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[期刊] 中国农业科学
[作者]
程安春 刘艳丽 朱德康 汪铭书 胡骑 陈孝跃
【目的】(1)建立单抗介导的、能够对黄曲霉毒素AFB1进行亚细胞定位的免疫组化方法;(2)探明AFB1侵染和分布于雏鸭靶器官(细胞)规律,为阐明AFB1对雏鸭的致病机理提供基础实验数据,为AFB1感染人类提供研究模型。【方法】(1)利用AFB1单抗、免疫组化理论和方法,结合石蜡切片技术,建立检测感染雏鸭组织器官和细胞中AFB1方法;(2)7日龄樱桃谷鸭饲喂黄曲霉毒素(AFB1)含量为150μg·kg-1的全价饲料,分别于6、12、24、48、72、96、120、144、168和192h各剖杀2只,取心、肝、脾、肺、肾、脑、十二指肠、法氏囊、胸腺和胰腺等组织器官多聚甲醛固定、石蜡包埋,应用建立的...
关键词：
免疫组化 黄曲霉毒素 雏鸭 侵染
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
孙秀兰 张银志 汤坚 朱瑜
为了扩大金标免疫层析试条(GICA)检测食品和饲料中黄曲霉毒素B1的应用范围,研究了样品基质对试剂条信号强度的影响,探讨了GICA测定饲料和各种发酵类食品样品时,提取液中NaCl、金属离子(Fe3+,Cu2+,Pb2+,As3+)和脂肪含量对检测结果的影响,并研究了消除影响的方法。结果表明,3种阴性样品(大米、玉米和小麦粉)均存在不同程度的非特异性干扰,大米的影响最小,其次为玉米和小麦粉,大米的最佳稀释倍数为10倍,玉米和小麦粉为30倍;随NaCl质量浓度增加,检测结果有偏向假阳性的趋势;4种金属离子对检测结果的影响程度依次为Fe3+>Cu2+>Pb2+>As3+;随着样品中油脂含量的增高,用...
[期刊] 浙江农林大学学报
[作者]
章先 王继璇 程高钏 李可 张晓峰 孙孟娇 程昌勇 宋厚辉
【目的】真菌毒素可污染农产品和动物源性食品，其中黄曲霉毒素B_1(AFB_1)毒性强、危害大，建立AFB_1快速、高灵敏和便捷的检测方法对于监测相关产品中AFB_1污染水平，保障人和动物健康均具有重要意义。本研究基于侧向层析技术原理，采用竞争模式，优化建立免疫层析检测方法，以实现AFB_1的快速定性检测和定量分析。【方法】通过比较分析不同粒径金颗粒标记抗体效果，优化确定免疫层析各组分材料类型、相关缓冲液配方及最佳使用质量浓度，建立AFB_1高灵敏定性定量免疫层析检测方法。【结果】优化建立的AFB_1免疫层析检测法在实际样本中的定性和定量检测限分别为2.5和0.5μg·kg~(-1)，灵敏度高、特异性强，与其他常见真菌毒素无交叉反应，加标回收实验结果显示：该方法准确稳定，且对AFB_1天然污染样本的定量检测结果与商品化试剂盒及LC-MS/MS一致性较好。【结论】本研究制备的免疫层析检测法可用于样本中AFB_1污染的快速定性检测与定量分析，适合缺乏实验条件的基层检验检疫机构和农产品加工企业对大量样本进行快速筛查，样本检测结果疑似阳性再采用仪器法进行确认，可降低检测成本，提升检测效率，同时为建立其他病原微生物免疫层析检测方法提供参考。图9表2参26
[期刊] 中国农业科学
[作者]
李俊霞 梁志宏 关舒 汪晓 王宁 计成 牛天贵
【目的】筛选能降解黄曲霉毒素B1(AFB1)的细菌,以期在该毒素的生物脱毒中得到应用。【方法】以香豆素为惟一碳源和能源进行AFB1降解菌株的初筛,之后将初筛的10株菌分别降解浓度为100μg·kg-1的AFB1。【结果】筛选出的NMO-3菌株降解AFB1能力达85.7%,显著高于其它菌株(P
[期刊] 中国农业科学
[作者]
张兆威 李培武 张奇 丁小霞
