【背景】在全球气候变化的背景下，大气CO_2浓度的升高会影响植物病害的发生，进而影响农业生产。β型碳酸酐酶（β-carbonic anhydrase,βCA）是植物CO_2感应和浓缩系统中的重要组成元件，参与拟南芥和烟草的植物免疫过程，但在番茄（Solanum lycopersicum）等园艺作物中的研究较少。【目的】通过探究番茄SlβCA3在抵御植物病害中的作用及机制，为番茄生产中的抗性调控提供科学依据。【方法】以拟南芥AtβCA氨基酸系列为参考序列，在番茄Sol genomics network数据库中鉴定到4个SlβCA。进一步以野生型（wild-type,WT）番茄‘Ailsa Craig’(AC)为材料接种丁香假单胞菌番茄致病变种（Pseudomonas syringae pv. tomato DC3000,Pst DC3000），利用q RT-PCR技术测定叶片中SlβCA的表达量，筛选出受Pst DC3000诱导表达的基因SlβCA3。在此基础上，以AC为背景，利用农杆菌介导法进行番茄遗传转化，构建SlβCA3稳定过表达植株（OE-SlβCA3）。通过观察OE-SlβCA3植株接种Pst DC3000后的抗性表型，明确SlβCA3在番茄抵御Pst DC3000过程中的作用。为了研究SlβCA3调控植物抗病性的内在机制，比较WT和OE-SlβCA3植株接种Pst DC3000与对照条件下转录组的变化，并利用KEGG数据库对差异基因进行功能分析，推测糖代谢与SlβCA3介导的免疫反应有关。最后，通过测定WT和OE-SlβCA3植株糖代谢及其信号途径相关基因表达量以及葡萄糖、果糖和蔗糖含量，对转录组结果进行验证及分析。【结果】OE-SlβCA3植株对Pst DC3000的抗性增强，接种Pst DC3000后，叶片中的细菌生长量、病斑数以及死细胞积累量明显减少。转录组测序结果显示，正常条件下，OE-SlβCA3植株转录谱没有发生明显变化；接种Pst DC3000后，在WT和OE-SlβCA3植株中检测到2 100个Pst DC3000诱导基因，其中有63.3%的基因在OE-SlβCA3植株中表达量更高。KEGG分析结果显示，依赖于SlβCA3过表达的Pst DC3000诱导基因富集在糖代谢相关路径中，包括淀粉和蔗糖代谢，内质网中的蛋白质加工（糖基化），氨基糖和核苷酸糖代谢，真核生物中的核糖体生物合成以及光合作用等路径。糖代谢与糖信号密不可分，q RT-PCR及糖含量测定结果显示，接种Pst DC3000后，OE-SlβCA3植株叶片中糖代谢及其信号传导途径相关基因表达量与葡萄糖、果糖和蔗糖的含量较WT更高。【结论】番茄SlβCA3的过表达增强了植株对Pst DC3000的抗性，该过程可能与糖代谢及其信号通路在植物免疫中的作用有关。

研究了番茄根际促生菌——假单胞菌在黄瓜根部的定殖能力以及对黄瓜灰霉病和枯萎病的生防作用。结果表明,假单胞菌在浸种和灌根两种情况下均能够定殖在黄瓜根部。拮抗测定表明,一些株系对黄瓜灰霉病菌和黄瓜枯萎病菌有较好的抑制作用,最高抑制率分别达到89.1%和65.6%。离体及盆栽试验表明,CBT1、CBT3、CBT6对黄瓜灰霉病有较好的防治效果,相对防效分别为51.1%~62.4%和44.0%~67.7%;CBT1、CBT6、CBT7对黄瓜枯萎病有一定的防治效果,相对防效分别为55.3%~59.3%和47.7%~55.4%。

采用PCR方法从丁香假单胞大豆致病变种(Pseudomonas syringae pv.glycinea)A1和S1菌株中分别克隆到大小为1 026和1 038 bp的hrpZ基因(hrpZPsgA1和hrpZPsgS1),对该基因进行了原核表达和功能研究。SDS-PAGE显示其表达产物为相对分子质量62×103的融合蛋白,harpinZPsgA1和harpinZPsgS1的相对分子质量约为35×103。harpinZPsgS1的粗提蛋白经GSTrap FF纯化后质量浓度可达1.1 mg.mL-1。生物活性检测表明,该蛋白对热稳定,对蛋白酶K敏感,可以在非寄主植物烟草上激发过敏反应,过敏反应可...

