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[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 王红星  雷治海  丁菲  谭湘陵  
用体外转录方法合成了瘦素 (leptin)长形受体 (Ob Rb)反义和正义RNA探针 ,用原位杂交法研究了 5头 2~ 3月龄母猪下丘脑内瘦素长形受体mRNA的分布定位。结果表明 ,猪瘦素长形受体mRNA分布于下丘脑的弓状核、腹内侧核、背内侧核、室旁核、室周核和下丘脑外侧区
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 张根华  赵茹茜  周浩良  陈伟华  陈杰  
应用地高辛标记反意生长抑素cRNA探针原位杂交技术,研究5日龄AA肉鸡生长抑素mRNA阳性神经元胞体在下丘脑内的分布。结果表明:生长抑素mRNA阳性神经元主要分布在下丘脑外侧核吻侧部、后内侧核和后核吻侧部以及乳头体外侧核。生长抑素mRNA阳性神经元胞体为圆形、梭形和椭圆形,直径7~20μm。胞质内均有强度不等的黑色或蓝黑色杂交反应物。生长抑素mRNA神经元胞体在下丘脑各核区的分布数目存在明显差异,其中下丘脑外侧核内的阳性胞体密度高于其它核区,提示下丘脑外侧核的生长抑素神经元的生理功能很活跃。有些核区显示的生长抑素mRNA阳性神经元有突起,说明这些神经元的树突或轴突可能可以储存生长抑素mRNA。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 李庆梅  雷治海  陈敏  邓碧华  苏娟  
用免疫组织化学方法研究了5头苏钟猪下丘脑内开胃素(orexin)A的分布。结果表明,在猪下丘脑内,开胃素A免疫阳性神经元分布于下丘脑的视前内侧区、室周核、室旁核、视上核、背内侧核、穹隆周核、乳头体核、前区、外侧区和后区等部位,以下丘脑外侧区、乳头体核和视上核出现的免疫阳性神经元最多,以室周核的最少。这一结果与在其他动物上获得的基本相似。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 倪迎冬  袁丽霞  饶开晴  李玥  杨晓静  赵茹茜  
采用隔日限饲方式对0~2周龄(早期)和7~9周龄(后期)三黄肉鸡进行限饲处理,分别于2和9周龄时各组随机选取10羽肉鸡宰杀后采样。结果显示:与对照组相比,早期限饲组鸡体重极显著降低(P0.05,n=10);早期限饲组鸡的平均日采食量低于对照组,而后期限饲组鸡平均日采食量升高;限饲期间肉鸡料重比增加,而自由采食期间无差异。Real-time PCR测定结果显示:肉鸡下丘脑神经肽Y(NPY)、阿片-促黑素细胞皮质素原(POMC)和瘦素(leptin)受体mRNA转录丰度均随日龄增加而显著升高...
