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[期刊] 西南农业学报  [作者] 陆秀红  黄金玲  刘志明  秦碧霞  万宇力  
采用盆栽接种2龄幼虫法,对6份番茄Solanum lycopersicum种质材料进行了对南方根结线虫Meloidogyne incognita的抗性鉴定。结果表明:供试的番茄材料对南方根结线虫的抗性存在差异,其中,高抗材料4份,抗病材料1份,感病材料1份;采用酶切扩增多态性序列(Cleaved amplified polymorphic sequences,CAPS)方法对番茄抗性材料进行Mi-1基因检测,发现TY52、T27和Bss368 3份材料不含Mi-1基因,无限生长(红色)和T24含有Mi-1基因。
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 陆秀红  黄金玲  刘志明  秦碧霞  乔丽娅  
采用盆栽病土接种法,鉴定58份番茄(Solanum lycopersicum)种质材料对南方根结线虫(Meloido-gyne incognita)的抗性。结果表明:供试的58份番茄种质材料对南方根结线虫的抗病性存在明显差异,其中高抗材料1份,抗病材料3份,感病材料3份,高感材料51份;根据已知NBS-LRR类抗病基因NBS区域的保守系列,设计简并引物,对抗性材料基因组进行体外扩增,获得了约500bp的预期片段。
[期刊] 中国农业科学  [作者] 贾双双  高荣广  徐坤  
【目的】研究确定准确鉴定评价番茄砧木抗南方根结线虫侵染能力的方法,筛选抗性砧木材料。【方法】通过测定16个盆栽番茄砧木幼苗接种南方根结线虫50d时的相对生长量及相关抗病指标,利用系统聚类分析和隶属函数运算相结合的方法进行综合分析。【结果】南方根结线虫侵染对不同番茄砧木幼苗各器官相对生长量、相关抗病指标及其变异系数的影响显著不同,其中生长量的变异系数以相对根鲜质量较大,为20.20%,相对茎粗较小,仅6.22%。采用相对生长量及抗病指标分别进行系统聚类的结果与利用根结指数的聚类结果一致,但与病情指数的聚类结果存在些微差异。根据综合指标隶属函数运算,确定了供试番茄砧木抗南方根结线虫的顺序。【结论】...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 戴均涛  张慎璞  王暄  丁修恒  李红梅  
[目的]Mi基因是目前番茄遗传育种及生产实践中应用最为广泛的根结线虫抗源,通过对3种分子标记法检测番茄中Mi基因的结果进行比较与分析,以期为番茄抗根结线虫遗传育种提供准确、高效的分子鉴定方法。[方法]采用酶切扩增多态性序列(CAPS)、引物对组合以及序列特征扩增区(SCAR)3种分子标记法分别检测16个番茄品种的Mi基因及其基因型,同时采用人工接种法测定番茄品种对南方根结线虫的抗、感性。[结果]针对上述品种,3种分子标记法的检测结果存在着明显的差异,CAPS法检测全部供试番茄均含Mi基因,除‘线虫绝39号’外均为Mi/Mi纯合基因型;而PM3Fb/PM3Rb、PMi F3/PMiR3引物对组合检测和SCAR标记Mi23F/Mi23R检测的结果均显示有9个品种含Mi基因,前者检测表明‘VFN’‘双抗265’和‘双抗228’为Mi/Mi纯合基因型,但后者检测则显示仅‘VFN’和‘线虫绝39号’为Mi/Mi纯合基因型。接种测定结果显示:‘VFN’和‘线虫绝3号’为南方根结线虫免疫品种,‘双抗228’‘仙客1号’‘Sparta’和‘线虫绝39号’为高抗品种,‘双抗265’和‘牟番1号’为抗病品种,其余均为感病品种。[结论]CAPS法容易产生假阳性,不适用于番茄Mi基因的检测,而PM3Fb/PM3Rb、PMi F3/PMiR3的引物对组合和SCAR标记Mi23F/Mi23R这2种方法能够相对准确地检测番茄Mi基因,其中SCAR标记经单次PCR反应即可直接鉴定Mi基因的有无及其基因型,应用更为便捷。
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 黄金玲  陆秀红  张禹  李秋捷  刘志明  黎起秦  
为明确各柑橘砧木对根结线虫的抗性水平,为生产上柑橘线虫防控提供有效措施,采用病土接种方法对供试14份柑橘砧木材料进行根结线虫抗性鉴定,并采用人工接种2龄幼虫的方法测定分析防御酶POD(过氧化物酶)、PAL(苯丙氨酸解氨酶)、PPO(多酚氧化酶)的活性变化,探讨抗性材料的抗性机制。抗性测定结果显示:接种后土苦柚根结指数为36.37,根内平均雌虫数为每克根7头,平均卵囊数每克根1.3个,对根结线虫有抗性;酸橘次之,其余砧木均感病。防御酶活性测定结果显示:接种根结2龄幼虫后酶的活性在抗、感材料间差异明显,接种后5~35d,抗性材料土苦柚根部的POD、PAL、PPO活性均高于感病材料,表明抗病材料防御酶反应快,积累量大,能及时阻止线虫的侵染,但酶积累及变化有差异。试验结果说明土苦柚对柑橘根结线虫具有较强的抗性,是比较好的抗性砧木。
[期刊] 沈阳农业大学学报  [作者] 朱峰  王芳  王东  左青  朱晓峰  王媛媛  段玉玺  陈立杰  
