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[期刊] 淡水渔业
[作者]
吴羿锦 胡雨 李嘉蕙 王志坚
通过对稀有鮈鲫(Gobiocypris rarus)进行单次电刺激和连续电刺激,探讨了电刺激对稀有鮈鲫精子寿命的影响。结果显示:稀有鮈鲫精子寿命具有日节律现象;单次电刺激能显著提高精子寿命,且3 h后达到峰值;隔天一次的连续电刺激也能显著提高精子寿命。
[期刊] 淡水渔业
[作者]
陈冬明 刘小红 黄自豪 王志坚
控制水域电压为７５ Ｖ，电流２８０ ｍ Ａ，持续电刺激５ ５００ ｍｓ左右，电刺激的作用强度是使鱼既能达到休克昏迷状态又能在几分钟内苏醒。通过对１月龄的稀有鮈鲫（Ｇｏｂｉｏｃｙｐｒｉｓ ｒＡｒｕｓ）进行电刺激，观察电刺激对其性腺发育及性成熟后繁殖的影响，以期为渔政部门评价电捕鱼行为对鱼类资源的影响提供参考。结果表明，电刺激１次组、电刺激３次组和电刺激５次组可以促进雌雄鱼的生长和性腺发育，连续电刺激组对雄鱼的生长和性腺发育影响不大却会抑制雌鱼的生长和性腺发育；电刺激１次组、电刺激３次组和电刺激５次组对性成熟后雌雄鱼的繁殖没有产生显著差异，而连续电刺激组对性成熟后雄鱼的繁殖没有产生显著差异，却会造．．．
[期刊] 淡水渔业
[作者]
陈冬明 刘小红 黄自豪 王志坚
通过对性成熟的稀有鲫（Ｇｏｂｉｏｃｙｐｒｉｓ ｒａｒｕｓ）亲鱼进行电刺激，观察电刺激对其繁殖的影响。控制水域电压为７５ Ｖ，电流２８０ ｍ ａ，持续电刺激５５００ ｍｓ左右，电刺激的作用强度是使鱼既能达到休克昏迷状态又能在几分钟内苏醒。结果表明，电刺激会造成雌鱼不产卵，或产出的卵颜色泛白；电刺激３次使雌鱼的产卵量显著减少７４粒（ｐ＜０．０５）；电刺激５次使雌鱼的产卵周期显著延长１０．２ｄ（ｐ＜０．０５），产卵量显著减少８０粒（ｐ＜０．０５）；电刺激１次使雄鱼的受精率显著提高１５％（ｐ＜０．０５）。通过组织切片观察发现，电刺激对雌鱼卵巢中的卵细胞造成了不同程度的损坏，且电刺激次数越多，损坏程度越．．．
[期刊] 淡水渔业
[作者]
王永明 史晋绒 蒲德永 金丽 黄林 张耀光
研究了不同水体、盐度(NaCl溶液)和pH对稀有鮈鲫(Gobiocypris rarus)精子活力的影响,并测定了精子的大小、密度。结果显示:稀有鮈鲫精子头部长(1.246±0.083)μm,宽(1.053±0.172)μm,尾长约(37.21±2.536)μm;精子密度为(4.623±0.170)×109 ind./mL;精子活力以江水中最高;精子生存的最适NaCl浓度为0.55%,此溶液中精子的快速运动时间,有效运动时间及寿命分别为(36.04±2.55)s、(50.57±2.69)s和(87.83±9.02)s;精子在pH为8.0的蒸馏水中活力最强,此时精子的快速运动时间,有效运动时间及...