【目的】黄曲霉毒素严重污染农产品,威胁人畜生命健康,是政府重视、社会关注的一大焦点问题,因此亟需研究建立黄曲霉毒素高灵敏高快速检测方法。目前已研制出高特异性高灵敏度黄曲霉毒素单克隆抗体,本研究旨在应用该抗体,建立黄曲霉毒素时间分辨荧光免疫层析快速检测技术,为农产品质量监管、风险评估提供技术支持。【方法】本研究通过将黄曲霉毒素抗体与乳胶铕进行偶联标记,利用自主研制的黄曲霉毒素时间分辨荧光免疫层析试纸条进行黄曲霉毒素检测,通过检测线T信号值与质控线C信号值的比值和标准溶液浓度的自然对数值实现定量。针对花生、稻米、植物油等不同农产品,研究建立样品粉碎均质提取一体化技术。对铕标记时间分辨荧光免疫层析检...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
王瑞国 侯水生 苏晓鸥
【目的】(1)研究黄曲霉毒素B1(AFB1)不同染毒水平(3,30,300μg·kg-1BW)染毒后,在不同时间点导致雏鸭肝细胞DNA损伤情况;(2)探明AFB1染毒剂量及染毒时间与雏鸭肝细胞DNA损伤之间的关系,为AFB1遗传毒性提供研究模型。【方法】96只雄性北京鸭雏鸭,随机分为16组,每组6只。第1组为对照组,第2至6组为低剂量(染毒)组、第7至11组为中剂量(染毒)组、第12至16组为高剂量(染毒)组。对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组雏鸭分别灌胃25%DMSO水溶液,0.25,2.5,25μg·mL-1溶液各1mL,对照组于灌胃1h后,各剂量染毒组分别于灌胃染毒1、2、8、24、4...
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
赵以桥 余烨颖 吕雅婷 曾昱龙 胥伟
以茶树籽为原料,真空冷冻干燥后粉碎并喷无菌水,使含水量分别为10%、15%、20%,人工接种产毒黄曲霉(Aspergillus flavus)ACCC30899,置于生化培养箱,观察产毒黄曲霉的生长状况;采用液相色谱串联质谱法分别于黄曲霉侵染7、14、21d、含水量大于15%的茶树籽所产黄曲霉毒素组分进行测定。结果表明:茶树籽粉末含水量高于10%时黄曲霉可生长;茶树籽粉末含水量大于15%时黄曲霉生长状态良好,黄曲霉毒素组分测定值均低于检测下限(0.03μg/kg),提示在产毒黄曲霉侵染含水量大于15%的茶树籽,产黄曲霉毒素的风险较小。
关键词：
茶树籽 含水量 黄曲霉 黄曲霉毒素
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
赵以桥 余烨颖 吕雅婷 曾昱龙 胥伟
以茶树籽为原料,真空冷冻干燥后粉碎并喷无菌水,使含水量分别为10%、15%、20%,人工接种产毒黄曲霉(Aspergillus flavus)ACCC30899,置于生化培养箱,观察产毒黄曲霉的生长状况;采用液相色谱串联质谱法分别于黄曲霉侵染7、14、21d、含水量大于15%的茶树籽所产黄曲霉毒素组分进行测定。结果表明:茶树籽粉末含水量高于10%时黄曲霉可生长;茶树籽粉末含水量大于15%时黄曲霉生长状态良好,黄曲霉毒素组分测定值均低于检测下限(0.03μg/kg),提示在产毒黄曲霉侵染含水量大于15%的茶树籽,产黄曲霉毒素的风险较小。
关键词：
茶树籽 含水量 黄曲霉 黄曲霉毒素
[期刊] 草业科学
[作者]
高晶 袁建振 侯扶江 常生华 王召锋 傅华 王静
黄曲霉毒素是严重威胁动物与人类健康的一类真菌毒素。牧草在收割、运输与贮存过程中极易发霉,易被黄曲霉毒素侵染。反刍动物采食感染有黄曲霉毒素的饲料后,其乳汁中也会分泌出黄曲霉毒素,即使微量的黄曲霉毒素也可对动物和人体造成危害。因此,本文对饲料及乳制品中黄曲霉毒素的来源、危害、检测技术以及预防措施进行了综述,并对其检测技术进行重点阐述,以期为在生产实践中能够准确、快速、实时地检测饲料及乳制品中的黄曲霉素提供理论依据与指导。
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
齐德生 刘凡 于炎湖 何万领 涂华荣