［目的］丁香假单胞大豆致病变种（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｙｒｉｎｇａｅ Ｐｖ．ｇｌｙｃｉｎｅａ）ａ１和ｓ１菌株编码产生的ＨｒＰ Ｚ蛋白差异序列主要集中在ｃ端的３个区域，并且这２个蛋白诱导非寄主Ｈｒ的能力也存在差异。本研究将探究ＨｒＰ Ｚ蛋白这３个差异区域在烟草上诱导Ｈｒ（ＨｙＰｅｒｓｅｎｓｉｔｉｖｅ ｒｅｓＰｏｎｓｅ）和抑制烟草花叶病毒（ｔｍｖ）中所起的作用。［方法］采用常规Ｐｃｒ及重叠Ｐｃｒ方法将这２个ＨｒＰ Ｚ基因的３个差异区域分别进行互换，构建了相应的重组表达载体，表达并纯化得到了６个重组蛋白，相对分子质量均在４１×１０３左右。并检测了其诱导Ｈｒ活性、诱导植物抗病性。［结果］检测结果表．．．

【背景】近年来，我国番茄生产中面临的不良气候环境导致露地和设施栽培中番茄病害日益严重。由丁香假单胞菌番茄致病变种（Pseudomonas syringae pv. tomato,Pst）所引发的番茄细菌性叶斑病频发，严重影响了番茄的产量、品质。糖是植物体内重要的信号分子与营养物质，在植物遭受病原菌侵染时，糖既可以作为信号参与调控植物抗病性，也可以作为主要碳源为免疫反应提供能量。STP(sugar transport protein)家族是一类糖转运蛋白家族，在植物生长发育过程与病原防御中起着重要作用。【目的】明确番茄中STP家族是否参与调控植株对细菌性叶斑病的抗性。【方法】以番茄CR品种（Solanum lycopersicum cv. Condine Red）为材料，通过接种Pst DC3000，明确STP基因家族对Pst DC3000的响应。构建SlSTP2的突变材料与过表达材料，并进行鉴定、繁种。在野生型和SlSTP2基因突变体、过表达植株上接种Pst DC3000，观察比较叶片发病情况、台盼蓝染色显示的死细胞数量，检测叶片菌落数（colony-forming units,CFU）和光系统Ⅱ实际光化学效率，明确SlSTP2在植株防御细菌性叶斑病中的作用。为探究SlSTP2防御Pst DC3000的内在分子机制，通过双分子荧光互补（bimolecular fluorescent complimentary,BiFC）试验筛选互作蛋白，构建编码该蛋白的基因突变与过表达材料，并接种Pst DC3000明确其在植株防御细菌性叶斑病中的作用。【结果】在番茄植株上接种Pst DC3000后，SlSTP1和SlSTP2表达上调，选取上调最显著的SlSTP2作为后续研究对象，构建其突变材料与过表达材料。在番茄野生型和Slstp2突变植株、OE:SlSTP2过表达植株上接种Pst DC3000，相比野生型植株，Slstp2植株细菌性叶斑病的发病情况更严重，叶片CFU与台盼蓝染色显示出的死细胞数均更多，光系统Ⅱ实际光化学效率下降，OE:SlSTP2植株则相反。通过BiFC试验发现，SlSTP2与G蛋白β亚基SlAGB1互作。接种Pst DC3000后，Slagb1突变体发病较野生型重，呈现与Slstp2突变体一致的发病表型；OE:SlAGB1则与OE:SlSTP2植株同样表现出更强的抗性。【结论】SlSTP2受Pst DC3000诱导，并正调控番茄对细菌性叶斑病的抗性，且SlSTP2与正调控因子SlAGB1互作，推测SlSTP2调控番茄细菌性叶斑病抗性与SlAGB1有关。