[期刊] 淡水渔业
[作者]
陈冬明 焦平 杨调燕 王志坚
设定基温(23℃),研究了温度骤变(23℃→35℃、37℃、39℃→23℃)条件下不同的处理时间对稀有鮈鲫(Gobiocypris rarus)不同发育阶段的胚胎和仔鱼的影响,以期为评估温排水对鱼类的影响提供基础资料。结果表明,稀有鮈鲫不同发育阶段的胚胎和仔鱼均能耐受温度骤变(23℃→35℃→23℃),与对照组(23℃)没有产生显著性差异;但当温度骤变为(23℃→37℃、39℃→23℃)时,随着骤变温度的升高以及处理时间的延长,不同发育阶段的胚胎和仔鱼畸死率升高,耐受能力表现出较大差异。其中,眼黑期>肌肉效应期>胚孔封闭期;混合营养期>外源性营养期>内源性营养期。
[期刊] 淡水渔业
[作者]
詹素平 刘小红 王志坚
运用石蜡切片技术和扫描电镜技术对稀有鮈鲫（Ｇｏｂｉｏｃｙｐｒｉｓ ｒａｒｕｓ）鳃结构进行观察，并采用浓度为２ ｍＧ／Ｌ的ｃｄ ｃＬ＿２水溶液对稀有鮈鲫进行急性毒理实验。结果显示：稀有鮈鲫具４对鳃，由鳃耙、鳃弓、鳃丝及鳃小片组成。鳃的各个部位表面均有上皮细胞覆盖；鳃耙和鳃弓具味蕾，鳃弓上还具不同类型的黏液细胞；相邻鳃小片的上皮细胞间也分布有黏液细胞，在鳃小片基部有氯细胞着生。鳃丝表面有不规则凹陷和微嵴，具沟、坑、孔等结构；鳃小片两面均呈凹凸状。在２ ｍＧ／Ｌ的ｃｄ ｃＬ＿２水溶液暴露下，鳃受到损伤，发生鳃小片充血呈球状，鳃上皮水肿、脱落，黏液细胞增多等现象；并随时间延长受损程度加重。
[期刊] 水产学报
[作者]
居建 朱珠 杨辉 魏文志 张莹莹
双酚A（BPA）是一种具有雌激素效应的塑化剂，对雄性生殖影响显著，载脂蛋白E（ApoE）对精巢中甘油三酯和胆固醇等脂质的运输过程有重要作用。本研究探讨BPA对精巢ApoE基因的影响及调控机制，以期找到BPA所引起的雄性生殖问题与脂代谢之间的潜在联系。将稀有鮈鲫暴露于BPA（15 μg/L）1、3和5周，通过实时荧光定量（qPCR）、免疫印迹（WB）及免疫荧光（IF）检测BPA对ApoE基因表达和分布的影响，通过染色质免疫共沉淀（ChIP）和DNA甲基化检测探究BPA对ApoE的调控机制。结果显示，qPCR、WB及IF结果显示BPA可以显著影响精巢ApoE基因的表达和分布。ChIP结果表明ApoE的启动子区存在一个雌激素相关受体γ（Esrrg）阳性作用位点，ApoE mRNA的表达变化与Esrrg的募集变化一致。DNA甲基化检测结果显示ApoE的启动子区处于未甲基化状态，BPA处理对其无显著影响。研究表明，BPA可以通过调控稀有鮈鲫精巢ApoE基因启动子区域的Esrrg的募集直接干扰ApoE基因表达，BPA可能通过影响稀有鮈鲫精巢脂质转运影响其生殖功能。本研究结果将为后续从脂质代谢角度探究环境内分泌干扰物对雄性生殖的影响提供参考。
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
叶斐菲 刘红 蔡生力 王豪杰 李媛媛
稀有鮈鲫是一种新型的模式实验鱼,具有利用转基因技术培育开发成为观赏性鱼类的潜在可能。本实验采用PCR方法,从稀有鮈鲫基因组DNA中分离得到大小为1584bp的β肌动蛋白(β-actin)基因片段。序列分析表明,该片段包括长为1507bp的启动调控区和77bp的部分转录区序列。启动调控区包括一段长为109bpβ-actin基因上游调控序列,不翻译的外显子1和内含子1。上游调控序列中含有TATAbox,CAATbox和CArGbox等与转录活性密切相关的作用元件,并且在稀有鮈鲫β-actin基因第一个内含子中也含有1个CArG调控元件。将该启动子片段克隆到绿色荧光表达载体(pAcGFP1-1)上,...
