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[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
杨俊香 兰叶青
分析了用ferrozine分光光度法测定Fe2 + 浓度时硼酸硼酸盐缓冲溶液和共存离子S2 -对结果产生干扰的原因 ,提出了在ferrozine进行显色反应前先用HCl酸化处理来消除测定干扰的方法 ,取得了较满意的Fe2 + 测定结果。
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
黄亮 胡先文 岳霞丽 王虹 叶发兵 董元彦
将甲壳素溶于NaOH/CO(NH)2水相溶剂中,研究了甲壳素水溶液的紫外光谱性质,确定甲壳素在新溶剂中的最佳紫外吸收波长为230 nm,试验了不同溶剂组分浓度、测试温度对紫外分光光度法测定甲壳素浓度的影响,发现对于不同溶剂组分浓度的甲壳素溶液,甲壳素的质量百分比浓度与紫外吸收值均有较好的线性相关性,且测定时温度在8-20℃范围内时,测定结果准确。
[期刊] 草业科学
[作者]
胡秉芬 黄华梨 季元祖 赵晓芳 戚建莉 张露荷 张广忠
分光光度法是测定叶绿素含量的最常用方法之一,但是运用该方法所测得叶绿素含量往往随叶绿素提取液浓度的变化而波动,进而影响对叶绿素含量测定的准确性。因此,使用适宜浓度的叶绿素提取液浓度,对准确测定叶绿素含量至关重要。本研究为了探索问题,以枣树(Ziziphus jujuba)"金昌一号"叶片为材料,用乙醇和丙酮-乙醇混合液(1∶1)分别提取叶片叶绿素,将叶绿素提取液稀释成不同的浓度梯度,用分光光度法测定叶绿素含量。研究发现在叶绿素提取液浓度低于0.80cm2·mL~(-1)(或14.67mg·mL~(-1))时,所测得叶绿素含量趋于平稳,与Excel二次曲线拟合分析结果基本一致。这表明运用分光光度法测定枣树叶绿素含量的提取液适宜浓度应低于该浓度。而且还发现吸光度(A)比值的平稳性与叶绿素含量测定的准确性密切相关;叶绿素提取液浓度越低,吸光度越稳定,当提取液浓度低于0.68cm~2·mL~(-1)时,吸光度不再变化。
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
周德庆 韩雅珊
维生素C在紫外（UV）谱区243，267nm处有吸收峰，且在碱性条件下不稳定，当pH达12～13时，10min其破坏率达95％以上，利用碱处理前后吸光度的变化可以消除背景干扰测定VC含量。比色液VC含量在0．3～25μg·mL－1服从Beer－Lambert定律，准确度、精确度、回收率等实验表明，本法快速、准确、可靠，适用于大多数果蔬和除了含有高浓度咖啡因、糖精、焦糖和单宁以外饮料VC含量的测定。
关键词：
减处理 UV法 VC测定 果蔬及饮料
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
孙志良 卢向阳 许建平 谭超 周可炎
为了给复方白毛藤制剂有效成分含量检测提供有效方法,采用紫外分光光度法测定了复方白毛藤注射液中硫酸黄连素的含量.结果表明,在332nm波长处硫酸黄连素的吸收度与药物浓度呈良好线性关系,其回归系数为0.9990,被测样品中硫酸黄连素回收率为98.76%,变异系数为0.77%,硫酸黄连素的含量在24h内稳定性好.
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
何慧 祁建斌 刘凡
用一阶导教光度法在255．5um处测定复方芦丁片中维生素C，可消除芦丁的干扰。与部标法相比，两法测定结果的差异不显著（P＞0．05），但本法操作简便快速，测量的线性范围宽（0～21μg／ml范围内符合比尔定律），具有实用性。
[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
李金克 邓文红 陈少良
为了探讨和开发凝胶渗透色谱(GPC)--高压液相色谱(HPLC)法定量测定植物组织中的细胞分裂素,以群众杨叶片和烟草组培苗为试验材料,根据细胞分裂素标准品回收率的测定,得出最佳试验方法:80%甲醇研磨后4℃浸提24h,抽滤,滤液离心,上清液加2滴氨水,40℃浓缩至干,用含3%甲醇的CH2Cl2溶解样品,经0.22μm滤膜过滤后过GPC纯化,最后HPLC外标曲线法定量。用液相--质谱联用仪(LC-MS)对所检测的细胞分裂素定性。测试表明:群众杨叶片中玉米素鲜质量含量439.5018ng/g,烟草叶片中玉米素鲜质量含量为617.9957ng/g。在植物样品中检测到的激动素(鲜质量含量49.4739...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
曹瑞兵 周斌 陈德胜 陈溥言
提取经ConA诱导培养的猪外周血白细胞总RNA ,RT -PCR扩增出猪IFN -γ基因并克隆到pGEM -T -easy载体 ,测序结果表明扩增片段是含有信号肽的猪IFN -γ的完整基因。设计 1对引物亚克隆猪IFN -γ成熟蛋白基因并对其5′端前 2个稀有密码子进行大肠杆菌偏嗜性改造。经测序鉴定后插入原核表达载体pRLC ,并实现在大肠杆菌中的高效表达。表达产物以包涵体形式存在 ,经 7mol·L-1盐酸胍的变性液溶解及 0 5mol·L-1盐酸胍复性液复性处理 ,表达产物进行脱盐、凝胶层析纯化。细胞病变抑制法测定结果表明 ,重组猪IFN -γ具有较高的干扰素活性 ,约为 4 5× 1...
