比较５个番茄成熟等基因系的乙烯生成量、多聚半乳糖醛酸酶（ＰＧ）和果胶甲酯酶（ＰＥ）等生理生比指标表明：基因ｒｉｎ具有对乙稀释放量和ＰＧ、ＰＥ活性抑制的综合效应；ｒ对果实成熟的抑制主要表现在对乙烯释放量的抑制作用；Ｎｒ则表现为对ＰＧ和ＰＥ的抑制效应；ｔ抑制效应较差；几个突变基因对果实成熟过程均有抑制效应。突变等基因系与Ｗｔ在品质上没有明显差异。

【目的】SWEETs(sugars will eventually be exported transporters)是一种糖转运蛋白,参与植物生物进程,对植物生长发育、响应各种胁迫、宿主-病原体的互作发挥作用。克隆番茄SWEET7a,通过构建Sl SWEET7a沉默和过表达载体,研究其在糖的转运过程中的作用,为探索SWEETs在植物果实发育过程中的功能提供理论依据。【方法】以Micro-Tom(Solanum lycopersicum)番茄为试材,利用RT-PCR技术从果实中克隆SWEET7a的c DNA全长842bp,进行生物信息学分析,并利用MEGA6.0构建拟南芥进化树,与Sl SWEET7a进行蛋白序列同源性分析;利用实时荧光定量PCR技术探明其在果实发育时期的时空表达特征分析,并构建基因的沉默和过表达载体,通过农杆菌介导的果实注射法进行瞬时表达检测构建载体的表达效率;然后进行番茄的遗传转化,获得T1代转基因株系,利用实时荧光定量PCR技术检测绿熟期果实SWEET7a的表达,通过高效液相色谱法检测转基因果实和叶片中糖组成与含量的变化。【结果】Sl SWEET7a蛋白结构是由7个跨膜结构域构成的。同源性比对分析结果显示,Sl SWEET7a与拟南芥At SWEET6和At SWEET8序列同源性较高,都属于SWEETs家族的CladeⅡ。番茄果实各部位的表达分析显示,Sl SWEET7a在绿熟期果柄、果实维管束相对表达量最高,转色期和红熟期相对表达量较低。构建SWEET7a沉默(S7a)及过表达载体(OE7a)在番茄果实的瞬时表达,发现OE7a样品果实中Sl SWEET7a的表达量是未注射果实的6倍,其Sl SWEET7a表达量明显上调,与对照相比,S7a样品果实中Sl SWEET7a明显下调了5倍。在番茄中的遗传转化中卡那霉素抗性筛选获得10株可能的超表达T0代植株,PCR鉴定得到了Sl SWEET7a超表达8株;沉默株系经除草剂筛选,获得14株,PCR检测得到10株沉默株系。T1代植株的实时定量分析显示,过表达Sl SWEET7a植株发生转基因沉默现象,Sl SWEET7a表达量显著低于正常植株,而沉默植株表达量也降低,说明获得的过表达植株也发生了基因沉默。果糖、葡萄糖和蔗糖含量测定结果表明,降低番茄中Sl SWEET7a的表达,植株成熟叶片和绿熟期果实中果糖、葡萄糖和蔗糖含量均高于对照,尤其是叶片中蔗糖含量显著高于对照,这说明Sl SWEET7a对细胞中蔗糖的易化扩散起着重要作用。【结论】Sl SWEET7a对叶片中蔗糖向源组织韧皮部的装载及果实果柄、维管束的运输、卸载起重要调控作用。

[目的]本研究旨在解析细胞分裂素受体基因SlHK4的突变对番茄抗旱性的影响，为揭示细胞分裂素及其受体在番茄抗旱性中的作用奠定基础。[方法]以野生型(WT)番茄和细胞分裂素受体基因SlHK4的2个纯合突变株系slhk4-4和slhk4-118为材料，对生长1个月的植株干旱处理30 d,分析干旱条件下的叶片相对含水量(RWC)、干旱响应标记基因表达、光合作用相关参数与关键基因表达、氧化胁迫相关参数与关键基因表达以及复水7 d后的植株存活率。[结果]在干旱处理过程中，与WT相比，slhk4突变株系出现叶片萎蔫等干旱胁迫表型的时间推迟，叶片RWC较高，干旱响应标记基因SlDREB1表达量上升较晚；复水后，slhk4-4和slhk4-118株系的存活率显著高于WT,分别是WT的6.0和6.3倍。随着干旱程度增加，WT的叶绿素含量，光系统Ⅱ实际光化学效率、电子传递相对速率等叶绿素荧光参数和光系统Ⅱ关键基因SlPsbQ表达量均大幅下降；而slhk4-4和slhk4-118株系的叶绿素含量和光系统Ⅱ最大光化学效率基本不变，其他参数的下降速度和幅度均显著小于WT。与WT相比，slhk4叶片的丙二醛含量较低，抗氧化酶谷胱甘肽S转移酶含量较高，过氧化物酶基因SlCEVI-1的表达量较高。[结论]在相同干旱条件下，slhk4突变株系比WT具有更强的光合作用和抗氧化能力，抗旱性更强，表明细胞分裂素受体SlHK4负调控番茄抗旱性。