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
黄婷妹 蔡生力 刘红
稀有鮈鲫(Gobiocypris rarus)是我国特有的一种小型鲤科鱼类,目前已作为一种新型模式生物应用于实验研究。运用普通PCR方法克隆得到一段长6 299 bp的序列,序列分析发现编码区与稀有鮈鲫卵黄蛋白原cDNA序列相似性为100%。再参考6 299 bp序列5'端设计两对特异性引物,进行基因组步移,获得长度为1 285 bp的序列。经过序列拼接后得到7 573 bp的序列,分析发现其中含卵黄蛋白原基因全序列长度为6 595 bp卵黄蛋白原基因上游调控序列长度为978 bp。进一步分析开放性阅读框得知:稀有鮈鲫卵黄蛋白原基因含有26个外显子和25个内含子,编码1 299个氨基酸序列,C...
[期刊] 水产学报
[作者]
倪秦伟 孙阳 刘林怡 吕利群
为了研究Ⅱ型草鱼呼肠孤病毒(GCRV-Ⅱ)的流行规律，本实验基于稀有鮈鲫感染GCRV-JX02的研究模型，利用分子生物学检测、逆转录实时定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)等方法开展GCRV-Ⅱ水平和垂直传播的研究。结果显示，水平传播中浸泡感染和共培养感染都能使稀有鮈鲫成为GCRV-Ⅱ的无症状携带者，阳性检出率分别为50%和80%；其中共培养感染直接导致8%的稀有鮈鲫死亡。感染后无症状的稀有鮈鲫经热休克处理，浸泡感染与共培养感染组的死亡率分别为57.14%和100%，总体阳性检出率分别为80.95%和100%。腹腔注射感染GCRV-JX02后存活的无症状稀有鮈鲫每0.01 g精巢与卵巢中病毒拷贝数分别为3.64×10~6和6.84×10~6个。垂直传播实验中稀有鮈鲫单个的卵子、未受精卵、受精卵和幼鱼的平均病毒拷贝数为1.98×10~3、1.15×10~4、4.75×10~3和6.74×10~4个，幼鱼中病毒的拷贝数显著高于卵子与受精卵时期，表明GCRV-JX02不仅能够在稀有鮈鲫中垂直传播，还能伴随幼鱼的发育不断扩增。本研究阐明了不同传播途径下GCRV-Ⅱ的传播潜力，有助于评估草鱼出血病的流行风险，且为筛选阻断草鱼呼肠孤病毒传播的药物提供了有效的动物模型。
[期刊] 水产学报
[作者]
郑宗林 张进 徐靖琳 刘伟 于文博 方媛林 张景森 段聪 周朝伟
为探究稀有鮈鲫MHC Ⅱβ基因的分子特征及其表达特点，采用PCR扩增技术获得了稀有鮈鲫（Gobiocypris rarus）MHC Ⅱβ cDNA序列810 bp，包括开放阅读框（ORF）759 bp，编码252个氨基酸。生物信息分析表明，MHC Ⅱβ氨基酸序列存在4个保守的半胱氨酸残基和GXXGXXXGXXXXXXG结构，与其他亲缘鱼类的一致性为51.78%～80.56%，其编码的蛋白质分子包括1个信号肽、1个MHC Ⅱβ（β-1）结构域、1个IGc1（β-2）结构域和1个跨膜螺旋区域。实时荧光定量PCR（qRT-PCR）结果表明，MHC Ⅱβ在脾脏表达量最高，头肾、鳃、皮肤表达量较高。人工感染鲁氏耶尔森菌后，6 h时头肾表达呈极显著上调，肝脏在12 h开始出现极显著上调，皮肤在24 h和48 h表达极显著，鳃在6～24 h表达极显著，脾脏则是在6 h出现极显著下调，于96 h接近对照组表达水平。初步研究表明，MHC Ⅱβ在鱼类抵御细菌感染的免疫反应中发挥着重要作用，为进一步揭示稀有鮈鲫MHC家族的功能提供了参考依据。
