- 年份
- 2024(3402)
- 2023(4802)
- 2022(4029)
- 2021(3566)
- 2020(3186)
- 2019(7153)
- 2018(6946)
- 2017(12296)
- 2016(6927)
- 2015(7832)
- 2014(7820)
- 2013(7419)
- 2012(6752)
- 2011(6106)
- 2010(6220)
- 2009(5558)
- 2008(5386)
- 2007(4792)
- 2006(4028)
- 2005(3519)
- 学科
- 济(31665)
- 经济(31654)
- 业(21556)
- 管理(20812)
- 方法(18800)
- 企(18338)
- 企业(18338)
- 数学(17409)
- 数学方法(17039)
- 技术(11947)
- 学(7777)
- 农(6504)
- 技术管理(6488)
- 中国(6398)
- 业经(5860)
- 理论(5343)
- 地方(5169)
- 农业(4592)
- 环境(4559)
- 财(4332)
- 贸(4298)
- 贸易(4293)
- 易(4172)
- 划(3884)
- 和(3522)
- 产业(3427)
- 教学(3366)
- 发(3187)
- 制(3126)
- 新技术(3038)
- 机构
- 学院(103530)
- 大学(102735)
- 管理(38418)
- 济(38214)
- 经济(37449)
- 研究(36371)
- 理学(34235)
- 理学院(33834)
- 管理学(32704)
- 管理学院(32526)
- 科学(27778)
- 农(26198)
- 中国(24369)
- 业大(22268)
- 京(22047)
- 农业(21431)
- 所(20238)
- 研究所(19048)
- 中心(16383)
- 技术(16059)
- 江(15339)
- 农业大学(14130)
- 财(13815)
- 北京(13061)
- 室(13060)
- 省(12970)
- 院(12859)
- 范(12144)
- 科技(12089)
- 工程(12069)
- 基金
- 项目(78636)
- 科学(61778)
- 基金(57224)
- 家(53057)
- 国家(52731)
- 研究(49734)
- 科学基金(44602)
- 省(33907)
- 自然(32231)
- 自然科(31615)
- 自然科学(31609)
- 自然科学基金(30990)
- 社会(30200)
- 基金项目(29969)
- 社会科(28883)
- 社会科学(28876)
- 划(28216)
- 资助(24167)
- 教育(23873)
- 重点(18729)
- 计划(18204)
- 编号(17987)
- 创(17776)
- 发(17036)
- 科技(16889)
- 创新(16755)
- 部(16061)
- 科研(15547)
- 业(14652)
- 课题(13674)
共检索到141821条记录
发布时间倒序
- 发布时间倒序
- 相关度优先
文献计量分析
- 结果分析(前20)
- 结果分析(前50)
- 结果分析(前100)
- 结果分析(前200)
- 结果分析(前500)
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
蒋思文 吴桢方 熊远著
选择33头猪（14头基因型已知，19头未知）提取血液DNA，进行聚合酶链反应扩增得到含有突变位点的659bP的CRC基因特异片段，经过HhaⅠ酶切和电泳检测，可以鉴别氟烷基因型。14头猪通过氟烷测验与氟烷测交鉴别的基因型与PCR-酶切鉴别氟烷基因型结果完全吻合。
关键词：
猪 聚合酶链反应 氟烷基因
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
顾丰
原位聚合酶链反应（ｉｎｓｉｔｕＰＣＲ）是一项高新生物技术，它不仅可以检测在细胞中微量的ＤＮＡ或者ＲＮＡ，而且可以精确定位，因此在分子病理学、分子生物学、分子遗传学和微生物学等领域都有重要的应用价值。本文根据最新的研究资料，介绍了这项技术的基本原理、分类、主要实验步骤和注意事项，并建议在间接原位聚合酶链反应（ｉｎｄｉｒｅｃｔｉｎｓｉｔｕＰＣＲ）中用引物原位标记（ＰＲＩＮＳ）技术代替荧光标记原位杂交（ＦＩＳＨ）检测信号。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
朱山 郭福生 涂小林 陆承平 吴时友
聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测证明，某虾场发病的中国对虾（Ｐｅｎａｅｕｓｃｈｉｎｅｎｓｉｓ）感染无包埋体对虾病毒（ＮＯＳＶ），或称中国对虾类杆状病毒（ＰｃＢＬＶ）；野生脊尾白虾（Ｅｓｏｐａｌａｅｍｏｎｃａｒａｉｎｉｃａｕｄａ）也感染ＮＯＳＶ，并可能经卵垂直传播；南美白对虾（（Ｐｅｎａｅｕｓｖａｎｎａｍｅｉ）亦可感染该病毒而发病。经ＰＣＲ扩增纯化的皮下及造血组织坏死症杆状病毒（ＨＨＮＢＶ）与ＮＯＳＶ的核酸结果表明，两者为同一种病毒。选取经ＰＣＲ检测的９份样品，重新编号后用ＥＬＩＳＡ法进行检测，两种方法判定的结果完全相同。将ＰＣＲ和ＥＬＩＳＡ双阳性的样品制备超薄切片，观察到ＮＯＳＶ感染的典型细胞病变。...