Hsp90基因是真核生物中广泛存在且非常保守的热激蛋白基因家族中的重要成员,在生物的抗逆胁迫过程中起重要作用。从番茄基因组扩增Hsp90基因,连接到载体pCAMBIA1302上,构建了表达载体pCAM-Hsp90,利用实时定量荧光技术检测了番茄接种南方根结线虫后Hsp90基因的表达水平,结果表明:在20~25dpi后番茄根部Sl-Hsp90基因大量表达。此外,南方根结线虫的雌虫和二龄幼虫J2的Mi-Hsp90基因在高温和低温胁迫时表达量都高于对照,而且在35℃时表达量要高于4℃时的表达量,在J2中的表达量高于雌虫的表达量。说明Hsp90基因在番茄抗线虫侵染以及线虫适应环境方面起到非常重要的作用...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 叶德友  钱春桃  陈劲枫  
【目的】酸黄瓜对南方根结线虫具有高度抗性,明确其抗性的光合响应特性,为进一步抗性基因的分离及功能鉴定提供理论依据。【方法】采用温室盆栽苗期人工接种技术,研究线虫侵染对抗、感黄瓜叶片光合作用、叶绿素荧光参数及相关生理指标的影响。【结果】线虫侵染使抗病材料酸黄瓜叶绿素(Chl)含量降低幅度显著小于感病材料北京截头,酸黄瓜Chl随氮素含量降低较北京截头平缓;抗、感材料净光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)下降,酸黄瓜胞间CO2浓度(Ci)下降,而北京截头Ci上升,酸黄瓜Gs对叶片相对含水量(RWC)持续下降的反应较北京截头敏感;实际光化学效率(ΦPSⅡ)、光化学猝灭系数(qP)降低幅度酸黄瓜小于北京截...
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 王仙林  朱立新  吴静利  李冬梅  邵姗姗  贾克功  
为探明野生樱桃李对南方根结线虫的抗性,以实生钵苗为试材,采用人工接种等方法,研究了野生樱桃李对南方根结线虫的抗性。结果表明:接种后30d,根中雌成虫数量占接种量的0.5%,依据抗性评价标准判定其高抗南方根结线虫;野生樱桃李对南方根结线虫的抗性存在显著的株间分离现象,表现为免疫、高抗、中抗和低抗4种类型,分别占群体总量的30.0%、52.5%、13.8%和3.8%;根内线虫数量为接种量的1.7%,雌成虫数量占根内线虫总数的29.4%,表明野生樱桃李对南方根结线虫具有极强的抗侵入作用和很强的抗发育作用,抗侵入是野生樱桃李对南方根结线虫的主要抗性机制。野生樱桃李是优异的抗南方根结线虫种质资源。
[期刊] 沈阳农业大学学报  [作者] 杨国栋  周宝利  毕晓华  张馨宇  滕龙  吴媛媛  王国华  
为了明确不同番茄砧木的抗南方根结线虫特性,及抗性与生理指标、土壤生物学活性间的关系,采用温室盆栽人工接种法,鉴定了12个番茄砧木对南方根结线虫(Meloidogyn incognita)的抗性程度,测定番茄叶片防御酶活性和根系活力、相对电导率、叶绿素、脯氨酸、丙二醛等生理指标,采用连续稀释法测定土壤中微生物的种类、数量,并测定土壤酶活性,同时分析上述指标与病情指数的相关性。试验结果表明:番茄砧木Gardna,Baliya,Greengard,Anka-T,Volante和9748表现为高抗;M158和RS2表现为中抗;Kagemusha和RS1表现为抗病;Vespa表现为感病;L-402表现为...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 刘雪娇  程春燕  杨树琼  钱春桃  李季  陈劲枫  
为探明抗性黄瓜材料受南方根结线虫侵染后根系组织病理学变化,以抗病黄瓜/酸黄瓜渐渗系ILs-10-1和感病普通栽培黄瓜‘北京截头’为试材,接种南方根结线虫后3、6、9、12、15和22 d取根系进行观察。结果表明:接种后3 d,ILs-10-1和‘北京截头’根尖均出现过敏性坏死;接种后6 d,在ILs-10-1和‘北京截头’根系上发现膨大的根结,两者根结数和根结大小差异不明显;但随着接种时间增加,ILs-10-1所形成的根结数明显少于‘北京截头’。对各时期横径最大的根结进行石蜡切片观察发现,ILs-10-1巨型细胞位于薄壁细胞层,数量少,体积小,周围大量的细胞在接种后6 d呈延伸状和空洞化;‘北...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 王刚  李二峰  茆振川  谢丙炎  冯东昕  
【目的】研究南方根结线虫(Meloidogyne incognita)Me3毒性变异群体的分子标记,用快速有效的分子方法来鉴定毒性变异的发生。【方法】以南方根结线虫的无毒群体以及抗性基因Me3毒性群体为材料,用根据南方根结线虫基因组设计的100对引物和19对来自文献的引物进行扩增,筛选出在3个种群中扩增的差异条带,设计SCAR引物,并建立多重PCR反应体系。【结果】得到了7对能在3个群体稳定扩增出差异条带的多态性引物,把其中的2个位点开发为SCAR标记,能够区分开3个线虫群体。多重PCR反应体系在无毒群体和Me3毒性群体中分别扩增出1条999 bp和1条629 bp的条带,在混合群体扩增出99...
