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[期刊] 水产学报
[作者]
陈松林 邓文涛 贺路 陈细华
根据激素—受体反应的原理，结合酶联免疫吸附测定法（ＥＬＩＳＡ）和放射受体测定法（ＲＲＡ）的优点，应用我们纯化的草鱼生长激素（ｇｃＧＨ）和大鳞大马哈鱼生长激素（ｓＧＨ）及其特异抗体．采用鱼类肝细胞膜受体制剂，首次建立了测定鱼类ＧＨ生物活性的酶联免疫吸附受体测定法（ＥＬＩＳＡ—ＲＡ）。此法检测草鱼ＧＨ的灵敏度达０．０６３～０．１２５μｇ／ｍｌ，检测大马哈鱼ＧＨ与草鱼肝膜受体结合的灵敏度达０．２５μｇ／ｍｌ。同时表明草鱼ＧＨ、基因重组鲤ＧＨ以及大马哈鱼ＧＨ均可不同程度地与草鱼（Ｃｔｅｎｏｐｈａｒｙｎｇｏｄｏｎｉｄｅｌｌｕｓ）、鲤（Ｃｙｐｒｉｎｕｓｃａｒｐｉｏ）、鲶（Ｓｉｌｕｒｕｓｍｅｒｉｄｉｏｎａｔ...
关键词：
鱼类,生长激素,酶联免疫吸附受体测定法
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
朱山 郭福生 涂小林 陆承平 吴时友
聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测证明，某虾场发病的中国对虾（Ｐｅｎａｅｕｓｃｈｉｎｅｎｓｉｓ）感染无包埋体对虾病毒（ＮＯＳＶ），或称中国对虾类杆状病毒（ＰｃＢＬＶ）；野生脊尾白虾（Ｅｓｏｐａｌａｅｍｏｎｃａｒａｉｎｉｃａｕｄａ）也感染ＮＯＳＶ，并可能经卵垂直传播；南美白对虾（（Ｐｅｎａｅｕｓｖａｎｎａｍｅｉ）亦可感染该病毒而发病。经ＰＣＲ扩增纯化的皮下及造血组织坏死症杆状病毒（ＨＨＮＢＶ）与ＮＯＳＶ的核酸结果表明，两者为同一种病毒。选取经ＰＣＲ检测的９份样品，重新编号后用ＥＬＩＳＡ法进行检测，两种方法判定的结果完全相同。将ＰＣＲ和ＥＬＩＳＡ双阳性的样品制备超薄切片，观察到ＮＯＳＶ感染的典型细胞病变。...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
陈以峰 张锡金 周燮
本文介绍二氢玉米素核苷(DHZR)组的间接酶联免疫吸附测定法的研制结果。用过碘酸盐氧化法合成免疫原,获得的抗 DHZR 抗血清效价为1∶3090,该抗血清基本上只与 DHZR 组发生交叉反应.检测极限为14 fmol DHZR/孔,检测线性范围为0.1～100 pmol DHZR/孔。板内误差 C.V=1.8%,板间误差C.V.=5.8%,重复性较好。健全性试验表明样品测定值可信。并对玉米籽粒等试样中的 DHZR 组细胞分裂素含量变化作了测定。
关键词：
二氢玉米素核苷 细胞分裂素 酶联免疫测定
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
兰海楠 李维 郑鑫
【目的】以鼠肝细胞为模型,在细胞水平上研究猪生长激素抗独特型抗体的作用机制。【方法】以猪生长激素单克隆抗体1A5-F(ab′)2部分免疫BALB/c鼠,采用杂交瘤细胞技术制备猪生长激素抗独特型单克隆抗体。分离Wistar大鼠肝脏细胞,以其为模型,采用流式分析、激光共聚焦显微镜观察、Western-blot等技术手段,研究猪生长激素抗独特型单克隆抗体的生物活性。【结果】成功制备了3株猪生长激素抗独特型单克隆抗体,分别命名为CG1、CG2、CG3。其中,CG1阳性信号最强,经鉴定,CG1为Ab2β类抗独特型抗体,属于IgG2a亚类。CG1能够以二聚体的形式激活鼠肝细胞表面的生长激素受体,并可激活信...