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
柴下 陆宏达 刘俊杰 岳蒙蒙 卢德刚
应用巢式聚合酶链反应(nested PCR)建立了一种检测异育银鲫武汉单极虫(Thelohanellus wuhanensis)基因组DNA的方法,提取的DNA作为模板进行两次扩增,第一次扩增用单极虫18S rRNA序列通用引物:5'-CTGCGGACGGCTCAG TAAATCAGT-3'和5'-CCAGGACATCTTAGGGCATCACAGA-3',扩增长度为1 584 bp;第二次依据第一次扩增产物中武汉单极虫特有的高度保守区设计特异性引物:5'-ACCCACTTCTGTGGC CTTTC-3'和5'-AATCCGACCTACAACGCTGG-3',扩增长度为853 bp。结果表明,通...
[期刊] 中国水产科学
[作者]
战文斌 邢婧 王远红 铃木信一 福田颖穗
对虾WSSV病是亚洲对虾养殖业中的一个棘手问题。本研究采用Kimura引物 ,用PCR技术对不同生长期的中国对虾 (Penaeuschinensis)进行了WSSV的检测 ,同时也检测了对虾发病时养殖池中多见的野生厚蟹 (Helicesp .)和矛尾刺虎鱼 (Acanthogobiushasta)。检测结果表明 :分别在检测的 5尾亲虾中的 1尾 ,6尾仔虾中的 1尾 ,5尾稚虾中的 3尾及所检测的 5尾病虾和 2只厚蟹中获得到 982bp的PCR扩增产物 ,说明为WSSV感染阳性。在检测的 2尾矛尾刺虎鱼中均未获得PCR扩增产物 ,说明为WSSV感染阴性。在亲虾、虾苗以及虾池内的野生厚蟹...
关键词：
对虾 白斑症病毒 聚合酶链反应
[期刊] 水产学报
[作者]
李军 王铁辉 周立冉 易咏兰 刘汉勤 陆仁后 陈宏溪
人工感染GCHV－861后，对处于潜伏期、发病期和恢复期等不同时期的草鱼内脏组织匀浆上清液进行逆转录聚合酶链式反应（RT－PCR）扩增，除恢复期的1条草鱼外，其余样品均得到特异扩增带，而对照组都没有，预示着RT－RCR技术对于草鱼出血病的早期诊断、防治及抗病有种具有重要意义。另外，对于显症出血病草鱼的肝、肾、脾、鳃、肌肉和肠道等组织器官进行检测，结果都为阳性，首次证实了GCHV存在于肝脏中，并对此作了进一步的讨论。
[期刊] 中国农业科学
[作者]
李艳 仇华吉 王秀荣 张守发 朱庆虎 李娜 李国新 童光志
【目的】建立一种能区分猪瘟病毒(classicalswinefever,CSFV)强毒和弱毒的反转录-复合套式聚合酶链式反应(RT-nPCR)检测方法。【方法】根据GenBank上登录的现有CSFV基因组全序列,选择高度保守区设计了一对CSFV通用引物,并在该对引物跨越区域的内部设计了猪瘟兔化弱毒疫苗和强毒特异性引物,建立了一种能区分猪瘟强毒和弱毒的RT-nPCR鉴别诊断方法。【结果】应用该方法从猪瘟兔化弱毒疫苗和石门强毒株基因组中扩增出了大小分别为447和343bp的一条特异性片段,从两种病毒基因组混合物中扩增出了大小为447和343bp的两条特异性片段,但对牛病毒性腹泻病毒和其它常见猪源病...
