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[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
彭细桥 戴良英 刘红艳
为了获得番茄离体再生体系的优化方案,对离体再生体系中番茄无菌苗的获得、生芽培养基激素组合及诱导出芽、生根培养基激素组合及诱导生根进行了一系列优化试验.结果显示,在浸泡、暗培养条件下,无菌苗生长快速、整齐;生芽培养基以 MS+2.0 mg/L BA+0.02 mg/L IAA 为宜;在再生芽个数方面,子叶要优于真叶、下胚轴,但由于下胚轴具有体积小、操作方便、形成愈伤组织和根的速率较快、根系发达等优点,因此外植体可选下胚轴.下胚轴生根培养基以 MS+0.3 mg/L IAA 为宜,子叶、真叶则使用 MS+0.1 mg/L BA+0.3 mg/L IAA 为宜.再生苗在无菌处理的移栽土中成活率较高,...
关键词：
番茄 子叶 真叶 外植体 再生
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
尹明安 郭立 刘华伟 崔鸿文
番茄 ZF无菌苗出芽后 5～ 7d,子叶切成 0 .5 cm× 0 .5 cm小块 ,下胚轴切成 1cm的小段作为外植体 ,以 MS为基本培养基 ,玉米素 1.0 mg/ L,6 -苄基腺嘌呤 1.0 m g/ L 分别与吲哚乙酸 0 .0 5 ,0 .2 ,0 .5和 1.0 mg/ L配成 7个激素组合 ,经诱芽比较 ,确定 MS+BA1.0 m g/ L+IAA0 .2 mg/ L 为最佳生芽培养基 ,MS添加吲哚乙酸0 .0 ,0 .0 5 ,0 .1和 0 .2 mg/ L 进行生根比较 ,确定 MS+IAA0 .0 5 mg/ L 为最佳生根培养基。卡那霉素 (Kan)临界浓度确定...
关键词：
番茄 组织培养 遗传转化
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
刘杨 陈火英 魏毓棠
利用番茄材料研究了番茄SSR技术中PCR体系的主要成分对SSR扩增结果的影响,并比较了采用聚丙烯酰胺凝胶和琼脂糖电泳检测扩增产物多态性的差异。结果表明:番茄SSR的反应程序为94℃预变性2min;94℃变性30s,50℃复性30s,68℃延伸30s,35个循环;最后72℃延伸8min为佳。反应体系中,模板DNA的适宜浓度为20～40ng,适宜的引物浓度为0.4μmol·L-1,dNTP的适宜浓度为200μmol·L-1,Mg2+的最适浓度范围为2.0mmol·L-1,Taq聚合酶在15μL反应体系中宜加入0.65U。PCR产物检测时聚丙烯酰胺凝胶的分辨率显著高于琼脂糖电泳。
关键词：
番茄 微卫星标记 反应体系
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
王燕 龚义勤 赵统敏 刘广 郁樊敏 叶海龙 柳李旺
对番茄基因组DNA的SRAP-PCR体系中Mg2+、dNTPs和引物浓度进行了优化,结果表明反应体系中适宜浓度为Mg2+1.5~3.0 mmol.L-1,dNTPs 0.05~0.20 mmol.L-1,引物0.25μmol.L-1;模板DNA为10~20 ng(10μL反应体系)。运用优化的体系,筛选获得3个合作906与其父母本多态性标记引物组合。利用15个引物组合对11个番茄主要品种以及1个近缘野生种进行种质鉴定的SRAP标记分析,10个多态性的引物组合共检测到55个多态性位点,平均每个引物可鉴别3.7个品种,双引物组合m e8/em8-1与m e6-1/em14-1可以区分所有供试材料。...
关键词：
番茄 SRAP 体系优化 品种鉴定
[期刊] 华北农学报
[作者]
梁超 王景雪 裴雁曦 杨婷
以番茄无菌苗的子叶和下胚轴为外植体,通过农杆菌介导法,对其遗传转化条件进行了优化,建立了高效番茄子叶和下胚轴农杆菌介导的遗传转化体系。结果表明:在农杆菌浸染前(浸染浓度为OD600=0.3)进行2 d的预培养浸染6 min的外植体在MS+2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/LIAA的培养基上转化效率最高。PCR检测初步证明,NPTII基因已整合到番茄再生植株中。
关键词：
农杆菌介导法 遗传转化 番茄
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
张丽华 程智慧 李海燕 王宝云 陈丽萍 刘绍
以加工番茄BO 2和BO 4无菌苗的子叶和下胚轴为外植体,以M S为基本培养基,研究了不同浓度的ZT,6-BA与不同浓度的IAA组合对外植体芽诱导的影响。结果表明,在不同浓度的ZT和IAA组合中,对2个番茄品种的子叶和下胚轴外植体芽诱导均以M S+1.0 m g/L ZT+0.05 m g/L IAA培养基为最好,BO 2品种子叶和下胚轴的出芽率分别为32.7%和24.5%,BO 4品种的分别为37.3%和28.2%;在不同浓度的6-BA和IAA组合中,诱导BO 2外植体出芽率最高的培养基是M S+2.0 m g/L 6-BA+0.2 m g/L IAA,子叶和下胚轴的出芽率分别为27.3%和...