[期刊] 中国水产科学  [作者] 李梅英  张莉  包慧君  张晖  柳金雄  陈秋生  
采用原位杂交技术(In situ hybridization,ISH)研究雄激素受体(Androgen receptor,AR)mRNA在中华鳖(Pelodiseus Sinensis)脾脏的存在及细胞定位。取5只健康成年中华鳖的脾脏,进行石蜡切片。用地高辛标记的寡核苷酸探针对组织切片进行原位杂交(In situ hybridization,ISH),检测雄激素受体mRNA在脾脏免疫细胞内的表达定位。结果显示,大部分雄激素受体mRNA阳性细胞呈圆形或椭圆形,数量少胞体大且呈不规则形。阳性细胞在脾脏动脉周围淋巴鞘(Periaterial lymphatic sheath,PALS)和红髓(Red...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 郑路程  苏娟  房蕊  靳蒙蒙  马志禹  郭停停  侯园龙  雷治海  
为揭示促性腺激素抑制激素(GnIH)在公猪生殖发育中的作用,本研究以15头雄性小梅山猪为研究对象,用免疫组化和半定量RT-PCR方法研究3、30、60、90和120 d的公猪(n=3)GnIH阳性细胞在下丘脑-垂体-睾丸轴的分布定位及在下丘脑的发育学变化。结果表明:GnIH在下丘脑主要分布于室旁核,GnIH阳性神经元呈纺锤形和多角形,且在下丘脑室旁核GnIH阳性神经元数目随日龄增长而上下波动,形态趋向成熟;在垂体分布非常广泛,无论是腺垂体还是神经垂体均有强烈的免疫阳性反应;在睾丸集中分布于生精小管内部,可见强烈的免疫阳性反应,在间质细胞也可见免疫阳性反应。GnIH mRNA的丰度随日龄增长而呈...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 张玉杰  赵燕  徐璐  张乾义  陈锴  孙永芳  邹兴启  朱元源  赵启祖  宁宜宝  王琴  
【目的】为研究CSFV RNA在体外感染细胞中的分布及定位,建立了一种准确、敏感的RNA可视化原位杂交技术。【方法】本研究通过比对GeN BANk中公布的CSFV、BVDV和BDV全序列,避开BVDV和BDV的同源区,设计了CSFV RNA及内参基因β-ACtiN的特异探针。以CSFV中等致病力毒株(He BHH1/95)为参考毒株,在Pk15细胞中培养病毒,加入RNA可视化原位杂交的特异探针和相应试剂,采用荧光共聚焦显微镜进行成像观察。通过综合分析观测结果、荧光强度、重复性等因素,采用正交试验优化了对原位杂交过程中具有重要影响的蛋白酶k浓度和甲醛固定时间,建立了CSFV RNA可视化原位杂交...
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 蔡更元  熊远著  邓昌彦  蒋思文  吴桢方  
用地高辛为标记物,以随机引物法标记猪PGDcDNA和HSLcDNA探针,经与半微量全血培养法制备的染色体进行原位杂交后,将猪PGD和HSL基因分别定位在猪6号染色体6q25和6cen-6q21区域。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 王根林  陈杰  NParvizi  
[期刊] 水产学报  [作者] 潘贤辉  宋红梅  周康奇  汪学杰  刘奕  牟希东  余梵冬  杨叶欣  刘超  郑曙明  胡隐昌  
为探究黑素皮质素受体1基因(MC1R)在橘色双冠丽鱼胚胎发育和体色形成过程中的表达定位及功能,本研究首先制备了MC1R基因的RNA正反义探针,T7方向转录的正义RNA探针质量浓度为447.529 ng/μL,SP6方向转录的反义RNA探针质量浓度为342.698 ng/μL。经10~20倍稀释后的探针用于原位杂交,MC1R基因探针表达定位显示,随橘色双冠丽鱼胚胎的发育杂交信号总体呈逐渐减弱趋势,原肠期和视泡期其卵黄和胚体侧卧部分有杂交信号分布;出膜期其脊柱、卵黄囊及其内容物和色素细胞内出现杂交信号;出膜期第1天,卵黄表面有信号分布。总体来看,杂交信号在脊索、卵黄囊、卵黄囊内容物质及色素细胞有特异表达,而以正义探针作为阴性对照组在5个胚胎阶段均无任何信号,杂交信号显现的MC1R表达定位说明其在橘色双冠丽鱼色素细胞的分化、迁移中起到重要调控作用,也与神经、营养、免疫功能相关,初步建立了鱼类体色相关基因功能和定位研究的整胚原位杂交方法。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 刘亚杰  花雯  蒋书东  崔培  宋爽  方富贵  李福宝  