以番茄为材料,研究了丁香酚和吗胍·铜对不同温度处理下、不同季节种植模式下番茄黄化曲叶病毒病(TY)的防治效果以及番茄生物量、蛋白质含量、硝酸盐含量、Vc含量和可溶性糖含量的影响。结果表明,在不同温度处理下,丁香酚对TY的防治效果均显著大于吗胍·铜处理下的防效,其中以28℃时的防效最高,同时发现病情指数在28℃时也是最高,显著大于20和35℃下的病情指数;在不同季节种植模式下,丁香酚对TY的防治效果均显著大于吗胍·铜处理下的防效,其中以秋延番茄保护地中丁香酚对TY的防效最好;在早春番茄保护地种植模式下,生物量、蛋白质含量、Vc含量和可溶性糖含量的变化趋势相似,丁香酚和吗胍·铜处理均显著大于对照,...

为研究钙对β－氨基丁酸（ＢＡＢＡ）诱导番茄抗病性的调控与防御酶活性的关系，本研究通过外源增钙和缺钙处理，系统探索β－氨基丁酸诱导的番茄抗病性和主要防御酶活性的变化。结果表明：用β－氨基丁酸处理番茄叶片后，处理叶片及其上位非处理叶片对灰霉病的抗性均显著增强，二者病情指数比对照分别降低３５．４％和２３．９％；外源ＣＡ２＋可以显著促进ＢＡＢＡ诱导的番茄抗病程度，用ＢＡＢＡ诱导同时外源喷施ＣＡ２＋，番茄诱导叶和非诱导叶的病情指数分别低于对照５３．６％和３４．４％；而ＥＧＴＡ（ＣＡ２＋螯合剂）和ＬＡ ＣＬ３（质膜钙通道抑制剂）则不同程度地抑制了ＢＡＢＡ诱导的抗病性。外源ＢＡＢＡ同样提高番茄处理叶片和非处．．．

采用体外抑菌活性和盆栽试验测定方法,研究了白黄链霉菌TD-1发酵液对番茄灰霉病菌的抑制效果及植株体内防御酶活性的影响,旨在为番茄灰霉病的生物防治提供参考。结果表明:TD-1菌株发酵液对灰霉病菌的菌丝生长和孢子萌发抑制率分别为98.1%和98.3%;TD-1发酵液在番茄植株上对灰霉病的防治效果为76.98%。喷洒TD-1发酵液24 h后接种灰霉菌孢子悬浮液,番茄叶片中苯丙氨酸解氨酶(PAL)、多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(POD)和超氧化物歧化酶(SOD)的活力均有所提高,分别在处理后第4,3,2,3天达到最高。

以番茄不同抗性品种的幼苗为材料,采用浸渍法研究了低浓度的叶霉菌粗毒素对番茄叶片防御酶(SOD、POD、PAL)活性及活性氧(O2-和H2O2)的诱导作用,为探讨病菌毒素诱导植物抗病性的生理生化机制提供科学依据。结果表明,番茄经叶霉菌粗毒素诱导后,抗、感品种叶片的SOD活性下降,但抗病品种的下降比率小,且比感病品种具有较高的酶活性;抗、感品种的POD活性变化趋势均为先上升后下降,二者间的酶活性变化差异不大;抗、感品种PAL活性均升高,但抗病品种增加更快,且增加比率高于感病品种;抗、感品种的O2-产率和H2O2含量的变化呈增加趋势,抗病品种的增加比率均高于感病品种,且增加峰值出现早。说明叶霉菌粗毒...