关键词：
加工番茄 子叶 下胚轴 植株再生
[期刊] 华北农学报
[作者]
陈双臣 刘爱荣 王凤华 王菲 周洲
Micro-Tom番茄植株矮小,生长密度高,生命周期短,转化效率高,成为功能基因组学研究的新型模式植物。对影响Micro-Tom遗传转化频率的共培养时间、AS的添加、工程菌液浓度和抑制农杆菌所用抗生素种类进行了分析,建立了Micro-Tom稳定高效的遗传转化体系。以bar基因设计引物对转化群体进行PCR检测,阳性率为72.3%,平均插入位点数为1.8个。遗传体系的建立为Micro-Tom在植物生物学研究中提供理论基础。
[期刊] 西南农业学报
[作者]
吴文涛 董莹 邓人可 薛美静 张靖 王扬
【目的】旨在建立Rutgers番茄品种的遗传转化体系。【方法】以易感线虫番茄品种Rutgers为实验材料,采用农杆菌介导法,对无菌苗的苗龄、筛选培养基中Hyg的浓度大小、不定芽诱导培养基的激素配比和生根培养基4个方面进行优化,从而建立Rutgers品种的遗传转化体系。【结果】选择9～11 d的无菌苗的叶片分化愈伤组织的效果最好,筛选培养基中Hyg的浓度为10 mg/L时可以有效的筛选转基因的抗性芽,愈伤组织诱导不定芽培养基中最佳激素配比为6-BA 2 mg/L+IAA 0.1 mg/L。以1/2MS添加不同浓度IBA(0.05、0.1、0.15、0.20 mg/L)进行生根比较,再生芽在1/2 MS+IBA 0.1 mg/L生根培养基上生根最好。【结论】首次建立了Rutgers番茄品种的遗传转化体系,为番茄的抗根结线虫转基因育种打下基础。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
任春梅 高必达
为了尽快地使番茄子叶获得较多的再生植株以及提高再生植株的移栽成活率 ,使番茄的遗传转化研究与应用得以顺利进行 ,以番茄子叶为外植体 ,系统研究了番茄子叶切段大小对诱导出芽的影响 ,生长素IAA和NAA对生根的影响 ,以及移栽土的灭菌处理、空气湿度、再生苗的生根状况等对移栽成活的影响 .结果表明 ,刚展开的子叶横切成 3段时可得到较多的再生芽 ;在MS培养基中添加低浓度的IAA能形成根系发达、生长健壮的再生苗 ;移栽土灭菌处理或再生苗生根差 ,都无法移栽成活 ;空气湿度过高或过低都容易使移栽苗萎蔫 .
关键词：
番茄 子叶 再生 移栽
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
叶志彪 李汉霞 周国林
取番茄不同苗龄的无菌苗子叶进行培养，发现以１４天苗龄的子叶培养不定芽再生频率最高，在ＭＳ培养基上添加不同浓度的吲哚乙酸（ＩＡＡ）和玉米素（Ｚｔ），对子叶愈伤组织的形成影响不大，但对不定芽的分化有较大影响，其中以ＭＳ＋Ｚｔ１ｍｇ·Ｌ~（－１）＋ＩＡＡ１ｍｇ·Ｌ~（－１）效果最好。在同样的培养基上继代培养，待芽长至１～２ｃｍ长时转到生根培养基上即可在短期内长出根系，成为再生植株。
关键词：
番茄,组织培养,植株再生
[期刊] 中国农业科学
[作者]
张春芝 刘磊 孙玉燕 周龙溪 杨宇红 谢丙炎 李君明
【目的】利用来自番茄近缘野生种类番茄茄(Solanum lycopersicoides)LA2951的渐渗系群体,挖掘LA2951中潜在的抗晚疫病基因。【方法】采用离体叶片接种法,每片小叶背面接种10μL菌液(2×104孢子囊/mL),在温度19℃和相对湿度70%—100%的条件下,第6天测量叶片病斑面积(lesion size,LS)和发病率(diseaseincidence,DI)。【结果】LA2951对晚疫病的抗性受QTL(quantitative trait loci)控制。接种番茄晚疫病T1,2小种,鉴定出Rpiq1b、Rpiq2b、Rpiq4b、Rpiq8a和Rpiq11等5个QT...