研究了改性蒙脱石对黄曲霉毒素B1的等温吸附 ,以及赖氨酸、酸碱度、温度、离体肠管吸收及透析袋透析对其吸附的影响。结果表明 ,改性蒙脱石在 pH 2 .0和 pH 8.0时对黄曲霉毒素B1的最大吸附量分别为5 98.8μg/g、6 82 .4 μg/g ;赖氨酸含量为 2 .0mg/mL和 4 .0mg/mL时对吸附无影响 ;酸碱度在 pH 2 .0至pH 8.0及温度在 2 0℃至 6 0℃时对吸附无明显影响 ;改性蒙脱石可减少离体肠管对黄曲霉毒素B1的吸收率及黄曲霉毒素B1通过透析袋的透析率。改性蒙脱石对黄曲霉毒素B1可能以化学吸附为主 ;鸡小肠对黄曲霉毒素B1存在主动吸收过程。
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
关心 何剑斌 董双 臧健 龙淼
以香豆素为唯一碳源，利用微生物去毒法，初步筛选出３２株生长良好的活性菌株，再添加ＡＦＢ１标准品（菌液毒素终质量浓度２．５μｇ／ｍ Ｌ），通过高效液相色谱（ＨＰＬＣ）检测ＡＦＢ１降解率，结果显示，从鸡粪中分离并命名为Ｆ６的菌株高效降解黄曲霉毒素Ｂ１，降解率达８３％。对菌株Ｆ６进行细胞形态及生理生化特性鉴定，初步判断为芽胞杆菌属，１６Ｓ ｒｒＮＡ序列同源性比对分析，与蔬菜芽胞杆菌国际标准株ＡＴＣＣ７００００５（登录号Ｎｒ０４３３２５．１）核苷酸同源性为９９．３％，由此可确定，Ｆ６菌株为蔬菜芽胞杆菌，命名为ＢＡＣｉＬＬｕＳ ｏＬｅｒｏＮｉｕＳ ｇＸ０１（登录号ＫＰ２９７８９６）。分离菌株Ｆ６发酵液各．．．
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
陈琳 严佳惠 张昭寰 赵勇 欧杰
黄曲霉毒素B_(1)（Aflatoxin B_(1)，AFB_(1)）分布广、肝毒性强，能够导致肝脏氧化性损伤。本研究通过注射AFB_(1)建立大鼠急性肝损伤模型，探究具有抗氧化活性的壳寡糖（Chitosan oligosaccharide，COS）对肝损伤的干预效果及方式。实验设置空白组、COS对照组、模型组、COS干预组、阳性对照组，连续灌胃8天，模型组、COS干预和阳性对照组仅在第6天注射1 mg/kg AFB_(1)。以大鼠血清肝功能指标、脂质过氧化物含量、抗氧化酶活性以及肝脏组织切片评价COS对肝损伤的干预效果，并利用RNA测序（RNA-Seq）技术获得差异表达基因（Differentially expressed genes，DEGs）以分析COS干预方式。结果表明，与模型组相比，COS干预组显著降低了血清肝功能指标和脂质过氧化物含量，提高了抗氧化酶活性；肝脏切片观察显示COS有利于改善大鼠肝脏形态；RNA-Seq数据表明，COS干预组和模型组比较共有968个DEGs，富集的基因本体（Gene ontology，GO）条目主要与肝脏代谢功能、氧化应激反应和蛋白质合成相关。综上，COS对AFB_(1)引起的急性肝损伤具有一定的干预作用，为COS用于预防AFB_(1)诱导的肝损伤提供理论参考依据。
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
王宁 马秋刚 计成 关舒 牛天贵
本研究对一株具有降解黄曲霉毒素B1活性的黏细菌的产酶条件进行了优化。通过单因素实验和正交实验得到最优化的培养基以及培养条件。优化后的培养基为:酵母粉7 g/L、CaCl2.2H2O为1 g/L、MgSO4.7H2O为0.5 g/L、VB12为750μg/L;并确定其最佳培养条件为:初始pH 7.5、接种量20%、发酵时间50 h、发酵温度30℃。在上述最佳培养基和最佳发酵条件下,该菌株降解黄曲霉毒素B1的能力为78.2%。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
陈兰明 陈永萱
采用辣根过氧化物酶标记高亲和力的黄曲霉毒素Ｂ１抗体，建立了标记抗体型直接竞争抑制ＥＬＩＳＡ快速筛选法。该法检测ＡＦＢ１的线性范围为０．２５～５．０ｎｇ／ｍＬ，灵敏度为１２．５ｐｇ。
关键词：
黄曲霉毒素B_1 ELISA 筛选
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