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
杨金增 赵保平 邓昌彦 熊远著
本文以40头猪的试验材料研究了血浆中丙酮酸激酶、磷酸果糖激酶、乳酸脱氢酶和氟烷基因型及PSE肉的相关。研究结果表明:氟烷阳性HAL~(nn)基因型猪血浆丙酮酸激酶和乳酸脱氢酶极显著地高于氟烷阳性HAL~(NN)基因型猪(P<0.05),而且血浆丙酮酸激酶及磷酸果糖激酶的对数值与肌肉品质指标pH值存在显著相关性(P<0.01);血浆丙酮酸激酶活性值及对数值也与其他肉质指标如系水力和光反射值存在较高相关(P<0.001);乳酸脱氢酶与肉质指标也呈较高相关的趋势。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
逯朋朋 张越 钟孝俊 姚火春
[目的]本文旨在研究荚膜聚合酶Wzy对猪链球菌Chz型致病力的影响。[方法]通过基因组可视化软件(ACT)和比较基因组学方法,探究猪链球菌荚膜(CPS)基因簇的遗传多样性;构建cpsB及wzy基因缺失株,利用透射电子显微镜(TEM)研究Wzy与荚膜合成的关系;采用细胞试验及动物试验等验证荚膜聚合酶Wzy对细菌致病力的影响。[结果]与野生株相比,wzy基因缺失株荚膜样物质减少并展现出更强的生物被膜形成能力。细胞试验显示,缺失株具有更强的小鼠脑微血管内皮细胞(bEnd.3)黏附能力和侵袭能力,但对小鼠巨噬细胞(RAW264.7)的吞噬作用更敏感。BALB/c小鼠攻毒试验结果表明,缺失株的致病力显著减弱,在小鼠体内的定殖和扩散能力也明显下降。[结论]荚膜聚合酶Wzy降低猪链球菌的致病力。
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
郑艳萍 Chander Subhash 杨小红 周俊青 李建生 严建兵
SNP是具有广泛利用潜力的第3代分子标记,本文旨在开发一种利用PCR技术快速检测SNP的方法。设计思路是:根据已知SNP位点设计2条特异正向引物,其最后一个碱基分别与已知SNP的2个碱基相同,同时在1条引物的5′端添加1段20 bp左右的其他物种的特异序列(如细菌DNA序列),然后选择1条合适的反向引物;最后同时加入3条引物,通过梯度PCR选择合适的退火温度进行PCR反应。利用这一方法成功将玉米的ZDS基因定位在玉米第7染色体短臂7.02 Bin。这种检测SNP的方法设计简单,费用低廉,尤其适合SNP标记的分子标记连锁图构建或者基因定位。
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
蒋思文 熊远著 邓昌彦 范春国 汪绍南
分别选择杜洛克×抗应激系、皮特兰×抗应激系和皮特兰×应激群仔猪24头、18头和18头进行肥育试验,90kg时分别屠宰18头、12头和10头,探讨氟烷基因的利用策略和电击昏对肉质的影响。结果表明:以抗应激系为母本,高瘦肉率的应激品种皮特兰为父本生产的商品猪胴体品质优于杜洛克×抗应激系,而肉质优于皮特兰×应激群。
关键词：
猪 氟烷基因 胴体品质 肌肉品质
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
张晓威 梁静 夏东 赵茹茜 杨晓静
为研究脂滴包被蛋白(Perilipin)在猪脂肪组织中的表达分布情况及其与糖皮质激素作用的关系,选取氟烷基因隐性纯合子猪(Halnn)和氟烷基因显性纯合子猪(HalNN)为动物模型,采用半定量实时荧光PCR(rqRT-PCR)技术分析其背脂和肾周脂中perilipin基因及脂肪代谢和糖皮质激素作用相关基因的表达。结果显示:两种氟烷基因型猪的体重、背膘厚和背膘指数无显著差异,但Halnn肾周脂重(P=0.09)和肾周脂指数(P=0.10)有低于HalNN猪的趋势。双因子方差分析结果表明Halnn猪脂肪组织中perilipin mRNA水平显著高于HalNN猪(P<0.05),而糖皮质激素受体基因...