关键词：
猪生长激素 抗独特型抗体 信号转导
[期刊] 华北农学报
[作者]
陈以峰 周燮
从样品制备，ＥＬＩＳＡ类型及免疫反应时间三方面着手建立了异戊烯基腺苷（ｉＰＡ）组细胞分裂素的快速酶联免疫吸附测定法。用ＮａＩＯ４氧化合成免疫原ｉＰＡ－Ｎ９－ＢＳＡ（ＢＳＡ：牛血清白蛋白）。由此获得的免抗血清效价达１：３４５００。交叉反应试验表明该抗血清只识别ｉＰＡ组细胞分裂素。因此本研究中采用直接型（即固相抗体型）ＥＬＩＳＡ，并将最佳免疫反应平衡时间缩短至３０ｍｉｎ（４℃）。所建立的ｉＰＡ组ＥＬＩＳＡ检测极限为４．７ｆｍｏｌｉＰＡ／孔，线性检测范围０．０１～５０ｐｍｏｌｉＰＡ／孔，板内、板间的变异系数分别为３．７％和５．３％。样品的稀释曲线与标准曲线平行，回收率为８７．１％，表明本研究中采用的...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
薛海燕 李红心 宋宏新
以灭活大肠杆菌(E.coli)O157为抗原免疫产蛋鸡获得抗E.coliO157卵黄抗体(IgY),建立了该抗体的间接酶联免疫吸附试验(ELISA)检测方法。并研究了包被温度和时间及不同卵黄前处理方法对ELISA检测的影响,所获得的最佳检测条件为:以浓度为108~109/mL的灭活E.coliO157为抗原进行包被,4℃包被19h,水稀释法对卵黄进行前处理,然后检测其中的IgY效价。该方法简便可靠,适于对大肠杆菌特异性抗体IgY的动态检测和批量检测。
关键词：
大肠杆菌O 卵黄抗体 酶联免疫吸附试验
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
单国民 钱传范 过琴媛 程明 苏巧玲
根据三氮苯类除草剂的结构特征，合成了三种不同的抗原，制备了三种高效价抗体，建立了检测莠去津、西玛津、扑草净残留量的酶联免疫吸附测定（ELISA）方法，方法的检测极限分别为1ng·mL－1，0．5ng·mL－1和2ng·mL－1。三种抗体对待检农药均有很高的特异性，H1BSA抗体对莠去津、西玛津、扑草净、西草净和环嗪酮的交叉反应分别为100％，10％，7．1％，1．4％和0；H2BSA抗体分别为44．6％，100％，0．31％，0．25％和0；H3BSA抗体分别为50．1％，8．9％，100％，25．1％和0．08％。对五种非三氯苯类除草剂丁草胺、氟乐灵、麦草畏、甲草胺、氟磺胺草醚均无交叉反应。
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
王保民 何钟佩 田晓莉 戴惠君
利用 GA_4-17-BSA 作为免疫抗原,GA_4-16-OA 作为包被抗原,建立了检测自由态 GA_4的间接ELISA。检测极限为4.1ng/mL,抗血清与 GA_7,GA_3,GA_4-ME 的交叉反应率分别为68.51%,9.10%。1.90%,与 IAA,ABA,ZR 交叉反应率极小。
关键词：
GA_4 间接酶联免疫吸附测定法
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
徐洪忠 危粹凡 吴位珩 肖芳萍
本研究应用山羊蠕形螨病灶中的虫卵、蚴虫、成虫及其代谢物制备出复合可溶性抗原,经紫外分光光度计测定,抗原蛋白含量为1.21 mg·mL~(-1)。以前未见报道,但还需进一步纯化分析其有效成份,测出抗原的有效保存期。经用株联法测定得出抗原的最佳工作浓度为0.1 μg·μL~(-1)。抗体的最佳工作浓度为1:200稀释度。这为进一步的研究和生产应用提供了依据。应用所制备的复合可溶性抗原与制备的阳性血清作
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
段留生 田晓莉 白崧 吴锜 何钟佩
以iPA－BSA为免疫抗原制备了兔抗血清，与其它iPA类似物的交叉反应率均低于5％，抗体－抗原亲和常数为6．26×106L·mol(-1)。利用此抗体与生物素－亲和素标记（ABC）系统建立了iPA的间接酶联免疫吸附测定法，检测线性范围为0．8～1000ng·mL(-1)（2．4～5693pmol．mL(-1)，板内误差CV＜5％，板间误差CV＜10％，样品平均回收率为87．3％。经平行试验、稀释试验以及对棉花根系伤流液、侧根组织和叶片中iPA含量的测定，表明所建立的ELISA及样品提取方法是可靠的。
[期刊] 淡水渔业
[作者]