关键词：
稀有鮈鲫 MHCⅡβ 细菌感染 基因表达
[期刊] 淡水渔业
[作者]
辛苗苗 危起伟 王志坚 陈慕飞 陈冬明 孙庆亮
实验探究了不同浓度对硝基酚对稀有鲫(Gobiocypris rarus)胚胎发育的急性毒性,记录了胚胎发育过程中具有代表性的毒理学特征,并对稀有鲫的心率、死亡率、孵化率、自主运动频率及孵出仔鱼体长进行统计分析。结果显示,对硝基酚会导致稀有鲫胚胎发育延迟,并造成胚胎卵凝结、心包囊肿、脊柱弯曲等多种畸形甚至死亡现象。随着对硝基酚浓度的提高,稀有鲫的胚胎孵化率、96 h成活率降低,各时期的死亡率与畸形率均增加。对硝基酚对稀有鲫胚胎24、48、72、96 h的半数致死浓度(LC50)分别是14.162、10.282、4.484、4.160 mg/L,安全浓度(SC)是1.63 mg/L。
[期刊] 中国水产科学
[作者]
赵会宏 刘晓春 林浩然 刘付永忠 王云新
选取健康雄性斜带石斑鱼(Epinepheluscoioides)亲鱼进行人工采精,以日立H-600型透射电镜观察精子超微结构,同时设定盐度梯度、温度梯度和pH梯度,观察其对精子活力的影响。超微观察显示,精子头部呈圆形或卵圆形,核膜与质膜间的空间较大;近端中心粒的长轴与尾部约成120°的夹角;基体位于鞭毛顶端,长轴与精子头部细胞核长轴平行;袖套位于核后端,呈筒状,两侧不对称,分布着数量、大小不等的线粒体和囊泡。尾部细长,长26.0～31.5μm,其主要结构是轴丝,轴丝为典型的"9+2"微管结构。活力实验显示,精子活力的最适盐度为27～35,盐度33时精子寿命最长,为27min;最适pH为6.5～...
[期刊] 淡水渔业
[作者]
曹岩 朱邦科 王剑伟
用控温半静态换水式实验方法,测定了伊维菌素(0.4%)、辛硫磷(20%)、氯氰菊酯(4.5%)和精制马拉硫磷(20%)四种常用药物对稀有(鱼句)鲫(Gobiocypris rarus)幼鱼的急性毒性效应。分别在实验24、48、72 h和96 h后记录稀有(鱼句)鲫幼鱼的死亡数,并推算了实验药液的安全质量浓度。结果显示,四种渔药的96 h半致死浓度分别为7.01、24.22、9.37和460μg/L,安全浓度分别为0.70、2.42、0.94和46.00μg/L,这4种药物对稀有(鱼句)鲫的毒性大小依次为:伊维菌素>氯氰菊酯>辛硫磷>精制马拉硫磷。结果表明:稀有(鱼句)鲫可用于渔药对水体环境影响...
[期刊] 中国人口.资源与环境
[作者]
杨丹辉 渠慎宁 李鹏飞
本文在对稀有矿产资源进行界定的基础上,采用"环境优先策略分析法"(Environmental Priority Strategy Methodology,EPS),对六大类22种稀有矿产全寿命周期的环境影响做出评估。结果显示,在现有可得数据中,铂族金属开发利用的环境影响较大,石墨的环境影响最小。鉴于稀有矿产资源作为关键原材料在战略性新兴产业中的重要地位,应加紧制定实施稀有矿产资源国家战略,积极应对稀有矿产资源领域日益加剧的国际竞争,实现稀有矿产资源可持续利用,有效维护国家资源安全。
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