者]
石亚攀 池玉杰 于存 韩树英
【目的】对从自然界得到的１株乳白耙齿菌菌株ＣＢ１（简称Ｉｌ－ＣＢ１）进行系统发育分析与鉴定，并研究其对刚果红染料的脱色条件，以期为乳白耙齿菌在染料废水脱色中的应用提供依据。【方法】在形态学鉴定的基础上，克隆菌株Ｉｌ－ＣＢ１的ＩＴＳ序列并进行系统发育分析。采用单因素方法检测ｐ Ｈ值、刚果红浓度、染料加入时间对Ｉｌ－ＣＢ１脱色率的影响；基于正交试验检测碳源浓度、氮源浓度、Ｃｕ２＋浓度、Ｍｎ２＋浓度、接种量５个因素对Ｉｌ－ＣＢ１脱色率的影响。【结果】菌株Ｉ１－ＣＢ１的ＩＴＳ序列与其他不同来源的２４个乳白耙齿菌的ＩＴＳ序列归为一类，从而在分子水平上鉴定其为乳白耙齿菌。ｐ Ｈ值对Ｉｌ－ＣＢ１脱色刚果红的．．．
[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
于存 池玉杰
为进一步鉴定试验菌株及明确一色齿毛菌CB1(Cerena unicolor CB1)对活性染料的脱色效果,在对该菌株ITS序列克隆的基础上,进行了其对活性黑和活性红2种活性染料脱色条件的研究。结果表明,C.unicolor CB1与17个同种其他菌株的ITS序列相似性为93%~99%,说明试验菌株为一色齿毛菌。染料脱色结果表明,250 mg/L的活性黑对C.unicolor CB1的脱色产生明显的抑制,而500 mg/L的活性红对该菌株的脱色抑制不明显。C.unicolor CB1对活性黑和活性红的脱色最适碳源分别是果糖和葡萄糖;最适氮源分别是尿素和硝酸铵;最适Cu2+和Mn2+添加浓度都为0...
关键词：
一色齿毛菌 ITS序列 活性染料 脱色
[期刊] 中南林业科技大学学报
[作者]
郭瑶 董旭杰 曹福祥 龙绛雪
为探讨白腐真菌对偶氮类、三苯甲烷类、醌胺类等染料的脱色降解作用,用Fomes lignosus对偶氮类染料中的刚果红、醌亚胺类中的结晶紫和三苯甲烷类中的中性红的脱色作用进行了研究。结果表明:木质层孔菌对各种染料均有降解作用,而对醌亚胺类染料结晶紫的脱色率最高为55.27%(12 h),最佳添加时间为第4 d,最佳温度为35℃,脱色时间在32 h时脱色率达到75%以上。
关键词：
木质层孔菌 染料 脱色降解
[期刊] 浙江农林大学学报
[作者]
陈梦扬 姚泽秀 李永春 吴涵韬 徐秋芳 魏健 秦华
应用平板分离培养和内转录间隔区（ｉｎｔｅｒｎａｌ ｔｒａｎｓｃｒｉｂｅｄ ｓｐａｃｅｒｓ，ｉｔｓ）序列分析的方法，筛选鉴定集约栽培雷竹ｐｈｙｌｌｏｓｔａｃｈｙｓ ｖｉｏｌａｓｃｅｎｓ林土壤中染料降解真菌菌株，并通过摇瓶发酵研究其染料脱色效果。结果表明：土壤样品中分离频次最高的真菌种类为木霉菌属ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ，对５株接种到苯胺蓝平板上能形成明显水解圈的真菌分离物，测试它们对偶氮和三苯甲烷类染料的降解能力。综合脱色效果较好的菌株为ｐ７－２－３和ｐ１２－２－４，ｉｔｓ序列比对和形态学观察表明菌株分别是卷枝毛霉ｍｕｃｏｒ ｃｉｒｃｉｎｅｌｌｏｉｄｅｓ和木霉菌ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ ｓｐ．，接种．．．
[期刊] 中南林业科技大学学报
[作者]
王高婕 曹福祥 龙绛雪 董旭杰
在ABTS法检测漆酶酶活性的基础上对黑孢漆斑菌的生长条件进行摸索.采用生长曲线分析,正交多因素分析及单因素分析对初始酸碱度,培养时间,接种量,菌龄,摇床转速及光照条件进行研究.结果表明:最佳培养条件为初始pH5.5,接种量7.5%,菌龄9天,摇床转速160 r/min,自然光照,培养9天.
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