【目的】对青春期和休产期皖西白鹅下丘脑和垂体中血管活性肠肽的分布与表达进行研究。【方法】采集青春期和休产期皖西白鹅的下丘脑和垂体,应用免疫组织化学PV-9000二步法并结合DAB显色技术,对血管活性肠肽的免疫反应阳性分布进行定位,并用Image-Pro Plus 6.0软件分析阳性区域的累积光密度值。【结果】血管活性肠肽免疫反应阳性细胞主要分布于青春期和休产期皖西白鹅下丘脑的弓状核、室旁核、内侧核、视上核、乳头体内侧核等处及腺垂体中;休产期皖西白鹅下丘脑和垂体中的血管活性肠肽的累积光密度值显著高于青春期。【结论】血管活性肠肽可能对皖西白鹅的休产状态有一定的调控作用。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 李云  张凌齐  周杰  田磊磊  李维新  刘力源  张淑静  
【目的】探讨不同发育时期皖南花猪下丘脑脂联素受体及生殖相关激素表达的发育性变化及其相关性。【方法】选择0,30,45,90,180日龄皖南花猪公、母猪各5头,采集其血清和下丘脑组织,采用ELISA法检测各日龄猪血清中脂联素(Adp)质量浓度和促性腺激素释放激素(GnRH)、促性腺激素抑制激素(GnIH)的活性,用实时荧光定量PCR方法检测猪下丘脑中Adp、脂联素受体1(AdpR1)、2(AdpR2)及GnRH、GnIH mRNA表达量的发育性变化和性别差异。【结果】不同日龄皖南花猪血清Adp与GnRH、GnIH水平均有极显著的发育性变化,其中30日龄猪的脂联素极显著低于其他日龄(P<0.01)...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 贾利云  周宏超  李文献  曹力  司丽芳  范光丽  
为了探讨流产大鼠下丘脑核团肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)的分布及变化,将12只孕SD大鼠随机分为流产组和妊娠组。流产组在妊娠第10,11天灌服米非司酮(RU486)3.75 mg/kg,妊娠组在妊娠第10,11天灌服等量生理盐水,所有大鼠均于妊娠第13天灌注取材。采用免疫组织化学SP法,对各组大鼠下丘脑TNF-α阳性细胞进行观察,探讨TNF-α在流产大鼠下丘脑的分布及变化。结果表明,妊娠组和流产组大鼠下丘脑视前大细胞核、视上核、室旁核、下丘脑室周核、弓状核均有TNF-α阳性细胞;与妊娠组相比,流产组大鼠各核团阳性细胞数量均极显著增加(P<0...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 陈树林  毛海鹏  赵慧英  卿素珠  范光丽  张艳  李耀辉  周建平  
为了探讨促性腺激素释放激素(gonadotrop in re leas ing horm one,G nRH)在青年奶山羊下丘脑的表达特点,采用灵敏度较高的免疫组化SP法研究了G nRH神经元在6~8月龄青年奶山羊下丘脑中的分布。结果表明,分泌G nRH的神经元主要分布在视上核、下丘脑前核、室旁核和弓状核,其次是视前内侧核、视前外侧核、交叉上核、下丘脑外侧区、视上弥散核、腹内侧核、腹外侧核及乳头体各核团,前连合核、终纹床核、穹窿周核、环核、视前交叉上核和背内侧核分布较少。G nRH阳性神经元的形态有圆形、三角形、卵圆形、梭形、多角形、不规则形,有些阳性神经元还具有明显的突起;圆形和三角形细胞直...
[期刊] 华北农学报  [作者] 赵强  马友记  李菁华  
为了探讨PRLH及其受体基因在绵羊性腺轴中的表达,以绵羊下丘脑-垂体-性腺轴系为研究对象,克隆了PRLH及其受体基因PRLHR,构建了系统进化树,并利用qRT-PCR技术对PRLH及其受体基因在绵羊性腺轴中不同组织的表达差异做了研究。结果表明,绵羊PRLH和PRLHR mRNA核苷酸序列分别为113,237 bp,PRLH基因核苷酸序列与山羊、牛、人、小鼠的同源性分别为96.8%,93.3%,80.3%,74.6%,PRLHR基因与藏羚羊、山羊、牛、人和小鼠的同源性分别为100%,99.3%,97.3%,90.4%,84.4%;PRLH及其受体基因在绵羊的下丘脑、垂体、子宫和卵巢中均有一定量的...
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