[目的]本研究旨在解析细胞分裂素受体基因SlHK4突变对番茄开花时间的影响，为揭示细胞分裂素途径调控植物开花的分子机制奠定基础。[方法]以细胞分裂素受体基因SlHK4的两个纯合突变株系slhk4-4和slhk4-5及野生型（WT）番茄为材料，统计各株系开花时间，并在发芽26d后取植株茎尖进行石蜡切片显微观察、响应细胞分裂素的荧光信号检测及转录组测序等分析。[结果]slhk4-4和slhk4-5突变体的始花节位与WT相同，但始花时间分别比WT晚6d和4d。与WT相比，slhk4-5茎尖花分生组织分化推迟，细胞显著减小，细胞数目略少；slhk4-4与细胞分裂素响应启动子TCSn驱动的GFP转基因株系的杂交F_(1)代茎尖中，响应细胞分裂素的GFP荧光信号显著减弱；slhk4-5茎尖中细胞周期正调控基因Cyclin-B1-2表达下调，开花正调控基因FUL2、SOC1表达上调，而花发育基因AGL12和AGL19表达下调，开花调控相关基因的表达变化趋势与slhk4-5开花推迟的性状变化不完全一致。差异表达基因（DEGs）的功能分析显示，57.6%具有功能注释的DEGs是富集于光合作用、呼吸作用、蛋白合成和代谢等相关通路中的结构基因，其中 88.2%在slhk4-5茎尖中的表达下调，表明slhk4茎尖的细胞活性很可能弱于WT。[结论]细胞分裂素受体SlHK4的功能缺失导致slhk4茎尖细胞分裂素信号减弱，花分生组织细胞减小，活性降低，分化延后，进而导致slhk4开花推迟。SlHK4是番茄开花时间的正调控因子。

[目的]本研究旨在解析细胞分裂素受体基因SlHK4的突变对番茄抗旱性的影响，为揭示细胞分裂素及其受体在番茄抗旱性中的作用奠定基础。[方法]以野生型（WT）番茄和细胞分裂素受体基因SlHK4的2个纯合突变株系slhk4-4和slhk4-118为材料，对生长1个月的植株干旱处理30 d进行干旱处理，分析干旱条件下的叶片相对含水量（RWC）、干旱响应标记基因表达、光合作用相关参数与关键基因表达、氧化胁迫相关参数与关键基因表达以及复水7 d后的植株存活率。[结果]在干旱处理过程中，与WT相比，slhk4突变株系出现叶片萎蔫等干旱胁迫表型的时间推迟，叶片RWC较高，干旱响应标记基因SlDREB1表达量上升较晚；复水后，slhk4-4和slhk4-118株系的存活率显著高于WT，分别是WT的6.0和6.3倍。随着干旱程度增加，WT的叶绿素含量，光系统II实际光化学效率、电子传递相对速率等叶绿素荧光参数和光系统II关键基因SlPsbQ表达量均大幅下降；而slhk4-4和slhk4-118株系的叶绿素含量和光系统II最大光化学效率基本不变，其他参数的下降速度和幅度均显著小于WT。与WT相比，slhk4叶片的丙二醛含量较低，抗氧化酶谷胱甘肽S转移酶含量较高，过氧化物酶基因SlCEVI-1的表达量较高。[结论]在相同干旱条件下，slhk4突变株系比WT具有更强的光合作用和抗氧化能力，抗旱性更强，表明细胞分裂素受体SlHK4负调控番茄抗旱性。

为了从普通番茄中筛选耐贮的优良育种材料,以番茄(Lycopersicon esculentum)07g-31(红果)、07g-32(粉果、F1)、07g-33(粉果、父本)、07g-34(粉果、母本)为试验材料,研究耐贮性不同的番茄果实成熟软化过程中呼吸、乙烯生理、硬度、多聚半乳糖醛酸酶及果实细胞壁超微结构的变化差异。结果表明:在耐贮性方面表现出明显优势的07g-31、07g-33果实成熟软化过程中,呼吸峰来临时间晚、强度弱,乙烯释放量低,ACC含量、ACC合成酶和ACC氧化酶的活性偏低,硬度下降较慢,多聚半乳糖醛酸酶活性较低,细胞壁及胞间层分裂缓慢、程度轻,07g-34的表现恰好相反,而07...