关键词：
类番茄茄 渐渗系 晚疫病 数量性状位点
[期刊] 林业科学
[作者]
韩娟 李亚鹏 田彦挺 郭琪 李云 孙宇涵 邓永平 牛东升 苏立琢 李秀宇 彭祚登
【目的】通过优化再生过程中的重要影响因素，建立刺槐离体叶片高效的再生体系，这将为刺槐苗木繁殖、诱变育种、遗传转化以及进一步开展刺槐分子育种等奠定良好的基础。【方法】以刺槐组培苗离体的叶片为外植体，观察叶片再生不定芽的整个过程，探究基因型、取材时期、黑暗处理时长以及植物生长调节剂对刺槐叶片再生不定芽的影响，同时筛选适合不定芽生根的IBA浓度。【结果】1）二倍体基因型普18-22再生能力最佳；2）组培苗继代45天为最佳外植体取材时期；3）黑暗处理14天为最佳黑暗处理时长；4）最佳的叶片再生不定芽的培养基为：MS+6-BA3.0 mg·L~(-1)+KT 1.0 mg·L~(-1)+2,4-D 0.1 mg·L~(-1)+蔗糖30 g·L~(-1)+琼脂6.5 g·L~(-1)；普18-22不定芽诱导率达96.67%，平均每个叶片再生7.4个不定芽；5）不定芽生根最佳培养基为：1/2MS+蔗糖30 g·L~(-1)+琼脂6.5 g·L~(-1)+IBA 0.3 mg·L~(-1)；生根率达100%。【结论】以继代培养45天的二倍体刺槐组培苗普18-22叶片为外植体，接种至MS+6-BA 3.0 mg·L~(-1)+KT 1.0 mg·L~(-1)+2,4-D 0.1 mg·L~(-1)+蔗糖30 g·L~(-1)+琼脂6.5 g·L~(-1)的再生培养基中，黑暗处理14天后转移至正常光照培养，45天后将再生的不定芽转移至生根培养基1/2MS+蔗糖30 g·L~(-1)+琼脂6.5 g·L~(-1)+IBA 0.3 mg·L~(-1)中，待不定芽生根后进行炼苗移栽，得到完整的再生植株。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
李富童 程智慧
【目的】优化低频再生黄瓜离体培养体系,为黄瓜遗传转化体系的进一步完善奠定基础。【方法】以低频再生黄瓜种质Q24和L66为材料,分别以黄瓜的子叶、子叶节和下胚轴为外植体,研究外植体类型对黄瓜再生频率的影响;在MS培养基中添加不同质量浓度6-苄基腺嘌呤(6-BA)和脱落酸(ABA),研究激素配比对黄瓜再生频率的影响;将获得的黄瓜子叶节外植体置于1/2 MS培养基上预培养0,1,2,3和4 d,研究预培养处理对黄瓜再生频率的影响。【结果】不同基因型黄瓜再生频率差异显著,其中Q24整体上具有相对较高的再生频率,其子叶节再生频率为54.8%,下胚轴再生频率为50.0%;L66的再生频率相对较低,其子叶节再生频率为36.9%,下胚轴再生频率为16.7%。激素配比显著影响黄瓜子叶节外植体的再生频率,其中1.00 mg/L ABA+1.00 mg/L 6-BA对Q24子叶节不定芽的诱导效果最好,再生频率达到60.7%;2.00 mg/L ABA+1.00 mg/L 6-BA对L66子叶节不定芽的诱导效果最好,再生频率达到42.9%。预培养处理可显著提高L66子叶节的再生频率,经过1～3 d预培养,其再生频率逐渐增加并达到最高(32.1%),4 d后再生频率开始降低;Q24子叶节经3 d预培养再生频率达到最高,为27.4%,但与对照相比差异不显著。【结论】Q24子叶节外植体最适激素配比为1.00 mg/L ABA+1.00 mg/L 6-BA,经3 d预培养后其再生频率可达60.7%;L66子叶节外植体最适激素配比为2.00 mg/L ABA+1.00 mg/L 6-BA,经3 d预培养后再生频率可达42.9%。
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
金建涛 赖钟雄 刘生财 林玉玲 张梓浩
以尤溪金柑试管苗为材料,采用双因素试验设计,筛选出适合尤溪金柑试管苗增殖和生根的培养基;采用L3(34)正交表设计,研究CaCl2、甘露醇和多效唑对尤溪金柑试管苗保存的影响.结果表明:芽增殖的最优培养基为:MS+1.2 mg·L-16-BA+0.05 mg·L-1NAA,增殖系数最高,达10.60;生根最优培养基为:MS+0.3 mg·L-1NAA+0.2 mg·L-1IBA,生根率最高达到了83.33%.保存12个月时处理C4(MS+0.44 g·L-1CaCl2+0 g·L-1甘露醇+1.0 mg·L-1多效唑)中尤溪金柑试管苗的存活率均为最高,达97.8%.
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
陈敏敏 侯喜林
为了筛选较易再生的不结球白菜品种,为转基因工作建立良好的再生体系,以暑绿、苏州青、亮白叶和矮抗5号为材料,研究了基因型、外植体类型以及不同的激素配比对再生频率的影响。结果表明:不同品种中,暑绿的再生频率最高。不同外植体类型中,子叶-子叶柄再生频率最高。种子发芽培养基中添加苯基噻二唑基脲(TDZ)使幼苗生长健壮,利于外植体分化,不定芽分化率均在60.00%以上,子叶-子叶柄在培养基MN+0.5 mg.L-1TDZ+0.5 mg.L-1NAA+7.5 mg.L-1AgNO3中再生频率最高,达到80.00%,表明TDZ在诱导器官的发生中有较强的持续效应。
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