丁洁 顾继锐 伍翠芳 李永文 张涛 吴江 谢显连 徐恒
用从斑点叉尾鮰(Ictalurus punctatus)cDNA文库克隆到的生长激素基因,与鲤β肌蛋白启动子、大麻哈鱼生长激素基因的poly(A)终止信号序列等调控元件共同构建了表达重组质粒pFV2 cfGH。提取重组质粒,用精子载体法导入中华倒刺鲃(Spinibarbus sinensis)的受精卵中,经孵化培养成转基因成鱼。抽提423尾转基因实验鱼血总DNA,经PCR检测表明:斑点叉尾鮰生长激素基因已导入中华倒刺鲃基因组中,导入率为17.26%。同时通过RT-PCR技术检测阳性中华倒刺鲃中生长激素基因的表达情况。
[期刊] 中国水产科学
[作者]
刘峰 刘臻 鲁双庆 张建社 谢新民 唐建洲 匡刚桥
为探索鳜(Siniperca chuatsi)、大眼鳜(S.kneri)、斑鳜(S.scherzeri)生长性状差异与基因差异间的联系,以3种鳜野生群体为材料,采用PCR-SSCP分析及测序方法,对3种鳜野生群体的生长发育相关基因——生长激素(GH)基因的差异进行了检测。结果表明,在生长激素基因5′侧翼区至第2外显子区域检测到4种多态型,均为群体特有多态型;在第2内含子3′段至第3内含子5′段区域检测到5种多态型,其中3种为群体特有多态型;在第4外显子至第5外显子5′段区域及第5外显子3′段至3′侧翼区均检测到4种多态型,均有3种为群体特有多态型。对各多态型编码区的分析表明,斑鳜与鳜、大眼鳜在...
关键词：
鳜 GH基因 遗传分化 PCR-SSCP
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
李雨萌 洪盼 兰海楠 吴天成 郑鑫
【目的】制备生长激素受体的单克隆抗体，探讨其对生长激素受体的激活作用，为研究生长激素模拟物提供新思路。【方法】以生长激素受体胞外域（ＧＨＢＰ）免疫ＢＡＬＢ／ｃ鼠，通过杂交瘤技术制备抗生长激素受体的单克隆抗体，用流式技术筛选抗体，通过流式、激光共聚焦显微镜观察研究该单克隆抗体对生长激素受体的激活作用，然后通过Ｗｅｓｔｅｒｎ－ＢＬｏｔ等技术手段研究其胞内的信号通路。【结果】通过杂交瘤技术共获得了３０个分泌抗生长激素受体的单克隆抗体，经流式分析筛选到具有受体激动剂活性的单克隆抗体（命名为Ｌ８）。竞争性结合分析结果表明，Ｌ８在受体上的结合表位与生长激素重叠；激光共聚焦观察结果表明，Ｌ８不但能结合到细胞．．．
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
马晓 胡毅 熊钢 何湘蓉 王晓清
生长激素(growthhormone,GH)参与动物的生长、发育等代谢过程.GH发挥生理作用,首先是与靶细胞膜表面的生长激素受体(growth hormone receptor,GHR)结合,启动细胞内信号传导,促进胰岛素样生长因子(Insulin_like growth factor,IGF_I)的表达,再通过血液循环到达生物体局部组织,促进细胞的代谢过程.GHR是一种特异、高效的膜蛋白.GHR对GH的功能发挥有重要的影响,其在细胞内的表达量对生长激素发挥作用有重要影响,从而影响了生物器官组织的生理功能.就生长激素受体及生长激素受体基因的研究进展进行综述.
关键词：
生长激素受体 基因 结构 表达 调节
[期刊] 水产学报
[作者]
邓利 张为民 林浩然 郑汉其
采用黑鲷生长激素（ｓｅａｂｒｅａｍ ｇｒｏｗｔｈ ｈｏｒｍｏｎｅ，ｂｒＧＨ）放射免疫测定法（ｂｒＧＨ ＲＩＡ）及黑鲷生长激素放射受体测定法（ｂｒＧＨ ＲＲＡ），研究了不同季节（３月、６月、９月及 １２月）黑鲷血清ＧＨ水平及肝脏和性腺中生长激素受体（ｇｒｏｗｔｈ ｈｏｒｍｏｎｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＧＨＲ）水平的变化，同时测定了黑鲷白肌及肝脏ＲＮＡ－ＤＮＡ比率及黑鲷肥满度（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ ｆａｃｔｏｒ，Ｋ）和性腺指数（ｇｏｎａｄｏｓｏｍａｔｉｃ ｉｎｄｅｘ，ＧＳＩ）的季节变化。黑鲷血清ＧＨ水平于６月出现高峰，显著高于３月、９月至１２月的水平（Ｐ＜０．０１）。黑鲷肝脏中ＧＨＲ水平在９月及１２月显...
关键词：
黑鲷 生长激素 生长激素受体 季节变化
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