用4个对光照反应不同的番茄品系,按双列杂交法,配制6个杂交组合,通过弱光结实率、正常光结实率分析番茄的结实性状。结果表明,不同番茄品系的弱光结实率、正常光结实率一般配合力效应差异极显著,对光照反应差异大的组合特殊配合力低。因此,弱光下番茄品种选育以光照反应差异大的组合为好,存在杂种优势。对弱光反应小的品系一般配合力较高,对弱光敏感反应的品系一般配合力较低。遗传参数估计表明,番茄结实性遗传存在加性和显性效应,以加性遗传为主。弱光结实率、正常光结实率的广义遗传力分别为55.41%和40.00%,狭义遗传力分别为53.98%和38.68%,环境与遗传因子间存在互作效应。

对耐贮番茄Lok、自交系 97 114、大黄柿子、桔黄佳辰、樱桃黄、小黄梨和醋栗番茄分 8个生育阶段取样 ,进行过氧化物酶同工酶酶谱分析 ,探讨耐贮番茄的亲缘关系和来源。结果表明 ,耐贮番茄Lok是普通栽培品系 97 114的突变体 ,而与野生亚种的亲缘关系较远。另外 ,耐贮番茄Lok随生育期进展谱带增减发生了变异 ,从而也映证了Lok发生了基因突变。

番茄果实成熟衰老是一个有序而复杂的过程,也是一个多因子高度协调的遗传调控过程,影响番茄果实成熟衰老的因子很多,包括各种植物激素﹑相关酶类以及各种外源物质等。本文论述了与番茄果实成熟衰老相关的植物激素及其类似物(乙烯﹑脱落酸﹑水杨酸﹑茉莉酸﹑多胺)﹑相关酶类(脂氧合酶﹑保护酶类﹑软化酶类),以及外源物质(1-甲基环丙烯﹑一氧化氮﹑钙)对番茄果实成熟衰老的影响,并探讨了各种相关因子对其成熟衰老的影响机理。

采用电子显微透射观察以及生理指标测定等方法进行番茄秧苗运贮试验,结果表明:运贮期间番茄叶片细胞叶绿体超微结构及叶绿体数量和体积均发生改变,各项生理指标发生明显而定向的变化。这些变化表明番茄秧苗运贮期间的质量下降实质是由于“断光”“断水”而引起的不同于“衰老”的整株型“胁迫性生理衰变”,这种“衰变”主要是由于环境条件(温度、光照、水分、养分)的急剧改变而引起的变化,与生理性衰老比较,只要环境条件恢复正常,植株“衰变”症状的恢复性较好。

目的探讨协同抑制番茄ACO1基因对果实成熟和病程相关蛋白基因表达、内源乙烯生物合成及果实耐贮性的影响。方法采用PCR或RT-PCR方法克隆了番茄ACC氧化酶1、ACC氧化酶3、EBF1、PR1、PR5以及NP24基因片段,并以此制备探针,以协同抑制ACO1的转基因番茄和野生型番茄为研究对象,进行Northern杂交,同时测定了伤害叶片和果实的乙烯释放量,并进行了果实贮藏试验等。结果Northern杂交结果表明,番茄ACO1基因表达被抑制后,与果实成熟相关基因LeACO3和LeEBF1,以及病程相关蛋白基因LePR1、LePR5和LeNP24的表达量急剧降低。乙烯释放量测定试验和果实贮藏试验结果...

利用农杆菌介导的叶盘法将类番茄茄(Solanum lycopersicoides)和多毛番茄(Lycopersicon habrochaites)的CBF1基因转入普通烟草(Nicotiana tabacum L.),通过分析转基因烟草在低温胁迫条件下目的基因的表达水平并结合转录组数据分析差异表达的基因,揭示CBF1基因在烟草中发挥抗冷作用的机制与相关性。结果显示:低温胁迫下,转基因烟草的抗低温能力高于非转基因的野生型;SlCBF1和LhCBF1基因在普通烟草中过量表达后,转录组测序分析表明SlCBF1基

本研究以3个耐寒性不同的番茄品种为试材,测定了番茄(Lycopersicum esculentum Mill.)幼苗在6、10、15和25℃下游离脯氨酸、自由水、束缚水含量变化。结果表明:游离脯氨酸含量随着低温胁迫时间的延长和胁迫程度的增强而增加,耐寒性强的品种游离脯氨酸含量上升快且上升幅度大;自由水含量的降低幅度和束缚水含量的增加幅度均随着胁迫程度的增强而加强,耐寒性强的品种自由水含量降低幅度大,束缚水含量增加幅度也大,冷敏感品种则相反。

本文采用突变级数法从社会成熟度、环境成熟度、经济成熟度和技术成熟度4个方面对我国18个煤炭资源型地区的低碳经济转型成熟度进行实证分析。分析结果表明:山西、河南、内蒙、云南、贵州、新疆6省处于低碳经济转型的发展期;安徽、江西、湖南等其余12个省处于低碳经济转型的成熟期。并针对分析结果提出相应提高各地区低碳经济转型成熟度的对策。

本研究对来自10个国家,国内27家单位抗黄化曲叶病毒病的239个番茄品种进行抗病基因的分子鉴定并分析,结果表明:Ty-1和Ty-3a是当前番茄抗黄化曲叶病毒病育种中利用的主要基因,携带复合基因的杂种也主要是这两对基因的利用。