用2μg/mL植物激活蛋白处理番茄叶片,测定番茄叶片内苯丙氨酸解氨酶(PAL)、过氧化物酶(POD)、POD同工酶、多酚氧化酶(PPO)和超氧化物歧化酶(SOD)含量.结果表明:经植物激活蛋白诱导处理后,防御酶活性明显增强.诱导1d后,PAL活性最大,是对照的3.93倍,8d后仍为对照的3.4倍;POD和PPO诱导后4d活性最高,分别比对照增加118.72%和101.79%,8d后仍比对照高;SOD活性诱导后4d达高峰,8d后稍高于对照.POD同工酶活性诱导后3d比对照增加了88.96%,同时还出现了新的酶带.

以番茄‘1479’和‘2300’为材料,研究了苯并噻二唑(BTH)诱导番茄对番茄黄化曲叶病毒(TYLCV)的抗病性,并测定BTH处理对番茄幼苗叶片光合特性和几种防御酶活性的影响。结果表明:0.10～2.00 mmol·L-1BTH均有不同程度的诱抗效果,其中0.50 mmol·L-1BTH处理效果明显,诱导效果可达42.7%。BTH可以提高番茄叶片的净光合速率(Pn)和气孔导度(Gs),能缓解由TYLCV侵染带来的净光合速率和气孔导度下降的趋势。喷施BTH或接种TYLCV均可提高番茄叶片过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)和苯丙氨酸解氨酶(PAL)的活性,但喷施BTH诱导并接种TYLCV...

对番茄褐斑病菌侵染条件及致病性的研究表明,温度与保湿时间对番茄褐斑病菌(Helminthosporiumcarposaprum)的侵染有很大的影响。当温度为10℃时,病原菌潜育期达74h;当温度为25~30℃时,潜育期仅为6.0~8.0h。叶面保湿时间愈长,愈利于病原菌的侵染,叶面最少保湿时间为6h。病原菌侵染的最佳温度和保湿时间组合为:温度25~30℃,保湿时间24~48h。不同番茄品种对病菌的敏感性差异较显著,世纪、夏丰为高度感病品种,百果强丰和博爱15号为中抗品种,霸王、皖粉3号和皖粉4号为抗病品种。不同菌龄的H.carposaprum对番茄的致病性也有差异,菌株培养10d时的致病力较强...

通过对北京地区番茄叶霉病菌生理小种分化的连续监测,发现了可侵染目前生产上主栽抗叶霉病品种的新小种。采用国际上通用的一套叶霉病生理小种鉴别寄主品种,利用苗期接种鉴定的方法,对新小种进行了多次小种归属鉴定,该小种属于1.2.3.4.9。与目前生产上的优势小种1.2.3和1.2.3.4相比,新小种的分化层次高,致病性更强,虽然现在还不是优势小种,但必须引起高度重视。

番茄溃疡病（Bacterial canker of tomato）是目前国内外番茄生产上最严重的细菌病害之一。为建立准确有效的人工接种鉴定体系，本研究采用5种不同的人工接种方式（剪顶法、喷雾法、复叶柄注射法、茎顶端注射法和茎基部注射法）对番茄植株进行接种，比较和分析了接种后各群体植株起始发病时间、平均发病率、病情指数和平均死株率等指标。结果表明：剪顶法和茎部注射法接种病原菌致病效果最好，发病率达到100.0%，病情指数>75.0，但是剪顶法接种后植株死亡率很高，接种40d时死亡率高达96.7%，不利于后续的遗传分析及留种；进一步分析发现茎基部注射接种时病原菌在植株体内传播速度更快；用5份抗感性不同的番茄材料及2个遗传分离群体共计742株番茄进行茎基部注射接种，结果表明该法接种后可以准确区分番茄材料的抗感性。综上所述，本研究结果表明茎基部注射法接种适用于番茄材料抗溃疡病评价及遗传分析，为抗溃疡病番茄材料的筛选及抗性品种的培育提供了有力支撑。

通过对比实验,以三氯甲烷、石油醚作检测番茄红素的提取剂,与提取剂甲苯作比较,结果差异性不显著,因此以较低毒性的三氯甲烷、石油醚代替目前国标法中强致癌试剂甲苯完全可行。