[期刊] 淡水渔业
[作者]
谷庆花 李铭远 司鑫鑫 高嵩
本研究根据杀鲑气单胞菌(Aeromonas salmonicida)的铁载受体(fstA)基因的保守序列设计特异性引物和探针,建立了一种基于重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase amplification, RPA)与侧向流试纸条(lateral flow strips, LFS)相结合的可视化快速检测杀鲑气单胞菌的方法。结果显示:本研究建立的基于RPA-LFS的杀鲑气单胞菌检测方法在37℃孵育25 min即可完成,特异性良好,与其他致病菌无交叉反应;灵敏度实验结果显示,该菌的纯培养物和人工污染的鲤鱼组织中的最低检测限均为单次反应1 CFU(colony forming unit)。本研究建立的基于RPA-LFS的杀鲑气单胞菌检测方法具有特异、灵敏、快速等优点,检测结果可通过肉眼直接观察,操作简单,不依赖昂贵的仪器设备,适用于养殖业中杀鲑气单胞菌的现场检测。
[期刊] 水产学报
[作者]
高文辉 白昌明 蔡生力 王崇明
为了建立适用于Ｏｓ ＨＶ－１不同变异株的检测方法，在牡蛎疱疹病毒（Ｏｓ ＨＶ－１）３个变异株全基因组序列比对的基础上，筛选到牡蛎疱疹病毒基因组中高度保守的ＤＮＡ聚合酶（ＤＮＡ ｐＯｌｙｍｅｒＡｓｅ）基因，据此设计巢式ｐＣｒ引物，优化ｐＣｒ反应体系和条件，建立了基于Ｏｓ ＨＶ－１ ＤＮＡ聚合酶基因的巢氏ｐＣｒ检测方法（ｐ－Ｎ ｐＣｒ检测方法），利用ｐ－Ｎ ｐＣｒ与ＣＮ ｐＣｒ检测方法对不同年份和宿主来源的Ｏｓ ＨＶ－１疑似感染样本进行检测。结果显示，ｐＮ ｐＣｒ检测方法能稳定地检出１００拷贝／μｌ的病毒ＤＮＡ；ｐ－Ｎ ｐＣｒ较Ｃ－Ｎ ｐＣｒ检测方法具有更强的特异性和更高的检出率。研究表明，本研究．．．
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
白小青 潘红梅 赵献之 陈四清 王金勇 袁树楷 李琴
为了探讨猪KIT基因等位基因的识别及KIT基因和毛色的关系,为实现猪毛色的定向分子育种奠定基础。以皮特兰、棕色杜洛克、白色杜洛克、长白猪、大白猪、B系猪、荣昌猪、盆周山地猪共8个品种(系)98头猪为试验材料,利用焦磷酸测序技术检测了猪KIT基因第17内含子区第一核苷酸处G→A突变的比例,推测了猪在KIT基因座位上的基因型或基因型组合。结果表明,A/A+G呈现明显的品种特征:棕色杜洛克、盆周山地猪、荣昌猪、皮特兰猪KIT基因A/A+G均在20%以下,推测棕色杜洛克和盆周山地猪在KIT基因座位上的基因型为ii,荣昌猪、皮特兰在KIT基因座位上的基因型为ii、IPi和IPIP;白色杜洛克、大白猪、长...
关键词：
猪 KIT基因 焦磷酸测序 毛色
文献操作()
导出元数据
文献计量分析
导出文件格式：WXtxt
删除