[期刊] 沈阳农业大学学报  [作者] 韩冰洁  焦俊  段玉玺  朱晓峰  陈立杰  王媛媛  
蔬菜根结线虫病是目前我国北方温室大棚和南方露地蔬菜生产中的重要病害之一,为研究常用化学试剂对根结线虫活性的作用,考察3种化合物CuSO4·5H2O、FeCl3·6H2O和NH4HCO3对靶标线虫南方根结线虫(Meloidogyne incognita)卵孵化和2龄幼虫(J2)侵染能力的影响,以及对番茄植株生长的影响。结果表明,3种化合物均对南方根结线虫的卵孵化具有明显的抑制作用,65mmol·L-1NH4HCO3对南方根结线虫卵孵化的抑制作用最强,抑制率可达100%;NH4HCO3和CuSO4·5H2O对番茄根结形成均具有较强的抑制作用,FeCl3·6H2O抑制作用较弱;3种化合物对番茄植株生...
[期刊] 沈阳农业大学学报  [作者] 鲁旭鹏  么巧君  朱晓峰  王媛媛  王芳  陈井生  陈立杰  段玉玺  
通过采用不同浓度的萘乙酸(NAA)、6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)对接种线虫2d后的番茄进行浸根24h处理,然后对其盆栽45d后对植物长势影响及温室防效进行测定。对番茄生长的影响结果表明:6 mg.L-1NAA和6 mg.L-16-BA处理对寄主植物具有明显的促进效果,并且株高、地上部分鲜重、根鲜重、根长与CK相比均呈现极显著的差异,其中6 mg.L-1NAA分别提高76.94%、80.30%、84.36%和75.53%,6 mg.L-16-BA分别提高68.47%、73.76%、68.56%和68.87%。对南方根结线虫温室防效及根结数的影响结果表明:10 mg.L-1NAA和10 mg.L-...
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 王雯君  贾克功  朱立新  叶航  王灵燕  
以实生钵苗为试材,采用人工接种、根系次氯酸钠-酸性品红染色等方法研究了毛桃对北方根结线虫的抗性。结果表明:毛桃的根结指数为24.67,接种侵入率2.6%,根中雌成虫数量占接种量的0.16%,依据有无根结和雌成虫数量占接种线虫数量的百分比标准判定其高抗北方根结线虫;毛桃实生群体对北方根结线虫的抗性具有显著的株间分离现象,免疫、高抗和中抗3种基因型个体分别占13.3%、80%和6.7%。毛桃对北方根结线虫具有极强的抗侵入与抗发育能力,是极优异的抗北方根结线虫桃树砧木树种和种质资源。
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 黄利  王宇  董林林  左元梅  
南方根结线虫(Meloidogyne incognita)是一种分布广危害严重的植物寄生线虫,有关该线虫发育和侵染植物的分子机制报道较少;秀丽线虫(Caenorhabditis elegans)是第一个模式动物,对其功能基因组进行了详细而深入的研究,因此,利用生物信息学手段寻找和鉴定二者高度同源的基因可为深入阐明寄生线虫侵染植物的分子机制和防治提供重要的科学依据。本研究利用最新公布的南方根结线虫的9 165个Contig序列分别和秀丽线虫的361 207个EST序列、23 973个蛋白质序列进行比对分析,获得了2种线虫高度同源的基因,通过gene ontology分析2 793个高度同源基因表...
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