关键词：
猪γ干扰素 基因改造 原核表达 分离纯化
[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
张立娜 刘培欣 曹殿军 闫丽辉 贾竞波 危艳武
以含有全长猪γ干扰素基因的质粒为模板,通过PCR方法扩增猪γ干扰素并引入酶切位点,酶切后与PCI真核表达载体连接在一起,测序后经比较,所扩增序列同Genebank报道的IFN-γ序列同源性为99·8%.将重组质粒转染PK细胞,检测所转染的pIFN-γ的抗病毒活性.试验结果表明,转染pIFN-γ试验组与正常细胞接毒对照组比较有显著差异,说明所构建的重组质粒转染后具有抗病毒作用.
关键词：
猪γ干扰素 真核表达 活性测定
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
张海彬 陆承平
在筛选最佳pH (pH =12 )的基础上 ,建立了改良HPLC法 ,使酪青霉毒素 (Roquefortin)的回收率从 2 2 9%上升到77 7% ,显著提高了检出率。用此方法检测了来自德国和中国的猪场、牛场以及鸡场的饲料样品共 111份 ,包括玉米、玉米青贮、牧草青贮以及混合饲料和牧草。结果表明 ,2 5份样品中含有该毒素 ,其含量为 4 8～ 2 815 0 μg·kg-1,玉米青贮饲料和牧草青贮饲料中的检出率最高 ,达 30 %以上 ,其次为玉米。在 2 5份国内饲料样品中 ,5份呈酪青霉毒素阳性。其中 ,青贮饲料中的含量最高 ,平均为 7135 μg·kg-1,检出率达 33%。...
[期刊] 华北农学报
[作者]
吴增茹 金同铭
用高效液相色谱（ＨＰＬＣ）法测定了３１个南瓜品种果肉中β－胡萝卜素的含量。取干粉样品用石油醚提取，旋转蒸干，正已烷定容，然后进行ＨＰＬＣ测定。分析柱为Ｎｏｖａ－ＰａｋＣ１８柱，流动相为９０％甲醇与乙酸乙酯洗脱梯度，在４５０ｎｍ处检测。测得品种间β－胡萝卜素的含量有显著差异，西班牙南瓜中β－胡萝卜素的含量８．７３５ｍｇ／１００ｇ（鲜重），远远高于其它南瓜品种，甚至高于胡萝卜中β－胡萝卜素的含量，为富含β－胡萝卜素的高保健南瓜。
关键词：
南瓜,β-胡萝卜素,反相高效液相色谱
[期刊] 中国农业科学
[作者]
闫若潜 谢彩华 吴志明 张志凌 刘光辉 刘梅芬
【目的】研究高效广谱鸡基因工程重组复合抗病毒制剂以对鸡的病毒性疾病进行防治。【方法】采用重叠延伸PCR(splicing by overlap extension-PCR,SOE-PCR)方法通过一基因柔性接头将鸡α干扰素(chicken interferon alpha,ChIFN-α)与鸡白细胞介素2(chicken interleukin-2,ChIL-2)基因构建成ChIFN-α-linker-ChIL-2嵌合基因并克隆入pGEM-T Easy载体,将嵌合基因亚克隆入pQE-30表达载体中进行原核表达。通过尿素变性、低浓度蛋白复性液复性、PBS溶液透析等步骤对表达的重组融合蛋白(rCh...
[期刊] 华北农学报
[作者]
陈红英 宋凌云 崔保安 胡功政 贾艳艳 郭显坡
通过PCR技术从罗曼鸡肝脏基因组中扩增鸡α干扰素(ChIFN-α)全基因,并克隆和测序。序列分析表明,ChIFN-α基因全长为582 bp,亚克隆其成熟蛋白编码基因489 bp,利用基因重组技术构建了重组质粒,使ChIFN-α置于原核表达载体pQE30的T5启动子下并同6×His(多聚组氨酸标签)-Tag融合。经酶切和PCR鉴定,DNA测序证实重组质粒pQEChIFN-α构建正确;将pQEChIFN-α转化大肠杆菌M15感受态细胞,用IPTG诱导表达。SDS-PAGE和Westernblot证实表达出分子质量为19.80 kDa的融合蛋白。表达的蛋白以包涵体形式存在,经变性、复性处理后,在Ve...
关键词：
鸡 α干扰素 克隆 原核表达 抗病毒活性
[期刊] 华北农学报
[作者]
王芳 胡波 任雪枫 范志宇 张则斌 徐为中 何孔旺
用RT-PCR方法对ConA刺激后的新西兰白兔外周血淋巴细胞(PBMC)扩增家兔γ-干扰素(IFN-γ)基因并进行测序,测序结果显示,与GenBank公布的序列核苷酸同源性达到99.4%～99.6%,氨基酸同源性为98.8%～99.4%;然后通过克隆、转化将家兔γ-干扰素基因转入转移载体pFastBacTM1,得到重组转移载体pFastBacTM1-IFN-γ,用pFastBacTM1-IFN-γ转化含有穿梭载体Bacmid的大肠杆菌DH10Bac感受态细胞,经筛选得到重组穿梭载体Bacmid-IFN-γ,用此质粒转染Sf9昆虫细胞,得到重组病毒rAcV-Bac-IFN-γ,经RT-PCR鉴定...
关键词：
家兔 γ-干扰素 克隆 重组杆状病毒
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